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妊娠期间暴露后狂犬病疫苗接种:对202例妇女及其婴儿的影响
狂犬病是一种通过哺乳动物咬伤进行传播的致死性传染病,常见于东南亚地区被犬科狂犬病感染的狗或猫的咬伤.
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彩色多普勒超声可持续动态观察的犬急性下肢深静脉血栓动物模型的构建
目的 建立彩色多普勒超声可持续动态观察的犬急性下肢深静脉血栓动物模型.方法 选择8条实验犬,麻醉后在右下肢股静脉内置入导管,缓慢匀速注入500 U凝血酶,彩色多普勒超声观察血栓形成情况,并与左下肢对照.于注入凝血酶前和注入凝血酶后30 min测量凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶原时间(APTT),之后行病理检查.结果 8条犬均置管成功,彩色多普勒超声可持续动态观察到右下肢急性深静脉血栓由开始形成到充满整个管腔的全过程,并经病理证实.而左下肢对照侧血流通畅.注入凝血酶前,8条实验犬的PT、TT、APTT分别为(11.22±0.48)s、(13.54±0.47)s、(26.5±3.7)s,注入凝血酶后30 min分别为(11.53±0.52)s、(14.23±0.55)s、(27.8±4.2)s,因快速促凝,同一犬试验前后各项凝血相关指标无明显差异(t=1.633、3.747、1.982,P均>0.05).结论 通过深静脉置管缓慢注入凝血酶可快速构建犬急性下肢深静脉血栓动物模型,并可运用彩色多普勒超声动态观察整个血栓形成过程.
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超声引导下犬下肢深静脉血栓动物模型的构建
目的 寻找一种更简便、准确的犬下肢深静脉血栓模型构建方法.方法 选择24条雄性比格犬,以犬右下肢股静脉为实验侧,左下肢股静脉为对照侧.二维超声测量静脉管腔直径,彩色多普勒超声定位.麻醉后,超声引导下穿刺股静脉,经动脉鞘送相应粗细的毛刷入犬右下肢股静脉,旋转并拉扯毛刷3.5～4.5 cm破坏静脉内膜.术后12 h,彩色多普勒超声观察血栓形成情况.结果 超声探头对实验侧股静脉加压,管腔不能被压瘪;彩色多普勒超声示静脉管腔内无回心血流信号;脉冲多普勒超声亦探测不到血流速度,血栓形成.对照侧股静脉血流通畅,探头加压后静脉管腔被压瘪,静脉内无血栓形成.24条犬中22条(91.7%)右下肢股静脉血栓形成,血栓形成长度为(4.0±0.3)cm.结论 超声引导下通过毛刷破坏静脉内膜可成功构建犬下肢深静脉血栓动物模型,操作简便、准确、创伤小、血栓形成率较高.
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不同直径自扩式金属裸支架置入后对犬气管的影响
目的 观察不同直径的自扩式金属裸支架置入后,对比格犬正常气管产生的影响,为临床医生更合理地选择自扩式金属裸支架提供借鉴.方法 选择健康比格犬8只,抽签法随机分为4组,每组2只.分别放置16、18、20或22 mm自扩式网状镍钛合金裸支架,观察3个月.比较不同直径自扩式金属裸支架对正常气管产生的影响,并比较各组气管上皮化及肉芽组织增生的情况.结果 实验犬中位气管直径为15.5 mm.16 mm支架组(支架-气管直径比例为103%)上皮化良好,气管结构无明显破坏;18 mm支架组(支架-气管直径比例为116%)少量肉芽组织增生,软骨及外膜结构正常;20 mm支架组(支架-气管直径比例为129%)肉芽组织增生严重,软骨受损,外膜正常;22 mm支架组(支架-气管直径比例为142%)未见明显肉芽组织增生,软骨结构正常,但气管外膜断裂.结论 在一定范围内,随着支架直径的增大,气管肉芽组织增生持续加重;但如果支架直径继续增大,支架内肉芽组织增生反而减轻,但过大的支架张力会造成气管结构破坏.
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去细胞猪主动脉瓣移植于犬腹主动脉内构建组织工程瓣
目的探讨在犬腹主动脉内构建组织工程心脏瓣膜的实验方法.方法将预种犬血管间质细胞和内皮细胞的去细胞猪主动脉瓣叶(猪瓣),移植于6条犬的腹主动脉内,于术后4,6,8和10周对移植瓣叶进行形态、组织结构及免疫组化染色观察.结果 (1) 移植术后4周时瓣叶周边有多层细胞长入,新细胞外基质形成,原支架组织部分吸收.(2) 10周末猪瓣组织完全吸收,为宿主细胞及新合成的细胞外基质取代.基质中间质细胞主要为成纤维细胞和肌纤维母细胞.细胞外基质成分主要为Ⅰ、Ⅲ型胶原和少量弹力纤维,并含有中性和酸性黏多糖.(3) 内皮细胞覆盖于瓣叶表面.结论 (1) 移植于犬腹主动脉内的去细胞猪瓣于移植术后10周末基本构成组织工程瓣叶;(2) 腹主动脉内异位移植是一种可供选择的实验研究方法.
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快速右心室起搏对犬心肌动作电位的影响
目的 犬快速右心室起搏3周构建心衰模型,探讨心衰模型中单个心肌细胞动作电位变化.方法 采用对照研究的方法将10条杂种犬分成两组即起搏犬组和对照组.比较两组活体单个心肌细胞动作电位.结果 起搏犬起搏3周均出现心衰且心肌细胞动作电位复极90%时程及复极50%时程均较对照组明显延长.结论 在快速右心室起搏成功构建心衰模型中心肌细胞发生明显电重构.
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犬线粒体DNA高变区Ⅰ(HVRⅠ)的遗传多态性研究
目的为犬线粒体DNA应用于系统进化和法医学物证鉴定提供基础.方法对106只无亲缘关系的犬线粒体DNA高变区Ⅰ(1041-1318)进行测序.结果测序得到了23个单倍型,它们的差异由24个突变点产生,其中包括碱基转换、颠换及插入.大多数突变点是碱基替代,转换为79.2%,颠换为16.7%,碱基插入为4.1%.结论犬线粒体DNA高变区Ⅰ序列,遗传差异度(相当于杂合度)为0.89,两个无关个体的偶合概率为0.1213,具有高度序列多态性.
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速眠新复合麻醉对外科手术实验用犬的效果观察
目的观察速眠新与戊巴比妥钠复合麻醉对外科手术实验用杂种犬的麻醉效果.方法成年健康杂种犬60只,雌雄兼用,肌内注射麻醉.结果速眠新与戊巴比妥钠复合麻醉用药量比推荐剂量少,平均麻醉诱导期6 mjn,麻醉维持时间270 min.速眠新有较好的镇静、镇痛和肌肉松弛作用,复合麻醉使速眠新效果更佳,诱导期短,维持时间长,复苏较快.结论速眠新与戊巴比妥钠复合麻醉适合动物实验时间较长的手术,是一种较理想的实验动物麻醉方法.
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新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之三--血样存放时间对生化值的影响
目的探讨不同存放时间对所测定血液样本生化值的影响.方法采用全自动生化仪对存放不同时间动物血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHO)等生化值进行测定.结果相同温度存放不同时间,血清生化值出现不同程度的变化.其中,存放时间对TP、ALB及CHO影响为明显.结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对制备后的血液样本,在一定温度下的存放时间应进行规范与统一.
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新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之四--血样存放温度对生化值的影响
目的探讨不同存放温度对所测定血液样本生化值的影响.方法采用全自动生化仪对存放于不同温度条件下动物血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHO)等生化值进行测定.结果血样不同温度存放相同时间,血清生化值出现不同程度变化.其中,存放温度对TP、ALB、ALT、CHO及TBil影响为明显.结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对制备的血液样本存放温度应进行规范与统一.
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新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之二--样品制备方法对血液生化值的影响
目的探讨血液不同制备方法对其血液生化值的影响.方法采用全自动生化仪对不同制备方法血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBiD、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHO)等生化值进行测定.结果相同动物血清血浆、不同离心温度及禁食后不同时间点采血均影响血液生化值.结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对测定样品的制备方法应进行规范与统一.
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新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之七--Beagle犬血液生化参考值的建立
目的建立新药慢性毒性试验Beagle犬血液生化参考值.方法采用全自动生化测定仪对不同年龄、不同性别Beagle犬的血液生化值进行了测定.结果取得不同年龄、性别Beagle犬血液生化值平均值及参考值范围.部分生化指标受性别因素影响.ALP、CK有随年龄增长而降低的趋势.结论在新药慢性毒性试验中,参比参考值时应考虑到Beagle犬性别与年龄的因素.
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机械刮宫法建立比格犬宫腔粘连模型
目的:通过机械刮宫法建立稳定的比格犬宫腔粘连的动物模型,以利于进一步研究探索.方法:6只性成熟的健康雌性比格犬的子宫按处理方法不同分为4组.所有经过搔刮处理后2个月的犬右侧子宫角组织作为处理组,搔刮前该部位正常内膜组织、同侧未处理的子宫组织及左侧未处理的相应部位的子宫组织为对照组,分别记为搔刮前组、同侧未处理组、对侧组.通过机械刮宫法损伤右侧子宫角内膜,分别于造模前后收集子宫内膜标本,行苏木精-伊红染色法、Masson染色法及免疫组织化学染色法并进行分析.结果:处理组外观异常的发生率高于对侧组(P＜0.05);处理组的内膜厚度薄于搔刮前组和对侧组(P＜0.05);处理组的内膜腺体数目明显比搔刮前组、同侧未处理组和对侧组少(P＜0.05);处理组的子宫内膜纤维化面积比例显著高于搔刮前组、同侧未处理组和对侧组(P＜0.001);胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、转化生长因子β1(TGF-β1)在处理组内膜上的表达水平高于搔刮前组、同侧未处理组和对侧组(P＜0.05),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在处理组内膜上的表达水平高于搔刮前组(P＜0.05).结论:利用机械刮宫法可以建立稳定的比格犬宫腔粘连模型,而子宫内膜组织中的IGF-Ⅰ、TGF-β1和bFGF的异常表达可能参与宫腔粘连的形成.
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缺血预处理对体外循环后心肌细胞凋亡及P13K/Akt通路的影响
目的:观察缺血预处理对犬体外循环术后心肌细胞凋亡以及P13K/Akt通路的影响.方法:10只雄性健康家犬随机分为对照组和缺血预处理组.常规建立体外循环,对照组阻断主动脉60 min后开放;预处理组于阻断主动脉前,夹闭主动脉2 min后开放3 min,反复2次.于主动脉开放90 min后取心肌标本.使用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化法检测磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)、凋亡相关蛋白BAX及Bcl-2表达情况.结果:缺血预处理可以明显减少体外循环后心肌细胞凋亡指数,降低再灌注90 min后凋亡蛋白BAX/Bcl-2比值,上调磷酸化Akt表达.结论:缺血预处理抑制犬体外循环后心肌细胞凋亡,并激活再灌注后P13K/Akt通路.
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亚低温治疗对急性呼吸窘迫综合征犬肺功能的影响
目的 探讨亚低温治疗对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)犬呼吸功能的影响.方法 25只健康杂种犬随机分为常温感染组(12只)和亚低温感染组(13只).2组均通过股静脉泵入活大肠埃希菌制成高动力型感染性休克模型.常温感染组在常温下继续观察,亚低温感染组通过血管内降温实施亚低温治疗(33℃±1℃).2组0、24、48 h通过PICCO采集肺血流动力学参数,呼吸机监测呼吸力学参数.72 h后处死动物,拍摄胸片及留取肺组织病理切片,判断是否发生ARDS.结果 观察至72 h时,亚低温感染组及常温感染组分别有4只及7只发生ARDS.2组氧合指数(OI)、氧分压[p(O2)]及肺静态顺应性(Cst)均随观察时间的延长逐渐降低,血管外肺水指数(EVLWI)、肺血管通透性指数(PVPI)、气道平台压(Pplat)及气道阻力(Raw)则随之逐渐升高(均P<0.05).亚低温感染组上述指标均明显优于常温感染组.结论 亚低温治疗可以改善感染性休克犬的肺功能和肺血流动力学状态,降低ARDS的严重程度.
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体外循环对犬心肌细胞凋亡的影响
目的:探讨心内直视手术体外循环对犬心肌细胞凋亡的影响及建立稳定的试验犬体外循环模型的方法.方法:6只试验犬采用不同的主动脉阻断时间和辅助循环时间建立体外循环模型,分别于阻断循环前,开放循环前及结束试验前留取心肌标本,采用免疫组化方法检测磷酸化蛋白激酶B(AKt)的表达,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数.结果:开放循环后犬心肌细胞磷酸化AKt表达增多,凋亡指数增加.结论:体外循环术后犬心肌细胞凋亡增多,可能是心脏手术后影响心功能恢复的重要原因,磷酸化AKT的上调尚不足以抑制凋亡的发生.
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犬脊髓横断后高频电刺激骶神经根对膀胱逼尿肌收缩意义的实验研究
目的:探讨用高频阻滞方法电刺激脊髓横断后狗骶神经根获得选择性膀胱逼尿肌收缩的可行性.方法:12只杂种犬于T9～10脊髓横断后,切开骶椎椎板,暴露好骶神经根,同时膀胱和尿道内放置压力憋尿器,电刺激骶神经根,观察膀胱及尿道压力变化及下肢肌肉活动情况.结果:12只犬中11只对电刺激有正常的膀胱、尿道及下肢的收缩反应,进一步高频阻滞电刺激,产生了选择性膀胱逼尿肌收缩,膀胱内压升高,而尿道括约肌收缩被抑制.结论:高频阻滞方法刺激骶神经可选择性激活膀胱逼尿肌收缩,使膀胱内压升高而抑制尿道括约肌同时收缩,为临床治疗脊髓横断后神经性膀胱提供了实验依据.
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老龄房颤犬模型静脉肌袖细胞分离及起搏电流记录
背景:电牛理改变是老化心脏表现的主要特征之一.目的:构建老龄房颤犬模型,观察静脉肌袖细胞动作电位和起搏电流的特征.设计、时间及地点:分组对照动物实验,于2005-03/2007-12在解放军总医院实验动物中心和老年心血管病研究所完成.材料:7～9岁健康杂种老龄犬12只,体质量15～20kg,雌雄兼有.台氏液成分(mmol/L):NaCl 135,KCI 5.4,CaCl2 1.8,MgCl2 1,NaH2PO40.33,HEPES 10,葡萄糖10,pH用NaOH调至7.4.方法:取老龄犬6只,快速起搏8周制备房颤模型,余6只犬未经快速起搏处理作对照.分离静脉肌袖细胞,利用全细胞膜片钳在电流钳模式下记录动作电位,在电压钳模式下记录起搏电流.主要观察指标:老龄犬肺静脉肌袖细胞动作电位的特征、起搏电流、起搏电流的,I～V曲线及起搏电流稳态激活的特征.结果:约82.6%的老龄犬静脉肌袖细胞记录到自动除极和自发性动作电位,而未经快速起搏处理犬的细胞约有40%记录到工作心肌动作电位特征.在-120mV时,房颤模型细胞起搏电流的电流密度为(-2.66±0.4)pA/pF,而对照组细胞的电流密度为(-1.24±0.21)pA/pF.从I-V曲线可见,起搏电流的电流密度具有电压依赖性特征,且病理模型犬的肺静脉肌袖细胞起搏电流电流随超极化电位增加更为明显.在-120 mV时,房颤犬静脉肌袖细胞电流的半激活电压为(-84.3±4.9)mV,激活曲线斜率为(+12.1±2.6)mV,而未处理细胞的半激活电压为(-98.0±7.2)mV,激活曲线斜率为(+9.5±1.8)mV,明显向更正的电位方向移动,提示老龄房颤犬静脉肌袖起搏电流更易激活.结论:老龄房颤犬静脉肌袖细胞更易出现自动除极电位,起搏电流的密度更高,起搏电流激活也更容易,提示起搏电流可能参与老年房颤异位起搏的发生.
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骨髓CD34+细胞移植促进梗死心肌血管形成的实验研究
目的:研究骨髓CD34+细胞移植对梗死心肌血管再生的作用.方法:用免疫磁珠法从犬肋骨骨髓分离CD34+细胞并注射到C02冷冻建立的慢性心肌梗死模型区,2,4,8周后取标本,应用免疫组化方法检测血管第八因子的表达,计数血管密度,分别于建立模型前、后4周和干细胞移植后8周应用99TCm-甲氧基异丁基异腈(9TCm-MIBI)单光子计算机断层扫描对心肌血流灌注进行评价,计算放射性分布缺损计数(F值).结果:骨髓CD34+细胞移植2,4,8周后梗死区血管密度(200倍视野下数)分别为(3.2±1.2),(8.2±0.8),(12.7±2.2)条/视野,明显高于对照组(t=5.09,14.07,8.67,P均＜0.05).骨髓CD34+细胞移植前、后8周的心肌灌注显像F值分别为5.44±0.70,1.50±0.55,细胞移植后梗死区心肌血流灌注得到明显改善(t=10.84,P均＜0.05).结论:骨髓CD34+细胞梗死心肌移植可明显促进梗死区血管形成,提高梗死区心肌的血流灌注.
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99mTc-MIBI双嘧达莫负荷显像评估心肌细胞损伤和再灌注后的可修复性
目的研究犬陈旧性心肌梗死 (陈旧心梗 )损伤区心肌细胞损伤与修复的形态学变化与 99mTc-MIBI摄取量的关系.方法选择犬 12只,建立陈旧心梗模型, 5个月后取心脏 ,通过透射电镜( TEM)观察 99mTc-MIBI硝酸甘油介入和双嘧达莫负荷心肌显像缺损区和可逆性缺损区内心肌细胞的超微结构.结果硝酸甘油介入 99mTc-MIBI放射性分布缺损区无完整的心肌细胞; 99mTc-MIBI双嘧达莫负荷心肌显像可逆性缺损区,主要为低血流灌注的心肌细胞,心肌细胞部分线粒体肿胀、变形严重,基质密度下降、有灶状空化,线粒体空泡散在分布、少数连续分布,膜和嵴不完整;部分线粒体轻度变形,基质密度降低程度较轻,有点状空化,嵴排列不整齐或部分凋落.在近正常心肌一侧,多数心肌细胞的线粒体近似卵圆形,线粒体膜基本完整,基质密度轻度降低,嵴排列较整齐,偶见损伤较严重的线粒体.结论 99mTc-MIBI的心肌摄取量与细胞损伤的程度有关;在 99mTc-MIBI心肌显像可逆性缺损区,血流灌注改善后,大部分损伤的心肌细胞有修复的可能性.
