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广州地区献血人群登革热病毒感染的血清流行病学调查
目的 评估登革热病毒(DENV)对广州地区血液安全的影响.方法 采用分层随机抽样的方法抽取2014年9月15日至10月15日在广州血液中心献血的无偿献血者3 000名,ELISA法检测其血清中DENV IgM抗体并按年龄和性别比较阳性率差异.IgM检测结果为阳性者进行DENV RNA检测.结果 3 000名献血者检出DENVIgM抗体阳性标本71份,阳性率为2.4％.其中男性44名,女性27名,阳性率分别为2.1％及2.9％,男女阳性率差异无统计学意义(x2=1.483,P=0.223);18～岁年龄组、25～岁年龄组、35～岁年龄组和45 ～60岁年龄组献血者抗DENVIgM抗体阳性率分别为2.2％、2.5％、2.0％和3.1％,差异无统计学意义(x2=1.209,P=0.751).71名DENV IgM阳性献血者中检出DENV RNA阳性1名,病毒滴度为9.44E2 copies/ml,阳性率为0.03％.结论 携带DENV的献血者对血液安全应当引起重视,在DENV流行区或者流行期间,应当建立相应的筛查方法,并把其纳入献血者筛查项目.
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微孔杂交检测登革病毒及其分型方法的建立
目的 建立特异、敏感、实用的登革病毒检测及分型方法.方法 分析登革1～4型病毒基因组序列,分别设计针对登革病毒1～4型的特异性包被探针,扩增、克隆测序后包被聚乙烯微孔板.PCR上游引物5'端标记生物素,对待检样品进行扩增后用作检测探针进行微孔杂交(PCR-ELISA)反应,并通过设定不同的包被DNA浓度、包被时间、杂交温度、杂交时间,对PCR-ELISA反应进行优化.结果 建立了快速、特异、敏感的登革病毒快速检测及分型方法,试验结果直观,阳性标本吸光度值在0.5以上,阴性结果吸光度值在0.1以下,S/N值在10以上.结论 所建立的方法可用作登革病毒感染的早期诊断及分型.
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1978~2014年我国登革热的流行病学分析
自1978年以来，我国几乎每年都有登革热病例报告，表现为间断性流行，有每隔4~7年发生1次流行的趋势。高发年龄段为20~60岁，男女发病比例接近；4个血清型均有流行，但以1型为主。1997年以后，登革热疫情得到一定的控制，但2013年开始，登革热发病率明显上升，尤其是2014年，流行规模更是达到1986年以来的新高。截至11月23日广东省登革发病人数已经达到44894人，疫情的严重性已经引起高度关注。本文对1978年以来我国登革热的流行状况、地区和人群分布以及今年登革热疫情大爆发的影响因素等进行了分析。
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登革2型病毒重组E蛋白的生物学特性分析
[目的]检测重组 D2V全长 E蛋白纯化后的免疫反应性与抗原性,为其亚单位疫苗研制奠定基础.[方法]酵母表达上清超滤浓缩后用金属螯合亲和层析(MCAC)法过柱,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术观察蛋白条带.将纯化蛋白与组氨酸抗体、 D2V E单抗进行斑点印迹和蛋白印迹,以确定纯化物是否为含组氨酸尾的 D2V E融合蛋白,并用 ELISA检测纯化 E蛋白与不同 DV抗体的结合反应.用纯化的重组 D2V E蛋白免疫小鼠后测定其产生的抗体类型与滴度,以分析其抗原性.[结果]表达产物经 MCAC柱纯化获得单一的相对分子质量为 69× 103的蛋白,组氨酸抗体与 D2V E单抗的印迹试验证实该条带就是含多聚组氨酸尾型特异的重组 E蛋白(rEgp) , ELISA显示纯化的 rEgp保留有免疫反应性及型特异性,内糖苷酶 H消化证实其含有 N联高甘露糖残基.接种 rEgp可诱生针对 D2V抗原与重组 E蛋白的高效抗体.[结论]纯化的 D2V全长 E蛋白保留其免疫原性和免疫反应性,并具有型特异性.
关键词： 登革热病毒 膜糖蛋白类 重组蛋白质 /分离与纯化 抗体 -
登革热初筛方法的应用比较
目的 比较2种不同初筛方法对登革热的诊断价值,并探讨各种方法的应用范围及应用价值.方法 采用回顾性研究.收集2015年1月至2017年12月门诊及住院共7555例疑似登革热病毒感染者的血清标本,采用胶体金法检测登革热病毒NS1抗原,取41份阳性标本采用ELISA法检测登革热病毒IgM抗体和登革热病毒IgG抗体,并采用x2检验比较这2种方法对登革热的初筛价值.结果 2015年2943例疑似登革热病毒感染者的血清标本中被确诊为登革热的有215例(7.31％),2016年2690例中确诊的有226例(8.40％),2017年1922例中确诊的有11例(0.57％).发热初期检测登革热病毒NS1抗原优于检测登革热病毒IgM抗体和登革热病毒IgG抗体.结论 NS1抗原检测在疾病发生早期敏感度和特异度良好,可作为登革热早期筛查的重要方法,在判断初次感染还是再次感染可采用联合检测登革热病毒IgM抗体和登革热病毒IgG抗体.
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清热解毒法治疗小儿登革热23例
登革热是由登革热病毒引起的一种蚊媒急性传染病.西医至今尚无特殊药物治疗,主要采取支持及对症治疗.本院自1990～2002年拟清热解毒法治疗小儿登革热23例,疗效满意,现报告如下.
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登革热病诊断的若干探讨
对1995年在广州市番禺区登革热局部流行中收治的83例进行了临床分析,发现发热、头痛、关节肌肉痛等临床症状与以往报道相似,但本次流行中31.3%患者无皮疹出现,而出现消化道症状所占比例较多且出血较少.提示:在流行期对疑似病例不可因无皮疹而排除登革热的诊断,而使之成为重要的传染源,对发热、全身肌肉痛伴有消化道症状的患者要重视登革热的可能.
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登革热重症病例的临床与实验室预警指标
目的:回顾性分析2006年我院收治484例登革热患者的临床表现以及实验室检查结果,探讨登革热重症病例发生的临床与实验室预警指标.方法:收集484例登革热患者的症状、体征和各项实验室检查数据,将病例分为重症组与普通组并分析两组之间各项数据的差异.结果:重症组患者多项临床表现及实验室检验结果与普通组之间存在明显差异.结论:持续性呕吐、束臂实验阳性、ALT或AST升高5倍以上可作为登革热重症病例发生的顸警指标.
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登革2型病毒非结构蛋白NS1的生物信息学分析
目的:分析登革2型病毒非结构蛋白NS1的结构和功能特征并预测其优势抗原表位.方法:利用NCBI、CBS等生物信息学网站和DNAStar、Vector NTI等软件包,分析登革2型病毒NS1的理化性质和结构与功能特征,及可能的空间结构和抗原表位.结果:NS1基因编码352个氨基酸,含12个保守的半胱氨酸.脂质含量相对较多,理化性质不稳定.无分泌型信号肽及跨膜结构,但存在多个糖基化、磷酸化、酰胺化位点.空间结构为一紧凑球形,N端和C端暴露于球体表面,线性B细胞抗原表位的区域较为密集.中段包埋于分子内部,但含有一些与血小板、血管内皮或纤维蛋白素原高度同源的B细胞表位序列,可能在登革出血热的病理过程中发挥重要作用.结论:NS1不仅是一个极具潜力的诊断性抗原,其抗原表位的预测将为登革病毒表位多肽疫苗的开发提供依据.
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全民齐动手,预防登革热
认识"登革热"登革热(俗称"断骨热")是一种由登革热病毒引起的急性发热传染病,由蚊子传播给人类.病原体为登革热病毒(可分为1、2、3、4型).主要传播媒介为埃及伊蚊、白纹伊蚊,其中白纹伊蚊(俗称"花斑蚊")在广东省分布广泛.
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深圳市龙华区一起输入性登革热疫情的分子流行病学研究
目的 对2017年深圳市龙华区一起输入性登革热病原体进行分子遗传学分析.方法 利用C6/36细胞从病人血清中分离登革热病毒(Dengue virus,DENV),对分离得到的DENV的E基因进行测定和系统发生树构建,结合现场流行病学资料对其分子遗传学进行分析.结果 成功分离得到1株DENV-1,命名为SZLH_17JB00855_2017.E基因的扩增获得两条目的产物,分别为1 010 bp和829 bp.目的产物经测序拼接后,终得到长为1 485 bp DNA序列;NCBI数据库多序列在线比对结果显示SZLH_17JB00855_2017毒株E基因与越南2007、2008及201 1年分离毒株E基因序列的覆盖率在99％～100％之间;系统发生树分析结果显示,SZLH_17JB00855_2017与VNBID-V 1686/2007、VNBID-V 1691/2007、VNBID-V3908/2008、VNBID-V3909/2008、VN09DX879/2011亲缘性近,与近年来广东省各地市暴发的分离株亲缘性较远.结论 现场流行病资料和实验室分子遗传学分析都提示本案例报告的登革热病例属于输入性病例,输入地极有可能是越南.
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SYBR Green I荧光PCR检测登革热病毒基因方法的建立
目的 建立SYBR Green I荧光PCR快速检测登革热病毒的方法.方法 以通用引物对标准株提取物和血清样本进行耵-PCR扩增,同时以SYBR Green I标记进行实时PCR扩增,分析其灵敏性特异性和重复性.结果 标准毒株的扩增结果与预期结果相同,测序结果显示实验结果序列与标准株序列一致.实验的灵敏性特异性和重复都较高.结论 SYBR Green I荧光PCR检测登革热病毒的方法是一个快速、准确检测登革热的方法,但它更适用于早期传染病监测.
关键词： 登革热病毒 PCR SYBR Green I -
登革热26例异常心电图分析
登革热是由登革热病毒经伊蚊传播的急性传染病.本文收集1987年7月～1987年11月收治有异常心电图记录的登革热患者26例,对心电图异常与血二氧化碳结合力、血清钾浓度、血红蛋白水平进行分析,现报导如下.
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干扰素诱导性跨膜蛋白抑制HIV细胞间传播
正常人体细胞能够表达一类干扰素诱导性跨膜蛋白(Interferon induced transmembranes, IFITMs).该蛋白具有抗病毒的活性,且已被证实对甲型流感病毒、西尼罗病毒、登革热病毒和埃博拉病毒等多种病原体具有抑制作用.近期,研究人员发现IFITM蛋白可以抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)的传播与发展.
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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体
目的 构建登革2型病毒(dengue virus serotype 2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体.方法 PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B, 采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达.用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清.结果 成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3 200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白.结论 通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白.
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南宁市献血人群登革热血清流行病学调查
目的 了解南宁市献血人群中登革热病毒(DENV)的感染状况,评估登革热病毒对南宁市血液安全的影响.方法 从南宁中心血站的不同采血点中随机选择1 712例经过健康征询合格及血液初筛检测合格的献血者,抽取5～6 mL静脉血于乙二胺四乙酸抗凝管中.酶联免疫吸附试验检测血清中的DENV NS1抗原、IgM抗体和IgG抗体.结果 DENV NS1抗原、IgM抗体、IgG抗体的阳性率分别是1.1％(18/1 712)、0.2％(4/1 712)、7.1％(121/1 712),其中NS1抗原和IgM抗体及NS1抗原和IgG抗体的双重阳性率均是0.1％(1/1 712).IgM与性别之间的关系差异有统计学意义(P=0.028),男性IgM阳性率更高;IgG与年龄之间的关系差异有统计学意义(P=0.045),30岁以上的人群IgG阳性率更高.结论 南宁市献血者中既有曾经受DENV感染者也有正在受感染者,应当重视DENV对血液安全性的影响,适时调整献血者的血液筛查策略.
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登革热136例护理体会
总结了136例登革热患者的护理体会,包括一般护理、高热、皮疹、出血等症状护理,中毒性肝炎、心肌炎、肺炎等并发症护理,心理护理及健康教育,认为加强基础护理,及时给予对症护理,密切观察病情变化,做好并发症的抢救及护理,对减轻患者的痛苦,促进疾病的康复十分重要.
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森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的建立及应用
目的 建立森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法.方法 将病毒抗原包被微球,利用病毒抗体和阳性血清建立并优化森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法,评价方法的敏感性和准确性.结果 建立的液相蛋白芯片检测方法病毒抗体和生物素标记二抗的孵育时间均为1h,生物素标记羊抗兔IgG和羊抗人IgG佳稀释度分别为1∶200和1∶100,能对3种病毒单一和混合感染准确检测.对295份临床样本的检测结果表明,该方法具有高通量、快速、敏感、特异的特点.结论 本方法能对3种虫媒病毒同时进行快速检测,为虫媒病毒的筛查检测提供一种新方法.
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血清登革热病毒NEST-PCR检测
目的建立用NEST-PCR快速检测登革热病毒的方法.方法通用引物对样本进行RT-PCR扩增,然后用分型引物进行NEST-PCR,根据产物条带的位置分型.结果标准毒株的扩增结果与预期结果相同,血清登革热病毒在病程2～5 d的阳性率高于6～9 d的阳性率,分别为6/7和2/6.结论NEST-PCR方法是一个快速、准确检测登革热的方法,但它更适用于早期临床检测.
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输血传播西尼罗病毒
西尼罗病毒(WNV)属黄病毒科黄热病毒属.黄热病毒属的其它成员包括登革热病毒、扁虱热传播性脑炎、黄热病,日本脑炎和圣·路易斯大脑炎病毒.1937年Smithburn及其同事首先从白尼罗河源头乌干达北部的西尼罗河地区一例37岁妇女的血液中分离出WNV,按照当时的情况,新分离的虫媒病毒的命名以获得该病毒的地理名称命名.那例妇女参与了昏睡病监视项目,并且在抽血的当天有38.1℃的发热,分离出的病毒在恒河猴大脑内和鼻内接种以后导致发热和脑炎(但是当给予静脉注射时只有发烧)以及诱导了免疫.非洲绿猴脑内接种该病毒没有使其患上脑炎,仅有发热,感染该病毒后做鼠生物实验,发现3只恒河猴中有2只血液中含有该病毒达9天.
