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磷脂酰肌醇3-激酶通路对脂多糖预激动小胶质细胞高迁移率族蛋白1表达的影响
目的 探讨磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinaseB,P13K/Akt)通路对脂多糖 (lipopolyssacride,LPS)预处理体外培养大脑皮质小胶质细胞高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1protein 1,HMGB-1)表达的影响.方法 体外分离纯化小鼠大脑皮质小胶质细胞,纯度鉴定后按未刺激对照组、0.01μg/mL LPS单次刺激组(18 h)、1μg/mL LPS刺激组(24 h)、预处理组、PI3K/AKT通路抑制组(2 h)分别进行处理.收获各组细胞与培养上清,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平,免疫荧光法检测HMGB-1在细胞中的定位情况,Western blot 检测 HMGB-1和磷酸化Akt的表达水平.结果 PI3K/Akt通路抑制后,LPS预刺激小胶质细胞产生的TNF-α水平较1μg/mL单次刺激组、预刺激组水平降低(P=0.043;P=0.046);磷酸化Akt表达降低,小胶质细胞HMGB-1表达以及向胞浆中转位呈现降低趋势.结论 PI3K/Akt通路在LPS预激诱导的HMGB-1活化中起正性调节作用,这些分子及调节通路的变化参与LPS耐受诱导的重新调配过程,从而共同影响小胶质细胞的终效应.
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磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B信号通路分子蛋白在大骨节病患者全血中的表达
目的：观察大骨节病患者全血中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）及其下游蛋白激酶B（Akt）信号通路分子蛋白（PI3Kp110、pAkt、pGSK3β）表达，分析PI3K/Akt信号通路的状态。方法20例大骨节病患者（大骨节病组）来自陕西省大骨节病区（旬邑、麟游、永寿、千阳、长武、陇县），同时选取性别、年龄相匹配的健康者作为对照组。采集大骨节病患者和对照组人群静脉血，应用Trizol法从全血中提取蛋白，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blot）检测全血中 PI3K/Akt 信号通路分子蛋白表达，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），GDS-8000凝胶成像系统观察并记录灰度值，组间比较采用t检验。结果大骨节病组与对照组年龄、性别比较，差异无统计学意义（t=0.701，P>0.05；χ2=0.400，P>0.05）。大骨节病组全血中 PI3Kp110、pAkt、pGSK3β蛋白表达均明显高于对照组（156.1±92.1比79.5±21.5、113.7±15.2比43.3±10.7、105.9±17.5比37.3±12.0），两组比较差异有统计学意义（t=2.563、6.567、7.916，P<0.05或<0.01）。结论大骨节病患者全血中PI3K/Akt信号通路分子蛋白PI3Kp110、pAkt、pGSK3β表达明显增加，PI3K/Akt信号通路呈激活状态。
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RegⅣ、EGFR、PI3K蛋白在胃腺癌中的表达及意义
目的：研究再生基因蛋白Ⅳ（ Regenerating gene typeⅣ，RegⅣ）、表皮生长因子受体（ Epider-mal growth factor receptor ，EGFR）及磷脂酰肌醇3-激酶（ Phosphatidylinositol -3-kinase，PI3K）蛋白在胃腺癌中的表达及临床意义。方法应用S-P免疫组化技术检测73例胃腺癌及其相应的癌旁正常组织中RegⅣ、EGFR和PI3K蛋白的表达情况。结果73例胃腺癌组织中RegⅣ、EGFR、PI3K蛋白的阳性表达率分别为50．7％（37/73）、56．2％（41/73）、69．9％（51/73）均高于癌旁正常组织20．5％（15/73）、19．2％（14/73）、21．9％（16/73），差异具有统计学意义（ P＜0．05）；RegⅣ的表达与肿瘤分化程度相关，差异有统计学意义（P＜0．05）；EGFR蛋白的表达与浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关，差异有统计学意义（P＜0．05）；PI3K蛋白的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关有统计学意义（P＜0．05）。 RegⅣ与EGFR、PI3K蛋白在胃腺癌组织中的表达呈正相关（r＝0．343、0．248，P＜0．05），EGFR与PI3K蛋白在胃腺癌组织中的表达呈正相关（ r＝0．384，P＜0．05）。结论 RegⅣ可能通过激活EGFR/PI3K/Akt信号通路在胃腺癌的发生发展中发挥重要作用。
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佐剂关节炎大鼠血管新生COX-2、PI3K、AKT与细胞因子相关性研究
目的:观察佐剂关节炎大鼠环氧化酶-2(COX-2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)的表达,以及其与白细胞介素-6(IL-6)、大鼠白细胞介素-10(IL-10)、血管内皮生长因子(VEGF)细胞因子的关系.方法:将20只大鼠适应性喂养1周后,随机分为正常对照组(NC组)、模型对照组(MC组),每组10只.MC组每只大鼠右后足趾皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml,复制佐剂关节炎大鼠模型,NC组每只大鼠右后足趾皮内注射蒸馏水0.1 ml,两组均给药18 d.结果:与NC组比较,MC组足肿胀率、关节炎指数均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);MC组的IL-6、VEGF指标也均明显升高,而IL-10指标明显下降升高,差异均有统计学意义(P<0.01);MC组的COX-2、PI3K、AKT指标均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);MC组大鼠COX-2与IL-6、VEGF呈正相关,与IL-10呈负相关;PI3K与IL-6、VEGF呈正相关,与IL-10呈负相关;AKT与IL-6、VEGF呈正相关.结论:COX-2、PI3K、AKT与IL-6、IL-10、VEGF细胞因子密切相关.
关键词： 类风湿关节炎 环氧化酶-2 磷脂酰肌醇3-激酶 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 血管新生 -
参芎化瘀胶囊通过磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B信号通路抑制全脑缺血大鼠神经细胞凋亡
目的:探讨参芎化瘀胶囊对大鼠脑缺血/再灌注损伤神经细胞凋亡的影响.方法:雄性SD大鼠被分成假手术组,模型组,参芎化瘀胶囊高、低剂量组,以改良的Pulsineli 4血管阻断(4-VO)法制作全脑缺血模型.免疫组织化学法检测海马区磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)、蛋白激酶B(PKB/Akt)的表达.原位缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞.结果:与假手术组比较,模型组中PI3-K、Akt表达增高,凋亡神经细胞数量增多；与模型组比较,参芎化瘀胶囊组中PI3-K、Akt表达进一步增多,凋亡神经细胞数量减少,上述变化在高剂量参芎化瘀胶囊组更为明显.结论:参芎化瘀胶囊可抑制全脑缺血大鼠神经细胞凋亡,其机制与PI3-K/Akt信号通路有关.
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瘦素对大鼠离体胰岛β细胞胰岛素分泌和Kir6.2基因表达的调节
研究瘦素在不同的葡萄糖浓度下对离体大鼠β细胞胰岛素分泌以及ATP敏感性K+通道(KATP)亚单位Kir6.2基因表达的调节及其可能的细胞内信号转导途径.结果表明在不同的葡萄糖浓度下,瘦素对胰岛素分泌的调节呈双向变化,对Kir6.2基因表达的调节可能通过细胞内与胰岛素受体底物-2有关的磷脂酰肌醇3-激酶信号途径的介导.
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PTEN/P13K突变对肺癌细胞基因表达谱的影响
目的:探讨第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)和磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)基因突变对肺癌细胞基因表达谱的影响.方法:采用蛋白质印迹法检测19株非小细胞肺癌细胞中PTEN表达情况,测序验证PTEN基因是否发生突变,检测该突变对于PTEN下游分子AKT和mTOR通路产生的影响.利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)方法对19株肺癌细胞的基因表达谱数据进行PTEN/PI3K突变的功能分析.结果:19株非小细胞肺癌细胞中有5株PTEN蛋白表达缺失,通过测序发现这5株均存在PTEN突变；文献检索另有2株存在PIK3CA突变.PTEN突变后其下游分子AKT和mTOR通路处于持续活化状态.借助GSEA法对肺癌细胞基因表达谱数据进行分析,发现PTEN(或PI3K)突变对肺癌细胞的线粒体-能量代谢的基因集产生了重要影响.结论:PTEN/PI3K突变对其下游分子AKT和mTOR通路产生明显影响,对肺癌细胞基因表达谱的影响主要体现在线粒体-能量代谢方面的基因集.这一发现提示,有必要重视线粒体-能量代谢在肺癌发生中的作用.
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大脑皮质细胞低氧条件液对神经干细胞增殖的影响及其信号转导通路的分析
目的 观察和分析大脑皮质细胞低氧条件液对神经干细胞增殖的影响,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)两条信号通路在此过程中的作用.方法 原代培养出生后24 h内SD大鼠大脑皮质细胞5d后,全量换液并在4％ O2、1％ O2和常氧环境下继续培养细胞6h以制备低氧条件液和常氧条件液.分别用3种条件液及结合使用PI3-K、JNK信号通路抑制剂LY294002和SP600125悬浮培养神经干细胞,并用免疫荧光染色鉴定神经干细胞,使用增殖效率(神经球数量)和增殖速度(神经球直径)分析神经干细胞的增殖情况.结果 (1)4％低氧条件液组和常氧条件液组神经干细胞的增殖效率高于1％低氧条件液组(P＜0.01),但前两者之间差异无统计学意义；(2)与常氧条件液相比,两个低氧条件液均提高了神经干细胞的增殖速度(P＜0.01),且4％低氧条件液组神经干细胞的增殖速度较1％低氧条件液组快(P＜0.01)；(3)在4％低氧条件液中使用LY294002和SP600125同时抑制了神经干细胞的增殖效率和增殖速度,且LY294002抑制作用在24 h之后尤为明显.结论 4％大脑皮质细胞低氧条件液能提高神经干细胞的增殖速度,PI3-K信号通路在此过程中发挥主要作用.
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胃腺癌组织再生基因蛋白Ⅳ的表达及临床意义
目的 探讨再生基因蛋白Ⅳ(regenerating gene typeⅣ,RegⅣ)在胃腺癌发生发展中的可能价值及意义.方法 采用S-P免疫组织化学技术测定63例胃腺癌及相应的癌旁正常组织中RegⅣ及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、Akt蛋白的表达;分析胃癌患者不同临床病理特征下RegⅣ、PI3K、Akt蛋白的表达差异,并分析胃癌组织RegⅣ蛋白与PI3K、Akt蛋白表达的相关性.结果 63例胃腺癌组织中RegⅣ、PI3K、Akt蛋白的阳性表达率为50.7％ (32/63)、68.3％ (43/63)、60.3％ (38/63),均高于癌旁正常组织19.0％ (12/63)、20.6％ (13/63)、9.5％ (6/63),差异有统计学意义(P＜0.05).不同肿瘤分化程度间RegⅣ蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.05);不同肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移与否、临床分期间PI3K蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.05);淋巴结转移与否胃癌组织Akt蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.05).胃腺癌组织中RegⅣ蛋白与PI3K、Akt表达正相关(rs=0.284、0.305,P＜0.05),PI3K蛋白与Akt蛋白表达正相关(rs=0.423,P＜0.05).结论 RegⅣ高表达与胃腺癌发展相关,PI3K/Akt信号通路的激活可能参与其中.
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LY294002抑制PI3K/Akt信号通路对人胃癌SGC-7901细胞的影响
目的 探讨低氧环境下PI3K抑制剂2-(4-吗啉基)- 8-苯基- 4氢-1-苯并吡喃- 4-酮(LY294002)对人胃癌SGC-7901细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路、细胞生长、细胞凋亡及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达的影响.方法 应用LY294002作用于低氧环境中的人胃癌SGC-7901细胞(低氧+LY294002组),采用CCK-8试剂盒检测SGC-7901细胞生长;流式细胞仪检测细胞凋亡百分比;Western blotting检测PI3K和p-Akt蛋白表达;RT-PCR检测HIF-1α mRNA表达.以低氧环境中未加LY294002的细胞作为对照(低氧组).结果 LY294002能抑制低氧环境中SGC-7901细胞增殖,抑制效果在药物作用后第2～6天时为明显(P＜0.05),低氧+LY294002组中细胞凋亡百分比明显高于低氧组(P＜0.01).LY294002能明显抑制PI3K、p-Akt蛋白以及HIF-1α mRNA的表达,与低氧组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 LY294002能抑制低氧环境中人胃癌SGC-7901细胞生长,促进细胞凋亡,抑制PI3K/Akt信号通路及其下游HIF-1α mRNA的表达.
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二氮嗪后处理对大鼠缺血再灌注心肌损伤和糖原合成酶激酶-3β表达的影响
目的 探讨激活磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路对二氮嗪后处理大鼠缺血再灌注(I/R)心肌保护作用的影响及其机制.方法 60只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分入假手术组、I/R组、二氮嗪后处理组(予二氮嗪7mg/kg)、渥曼青霉素组(予渥曼青霉素15 μg/kg)和二氮嗪+渥曼青霉素组(复合组).结扎左冠状动脉前降支30 min、再开放120min建立心肌I/R损伤模型.再灌注末,采用比色法检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)表达水平,应用电子显微镜观察心肌超微结构变化,采用比色法测定心肌组织内半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)活性,Western免疫印迹试验检测糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的表达水平.结果 I/R组、二氮嗪后处理组、渥曼青霉素组、复合组的LDH、CK表达水平,心肌组织内Caspase-3的活性值均显著高于假手术组(P值均＜0.01);二氮嗪后处理组和复合组均显著低于I/R组(P值均＜0.01);复合组均显著高于二氮嗪后处理组(P值均＜0.05);I/R组与渥曼青霉素组间的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).二氮嗪后处理组和复合组的p-GSK-3β表达水平显著高于假手术组和I/R组(P值均＜0.01),复合组显著低于二氮嗪后处理组(P＜0.01),假手术组、I/R组和渥曼青霉素组间的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).结论 二氮嗪后处理通过激活PI3K/Akt信号通路减轻大鼠心肌I/R损伤的机制与p-GSK-3β的表达增加有关.
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PI3K-Akt通路参与二氮嗪后处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用
目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(phosphatidy-linositol 3-kinase-protein kinase B,PI3K-Akt)通路在二氮嗪(diazoxide,DZ)后处理减轻心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤中的作用.方法 采用大鼠在体心肌I/R损伤模型,50只雄性SD大鼠按照随机数字表随机分为5组(每组10只):A组(假手术组)、B组(I/R组)、C组(DZ组)、D组(渥蔓青霉素 wortmannin,WTN组)、E组(DZ+WTN组).连续监测血流动力学指标,2,3,5.三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色分析心肌梗死面积,比色法测帆浆肌酸激酶(creatine kinase,CK)水平,HE染色观察病理学变化.结果 与B组相比,C组和E组心功能明显改善,心肌梗死面积[(11±4)%与(17±4)%vs(23±5)%,P<0.01或P<0.05]和血浆CK[(5.8±1.0)U/ml与(7.2±1.3)U/ml vs(11.6±1.6)U/ml,P<0.01]水平都显著降低,心肌损伤较轻;与E组相比,C组心功能明显改善,心肌梗死面积[(11±4)%vs(17±4)%,P<0.05]和血浆CK水平[(5.8±1.0)U/ml vs(7.2±1.3)U/ml,P<0.05)均显著降低,心肌损伤更轻;B、D两组各项指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 DZ后处理的心肌保护作用部分地与PI3K-Akt通路有关.
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磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶信号通路与肾脏疾病
磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kimase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(v-akt murine thymoma viral oncogene homolog,Akt)通路是真核细胞关键的信号转导通路,在细胞凋亡、代谢、增殖及分化等生命活动中发挥着重要功能.近年来发现此通路与肾脏疾病关系密切,它在糖尿病肾病(DN)、狼疮性肾炎、多囊肾、肾脏缺血再灌注损伤等疾病的发病机制、诊断及治疗等方面的作用日益受到重视.
关键词： 磷脂酰肌醇3-激酶 哺乳动物的雷帕霉素作用靶点 蛋白激酶B 肾脏疾病 -
壮骨镇痛胶囊对裸鼠乳腺癌移植瘤细胞磷脂酰肌醇3-激酶的影响
目的：探讨壮骨镇痛胶囊对裸鼠乳腺癌转移瘤细胞磷脂酰肌醇3-激酶的作用。方法32只裸鼠随机等分为壮骨镇痛胶囊预防组、壮骨镇痛胶囊治疗组、参一胶囊阳性药物对照组和模型组，每组8只，接种乳腺癌细胞MDA-MB-231制备移植瘤，药物干预后，采用免疫组织化学染色法检测各组裸鼠移植瘤细胞磷脂酰肌醇3-激酶( PI3-K)的表达水平。结果与模型组比较，各药物组瘤重均显著减轻(均P<0.05)，且预防组瘤重显著低于治疗组和参一胶囊阳性对照组(均P<0.05)；各药物组PI3-K表达水平均显著低于模型组(均P<0.05)，并且预防组PI3-K表达水平显著低于参一胶囊阳性对照组和壮骨镇痛胶囊治疗组(均P<0.05)。结论壮骨镇痛胶囊能够抑制裸鼠乳腺癌移植瘤的生长，其作用可能与抑制磷脂酰肌醇3-激酶表达水平相关，预防组较治疗组疗效更佳。
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胰岛素样生长因子-1的神经保护作用
胰岛素样生长因子-1(IGF-1)是一种多肽类神经营养因子.在生理条件下,IGF-1及其受体广泛分布于中枢神经系统;在病理条件下,IGF-1表达上调,并通过促分裂原活化蛋白激酶和磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶等信号通路,抑制细胞凋亡、调节离子通道活性、抑制一氧化氮毒性等多种途径发挥神经保护作用.
关键词： 胰岛素生长因子-1 促分裂原活化蛋白激酶 磷脂酰肌醇3-激酶 神经保护 -
抗血栓新靶点PI3K的研究进展
随着人口老龄化程度的提高,血栓性疾病的发病率和死亡率也逐年增高,因而安全有效的抗血栓药物的开发成为目前药物研究领域的热点.血小板在血栓形成中具有非常重要的作用,但目前临床使用的抗血小板药物由于各方面的不足受到限制,尤其是出血副作用.磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)是与细胞内信号转导相关的脂质激酶,在血小板活化的信号转导过程中发挥关键作用.目前正在研发的PI3Kβ抑制剂显示出良好的抑制血栓形成作用,同时不影响正常的止血过程,使PI3Kβ有望成为理想的抗血栓靶点.文章对PI3K的结构分类,血小板中的信号通路以及PI3K抑制剂作了综述.
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国家“重大新药创制”科技重大专项重点关注靶点分析解读——PI3K-Akt-mTOR通路
由磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)组成的PI3K-Akt-mTOR通路是细胞内非常重要的信号转导途径,该通路的紊乱会引起一系列的疾病,包括癌症、神经病变、自身免疫性疾病和血液淋巴系统疾病.近年来,PI3K-Akt-mTOR通路作为药物靶点备受关注.结合汤森路透数据库资源——Thomson Reuters Integrity和Cortellis for Competitive Intelligence,对PI3K-Akt-mTOR通路的机制、相关药物研究进展、适应证、研发公司、交易、专利、文献等情报进行了数据层面的分析.
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血栓素A2及PI3K/AKT信号通路在早发型子痫前期的作用研究
目的:研究血栓素A2(TXA2)及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路在早发型子痫前期的作用和意义.方法:选取本院2015年5月至2017年5月收治的60例子痫前期孕妇为观察组,同期30例正常孕妇为对照组,采用免疫组织化学法检测两组胎盘组织中TXA2的表达,采用Caspase 3活性检测试剂盒检测凋亡蛋白Caspase 3表达,采用Real-time PCR和Western blotting检测患者血清和胎盘组织中PI3K、AKT的基因和磷酸化蛋白的表达.结果:与对照组相比,观察组患者血清TXA2、PI3K、AKT含量明显升高,Caspase 3活性明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);观察组患者胎盘组织内TXA2、PI3K和AKT的蛋白和mRNA表达显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,观察组患者胎盘组织内TXA2蛋白平均光密度水平明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:早发型子痫前期患者体内TXA2呈异常过表达状态,且PI3K/AKT信号通路在早发型子痫前期的发病过程中具有重要的作用.
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人PI3KCG慢病毒载体的构建及其在乳大鼠原代心肌细胞中的表达和初步功能检测
目的:构建含有人磷脂酰肌醇3-激酶p1 10γ(phosphatidylinositol 3-kinase,catalytic subunit gamma,PI3KCG)基因的慢病毒载体,鉴定其在乳大鼠原代心肌细胞中的表达并作初步功能检测.方法:利用同源重组的方法构建含PI3KCG基因慢病毒载体质粒,测序鉴定后采用脂质体转染法同慢病毒系统三质粒共转染293T细胞,转染后24h和48 h荧光显微镜下观察阳性对照组中的绿色荧光蛋白的表达,同时PCR法鉴定重组PI3KCG慢病毒质粒转染293T细胞成功,收集72 h病毒上清.培养乳大鼠原代心肌细胞,分为对照组,缺氧/复氧组,空载体阳性对照组,PI3KCG实验组,PI3KCG+Ly294002组5组,将含PI3KCG慢病毒载体的病毒液转染心肌细胞,检测各组的细胞培养上清中的乳酸脱氢酶浓度,观察预转染PI3KCG基因对心肌细胞缺氧/复氧过程中的保护作用.结果:成功构建含有PI3KCG基因的慢病毒载体质粒,并在293T细胞中成功表达.与缺氧/复氧组比较,PI3KCG组心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶水平明显降低(P＜0.01)；心肌细胞的存活率、搏动频率明显升高(P＜0.01).结论:PI3KCG慢病毒载体有望成为探讨PI3K/AKT信号通路激活在防止心肌细胞缺血再灌注损伤的有效工具.
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LY294002抑制PI3K-Akt信号通路对人甲状腺癌细胞的影响
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮(LY294002)对人甲状腺未分化癌HTH-15细胞中PI3K-丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路、细胞生长、细胞凋亡及细胞侵袭性的影响.方法:HTH-15细胞用不同浓度(O～100 μmol/L)LY294002处理,以DMSO处理作为对照组,四甲基偶氮唑盐(MTF)试验检测细胞抑制率;流式细胞仪检测细胞周期百分比;Western blot检测磷酸化Akt(p-Akt)蛋白、基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达;Transwell小室检测细胞侵袭性.结果:LY294002能抑制HTH-15细胞的增殖,且呈一定的浓度及时间依赖性,经LY294002处理组后细胞停留在G1期的百分比明显高于DMSO对照组(P＜0.05);LY294002能明显抑制p-Akt蛋白和MMP-2蛋白表达,且应用LY294002后,能降低HTH-15细胞的侵袭性.结论:甲状腺未分化癌HTH-15细胞中存在有活性的PI3K-Akt通路,表达高水平的p-Akt蛋白,LY294002可能通过抑制PI3K-Akt信号通路中p-Akt的表达抑制HTH-15细胞增殖,促进细胞凋亡,降低细胞侵袭能力.
