恒磁场治疗限局型硬皮病76例

硬皮病是一种以皮肤及各系统胶原纤维进行性硬化为特征的结缔组织病,分系统型和限局型两种,限局型常好发于躯干、四肢和颜面,呈圆形、椭圆形条带状或不规则形,目前治疗方法虽多,但疗效较差.我科从1995-2000年试用恒磁场治疗限局型硬皮病76例,获得满意疗效,报道如下.

恒磁场对成人骨髓间充质干细胞增殖及细胞周期的影响

目的:观察不同强度恒磁场辐射对成人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)增殖水平及细胞周期的影响. 方法:用密度梯度离心法分离成人MSC,再经贴壁筛选法筛选,对生长良好的第3代成人MSC进行恒磁场辐射(强度分别为0.05、0.10、0.50和1.00 mT),连续刺激5天(每天8 h)后,用单四唑(MTT)法、流式细胞仪法测定细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况. 结果: 0.05 mT组细胞增殖显著高于对照组;0.10 mT组细胞增殖与对照组相比无明显差异;其余剂量组细胞增殖均显著低于对照组.各组均未发现DNA倍体异常细胞. 结论:恒磁场对成人MSC增殖的影响与磁感应强度有关,0.05 mT的磁场促进MSC的增殖,0.10 mT的磁场对MSC无明显影响,0.50 mT和1.00 mT的磁场抑制MSC的增殖.

恒磁场对金属离子钴铬作用下人单核细胞分泌肿瘤坏死因子的影响

[目的]探讨恒磁场对金属离子钴、铬作用下人外周血单核细胞分泌肿瘤坏死因子的影响,寻找防治假体周围骨溶解的方法.[方法]将CoCl2粉末与CrCl3粉末溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和CrCl3溶液,从健康人外周血提取单核细胞,将金属离子Co2+、Cr3+分别与人单核细胞在不同的磁场强度(1 mT、10 mT、100 mT)下共培养.实验分9组:单核细胞组(对照组)、Co2+、Cr3+组、Co2+、Cr3+分别+不同磁场强度(1 mT、10 mT、100 mT)组,各组细胞于培养12、24、48 h取细胞上清液,用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,以吸光度(A值)的高低来反映标本中肿瘤坏死因子α含量的多少.[结果]Co2+、Cr3+均能刺激人单核细胞释放TNF-α(P＜0. 05),且以24 h释放为明显.经磁场暴露12 h之后,1 mT、10 mT、100 mT磁场处理组TNF-α量均低于非磁场处理组(P＜0. 05),并呈现强度依赖性.[结论]一定强度的恒磁场可拮抗金属离子钴、铬刺激人外周血单核细胞分泌TNF-α,为磁场疗法防治假体周围骨溶解提供了理论依据.

不同强度恒磁场协同顺铂促进U2骨肉瘤细胞凋亡的分子机制

[目的]探讨不同强度恒磁场促进顺铂诱导的U2骨肉瘤细胞(U2-OS)细胞凋亡及p53、bcl-2、c-myc基因表达变化的情况.[方法]分别使用1 mT、10 mT、100 mT恒磁场和加入3.0 μg/ml顺铂的细胞培养液共同培养U2-OS细胞24 h.采用四甲基氮唑蓝比色法(MTT法)、流式细胞术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测恒磁场和顺铂联合对U2骨肉瘤细胞体外增殖、凋亡及相关基因表达.[结果]不同强度恒磁场能促进顺铂对人U2-OS细胞的抑制作用,10 Gs场强下其抑制率、凋亡率高;凋亡率达37.66%,而p53 mRNA表达强,bcl-2、c-myc mRNA表达弱.[结论]不同强度恒磁场协同顺铂通过诱导细胞内p53、bcl-2、c-myc基因表达的变化是其抗肿瘤的机制之一,10 Gs场强下协同顺铂的抗肿瘤作用强.

恒磁场对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡及分泌功能的影响

目的 观察不同强度的恒磁场作用不同时间对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、凋亡及分泌功能的影响.方法 将HUVECs分别暴露于场强为5、22、86或135 mT的恒磁场中,磁场作用时间分别为8、12或24 h.以流式细胞技术分析恒磁场对HUVECs增殖及凋亡的影响；比色法测定细胞培养液中一氧化氮(NO)含量的变化；放射免疫法测定细胞培养液中的内皮素-1( ET-1)及6-酮-前列环素F1α(6-keto-PGF1α)的含量.结果 ①低强度磁场(5 mT)短时间(8 h)作用于HUVECs可促使其增殖,但高强度磁场( 135 mT)或作用时间过长(12 h或24 h)则会抑制HUVECs的增殖；②磁场对HUVECs凋亡无影响；③低强度磁场(5 mT)短时间(8 h)作用可促使HUVECs合成释放NO和6-keto-PGF1α,但高强度磁场( 135 mT)或作用时间过长(12 h或24 h)则会抑制HUVECs合成分泌NO和6-keto-PGF1α；④细胞暴露于磁场8h时,5 mT组和22 mT组与对照组比较,HUVECs合成释放ET-1量无明显变化(P＞0.05),但86 mT组和135 mT组的细胞ET-1分泌量高于对照组(P＜0.01).当磁场作用时间分别为12和24 h时,5 mT组与对应时间点对照组比较,细胞ET-1合成释放量仍无变化(P＞0.05),22 mT组、86 mT组、135 mT组则明显低于对照组(P＜0.01).结论 低强度磁场、短时间作用可促进HUVECs的增殖及舒血管物质的合成分泌,而高强度磁场或磁场作用时间过长则抑制HUVECs增殖,增加缩血管物质的合成.

恒磁场对C-反应蛋白作用下大鼠内皮祖细胞增殖、凋亡及一氧化氮分泌的影响

目的 观察恒磁场(CMF)对C反应蛋白(CRP)作用下大鼠骨髓来源内皮祖细咆(EPC)增殖、凋亡及一氧化氮(NO)分泌的影响.方法 密度梯度离心法获得SD雄性大鼠的骨髓EPC,无菌条件下培养4 d;实验分为3组:空白对照组、CRP(12μg/ml)组及CRP+CMF(0.1 mT、0.5 mT、1.0 mT)组.各组皆于24 h后收集标本,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,硝酸还原酶法检测培养液中的NO含量.结果 与对照组相比,CRP组细胞增殖(吸光度)显著降低(P<0.05),NO分泌量显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05);CRP+0.5 mT和1.0 mT CMF组细胞增殖吸光度显著高于CRP组(P<0.05),NO分泌量显著高于CRP组(P<0.05),细胞凋亡率显著低于CRP组(P<0.05).结论 0.5 mT和1.0 mT CMF可拮抗CRP的作用,促进EPC的增殖及NO分泌并抑制EPC凋亡.

恒磁场作用诱导骨髓间充质干细胞向髓核细胞分化的实验研究

目的 研究恒磁场作用对骨髓间充质干细胞(MSCs)向髓核细胞分化的影响.方法 采用4',6-二咪基-2'-苯吲哚盐酸(DAPI)标记新西兰大白兔原代髓核细胞,分别在恒磁场(磁场强度依次为0.05,0.10.0.50,1.00mT)及无磁场环境下与第三代MSCs直接接触或间接接触培养.每24 h观察MSCs的形态变化情况,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测MSCs细胞生长情况,采用RT-PCR法检测细胞Ⅱ型胶原、Ag-grecan及Sox-9基因表达水平.结果 直接接触-曝磁组MSCs被诱导分化为圆形类髓核细胞,明显优于未曝磁组细胞(P＜0.05).在0.05 mT恒磁场干预条件下,类髓核细胞Ⅱ型胶原蛋白、Aggrecan及Sox-9基因表达水平均较未给予恒磁场作用的类髓核细胞显著增高(P＜0.05),0.10 mT恒磁场则无明显上述作用(P＞0.05);当磁场强度大于0.10 mT时,能明显抑制类髓核细胞增殖水平(P＜0.05).结论 0.05 mT恒磁场作用及细胞直接接触均有利于诱导MSCs向髓核细胞分化.

恒磁场对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的研究不同强度的恒磁场对人脐静脉内皮细胞增殖的影响. 方法体外培养的第3代人脐静脉内皮细胞,分为对照组及不同剂量磁场组.各剂量磁场作用组的磁感应强度分别为0.05 mT、0.1 mT、1 mT、10 mT、30 mT、60 mT和100 mT,磁场作用时间均为48 h.用3HTdR法及MTT法测定细胞增殖. 结果 0.05 mT组细胞增殖显著高于对照组(0.292±0.010对0.220±0.008,P<0.05);0.1 mT组细胞增殖与对照组相比无明显差异(0.231±0.009对0.220±0.008,P>0.05);其余剂量组细胞增殖均显著低于对照组(P<0.05). 结论 0.05 mT的恒磁场可以促进人脐静脉内皮细胞的增殖.

恒磁场对金属离子钻、铬作用下人单核细胞分泌肿瘤坏死因子和细胞凋亡的影响

目的 探讨恒磁场对金属离子钴、铬作用下人外周血单核细胞分泌肿瘤坏死因子的影响,并探讨其对细胞凋亡的动态变化与Caspase-3活性的影响.方法 将CoCl2粉末与CrCl3粉末溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和CrCl3溶液,从健康人外周血提取单核细胞,将金属离子Co2+Cr3+分别与人单核细胞在不同的磁场强度(10Gs、100Gs、1000Gs)下共培养.实验分8组:Co2+Cr3+组(对照组)、Co2+、Cr3+分别+不同磁场强度(10Gs、100Gs、1000Gs)组,各组细胞于培养12、24、48小时用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子(TNF-a)的含量:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,比色法测定Caspase-3酶活性.结果 经磁场暴露12h之后,各磁场处理组TNF-a量均低于非磁场处理组(P＜0.05),并呈现强度时间依赖性.在100Gs和1000Gs磁场处理组,细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.05),并随着磁场强度的逐渐增大,Caspase-3酶活性逐渐增强.而10Gs磁场组对细胞凋亡及Caspase-3酶活性的改变无明显影响(P＞0.05).结论 一定强度的恒磁场町拮抗金属离子钴、铬刺激人外周血单核细胞分泌TNF-a并且促进其凋亡,为磁场疗法防治假体周围骨溶解提供了理论依据.

恒磁场对ВСД-ТТ综合征患者植物神经功能状态的影响

恒磁场对人脐静脉内皮细胞活性及超微结构的影响

目的探讨恒磁场对血管内皮细胞活性、超微结构及凋亡的影响.方法将人脐静脉内皮细胞暴露于0.05、0.1、1及5 mT恒磁场中,四唑盐比色法测定细胞增殖,采用透射电镜观察内皮细胞超微结构,流式细胞仪观测内皮细胞凋亡.结果 0.05 mT恒磁场促进内皮细胞的增殖活性,0.1 mT恒磁场对细胞增殖无明显影响,1 mT、5 mT恒磁场抑制细胞增殖.0.05 mT、0.1 mT、1 mT恒磁场不引起细胞坏死,但1 mT恒磁场可引起部分细胞变性,5 mT恒磁场不但引起细胞变性,还可以导致细胞坏死.0.05 mT、0.1 mT、1 mT恒磁场没有引起细胞凋亡,5 mT恒磁场导致8.4%细胞凋亡.结论恒磁场对人脐静脉内皮细胞的生物学效应与磁感应强度有关,5 mT恒磁场对人脐静脉内皮细胞具有损害作用.

恒磁场对糖基化终产物作用下内皮细胞一氧化氮生成和一氧化氮合酶活性的影响

目的观察不同强度恒磁场对糖基化终产物作用下人脐静脉内皮细胞一氧化氮生成及一氧化氮合酶活性的影响.方法采用体外培养第3代人脐静脉内皮细胞,糖孵育法制备糖基化终产物修饰牛血清白蛋白.实验分为6组,即对照组、糖基化终产物修饰牛血清白蛋白(100 μg/L)组及糖基化终产物修饰牛血清白蛋白+不同强度(1×10-4T、5×10-4T、10×10-4T、20×10-4T)磁场组.各组细胞于培养及磁场作用24 h后收集标本,用Griess法检测培养上清中一氧化氮水平,并测定人脐静脉内皮细胞的一氧化氮合酶活性.结果糖基化终产物修饰牛血清白蛋白组一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性较对照组明显降低(P<0.05).1×10-4T、5×10-4T、10×10-4T和20×10-4T恒磁场组一氧化氮生成、一氧化氮合酶活性显著高于糖基化终产物修饰牛血清白蛋白组(P<0.05).结论糖基化终产物修饰牛血清白蛋白可抑制人脐静脉内皮细胞的一氧化氮合酶活性和一氧化氮产生;1×10-4T～20×10-4T的恒磁场可呈强度依赖性拮抗糖基化终产物修饰牛血清白蛋白对一氧化氮生成的抑制效应.

恒磁场对Feridex-GFP双标记BMSC在损伤肝脏中定植的影响

目的:评价体外恒磁场作用下,双标记干细胞经外周静脉、门静脉、肝动脉移植在损伤肝脏中的定植率及治疗急性肝损伤的有效性.方法:分离骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),经培养传代纯化、体外诱导,分化为肝样细胞,绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和菲立磁(Feridex)体外双标记BMSCs,不同途径移植双标记BMSCs至肝脏,于移植后第1,2,3,4周处死大鼠,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)水平,并取肝组织做苏木精-伊红染色(HE染色)、荧光显微镜下观察肝内GFP阳性率.结果:双标记BMSCs通过尾静脉、门静脉、肝动脉3种途径及其外加恒磁场作用下,移植后第4周均能定植于肝脏,改善肝功能;在远期疗效不变的前提下,肝门静脉移植+恒磁场组、肝动脉移植+恒磁场组促进肝功能的早期恢复.结论:BMSCs移植可有效治疗急性肝损伤,首选经门静脉+恒磁场、肝动脉+恒磁场途径,次选外周静脉或外周静脉+恒磁场途径.

恒磁场对糖基化终产物作用下内皮细胞分泌细胞间黏附分子-1及与单核细胞黏附的影响

目的观察不同强度恒磁场对糖基化终产物(AGE)作用下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及HUVEC与人单核细胞株THP-1黏附的影响.方法采用体外培养第3代的HUVEC,实验分为6组,即对照组、AGE组(AGE-BSA 100μg/L)及AGE+不同强度(1、5、10、20Gs)的恒磁场组.各组细胞于培养及恒磁场作用24 h后收集标本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HUVEC分泌Ⅰ-CAM-1的量,计数法观察HUVEC与THP-1的黏附率.结果AGE组细胞ICAM-1的分泌量显著增高(P＜0.05 vs对照组),而1、5、10和20Gs恒磁场组细胞ICAM-1的分泌量显著低于AGE组(P＜0.05).AGE组HUVEC与THP-1的黏附率显著增加(P＜0.05 vs对照组),而1、5、10和20 Gs恒磁场组HUVEC与THP-1的黏附率显著低于AGE组(P＜0.05).结论1-20Gs的恒磁场可拮抗AGE的作用,抑制HUVEC分泌ICAM-1及与单核细胞的黏附率.

恒磁场对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的:探讨中心磁场强度为0.2 T的恒磁场对大鼠骨髓间充质干细胞的影响.方法:用全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞,对生长良好的第3代细胞进行中心磁场强度为0.2 T的恒磁场刺激,MTT法测定细胞增殖水平,流式细胞仪法测定细胞周期变化.结果:大鼠骨髓间充质干细胞经磁场刺激5 d后,实验组细胞增殖水平和(S+G2/M)期细胞数量均有不同程度提高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:恒磁场能促进体外培养大鼠骨髓间充质干细胞的增殖水平.

恒磁场对培养的骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制

目的 观察不同强度的恒磁场作用不同时间对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向成骨细胞分化的影响及机制.方法 密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞进行体外培养.以3～4代的MSCs为靶细胞,对其进行诱导分化和施以恒磁场处理.磁场暴露强度分别为0、0.5、1.5、2、3 mT.以IFCC推荐法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性表达;茜素红染色观察钙结节的数量和大小;放免法检测骨钙素(osteocalcin,OCN)和Ⅰ型胶原的分泌;Western blot分析MAPK P38信号分子的磷酸化,并探讨其特异性阻断剂对恒磁场调控MSCs成骨分化的影响.结果 ①恒磁场明显促进Ⅰ型胶原和ALP的活性表达,增加OCN的分泌及钙结节的形成,其中1.5～2 mT磁场强度促MSCs成骨分化作用为明显;②恒磁场促进磷酸化MAPK P38的表达;③加入P38信号通路SB253580明显抑制恒磁场的促成骨效应.结论 磁场促进MSCs成骨分化,其机制与P38信号分子的激活有关.

恒磁场对 AngⅡ作用下人脐静脉内皮细胞分泌ICAM-1及与单核细胞黏附的影响

近年来,黏附分子与炎性反应在经皮冠状动脉介入治疗术后再狭窄发生中的作用受到重视[1],已证实细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平的增加与冠状动脉介入治疗术后的再狭窄显著相关[2,3].血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)有强烈的致炎症作用,可刺激内皮细胞ICAM-1等黏附分子的表达[4],增加内皮细胞对单核细胞的黏附作用及炎症浸润[5],因此也是冠脉介人治疗术后再狭窄发生的重要因素.

恒磁场对兔主动脉内皮细胞增殖的影响

目的:观察不同剂量恒磁场对兔主动脉内皮细胞增殖影响.方法:将体外培养的3～8代兔主动脉内皮细胞分为对照组及不同剂量(0.5,1,10,100,300,600和1000 Gs,1 Gs=10-4 Tesla)磁场组.磁场作用时间为48 h.用3H-TDR法及MTT法测定细胞增殖.结果:与对照组相比,0.5 Gs组细胞增殖显著高于对照组(P<0.05);1 Gs组细胞增殖与对照组相比无明显差异;其余剂量组细胞增殖显著低于对照组(P<0.05).结论:0.5Gs的恒磁场可以促进兔主动脉内皮细胞的增殖.

不同强度恒磁场对人脐动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的: 探讨不同强度恒磁场对离体人脐动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法: 用含100 ml*L-1新生牛血清及成纤维生长因子(5 μg*L-1)和表皮生长因子 (10 μg*L-1)的DMEM的培养液,培养人VSMC至3～10代,将培养液与VSMC的混悬液(细胞浓度为1×105*mL-1)100 μL加入 96孔培养板中培养,对照组持续培养72 h,实验组24 h后将培养板置于0.5～60 mT的恒磁场中继续培养48 h,用MTT法和3H-TdR掺入法检测两组VSMC的增殖数量(A值和核素闪烁计数值).结果: 在恒磁场的作用下, 0.5,1,2,5 mT组人脐VSMC的增殖数量显著低于对照组(P＜0.05).10,30,60 mT组人脐VSMC的增殖数量显著高于对照组(P＜0.01).结论: 恒磁场强度为0.5,1,2,5 mT时抑制VSMC增殖,10,30,60 mT时促进VSMC增殖.

恒磁场对阿霉素杀伤人乳腺癌细胞的协同作用

目的:观察恒磁场联合阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响及其机制.方法:MCF-7细胞经不同浓度的阿霉素和/或恒磁场(10 mT)处理24 h后.以MTT法检测不同条件下细胞生长受抑制情况;流式细胞术检测各组细胞周期分布;荧光显微镜检测细胞内活性氧变化情况;蛋白电泳检测凋亡相火蛋白Caspase 3表达情况.结果:恒磁场可明显增强阿霉素对MCF-7细胞生长的抑制效应(P<0.01),更强地抑制细胞DNA合成及有丝分裂(P<0.05),促使细胞内活性氧合成,并上调凋亡相关蛋白Caspase-3的表达.结论:恒磁场(10 mT)对阿霉素杀伤人乳腺癌细胞具有较强的协同作用.