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rrn操纵元序列PCR鉴定术后龟分支杆菌暴发感染的研究
目的 本研究旨在采用分子生物学技术,从基因水平上确认医院内术后暴发感染的致病菌,并建立一套快速的PCR方法鉴定龟分支杆菌脓肿亚种.方法 根据分支杆菌的rrn操纵元序列即16s rDNA和16s-23s rDNA间隔区序列,分别设计合成一对引物,采用聚合酶链反应技术,并以结核分支杆菌和常见速生长非结核分支杆菌作对照,对临床分离株进行PCR扩增,并根据DNA带的大小和数量鉴定分支杆菌.结果 53株龟分支杆菌脓肿亚种临床分离株和标准株,用16s rDNA扩增,均被扩增出一条特异的584bp DNA带,相应的16s-23s rDNA扩增,为特异的380bp DNA带.而速生长的非结核分支杆菌均扩增出不同大小的1或2条DNA带.结论 基因水平上确认此次引起医院内术后暴发感染的致病菌为龟分支杆菌脓肿亚种.rrn操纵元PCR扩增检测体系灵敏、特异,能鉴定龟分支杆菌脓肿亚种临床株,并与其它速生长分支杆菌区别开.
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5种消毒剂对龟分枝杆菌脓肿亚种的杀灭效果
目的了解5种常用消毒剂对临床分离的龟分枝杆菌脓肿亚种的杀灭效果.方法细菌在分枝杆菌干燥培养基斜面上培养7d,转至装有玻珠的小三角瓶中振摇,稀释至108cfu/ml.取0.1ml试验菌悬液加入5ml消费剂溶液中,一定时间后中止消毒剂的作用,采用平板涂抹法接种罗氏培养基表面,37℃培养7d检测残存菌数,计算杀灭率.结果含40mg/L有效碘的艾利克溶液作用5min;0.2%过氧乙酸作用5min;含40mg/L有效氯的TC-101消毒片溶液作用5min;含1%戊二醛的GA-50医用器械消毒液作用1min或含60%乙醇的消毒酒精作用1min,以上消毒剂对龟分枝杆菌脓肿亚种临床株的杀灭率均大于99.90%.结论 5种常用消毒剂均能够杀灭该龟分枝杆菌脓肿亚种临床分离株,达到消毒合格的要求.
