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HPLC-ELSD法测定三七中三七素的含量
目的 测定五加科植物三七中水溶性成分三七素的含量.方法 选用产自云南的三七药材采用HPLC-EISD法测定三七素含量,并比较使用纯净水、50%甲醇和70%甲醇超声提取三七素的含量.结果 以50%甲醇为溶剂提取三七素含量高.三七素单体能够很好的被分离出来,用HPLC-ELSD法测定出云南三七中三七素的平均含量为0.58%.结论 HPLC-ELSD法专属性强,精密度和稳定性良好,可精确测定三七中三七索的含量.
关键词： 三七 三七素 HPLC-ELSD法 含量测定 -
西洋参根腐病与三七素积累之间关系
目的:西洋参的根腐病与西洋参自身产生和分泌的化感物质有关,研究西洋参根腐病的发生与西洋参根中三七素(β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸,β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionic acid,β-ODAP)积累之间的相关性.方法:采集陕西汉中留坝县佳仕森西洋参种植基地生长2-4年的重茬地与生茬地的正常西洋参和患根腐病西洋参,利用2,4-二硝基氟苯(FDNB)柱前衍生法,然后通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定西洋参主根和侧根中β-ODAP含量的变化.结果:结果表明,患根腐病参样中β-ODAP的积累明显高于正常参样,重茬地患根腐病参样中β-ODAP的积累明显高于生茬地;正常参样中β-ODAP含量的积累为三年生高,二年生次之,四年生低,而在患根腐病参样中,四年生高,二年生次之,三年生低,呈完全相反趋势;且同株参样中,主根和须根中β-ODAP含量的积累存在明显差异,尤其是二年生和三年生的参样.结论:以上结果表明重茬地西洋参根中β-ODAP含量明显高于生茬地西洋参,患根腐病西洋参根中β-ODAP含量明显高于正常西洋参,西洋参根腐病的发生与西洋参根中β-ODAP含量的积累呈正相关.
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三七渗漉提取工艺的研究
目的 优选三七的佳渗漉提取工艺.方法 采用正交试验法,以三七总皂苷和三七总氨基酸为考察指标,对影响三七渗漉提取工艺的因素进行研究.结果 乙醇浓度、乙醇用量、渗漉速度均对三七提取工艺有显著影响.结论 三七的佳渗漉提取工艺为用12倍量50%乙醇,渗漉速度为1～3 mL/(min·kg).
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柱前衍生化高效液相色谱法测定三七及其制剂中三七素含量
目的:建立三七药材及其制剂中三七素含量测定的方法.方法:以硼砂缓冲液(pH 9.18)为提取溶剂,回流提取药材及制剂中的三七素;以氯甲酸芴甲酯(FMOC)作为衍生化试剂,对三七素提取液进行柱前衍生化,采用RP-HPLC,ODS柱分离,并通过紫外检测的方法进行测定.结果:在本实验条件下,三七素的线性范围为1.76～352 mg·L-1,低检测限为60 μg·L-1.衍生化产物稳定,过量的衍生化试剂无干扰.平均加样回收率为95.3%,RSD为1.7%.结论:该方法操作简单,快速,灵敏度高,可用于三七药材及制剂中三七素的分析测定和三七素的药物代谢研究.
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反相离子对色谱法测定三七中三七素含量
建立反相离子对色谱法测定三七中三七素含量.通过超声提取样品中的三七素,并采用四丁基氢氧化铵离子对试剂与反相高效液相色谱法结合直接测定三七素含量.确定超声提取优化条件为物液比为1:20,连续超声提取2次,每次15min,3500r·min-1,离心15 min.三七不同生长年限、产地、部位、以及同属植株中三七素含量均有差异:一年生三七茎叶三七素含量高;红河州样品三七素含量高于文山州;真空冷冻干燥方式优于其他加工方式;三七高于其他同属植株.该检测方法操作简便,分离度好,稳定性好,适用于三七素含量直接测定,为三七中三七素的质量标准控制提供参考.
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HILIC测定三七片中三七素的含量
目的:建立三七片中三七素的HILIC含量测定方法,对不同厂家不同批次的三七片质量进行分析.方法:ThermoHILIC色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为0.1％ H3 PO4-乙腈(40∶ 60)等度洗脱;流速l mL·min-1;柱温25℃;检测波长213 nm.结果:三七素在3.6 ～460 mg·L-1呈良好的线性关系.不同厂家不同批次的三七片中三七素质量分数为1.60～4.31mg·g-1.结论:该方法操作简便、稳定易行、可控性强、重复性好、结果准确,可用于三七药材及其相关制剂中止血活性成分三七素的含量测定,为其质量评价提供了参考.
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三七素对凝血功能的影响及止血机制
目的:研究三七素对凝血功能的影响即其对凝血系统、血小板聚集和纤溶系统的影响,探究三七素的止血机制.方法:SD大鼠60只,体重(200 ±20)g,昆明种小鼠60只,体重(20±2)g,雌雄各半,分空白对照组、酚磺乙胺注射液组、三七素DE Ⅰ组(40 mg· kg-1)、三七素DEⅡ组(20 mg·kg-1)、三七素DEⅢ组(10 mg·kg-1),三七素DE Ⅳ组(5 mg·kg-1),测定凝血时间和测定三七素对凝血系统、血小板聚集、纤溶系统的影响.结果:与空白对照组比较,三七素各组能显著缩短小鼠凝血时间(P＜0.01),三七素能显著影响大鼠的凝血系统的凝血因子(P＜0.05)和血小板聚集(P＜0.01),对纤溶系统影响显著(P＜0.01).结论:三七素的止血机制可能与凝血系统、血小板聚集和纤溶系统均有关.
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趁鲜清洗和干制后清洗对三七药材质量的影响
目的 研究趁鲜清洗和干制后清洗两类不同清洗方式对三七药材外观品质和内在成分的影响,为规范三七产地加工方法提供依据.方法 比较传统不清洗直接晒干、传统打磨加工、趁鲜清洗后晒干、干制后清洗等方法处理,对三七主根的干燥时间、折干率、密度、药材外观性状和内在成分的影响.结果 传统不清洗直接晒干,三七药材表皮会黏附大量红土,外观性状和卫生指标差;传统打磨加工方法虽可清除部分三七表皮泥土,但打磨对药材表皮磨损较大,并造成折干率和三七素含量降低,下降率分别为10.0％和18.1％;将三七干制后清洗,则会导致药材表皮磨损脱落,表皮颜色发白无光泽,并导致总灰分、醇提物、人参皂苷Re、三七素和可溶性糖等内在成分的大幅损失,损失率分别高达9.9％ ～17.7％、8.3％ ～15.9％、63.9％～70.8％、12.5％ ～36.1％和27.3％ ～ 37.4％,且干制后清洗时间越长,药材内在成分损失越大;而将三七趁鲜清洗后再干燥,既利于三七表皮脱水,缩短干燥时间,又提高了药材卫生和外观性状指标,并大幅降低药材内在成分的损失.结论 建议在三七药材产地加工上,应大力推广趁鲜清洗后再干燥加工的方式,以科学去除药材外源污染物,保证三七药材外观和内在质量,并保证临床用药的安全、有效.
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三七素体外经皮渗透特性研究
目的 研究三七素的理化性质及渗透促进剂对三七素体外透皮性能的影响.方法 采用摇瓶法测定三七素的表观溶解度及油水分配系数;采用Franz扩散池法,以小鼠皮和猪皮为模型皮肤,采用HPLC法测定三七素,评价佳促渗剂.结果 三七素水溶性强,IgP值低,三七素在皮肤上体外释放符合Higuchi方程;在小鼠皮上的渗透效果比猪皮好;通过对促渗剂种类和用量的筛选,发现5％N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)促渗效果好.结论 三七素具有一定的经皮吸收能力,其经皮吸收与药物在皮肤中的扩散速率有关,5％ NMP显著增加三七素经皮渗透速率.
关键词： 三七素 透皮吸收 促渗剂 N-甲基-2-吡咯烷酮 扩散速率 -
HPLC法测定三七及其制剂中三七素
三七为五加科植物三七Panax notoginseng (Burk.)F.H.Chen的干燥根,其中所含三七素(dencichine,β草酰基-L-α,β-二氨基丙酸)具有止血作用[1,2],因此三七在祖国传统医药中广泛用于跌打损伤的治疗.研究进一步证明三七素具有止血、增加血小板数的药理活性[3].
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三七中三七素的提取分离及含量测定
目的:研究三七中水溶性成分三七素的提取分离方法及含量测定.方法:采用超声提取三七素的粗品,然后经过醇沉、凝胶柱过滤和离子交换树脂的纯化,得到三七素单体,用HPLC法测定其含量.结果:三七素单体能够很好地被分离出来,含量为92.41%.结论:运用多种柱层析结合的方法能够成功地分离到纯度较高的三七素单体.
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三七在肾脏疾病中的应用及其作用机制
三七为五加科人参属植物Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen的根茎,又称田七、人参三七、田三七等.其味甘、微苦、性温.有散瘀止血、消肿止痛、补血活血、滋补强壮等功效,主要含三七皂甙、人参皂甙、三七素等成分[1～3].三七的药理作用涉及全身各系统,在临床上也广泛应用于消化系统、心脑血管系统和泌尿系统等.在此仅就其对肾脏疾病的作用及其机制作一综述.
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三七功用与化学成分
三七味甘、微涩、微苦,性温,归肝、胃、大肠经,别称田七,又名山漆、金不换、血参、田漆等.始用跌打损伤、疮疡肿毒、蛊毒等,明、清范围扩大,用于内科、妇科出血性、血瘀性病证.《本草纲目》谓“止血、散血、定痛……,亦主吐血衄血”“能治一切血病”.《玉楸药解》载“和营止血,通脉行瘀,行瘀血而敛新血”.《本草纲目拾遗》“三七补血第一”.《跌损妙方》含三七方40首,多配伍活血祛瘀、止血、力气、止痛之品;陈士铎认为“三七根,入五脏之经,止诸血,外血可遏,内血可禁,崩漏可禁”,叶天士三七汁治吐血证、“络伤血溢”,徐灵胎善用三七伍阿胶养阴止血;张锡纯首选三七止血之效,治内、外、妇科等疾病;近代张山雷冲服三七(约0.96～1.94g)贯穿于血证辨论始终.三七含皂苷、黄酮、挥发油、氨基酸、多糖、淀粉、蛋白质、三七素及多种微量元素;三七总皂苷能抗血小板聚集,降低全血黏度,抑制血小板激活、聚集,明显降低心肌缺血,改善心肌微循环,清除氧自由基、抑制脂质过氧化和稳定神经细胞;三七素、槲皮苷等均能促进凝血过程的发生,缩短出血后凝血时间,促进凝血酶的生成;多用于冠心病、心绞痛及脑血管疾病防治.也有报告三七可导致出血.促凝止血、抗凝活血作用临床与实验报告不尽一致;且与用量大小有关,低剂量止血作用更显著,中、高剂量活血即抗血栓形成作用更强,鲜少对量效关系深入探究.未来亟待明确活血、止血双向调节药效用量界点,有待进一步实验和临床研究.
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三七素对谷氨酸损伤的PC12细胞的影响
目的:研究三七素对谷氨酸损伤的PC12细胞的影响.方法:用谷氨酸复制体外培养的PCI2细胞损伤模型,采用MTT法、Hoechst33342/PI双重染色法分别研究高、低剂量三七素对谷氨酸所致的PC12细胞损伤的影响.结果:谷氨酸刺激后,PC12细胞存活率较对照组显著降低(P＜0.05)、凋亡显著增强(P＜0.05).给予高剂量三七素可加重谷氨酸引起的PC12增殖力降低、凋亡增强.但低剂量三七素干预后,细胞存活率较模型组显著升高(P＜0.05),凋亡较模型组明显降低(P＜0.05).结论:高剂量三七素可加重谷氨酸对PC12细胞的损伤,但低剂量三七素可显著减轻谷氨酸对PC12细胞的损伤,但具体机制尚有待于进一步研究.
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红参中水溶性成分三七素的生理活性研究
目的:从红参粉种分离三七素,并研究其新的生理活性.红参粉末中发现含有三七素(β-N-oxalo-L-α,β diaminopropionic acid).方法:应用离子交换葡聚糖凝胶色谱柱(CM-Sephadex C-25)和快速蛋白质液相色谱柱(FPLC MonoQ)分离.结果:三七素对豚鼠主动脉收缩作用的影响,在没有组织胺或肾上腺素存在的情况下,既无收缩作用也无松驰作用.它能增益组织胺诱导豚鼠主动脉的收缩,但对于肾上腺素却无此种作用.此外,三七素通过肾上腺素、ADP凝血酶和胶原均无诱导血小板聚集的作用.三七素对于血管紧张肽转移酶也无阻抑作用.结论:三七素止血作用可能是通过促进组织胺使血管收缩引起的.
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三七素的止血活性及其神经毒作用实验研究
目的:研究三七素止血活性的药理作用及其神经毒作用,为新药开发提供依据.方法:小鼠腹腔注射三种不同浓度的三七素,30 min后观察其生理活动的异常情况;采用玻片法测定三种不同浓度的三七素对小鼠凝血时间的影响:大鼠腹腔注射三种不同剂量的三七素,30 min后腹主动脉取血,应用MPG-3E型多能血液凝聚仪,测定三七素对血小板的凝聚作用及凝血因子(TT、PT、APTT)的影响.结果:三七素能明显缩短凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间,提高血小板数和黏附率:但剂量达到一定量时,也会出现严重的运动失调.结论:三七素具有止血作用,虽有神经毒作用,但在安全剂量下不会出现.
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HPLC法测定三七片中三七素的含量
目的:采用高效液相色谱法测定三七片中三七素的含量.方法:色谱柱为Hypersil ODS2(250mm×4.6 mm,5靘),流动相为甲醇:0.5%磷酸=15:85,三乙胺调pH值到4.5,流速为1.0 ml·min-1,柱温30℃,检测波长为213 nm.结果:三七素在2～12靏穖l-1范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为96.7%,RSD为1.8%.结论:HPLC法简便,灵敏度高,稳定可靠,可用于产品的质量控制.
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复方血栓通胶囊中三七药渣的三七素含量考察
目的:考察复方血栓通胶囊三七药渣中三七素的含量.方法:采用HPLC法进行含量测定,色谱柱:岛津Shim-packXR-ODS色谱柱(3.0 mm×75 mm,2.2 μm);流动相条件:A: B=75: 25[A为水,B为3.5 mmol· L-1磷酸二氢钠的甲醇-0.03％四甲基氢氧化胺(20:80,磷酸调pH为3.3)];柱温:40℃;检测波长:220 nm;流速:0.3ml· min-1;进样量:10μl.结果:三七药渣中三七素含量为0.057％ ～0.219％.结论:三七药渣中仍含有三七素,建议三七药材直接入药.
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三七的药理作用研究进展
三七是五加科人参属植物三七(Panax notoginseng F.H.ehen)的块根,主产云南、广西、四川等地,多为栽培,别名参二三七、田七等,味甘、微苦、性温,归肝、胃、心、小肠经,具有止血、散瘀、消肿止痛等功效,主治咯血、衄血、外伤出血、跌打损伤等.其主要成份有三七素(三七氨酸)、三七总皂苷(PNS)、黄酮、挥发油、氨基酸、糖类等有效成份,现代药理研究:其具有止血、保护心肌细胞、保护脑组织、降血脂、抗血栓、增强免疫力、抗炎、抗纤维化、抗肿瘤、消除氧自南基、抗氧化等作用.本文就三七在血液系统、心脑血管系统、神经系统、免疫系统以及抗炎、抗肿瘤、抗衰老等方面的药理作用综述如下:1 对血液系统的作用
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三七有效成分的分离纯化研究
目的:探讨从三七提取液中分离三七总皂苷和三七素的方法.方法:采用D101大孔树脂分离纯化三七总皂苷,采用732强酸型阳离子交换树脂和CM Sephadex C-25分离三七素.结果:可从三七提取液中分离得到三七总皂苷和三七素粗品.结论:本分离方法简单,可用于工业生产.
