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茶氨酸对大鼠脑缺血再灌注后单胺类神经递质及相关基因表达的影响
目的 探讨茶氨酸对大鼠脑缺血再灌注后多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的水平及对谷氨酸受体2(GluR2) mRNA、麟脂酶C-γ1( PLC-γ1) mRNA表达的影响,讨论其所致神经损伤的保护作用机制.方法 将56只6周龄、体重为100～ 120 g的SPF级雄性SD大鼠按体重分层,以随机势字表法分为5组,分别为模型组(12只)、假手术组(8只),以及茶氨酸低( 10 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高剂量组(90 mg/kg)(每组12只).茶氨酸剂量组大鼠灌胃每天给予相应剂量的茶氨酸,模型组和假手术组每天灌胃给予等量超纯水.连续灌胃15 d后,制备大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebraartery occlusion,MCAO)模型,于再灌注后第3、24小时进行神经学评分,再灌注后第24小时处死动物,测定脑组织中DA、5-HT和茶氨酸含量,同时测定脑组织线粒体中活性氧(ROS)生成和过氧化氢酶( CAT)活性,并采用RT-PCR法检测脑组织中GluR2 mRNA以及PLC-γ1 mRNA的表达水平.结果 模型组、茶氨酸低、中、高剂量组大鼠脑缺血再灌注后第3小时神经学评分分别为(6.000±0.926)、(4.100±0.738)、(3.444±0.726)、(2.250±0.886)分(F=29.70,P＜0.01)；第24小时神经学评分分别为(6.625±0.916)、(5.000±0.817)、(3.667±0.707)、(2.625±0.916)分(F=34.68,P＜0.01).模型组、茶氨酸低、中、高剂量组及假手术组大鼠脑内DA含量分别为(10.26±1.12)、(12.48±1.09)、(14.55±0.94)、(15.97±0.92)、(11.98±0.63) μg/g(F=43.76,P＜0.01);5-HT含量分别为(1.091±0.160)、(0.818±0.101)、(0.571±0.050)、(0.453±0.111)、(0.863±0.063) μg/g(F =48.68,P＜0.01)；大鼠脑线粒体中ROS生成速率分别为(3.072±0.503)、(1.331±0.268)、(1.295±0.061)、(0.804±0.200)、(2.158±0.218)U· min-1· mg-1(F =80.82,P ＜0.01);CAT活性分别为(4.880±1.121)、(8.405±1.356)、(9.535±2.511)、(15.090±4.054)、(21.260±6.054) U/g(F =28.58,P＜0.01)；大鼠脑内GluR2 mRNA相对表达量分别为0.842±0.020、1.063±0.100、1.170±0.152、1.254±0.131、1.012±0.056(F=9.23,P＜0.01); PLC-γ1mRNA相对表达量分别为0.737±0.090、0.887±0.045、0.963±0.025、0.991±0.049、0.867±0.079(F=10.24,P＜0.01).结论 茶氨酸对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制与调节脑内单胺类神经递质含量以及上调GluR2 mRNA和PLC-γ1 mRNA表达有关.
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启膈散及其拆方抑制原代培养食管癌细胞PLC-γ1介导的信号转导的作用
目的 观察启膈散及其活血和化痰两个拆方对原代培养的食管癌细胞磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)介导的细胞信号转导的影响,以探讨启膈散治疗食管癌的作用机制.方法 从外科切除的原发性食管癌组织采集食管上皮细胞进行原代培养,加入启膈散及其活血和化痰两个拆方的水提物,测定细胞生长活性、PLC-γ1、EGFR、PDGFR、PKCα、磷酸化蛋白PY99和MARCKS(Ser152/156)表达水平、细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]I)及PLC-γ1和PKC活性.结果 启膈散及其拆方对原代培养的食管癌细胞生长、PLC-γ1、EGFR、PDGFR、PKCα、磷酸化蛋白PY99和磷酸化MARCKS(Ser152/156)表达、[Ca2+]i及PLC-γ1和PKC活性有不同程度的抑制作用,以活血组作用强.结论 启膈散及其拆方通过不同程度的抑制食管癌细胞PLC-γ1介导的信号转导而抑制肿瘤细胞的生长.
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阴阳双补方及各拆方对H2O2致PC12细胞氧化损伤的保护作用与PLC-γ1-PKCα-PLD信号转导通路的关系
自由基(free radical,FR)是具有未配对电子的原子、原子团、分子或离子.人体内的氧自由基包括过氧化物离子O2-2、超氧化物离子O-3、H2O2等[1].研究发现,多种神经系统疾病及衰老都和自由基损伤密切相关[2].
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白术甲醇提取物对小肠上皮细胞增殖、迁移及磷脂酶C-γ1表达的影响
目的 观察白术甲醇提取物(以下简称白术提取物)对小肠上皮细胞(IEC-6)增殖、迁移及磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)表达的影响,旨在探讨益气健脾中药白术促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制.方法 细胞分为空白组,精脒(5lμmol/L)组,白术提取物(50、100、200 mg/L)组;负荷实验设α-二氟甲基鸟氨酸[(α-difluorom ethylornithine,DFMO)多胺合成抑制剂]组,精脒+DFMO组,白术提取物(50、100、200 mg/L) +DFMO组.细胞贴壁培养24 h,给予受试药培养相应时间后,采用实时细胞分析仪(Realtime Cell Analyzer,RTCA)观察白术提取物对IEC-6细胞增殖的影响;划痕法检测白术提取物对IEC-6细胞迁移数目的影响;采用荧光定量PCR法和Western blot法检测PLC-γ1 mRNA及其蛋白表达.结果 与空白组比较,白术提取物对细胞增殖无明显影响(P＞0.05),精脒和白术提取物(100、200 mg/L)对细胞迁移均有促进作用(P＜0.01),并能增加细胞迁移过程PLC-γ1 mRNA和蛋白表达(P＜0.01).与DFMO 组比较,精脒、白术提取物(100、200 mg/L)能逆转DFMO所致的细胞迁移抑制及PLC-γ1 mRNA及其蛋白表达的抑制作用(均P＜0.01).结论 白术提取物可通过促进多胺介导的上皮细胞迁移发挥修复胃肠黏膜损伤作用,细胞增殖不是其主要药效作用.
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启膈散及其拆方对人食管癌Eca109细胞裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用
目的:探讨启膈散及其拆方抑制肿瘤血管生成的作用和机制.方法:取对数生长期的人食管癌EC9706细胞.接种于裸鼠右胁皮下制备荷瘤裸鼠模型.自接种后第2天开始,每天用40倍成人剂量的启膈散全方及其活血和化痰两个拆方水煎液灌胃给药,连续60 d.用免疫组化方法检测移植瘤中Fac-Ⅷ因子相关抗原标记的微血管密度(MVO)和VEGF的表达,Western blot方法检测肿瘤组织EGFR、PDGFR、VEGF及PLC-γ1蛋白表达.结果:各用药组肿瘤MVD与模型组相比明显降低(36.43±4.16,40.29±2.87 42.43±3.04 vessels/ram2 vs 48.57±7.45 vessels/mm2.P<0.05或0.01).各组肿瘤MVD值与VEGF表达量呈正相关(r=0.712.P=0.0005).各用药组肿瘤EGFR、PDGFR、VEGF、PLC-γ1蛋白表达与模型组相比明显降低.启膈散及其拆方抑制裸鼠移植瘤MVD及EGFR、PDGFR、VEGF、PLC-γ1蛋白表达的作用以全方组好,活血组次之.结论:启膈散及其拆方能够抑制肿瘤血管生成.其作用机制与抑制EGFR、PDGFR、VEGF及LPLC=γ1蛋白表达相关.
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启膈散及其拆方对食管癌细胞Eca109 PLC-γ1介导的细胞信号转导的影响
目的:观察启膈散及其活血和化痰两个拆方对人食管癌细胞株Eca109细胞磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)介导的细胞信号转导的影响,以研究启膈散治疗食管癌的作用机制.方法:用启膈散(W)及其活血(P)和化痰(R)两个拆方的水提物处理体外培养的人食管癌细胞株Eca109细胞,测定细胞PLC-γ1、表皮生长因子受体(EGFR)和PKCα蛋白表达水平、蛋白酪氨酸磷酸化(PY99)水平和豆蔻酰化富丙氨酸C激酶底物(MARCKS)(Ser152/156)磷酸化水平、细胞内游离钙离子[Ca2+]i浓度及蛋白激酶C(PKC)活性.结果:1 mg/L的启膈散及其拆方明显抑制Eca109细胞PLCγ1蛋白表达(0.31%,0.42%,0.20%),随着药物浓度增加其抑制作用分别增强,启膈散及其拆方对体外培养的食管癌细胞PLC-γ1、EGFR和PKCα表达、PLC-γ1和EGFR酪氨酸磷酸化、MARCKS磷酸化、[Ca2+]i浓度(169.65±30.54 nmol/L,145.84±24.12 nmol/L,214.94±37.14nmol/L vs 231.86±51.10 nmol/L,P＞0.05,P＜0.05,P＞0.05)及PKC活性均有不同程度的抑制作用,以P组作用强.结论:启膈散及其拆方通过不同程度的抑制食管癌细胞PLC-γ1介导的信号转导而抑制肿瘤细胞的生长.
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启膈散及其拆方抑制原代培养食管癌细胞PDGFR-PLC-γ1酪氨酸的磷酸化
目的:观察启膈散及其活血和化痰2个拆方对原代培养的食管癌细胞血小板衍生生长因子受体(PDGFR)和磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)酪氨酸磷酸化的影响,以探讨启膈散治疗食管癌的作用机制.方法:从外科切除的原发性食管癌组织中采集食管上皮细胞进行原代培养,加入PDGF和启膈散及其活血和化痰2个拆方的水提物,免疫印迹法(Western blotting)测定PDGFR-PLC-γ1蛋白表达和酪氨酸磷酸化水平.结果:用PDGF-BB刺激4 min和启膈散及其拆方处理15 min前后,原代培养食管癌细胞PDGFRβ和PLC-Y1蛋白表达没有变化;但PDGF-BB刺激后PDGFRβ和PLC-γ1蛋白酪氨酸磷酸化明显增强,启膈散及其拆方能不同程度地降低其蛋白磷酸化水平,其中以活血组作用好,全方组次之.结论:食管癌病变与PDGFR-PLC-γ1蛋白酪氨酸磷酸化增强有关,启膈散及其拆方通过抑制PDGFR-PLC-γ1酪氨酸磷酸化从而抑制生长信号转导是其治疗食管癌重要机制.
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犀角地黄汤对胶原诱导性关节炎大鼠模型滑膜组织中磷脂酶C-γ1表达的影响
目的 探讨大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型形成及应用犀角地黄汤治疗过程中大鼠关节滑膜组织中磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)的表达情况,进一步探讨犀角地黄汤治疗类风湿关节炎的作用机制.方法 SD大鼠构建CIA模型,运用实时荧光定量反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测空白对照组、模型组和实验组大鼠在第42天关节滑膜组织中PLC-γ1的表达情况.结果 模型组大鼠关节滑膜组织中PLC-γ1的相对表达量(0.125±0.001)明显高于空白对照组(0.031±0.001)(P＜ 0.01),犀角地黄汤实验组PLC-γ1的相对表达量(0.072±0.001)低于模型组(P＜0.05).结论 犀角地黄汤可降低大鼠关节滑膜组织中PLC-γ1的表达,对类风湿关节炎急性期有一定的治疗作用.
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阻断磷脂酶C-γ1信号通路对卵巢癌细胞凋亡的影响
目的 观察阻断磷脂酶C(PLC)-γ1信号通路对卵巢癌细胞凋亡的影响.方法 用化学阻断剂U73122处理卵巢癌细胞,光镜观察细胞形态学改变,MTT法评价细胞生长抑制水平,流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率.结果 磷脂酶C信号通路被阻断后,卵巢癌细胞出现明显的细胞凋亡形态学改变,细胞存活率显著下降,流式细胞仪检测到凋亡细胞,与浓度及时间呈一定关系.结论 阻断磷脂酶C-γ1能启动卵巢癌细胞的凋亡.
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系统性红斑狼疮患者磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2表达的研究
目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中磷脂酶C-γ1、磷脂酶C -γ2的表达水平及其与SLE疾病活动性的相关性.方法 运用半定量聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测30例SLE患者与25名健康对照人的磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达水平,并采用Pearson相关性检验分析它们与补体C3、C4、抗双链DNA (dsDNA)抗体及SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分的相关性.结果 ①SLE组与健康对照组相比,磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达显著增高(分别为P＜0.01)；②磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达水平之间呈正相关(r=0.726,P＜0.01)；③SLE组磷脂酶C-γ1 mRNA表达水平与补体C3、C4、抗dsDNA抗体均无相关性,而与SLEDAI积分呈正相关(r=0.002,P＜0.05).磷脂酶C-γ2与补体C3、C4呈显著负相关(r=-0.914,P＜0.01；r=-0.829,P＜0.05),与抗dsDNA抗体正相关(r=0.171,P＜0.05),与SLEDAI积分相关性不明显.结论 本研究发现SLE患者磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2的表达水平在SLE患者中增高,磷脂酶C-γ1与SLEDAI积分呈正相关,磷脂酶C-γ2与补体C3、C4呈负相关,与抗dsDNA抗体正相关,可能对SLE患者的诊断和病情评估有较大价值.
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牵张应变作用下人牙周膜细胞内磷脂酶C-γ1水平的变化
目的:观察机械牵张应变作用下,人牙周膜细胞(HPDLCs)内磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)水平的变化.方法:通过原代和传代培养,获得性状稳定的人牙周膜细胞,使用动态机械应变细胞加载仪对细胞进行1%、10%和20%动态牵张应变加载.加载不同时间,通过流式细胞仪对细胞进行PLC-γ1水平检测.采用SPSS13.0软件包对数据进行方差分析.结果:在加载牵张应变初期,细胞内的PLC-γ1水平维持较低水平;随着牵张应变加载时间的延长,牙周膜细胞内的PLC-γ1水平逐渐升高.50min时,PLC-γ1平达到各应变组的高值(P<0.01).随着加载时间的继续延长,60min时,各应变组的PLC-γ1水平都显著下降(P<0.01).结论:牵张应变可引起细胞内PLC-γ1水平的变化.
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Wortmannin与U73122对缺失磷脂酶C-γ1细胞迁移的影响
0 引言 磷脂酶C-γ1(phospholipase C-γ1,PLC-γ1)与三磷酸肌醇激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI-3K)是生长因子介导的信号传递过程中的两个重要信号分子。尽管敲除plcgl基因后的小鼠不能正常发育，并于胚胎第9天死亡［1］；缺失PLC-γ1小鼠胚胎成纤维细胞(PLC-γ1-/-)在体外却能正常生长，且在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)刺激下其受体激活与内吞、DNA合成、迁移能力等与正常细胞(PLC-γ1+/+)相似［2］。但PLC-γ1-/-并不出现其近亲PLC-γ2的代偿表达，PLC-γ1-/-细胞株迁移过程中PLC-γ1的信号传递功能是否由其他PLC同工酶或PI-3K通路代偿，目前还不清楚。为探讨PLC-γ1通路在信号传递过程中的代偿机制，本研究检测了PLC、PI-3K特异性抑制剂U73122、Wortmannin对PLC-γ1-/-细胞的EGF介导细胞迁移的影响。
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牵张应变作用下人牙周膜细胞内磷脂酶C-γ1水平变化的实验研究
目的 观察人牙周膜细胞(HPDLCs)内磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)水平在机械牵张应变作用下的变化.方法 通过原代和传代培养,获得性状稳定的人牙周膜细胞,使用动态机械应变细胞加载仪对细胞进行1％、10％和20％动态牵张应变加载.并于加载后10 min、20 min、30 min、40 min、50 min和60 min,通过流式细胞仪和激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内PLC-γ1水平的变化.应用SPSS13.0软件包对数据进行统计分析.结果 流式细胞仪检测发现:加载初期,细胞内的PLC-γ1水平维持在较低水平,随着牵张应变加载时间的延长,牙周膜细胞内PLC-Y 1水平逐渐升高.50 min时PLC-Y 1水平达到了各个应变组的高值(P＜0.01),60 min时各应变组的PLC-γ1水平都有所下降(P.＜0.01).激光扫描共聚焦显微镜检测发现:各组都有PLC-γ1的表达,其中50 min加载组表达相对较强.结论 机械牵张应变可以引起人牙周膜细胞内PLC-γ1表达量发生改变.
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子痫前期血清通过PLCγ1促进脐血管平滑肌细胞PKC-α活性及胶原的表达
目的:探讨子痫前期(PE)血清激活血管平滑肌细胞蛋白激酶C-仅(PKC-α)及前胶原Ⅰ表达是否由磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)信息分子介导.方法:原代培养脐静脉内皮细胞(HUVEC)与脐动脉平滑肌细胞(HUASMC),体外建立HUVEC与HUASMC共培养体系,用PE血清处理共培养HUASMC细胞.MTT法检测HUASMC细胞活力;Annexin V-FITC-流式细胞仪检测HUASMC凋亡;Western blot法检测PLC-γ1(磷酸化)、PKC-α(包膜/胞浆比值)活性以及前胶原Ⅰ表达.siRNA沉默PLC-γ1表达后,观察PE血清对共培养HUVEC细胞PKC-α活性及前胶原Ⅰ表达的影响.结果:PE血清可促进共培养HUA-SMC细胞PLC-γ1磷酸化、PKC-α膜转位及前胶原Ⅰ的表达(P＜0.05);siRNA沉默HUA-SMC细胞PLC-γ1蛋白表达可逆转PE血清引起的PKC-α膜转位及前胶原Ⅰ的表达(P＜0.05).结论:PE血清通过PLC-γ1-PKC-α信息途径促进HUASMC前胶原Ⅰ的表达,可能在胎盘血管病理过程中起着重要的作用.
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磷脂酶C-γ1在小鼠胚胎肾组织中的表达及意义
目的:研究磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)在小鼠胚胎肾组织中的表达,探讨其临床意义.方法:制备小鼠胚胎肾组织标本,进行石蜡包埋并切片,采用免疫细胞化学方法检测PLC-γ1的表达情况,并进一步利用Western blot技术对磷脂酶C-γ1的表达进行初步定量.结果:免疫细胞化学结果表明,PLC-γ1在小鼠胚胎肾组织中的集合管上皮细胞游离面阳性反应较强,而周围的肾小球、肾小囊、肾小管等为阴性反应.在胚胎第18、16天的肾切片中,集合管反应仍呈现弱阳性,在胚胎第14天的肾切片中,集合管上皮呈现较强阳性反应.Western blot结果表明,PLC-γ1在胚胎第14、16、18天的表达量逐渐降低.结论:PLC-γ1相关的信号通路对于小鼠胚胎肾的发育,尤其是早、中期发育,具有重要的生物学作用.
关键词： 磷脂酶C-γ1 胚胎肾组织 免疫细胞化学 Western blot技术 -
周期性应力下磷脂酶C-γ1及其抑制剂对大鼠髓核细胞增殖能力的影响
目的 观察周期性应力下磷脂酶C-γ1(PLCγ1)及其抑制剂对大鼠髓核细胞增殖的影响.方法 将细胞玻片随机分成4组:对照组、加压0.5h组、加压1h组、加压2h组.Western blot法检测各组PLCγ1、磷酸化PLCγ1表达.另取细胞玻片,随机分为3组:对照组、加压6h组、U73122+加压6h组.使用荧光实时定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各组细胞外基质的表达.结果 PLCγ1磷酸化水平在加压0.5h组(0.109 ±0.010)、加压1h组(0.138±0.001)、加压2h组(0.201 ±0.014)较对照组(0.086 ±0.005)增高.加入U73122后,细胞外基质的基因表达,以对照组低,加压6h组高,U73122+加压6h组居中,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 周期性压力能促进髓核细胞的增殖,PLCγ1在压力传导中起信号传递作用.
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阻断磷脂酶C-γ1信号通路对大肠癌细胞株LoVo细胞增殖与凋亡的影响
背景与目的:磷脂酶C-γ1(phospholipase C gamma 1,PLC-γ1)是跨膜信号转导中关键和重要的一个信号中介,是细胞增殖与细胞凋亡调控的一个重要分子,近研究发现它在大肠癌等许多肿瘤组织中呈过表达状态,与肿瘤的发生、发展有密切关系.本研究主要探讨阻断PLC-γ1信号通路后对大肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响,及其上述影响的信号机制.方法:以人大肠癌LoVo细胞作为研究模型,利用PLC-γ1特异的化学阻断剂U73122处理以阻断LoVo细胞中PLC-γ1信号通路,通过绘制细胞生长曲线、PI单染的流式细胞仪检测细胞周期而评估对其细胞增殖的影响,通过细胞形态观察及DNA片段琼脂糖凝胶电泳评估是否启动细胞凋亡,同时检测阻断PLC-γ1信号通路后HSP70、Caspase-3表达水平的变化来探讨可能的信号机制.结果:阻断PLC-γ1信号通路明显减缓大肠癌LoVo细胞的生长,其细胞增殖抑制率随药物作用时间和浓度的增加逐渐增高,10 μmol/L U73122作用24、48 h后其抑制效果可分别达到35%和45%,使LoVo细胞G1期细胞比例增加,而S期细胞比例降低,延缓细胞从G1期向S期的过渡,即抑制细胞周期的进行,阻断PLC-γ1信号通路后LoVo细胞未能出现凋亡特征性的形态学改变,DNA琼脂糖凝胶电泳未能检测到凋亡特征的梯状带的出现,不能引起Caspase-3的激活,同时PLC-γ1信号通路的阻断可上调HSP70的表达水平,HSP70的分子伴侣作用可能是其抑制大肠癌细胞周期进行的机制.结论:阻断磷脂酶C-γ1信号通路能够抑制大肠癌LoVo细胞的过度增殖、抑制其细胞周期的进行,其机制可能是通过上调热休克蛋白70的表达水平而实现,但不能启动LoVo细胞凋亡,磷脂酶C-γ1不是调控LoVo细胞凋亡的关键信号分子.
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表皮生长因子介导成胶质瘤细胞NF-κB核转位的机制初探
目的 研究表皮生长因子(EGF)调节成胶质细胞瘤细胞内核因子-κB(NF-κB)核转位的可能机制. 方法 电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测激活和抑制磷脂酶C-γ1(PLCγ1)后,成胶质细胞瘤U-87MG中NF-κB的核转位水平,随后采用免疫印迹法(Western Blot)检测蛋白激酶C-α(PKCα)的表达水平,继而检测激活和抑制PKCα后NF-κB的核转位水平. 结果 NF-κB核转位水平在EGF刺激60 min时达大值,而经PLCγ1特异性抑制剂U-73122提前处理后,刺激后同期却无明显改变;在PKC特异性激动剂佛波酯(PMA)刺激后60 minNF-κB核转位水平达高峰,而提前使用PKCα特异性抑制剂Ro 31-8220处理细胞可有效逆转此改变. 结论 EGF可能通过PLCγ1-PKCα信号通路介导NF-κB向核内转位,从而调控相关侵袭和转移基因的转录.
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磷脂酶C-γ1在胚胎及新生小鼠脑组织的表达及意义
目的研究磷脂酶C-γ1在胚胎及新生小鼠脑组织的表达.方法制备胚胎及新生小鼠脑组织标本,进行石蜡包埋并切片,采用免疫细胞化学方法检测磷脂酶C-γ1的表达情况,并进一步利用Western blot技术对磷脂酶C-γ1的表达进行初步定量.结果免疫组织化学的结果表明,在胚胎脑组织中磷脂酶C-γ1的表达比较广泛,各种细胞均有表达,没有细胞特异性;而在出生后5 d的脑组织,磷脂酶C-γ1特异地表达于大脑皮质层及神经核团内的神经元,周围的神经胶质细胞不表达.Western blot的结果表明,在胚胎各个组织(脑、四肢、心、肾、胃、胰等)中脑的表达高,脑内的表达又随胚胎发育过程胚胎第11天(E11)、E14、E18、出生后5 d逐渐降低.结论磷脂酶C-γ1相关信号通路对于小鼠胚胎脑的发育具有重要生物学作用,可能对于脑神经元发育、生长、分化等具有重要作用.
关键词： 磷脂酶C-γ1 胚胎 脑 免疫细胞化学 Western blot -
磷脂酶C-γ1信号转导分子和肿瘤
磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)是一个重要的信号转导分子,体内、体外的试验都发现PLC-γ1的过度表达能促进细胞转化、增加肿瘤细胞的侵袭性,而阻断PLC-γ1的表达可逆转恶性细胞的表型及减少其侵袭性,揭示PLC-γ1与肿瘤发生、发展密切相关,也预示着PLC-γ1将是肿瘤治疗的一个有前途的靶点.
