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青蒿琥酯对MRL/lpr小鼠间质性肺炎和颌下腺炎的治疗作用
目的 探讨青蒿琥酯对MRL/lpr小鼠间质性肺炎和颌下腺炎的治疗作用.方法 18只MRL/lpr小鼠按随机数字表法分为硫酸羟氯喹组、青蒿琥酯组和对照组,每组6只.18周龄时,硫酸羟氯喹组和青蒿琥酯组分别给予硫酸羟氯喹混悬液(150 mg/kg,1次/d)和青蒿琥酯混悬液(50 mg/kg,1次/d),共12周.HE染色法评价肺炎和颌下腺炎的病理学改变.采用酶联免疫吸附法检测血清和尿单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)水平.结果 30周龄时,硫酸羟氯喹组、青蒿琥酯组细支气管周围损害指数[(1.62±0.19)、(1.52±0.30)比(1.95±0.34);P＜0.05]、血管周围损害指数[(1.23±0.18)、(1.28±0.12)比(1.57±0.33);P＜0.05]、肺泡损害指数[(1.35±0.16)、(1.37±0.10)比(1.72±0.34);P＜0.05]、颌下腺炎症指数[(1.48±0.22)、(1.43±0.15)比(1.84±0.34);P＜0.05]均较对照组减轻,血清[(1 103.02±185.56) pg/ml、(1 072.37±242.43) pg/ml比(1 490.67±329.43) pg/ml;P＜0.05]和尿[(189.16±70.85) pg/ml、(198.79±113.47) pg/ml比(446.79±192.31) pg/ml;P＜ 0.05] MCP-1水平均显著降低.结论 青蒿琥酯可降低MRL/lpr小鼠血清MCP-1水平,减轻间质性肺炎和下颌腺炎.
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青蒿琥酯对哮喘大鼠肺组织TLR-4及TGF-β1表达的影响
目的 通过对大鼠肺组织中Toll样受体4(TLR-4)和转化生长因子β1 (TGF-β1)表达影响的研究及对大鼠肺组织病理形态的观察,评价青蒿琥酯对哮喘大鼠的药理作用.方法 清洁级SD雄性大鼠32只,随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组和青蒿琥酯组,采用激发和雾化吸入的方法建立哮喘模型.观察各组大鼠肺组织病理改变；取相关组织分别进行外周血白细胞计数、肺泡灌洗液(BALF)白细胞计数;Western blot法和RT-PCR法检测TLR-4和TGF-β1蛋白表达情况.结果 与哮喘组相比较,青蒿琥酯组大鼠肺部组织的炎症细胞浸润较少,肺泡的组织结构较为完整;外周血和BALF白细胞计数结果表明,青蒿琥酯组各项指标与哮喘组比较均有所改善；在蛋白水平上,青蒿琥酯组TLR-4和TGF-β1蛋白表达均下降.结论 青蒿琥酯逆转哮喘大鼠组织病理变化,降低TLR-4蛋白表达,并且可能通过TLR-4调整TGF-β1表达,终改善哮喘大鼠的症状.
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北京地区50例疟疾患者流行病学及临床分析
目的 了解解放军第302医院收治的北京地区50例疟疾患者的流行病学和临床特征,总结规律,进一步指导临床诊治.方法 主要采用描述性流行病学方法对患者资料进行回顾性分析.结果 本组患者以中青年为主,平均(32.6±10.3)岁,46例有国外旅居史,主要症状包括发热(100%)、畏寒寒战(78%)、大汗(70%),有典型发作经过的为28例(56%).脾大(66%)和肝大(30%)为主要体征.检查提示外周血白细胞大部分在正常范围,39例(78%)血小板计数降低.40例患者(80%)乳酸脱氢酶(L,DH)水平升高.病情程度不同的恶性疟、间日疟患者血小板计数和LDH有统计学差异(P<0.01).青蒿素类药物(46例用蒿甲醚,4例用青蒿琥酯)治愈率达100%,恶性疟和间日疟退热时间无统计学差异(P>0.05).结论 北京地区疟疾多为输入性病例,以中青年为主,部分具有发热、寒战、大汗典型发作症状,血小板减少对于疾病的诊断可能有着重要的提示意义.LDH异常对于病情程度的判断及预后预测具有一定的指导价值.青蒿素类药物尤其是蒿甲醚治疗效果好,可作为首选药物.
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青蒿素抑制胆囊癌细胞的迁移侵袭及其机制
目的 探讨青蒿素对胆囊癌细胞体外迁移、侵袭能力的影响及其机制.方法 20μmol/L青蒿素处理胆囊癌细胞GBC-SD(青蒿素组),同时设立未加青蒿素处理的对照组.采用划痕实验检测胆囊癌细胞迁移能力变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力变化,免疫荧光技术检测细胞形态变化.采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中E-cadherin、Slug、Vimentin、MMP-2、MMP-9等基因的mRNA和蛋白水平变化.两组表达量比较采用t检验.结果 划痕24 h青蒿素组划痕宽(393±23)μm,明显大于对照组的(210±15)μm(t=13.415,P<0.05).青蒿素组GBC-SD穿膜细胞数为(93±8)个,明显少于对照组的(202±14)个(t=-17.037,P<0.05).青蒿素促使细胞形态从间质型向表皮型转化.青蒿素组GBC-SD细胞的Slug、Vimentin、MMP-2、MMP-9基因的mRNA分别为0.89±0.03、1.35±0.10、3.30±0.13、1.15±0.08,明显低于对照组的2.08±0.12、3.22±0.15、4.72±0.19、1.95±0.15(t=-19.812,-20.775,-12.259,-9.438;P<0.05);而E-cadherin mRNA为2.06±0.08,明显高于对照组的1.03±0.06(t=20.956;P<0.05).Western blot检测显示青蒿素下调Slug、Vimentin、MMP-2、MMP-9,上调E-cadherin蛋白.结论 青蒿素可抑制胆囊癌细胞迁移和侵袭,其作用可能与抑制Slug基因表达逆转上皮间质转化,进而降低MMP表达有关.
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青蒿素诱导胆囊癌细胞的细胞周期阻滞和抑制细胞凋亡的体外实验研究
目的 探讨青蒿素对胆囊癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响.方法 体外培养胆囊癌细胞株(GBC-SD和NOZ).采用MTT法检测不同浓度青蒿素对两株细胞增殖的影响;通过流式细胞仪检测20 μmol/L青蒿素处理24h对细胞周期的影响;通过FITC-Annexin V双染法检测20 μmol/L青蒿素处理24 h对细胞凋亡的影响;通过免疫印迹法检测20 μmol/L青蒿素处理24 h后p-ERK1/2、CDK4、cyclin D1、p16、cytochrome C、caspase-3在细胞内的表达水平变化.两组间比较采用t检验,两组以上比较采用单因素方差分析.结果 WST-1实验结果显示,青蒿素可以抑制GBC-SD和NOZ细胞增殖,且该抑制作用具有浓度依赖性,青蒿素对GBC-SD和NOZ细胞的半数抑制浓度分别为14.05 μmol/L和12.42 μmol/L.细胞周期分析结果显示,GBC-SD细胞[(74.60±2.24)％]和NOZ细胞[(78.86±2.02)％]G1期比例高于对照组[(54.26±1.61)％、(58.44±1.83)％](F=0.658,P=0.000;F =0.055,P=0.000).免疫印迹法检测结果显示,青蒿素作用24 h后,细胞周期调控相关蛋白CDK4和cyclin D1蛋白表达水平显著降低,而p16蛋白表达水平显著增高(P值均＜0.05).Annexin V/PI双染凋亡检测结果显示,GBC-SD细胞[(15.67±2.40)％]和NOZ细胞[(16.51±2.20)％]的凋亡比例高于对照组[(6.28±1.18)％、(6.94±1.23)％](F=1.110,P=0.004;F=1.273,P=0.003).免疫印迹法检测结果显示,20 μmol/L青蒿素处理24h后,细胞色素C在线粒体中的含量显著降低,而在胞质中的含量显著增高(P值均＜0.05).结论 青蒿素可能通过抑制ERK1/2信号转导通路干扰细胞增殖,通过抑制CDK4和cyclin D1,诱导p16表达造成G1期阻滞,通过激活线粒体途径介导细胞凋亡.
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双氢青蒿素对卵巢上皮性癌细胞体外增殖及有丝分裂原激活的蛋白激酶磷酸化水平的影响
目的 探讨双氢青蒿素对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞体外增殖的影响,以及对卵巢癌细胞有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)磷酸化水平的影响.方法 双氢青蒿素处理卵巢癌细胞株SKOV3和OVCAR3细胞后,四甲基偶氮唑蓝比色法检测SKOV3和OVCAR3细胞的体外增殖抑制效应,蛋白印迹法检测SKOV3和OVCAR3细胞中两种MAPK[即细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和p38蛋白激酶]的磷酸化水平,以未用双氢青蒿素处理的SKOV3和OVCAR3细胞作为对照.结果 双氢青蒿素处理72 h后,SKOV3和OVCAR3细胞的50%抑制浓度(IC50)平均分别为(9.0±1.4)和(5.5±1.2)μmol/L.双氢青蒿素处理后,SKOV3和OVCAR3细胞中ERK 1/2的磷酸化水平明显降低,相对于对照细胞分别下降了64.2%和75.3%,差异均有统计学意义(P＜0.05);而p38蛋白激酶的磷酸化水平无明显变化,相对于对照细胞仅分别下降了8.5%和6.4%,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 双氢青蒿素能制卵巢癌细胞的体外增殖,该作用可能与其下调癌细胞内ERK 1/2的磷酸化水平有关.
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青蒿素类药物抗肿瘤作用机制的研究进展
青蒿素类药物是治疗疟疾的主要药物,其衍生物有青蒿琥酯、蒿甲醚和二氢青蒿素等,主要的作用机制是通过铁离子介导的细胞损伤.近年来研究发现,青蒿素类药物还具有更广泛的药理作用,它可以通过阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、抗血管生成、调节肿瘤相关基因的表达以及损伤细胞线粒体等机制从而发挥抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用日愈受到人们的重视.
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青蒿琥酯逆转裸鼠种植食管癌耐药作用研究
目的 探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)与食管癌多药耐药的关系以及青蒿琥酯(Art)逆转食管癌多药耐药的作用机制.方法 将食管癌多药耐药细胞Eta109/ABCG2接种于裸鼠皮下,建立荷瘤裸鼠动物模型.裸鼠皮下成瘤后用药,经腹腔给予Art和(或)阿霉素(ADM),分为Art高、低剂量组(50、25mg/kg Art),ADM组(1mg/kgADM)和ADM+ Art高、低剂量组( 1mg/kg ADM+50、25mg/kg Art),对照组给予生理盐水.停药后第2天处死裸鼠,剥离瘤结节,网搓法制备单细胞悬液.采用流式细胞术检测皮下种植瘤细胞凋亡率,细胞ABCG2蛋白表达及细胞内ADM含量.结果 成功建立Eca109/ABCG2种植瘤裸鼠模型,1周内成瘤率为100％.与对照组比较,ADM+ Art高、低剂量组皮下种植瘤细胞凋亡率显著增加(P＜0.05),细胞中ABCG2蛋白表达量显著降低( P＜0.05),ADM含量显著增加(P＜0.05).结论 ABCG2参与了食管癌多药耐药的形成,Art可通过降低食管癌细胞中AtCG2的表达从而逆转食管癌耐药作用.
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二氢青蒿素对胃癌细胞血管生成及相关基因表达的影响
目的：检测二氢青蒿素（DHA）对胃癌SGC7901细胞中血管生成及相关基因表达的影响及意义。方法：不同浓度（5、10、20、40、80μmol/L）DHA作用SGC7901细胞24、48和72 h后，通过MTT法检测DHA对SGC7901细胞增殖的抑制作用。利用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中人表皮生长因子（VEGF-C）、环氧合酶-2（COX-2）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）和PTEN的mRNA的表达量；利用Western blot方法检测其蛋白表达量。结果：SGC7901细胞经过不同浓度DHA处理24 h以及50μmol/L DHA处理24、48和72 h后，SGC7901细胞增殖受到明显抑制，细胞中VEGF-C、COX-2、VCAM-1和PTEN的mRNA及蛋白的表达水平均都受到抑制；PTEN的mRNA及蛋白的表达水平则呈升高趋势。结论：DHA通过减少胃癌SGC7901细胞中VEGF-C、COX-2和VCAM-1基因的表达，促进PTEN的表达，抑制了肿瘤细胞的生长。
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二氢青蒿素联合顺铂对胃癌SGC7901细胞增殖和耐药因子表达的影响
目的 探讨二氢青蒿素(DHA)联合顺铂(CDDP)对人胃癌SGC7901细胞增殖和耐药因子表达的影响.方法 将体外培养的人胃癌SGC7901细胞株和人胃黏膜上皮细胞GES-1细胞株分为6组,即SGC7901对照组(0.1%二甲基亚砜100 μl)、SGC7901 DHA组(25 μmol/L DHA 100 μl)、SGC7901 CDDP组(2.5 μg/ml CDDP 100 μl)、SGC7901 DHA+CDDP组(25 μmol/L DHA和2.5 μg/ml CDDP各100 μl)、GES-1对照组(0.1%二甲基亚砜100 μl)和GES-1 DHA组(25 μmol/L DHA 100 μl).采用磺酰罗丹明染色法检测各组细胞增殖的抑制情况,以光密度(OD)值表示;反转录聚合酶链反应检测耐药因子多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、谷胱甘肽转移酶-π (GST-π)、B细胞淋巴瘤/白血病蛋白-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA水平,以各目的 基因片段密度值/内参照β-actin密度值表示;蛋白质印迹法检测上述耐药因子蛋白水平,以各目的 蛋白条带吸光度值/内参照β-actin吸光度值表示.结果 SGC7901对照组、SGC7901 DHA组、SGC7901 CDDP组、SGC7901 DHA+CDDP组OD值分别为(0.77±0.14)、(0.58±0.13)、(0.52±0.12)、(0.30±0.05),差异有统计学意义(F=18.71,P＜0.05);SGC7901 DHA组、SGC7901 CDDP组及SGC7901 DHA+CDDP组OD值与SGC7901对照组比较,差异亦有统计学意义(t值分别为3.60、4.05和6.81,P＜0.05).GES-1对照组OD值为(0.79±0.13),GES-1 DHA组为(0.78±0.12),差异无统计学意义(t=-1.24,P＞0.05).SGC7901对照组、SGC7901 DHA组、SGC7901 CDDP组、SGC7901 DHA+CDDP组各耐药因子mRNA和蛋白水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);SGC7901 DHA组、SGC7901 CDDP组及SGC7901 DHA+CDDP组MDR1、MRP1、GST-π、Bcl-2 mRNA和蛋白水平较SGC7901对照组降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);TopoⅡ和Bax mRNA和蛋白水平较SGC7901对照组升高,差异亦有统计学意义(P＜0.05).GES-1对照组与GES-1 DHA组各耐药因子mRNA和蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 DHA对胃癌SGC7901细胞生长具有明显的抑制作用,可增强化疗药物CDDP对SGC7901细胞增殖抑制作用,并能通过不同途径特异性抑制胃癌SGC7901细胞耐药因子的表达.
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青蒿素类药物在非疟疾疾病中的研究进展
青蒿素是从中草药青蒿中分离出的一种倍半萜内酯类抗疟药物.近年来,在不同疾病条件下研究发现青蒿素类药物在感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等非疟疾疾病中具有显著疗效.本文回顾了近年来国内外相关文献,并总结了青蒿素类药物在非疟疾疾病中的临床应用及其药理作用的研究进展.相信随着药物合成技术和临床药理学的进步,青蒿素类药物会在非疟疾疾病领域发挥更大作用.
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青蒿琥酯对狼疮鼠Olf-1/EBF相关锌指蛋白基因表达的影响
目的 探讨青蒿琥酯治疗对SLE患者外周血Olf-1/EBF相关锌指蛋白(OAZ)信号通路相关基因表达水平的影响.方法 应用随机数字表将24只12周龄MRL/lpr狼疮鼠分成2组,即狼疮对照组与青蒿琥酯治疗组,另取8只BABL/C作为正常对照组.采集并分离治疗前与治疗后4、8周狼疮鼠PBMCs,从细胞中提取RNA,逆转录为cDNA,用实时荧光定量PCR技术分析不同分组OAZ信号通路相关基因OAZ、Id1-3 mRNA表达水平的变化,ELISA法测定上清液中IL-4、IFN-γ、B细胞活化因子(BAFF)、ANA浓度并分析这些因子分泌水平与OAZ基因表达的相关性.2组比较采用t检验,多个样本均数间的比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 治疗后8周,治疗组OAZ、Id1、Id3mRNA的表达水平(△Ct分别为12.9±0.8、12.0±0.4、10.2±0.8)与狼疮对照组(△Ct分别为9.8±1.0、9.3±1.1、8.1±0.8)和正常对照组(△Ct分别为13.9±1.2、11.4±0.7、4.7±0.8、10.3±1.0)比较差异有统计学意义(F=7.46,P=0.008; F=6.37,P=0.032; F=5.63,P=0.042),且OAZ基因mRNA表达水平△△Ct值与Id1、Id3表达水平△△Ct值呈正相关(r=0.867,0.947;P均＜0.05);其血清IL-4、BAFF浓度,ANA的吸光度值均较治疗前显著降低,IFN-γ较治疗前显著增高(P＜0.05),OAZ基因mRNA表达水平△△Ct值与Th1/Th2比值呈正相关(r=0.976,P＜0.01),与ANA吸光度比值、BAFF浓度比呈负相关(r=-0.955,r=-0.937;P＜0.05).结论 青蒿琥酯治疗SLE可降低患者外周血中OAZ及其下游基因表达,同时减低多种细胞因子及ANA水平,推测OAZ信号通路可能是青蒿琥酯治疗SLE有效机制之一.
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双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠移植瘤的作用及P53表达的影响
目的 探讨双氢青蒿素(DHA)对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠皮下移植瘤的作用及P53表达的影响.方法 将人卵巢癌细胞株HO-8910注入裸鼠的腋下,建立人卵巢癌移植瘤的动物模型,随机分为空白组,低剂量DHA组、中剂量DHA组、高剂量DHA组、顺铂阳性对照组,观察干预后各组移植瘤抑瘤率;免疫组织化学法和蛋白印迹法检测肿瘤细胞内P53蛋白的表达;应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定移植瘤中P53 mRNA的表达.结果 ①DHA对裸鼠移植瘤的生长有一定的抑制作用,并具有浓度依赖性.②病理学观察见细胞的体积较大,胞质疏松,核深染,可有不同程度的核固缩、核碎裂及核溶解,细胞中可见局灶性坏死.③免疫组织化学法结果证实随着DHA剂量的增加突变型P53蛋白表达减弱;蛋白印迹法检测到DHA组野生型P53蛋白表达上调.④RT-PCR法检测到DHA组野生型P53基因表达上调.结论 DHA对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,且与剂量有一定的关系,其机制可能与上调野生型P53的表达导致细胞凋亡有关.
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青蒿琥酯对人胃癌BGC803细胞力学特性增殖迁移影响的研究
目的：利用不同生物学检测方法观察青蒿琥酯（Art）对胃癌细胞在增殖、细胞周期、迁移黏附、细胞形态结构及细胞力学特性等方面的影响。方法采用不同浓度的Art作用于人胃癌细胞株BGC803，用药一定时间后，细胞增殖实验（MTT）检测细胞增殖情况；流式细胞仪检测细胞周期变化情况；利用划痕实验检测细胞迁移能力的变化；使用原子力显微镜观察细胞黏弹性、膜表面形貌等细胞力学。结果对照组（0 mg/L Art）细胞增殖、迁移能力显著高于Art实验组（30 mg/L Art）；而对照组G1期细胞比例则显著低于实验组；实验组细胞黏附力显著高于对照组细胞，而细胞的弹力则显著低于对照组细胞；对细胞表面形态检测发现用药后的实验组细胞膜表面不再光滑，有多处凹陷出现，并且细胞表面粗糙度大幅上升。结论实验结果表明Art是有效的抗胃癌药物，可以通过抑制细胞增殖、阻滞细胞周期、改变细胞力学及细胞表面微观形态结构等方面起到抑癌作用。
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青蒿素对BGC-823癌细胞生长转移及侵袭能力的影响
目的:研究青蒿素对人胃癌细胞株BGC-823的生长、侵袭和趋化运动能力的影响.方法:采用细胞培养,transwell小室法和冲刷实验,观察不同浓度青蒿素对BGC-823细胞株生长侵袭、黏附和趋化运动能力的改变.结果:青蒿素在浓度≥10 μmol/L时可显著抑制BGC-823细胞的生长,并表现出剂量和时间依赖效应(＞2 d,P＜0.01),同时青蒿素可显著降低BGC-823细胞的侵袭、黏附和趋化运动能力(P＜0.01).结论:青蒿素对人胃癌细胞株BGC-823的生长、侵袭和趋化运动能力有显著抑制作用,有可能成为胃癌的临床治疗的一种方法.
关键词： 青蒿素类 胃癌 BGC-823癌细胞 -
抗华支睾吸虫药物研究进展
华支睾吸虫寄生于终宿主的肝胆管内,可引起以肝胆病变为主的华支睾吸虫病.目前用于治疗该病的药物仅有吡喹酮与阿苯达唑.动物实验结果表明,甲苯达唑、蒿甲醚、青蒿琥酯和三苯双脒对感染华支睾吸虫的大鼠均有良好的疗效.小规模临床试验显示,三苯双脒抗虫作用好、不良反应少,有望成为新的抗华支睾吸虫药物.该文就抗华支睾吸虫药物的研究进展进行综述.
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恶性疟原虫对青蒿素类药物产生耐药性的全球现状和基础研究
全球范围内,青蒿素类药物耐药性的产生与蔓延现状严峻.在东南亚大湄公河流域已确定出现对青蒿素类耐药的恶性疟原虫虫株,非洲和南美洲已展开耐药性监控.目前已基本确定与青蒿素类药物耐药性相关的基因片段,并有望应用分子标记对耐药性传播进行大范围监控.本文就近年来对青蒿素类药物产生耐药性的恶性疟原虫的全球现状和基础研究进展作一综述.
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双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞中p16INK4A蛋白表达的调控作用及其机制探讨
目的:探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人前列腺癌PC-3细胞株中p16INK4A表达的影响及其可能的分子机制.方法:用不同浓度(25、50和100 μmol/L)的DHA处理PC-3细胞48 h,同时设置DHA未处理的空白对照组.然后,采用FCM法检测各组细胞的凋亡率和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;亚硫酸氢盐基因组测序法检测p16INK4A基因的甲基化水平;实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和p16INK4A的mRNA及蛋白表达水平;细胞免疫荧光法检测p16INK4A蛋白的定位及表达情况.结果:与空白对照组相比,各浓度DHA处理组的PC-3细胞凋亡率和ROS水平均明显升高(P值均＜ 0.05).DHA处理后,PC-3细胞中p16INK4A基因的甲基化水平明显降低(P＜0.05),DNMT1 mRNA和蛋白的表达水平也明显降低(P值均＜ 0.05),而p16INK4A mRNA和蛋白表达水平明显升高(P值均＜ 0.05).p16INK4A蛋白在细胞核及细胞质中均有表达;与空白对照组相比,DHA处理组的p16INK4A蛋白荧光强度明显提高(P＜0.05).结论:DHA可能通过下调DNMT1表达,使p16INK4A基因的甲基化水平降低,从而恢复p16INK4A蛋白的表达,终诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡,并伴有ROS的产生.
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双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞中UCHL1基因表达的调控机制研究
目的:研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人前列腺癌PC-3细胞株中抑癌基因泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L1,UCHL1)表达的影响,并探讨其可能的调节机制.方法:PC-3细胞株经不同浓度(25、50和100 μmol/L)的DHA处理48 h,并设空白对照组.采用FCM法检测各组细胞凋亡率和细胞周期的变化.采用免疫荧光染色法检测UCHL1和DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)在细胞内的蛋白定位及表达量.蛋白质印迹法检测UCHL1、DNMT1、磷酸化Akt (phospho-Akt,p-Akt)和Akt蛋白的表达;并且以1μmol/L磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)家族抑制剂Wortmanin作为阳性对照,比较分析DHA处理组p-Akt蛋白的表达量.结果:DHA能明显诱导PC-3细胞凋亡,并使细胞停滞在G2/M期,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).DHA处理组中DNMT1蛋白由细胞核转移到细胞质,与空白对照组比较,DNMT1蛋白在细胞核与细胞质中总的表达水平明显下调(P＜0.05);而UCHL1蛋白表达在细胞质内明显上调(P＜0.05).与空白对照组比较,DHA处理组与阳性对照组的UCHL1蛋白表达均上调(P＜0.05),DNMT1表达水平均下调(P＜0.05),p-Akt蛋白表达水平下调(P＜0.05),而Akt蛋白表达量无明显变化(P＞0.05);其中,高浓度DHA处理组的p-Akt蛋白表达下调更为显著,更接近于阳性对照组.结论:DHA能够抑制DNMT1的表达,恢复抑癌基因UCHL1的表达,从而诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡,阻滞细胞周期进程;推测其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的活性有关.
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恶性疟原虫青蒿素和哌喹耐药的流行现状及机制研究进展
恶性疟原虫是全球范围内危害重大的寄生虫类传染病病原体之一.青蒿素是抗疟药的首选药物,目前已在多个国家和地区发现恶性疟原虫对青蒿素及其与哌喹联合用药耐受性.研究已经发现与青蒿素耐药性有关的基因突变,但哌喹耐药性的机制仍有待进一步研究.本文就近年恶性疟原虫对青蒿素及哌喹耐药的流行现状和分子机制研究进展作一综述.
