首页 > 文献资料
-
单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因对骨关节炎滑膜细胞的作用
目的 探讨单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因(HSV-TK)对骨关节炎滑膜细胞的作用.方法 含HSV-TK基因的重组腺病毒转染骨关节炎滑膜细胞,通过丙氧鸟苷(GCV)处理观察滑膜细胞抑制率,经荧光染色分析细胞核形态,定量分析细胞凋亡及坏死情况.结果 含TK基因的重组腺病毒有效感染骨关节炎滑膜细胞,经GCV对滑膜细胞存在明显抑制(P＜0.05),转染细胞死亡存在坏死与凋亡两种.结论 HSV-TKPGCV系统对骨关节炎滑膜细胞存在明显抑制效果.
-
山西省某县艾滋病患者单纯疱疹病毒感染状况及其影响因素的研究
目的 了解山西省某县艾滋病患者中Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-1,HSV-2)的感染率,并分别分析其影响因素.方法 对山西某县全部已纳入抗病毒治疗的195例艾滋病患者进行问卷调查.同时血清学检测确定其HSV-1和HSV-2的感染情况;利用单因素logistic回归模型分析数据.结果 共收回有效问卷195份,采集血样195份.195例艾滋病患者中,绝大多数(96.9%)为农民;男性116例(59.5%),女性79例(40.5%);年龄以20～50岁为主(146例,占74.9%);已婚有配偶者180例(92.3%).经有偿采供血或输血途径感染者176例,占90.3%.CD4+:T细胞计数(1～1531)×106个/L[(323.6±14.8)×106个/L],26.5%患者的血液CD4+T细胞计数<200×106个/L.154例患者(79.0%)目前有性伴;118例(86.8%)患者近6个月内每次性行为均使用安全套,123例(91.8%)患者在近一次的性行为中使用了安全套.HSV-1的IgG抗体阳性率为84.1%(164/195);HSV-2的IgG抗体阳性率为13.3%(26/195).合并感染HSV-1和HSV-2的有14例(7.2%).单因素logistic回归分析显示HSV-2感染与婚姻状况有关(OR=7.41;95%CI:2.42～22.73;P<0.01),未婚患者HSV-2感染率(46.7%,7/15)高于已婚者(10.6%,19/180).结论 当地艾滋病患者中存在一定比例的HSV-1和HSV-2感染者.艾滋病患者的HSV-2感染与婚姻状态有关.
关键词： 获得性免疫缺陷综合征 单纯疱疹病毒属 感染 因素分析 统计学 -
重组人干扰素α2b喷雾剂的抗病毒药效评价及临床观察
目的 研究重组人干扰素α2b喷雾剂抑制单纯疱疹病毒、流感病毒、SARS冠状病毒有效浓度范围,为临床研究提供依据并进行治疗病毒性皮肤疾病临床验证.方法 采用细胞病变抑制法研究重组人干扰素α2b喷雾剂抑制单纯疱疹病毒HSV-1及HSV-2攻击Vero细胞,抑制流感甲型及乙型病毒攻击人胚肾细胞,抑制SARS冠状病毒攻击Vero细胞的体外抗病毒作用.采用多中心、随机双盲临床试验评价重组人干扰素α2b喷雾剂对流感甲型及乙型病毒、尖锐湿疣的治疗效果.结果 重组人干扰素α2b喷雾剂抑制单纯疱疹病毒HSV-1及HSV-2对Vero细胞的攻击的半数有效浓度(IC50)分别为81.2 IU/ml和390.0 IU/ml;重组人干扰素α2b喷雾剂抑制流感甲型及乙型病毒对人胚肾细胞攻击的IC50分别为534.1 IU/ml和3645.5 IU/ml;抑制SARS冠状病毒对Vero细胞攻击的IC50为11.77 IU/ml.多中心、随机、双盲的临床研究表明,重组人干扰素α2b喷雾剂治疗单纯疱疹的有效率为89.09%,治疗尖锐湿疣有效率为22.0%,治愈率为17.0%,患者均未见明显不良反应.结论 体外实验表明重组人干扰素α2b喷雾剂对单纯疱疹病毒、流感病毒、SARS冠状病毒有显著抑制作用,临床研究表明重组人干扰素α2b喷雾剂作为蛋白经皮给药制剂可用于单纯疱疹和尖锐湿疣的临床治疗.
-
EB病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒和柯萨奇病毒感染和多发性硬化复发关系的研究
目的 探讨0EB病毒(EBV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒-1(HSV-1)、柯萨奇病毒B组Ⅰ-Ⅵ型近期活动性感染和复发.缓解型多发件硬化(RR MS)复发的关系.方法 采用酶联免疫吸附法检测34例RR MS患者和200名正常对照者血浆EB病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒-1、柯萨奇病毒B组Ⅰ-Ⅵ型IgM抗体,比较病例组和对照组间上述病毒近期活动性感染率的差别,并对病例组病毒近期活动性感染者和无活动性感染者的临床资料进行分析比较.结果 两组问EB病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒-1及柯萨奇病毒B组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ型IgM抗体阳性率的差异无统计学意义.RR MS组和对照组间柯萨奇病毒B组Ⅳ型、Ⅴ型IgM抗体阳性的差异有统计学意义(分别为3/34和0/200,P<0.05;2/34和0/200,P<0.05).病例组中任一病毒近期活动性感染者和无活动性感染者相比,其年龄、病程、发作次数、入院体温、血白细胞分类计数(中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞)、糖皮质激素应用与否及EDSS分值间的差异均无统计学意义.结论 RR MS患者复发期柯萨奇病毒B组Ⅳ型、Ⅴ型近期活动性感染率较高,但近期病毒活动性感染和症状的严重度无关,未发现EBV、CMV、HSV与RR MS复发的关系.
-
表达hIFNα-2b基因重组乳杆菌治疗HSV-2感染的研究
目的 探讨表达人干扰素α-2b的重组乳杆菌应用于阴道HSV-2感染的治疗作用.方法 建立阴道感染HSV-2的小鼠模型,使用重组菌菌液于感染前24 h进行预防,或感染后48 h进行治疗,记录病损程度并检测小鼠阴道分泌物中HSV-2滴度.结果 使用重组菌预防或治疗的小鼠症状轻且病程缩短,病灶中病毒滴度下降很快.结论 表达IFNα-2b的重组乳杆菌具有较强的局部抗病毒作用,可用于预防及治疗由HSV-2感染引起的生殖器疱疹.
-
1307例育龄妇女血清TORCH抗体定量检测结果分析
目的 了解昆明地区育龄妇女弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒( HSV),总称为TORCH的感染状况，为预防妊娠TORCH感染、降低新生儿出生缺陷发生率提供参考资料。方法 采用德国virion/serion酶联免疫吸附试验(ELISA)定量试剂，对1307例育龄妇女血清TORCH感染特异性IgM及IgG抗体进行检测，并对其结果进行分析。结果 1307例育龄妇女TORCH感染特异性IgM抗体总阳性率为1.45％，其中TOX：2.83％；RV：2.37％；CMV：0.46％；HSV：2.45％。特异性IgG抗体总阳性率为63.60％，其中TOX：3.98％；RV：72.30％；CMV：97.78％；HSV：80.34％。不同孕期妇女TORCH感染特异性抗体检出率差异无统计学意义。结论 本次调查中，1307例育龄妇女存在一定比例的TORCH现症感染，建议妊娠妇女尽可能进行TORCH筛查，以便尽早采取相应措施，避免由TORCH感染导致出生缺陷发生。
-
孕前及孕早期TORCH感染检测临床分析
目的 为优生优育、提高人口素质,探讨早期预防和治疗TORCH(T.弓形虫;R.风疹病毒;C.巨细胞病毒;H.单纯疱疹病毒;O.其他病毒)孕期感染,并对阳性患者进行了治疗和优生指导.方法 应用酶联免疫法(ELISA)检测全体对象外周血清中病原体特异性抗体IgM.检测由专人负责,严格按说明书操作.试剂由上海玉兰生物技术研究所提供.结果 阳性总人数319例,总感染率:3.28%,TOX-LgM、RV-LgM、GMV-LsM、HSV(Ⅱ)-LgM感染率分别为0.103%、2.64%、0.309%、0.237%;319例TORCH感染者均按治疗方案接受系统治疗,总转阴率达97.49%.结论 进行TORCH感染检测,做到早期诊断、早期治疗、早期预防很有必要.
-
重组抗原在HSV-Ⅰ感染ELISA检测中的应用
目的用单纯疱疹病毒(HSV)重组蛋白作为包被抗原建立一种特异性和灵敏性较高的ELISA方法.方法将重组糖蛋白D(gD)和HSV-Ⅰ分别作为包被抗原,检测57份临床标本,同时用国产和德国试剂盒进行检测;将德国试剂盒作为金标准,另外三者检测结果在特异性、灵敏性和符合率等方面与其进行比较.结果与德国试剂盒相比,在特异度、敏感度、符合率方面,重组抗原分别为57.1%、82.0%、78.9%.病毒抗原分别为57.1%、78.0%、75.4%;国产试剂盒分别为100.0%、48.0%、54.4%.重组蛋白重复性实验结果经统计学处理差异无统计学意义(P＞0.05).结论用酵母菌表达的HSV-Ⅰ重组gD蛋白作为包被抗原进行ELISA检测是一种敏感、特异的方法,具有较大的应用价值.
-
5-氨基酮戊酸光动力学疗法抗单纯疱疹病毒的实验研究
目的 研究5-氨基酮戊酸光动力学疗法(ALA-PDT)在体内外抗单纯疱疹病毒(HSV)的作用.方法 以HSV-Ⅰ感染豚鼠皮肤的动物模型以及HSV-Ⅰ和HSC-Ⅱ感染的Vero细胞为实验系统,观察ALA-PDT抗单纯疱疹病毒的疗效.结果 ALA-PDT在体外具有抑制HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ的作用,与阳性药物无环鸟苷作用基本一致.体内实验中,外用ALA对HSV-Ⅰ型豚鼠皮肤感染仅进行一次PDT治疗,对皮肤病变就产生了剂量依赖性的治疗效果,中、高剂量组疗效显著.结论 ALA-PDT能够有效地灭活单纯疱疹病毒,治疗该病毒引发的皮肤病变.为该疗法用于病毒性疾病的治疗提供了依据.
-
热毒清眼药水体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒药效的评价
目的通过组织细胞培养实验观察中药热毒清眼药水(RED)对单纯疱疹性病毒(HSV)所致细胞病变影响.方法大无毒浓度的热毒清眼药水分别对100TCID50与10TCID50单纯疱疹病毒Ⅰ型感染细胞所致的细胞病变进行用药抑制和检测热毒清眼药水对单纯疱疹病毒-Ⅰ(HSV-Ⅰ)病毒经不同浓度药物处理后所致细胞病变的影响.结果大无毒浓度的热毒清眼药水对100TCID50与10TCID50HSV-Ⅰ致细胞病变有明显抑制作用,与0.1%阿昔洛韦眼药水抑制作用比差异无显著性(P>0.05),两者均未出现细胞病变,而与对照组比差异有显著性(P<0.05).500 000～63 000 μg/L热毒清眼药水对HSV-Ⅰ致细胞病变抑制作用比2 000 000 μg/L～1 000 000 μg/L两种浓度更强,与对照组比差异有非常显著意义(P<0.01).热毒清眼药水细胞大耐受浓度是2 000 000 μg/L(1∶80稀释度),大于阿昔洛韦眼药水细胞大耐受浓度5 000 μg/L(1∶400稀释度).结论实验证实热毒清眼药水具有明显抗HSV-Ⅰ作用.热毒清眼药水细胞毒性很小,明显低于阿昔洛韦眼药水.
-
2008至2015年育龄妇女及新生儿 TORCH血清学筛查及临床意义分析
目的：回顾性研究不同人群血清弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒1型和2型特异性IgG和IgM抗体并分析临床意义。方法回顾性研究。收集2008至2015年北京地区妊娠妇女2661例、不育症患者324例、孕史不良患者2492例、近期异常妊娠者623例、胎儿宫内生长异常及新生儿疾病患儿261例、孕前检查人群170名、女性健康体检人群702名。采用商业酶免试剂盒检测弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒1和2型IgG和IgM抗体，任何IgM抗体阳性标本使用第2种商业酶免试剂盒进行复检。 PEMS3．1软件用于统计学分析。结果血清弓形虫IgG阳性率0．7％～1．6％，IgM抗体0～1．2％；风疹病毒IgG抗体阳性率85．3％～92．0％，IgM抗体阳性率0．4％～2．7％；巨细胞病毒IgG抗体阳性率89．1％～94．9％，IgM抗体阳性率0．7％～1．7％；单纯疱疹病毒1型IgG抗体阳性率74．8％～86．0％，IgM抗体阳性率0～0．7％；单纯疱疹病毒2型IgG抗体阳性率8．1％～17．4％，IgM抗体阳性率0～4．1％。既往可疑暴露人群（不育症和孕史不良患者）以及近期可疑暴露人群（近期异常妊娠、胎儿宫内生长异常及新生儿疾病患者），其血清TORCH－IgG和IgM抗体阳性率均未见高于妊娠妇女、孕前检查和女性健康体检人群。结论未发现TORCH感染与上述可疑暴露人群存在关联。（中华检验医学杂志，2016，39：281－285）
-
临床实验室建立TORCH检验程序的重要性
TORCH检验包括弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒和其他相关病毒等的血清学和核酸检验,是妊娠期感染、器官移植和重症患者检测的重要指标,建立一个合理的检验程序和对结果作出恰当的解释,对于正确应用TORCH检验项目有莺要意义.
-
如何重新评价与解释围产期TORCH感染筛查
妊娠期TORCH感染代表以病毒及其他微生物引起的一组围产期感染性疾病.在我国20多年前进行血清筛查后,较为明确地认为,TORCH感染对胎、婴儿危害较大,同时已具有较成熟的诊断与治疗手段.因此,必须对乙型病毒性肝炎、梅毒、HIV感染等做早孕期,甚至孕前筛查.对风疹的筛查好在孕前进行,如风疹IgM+则不必处理;如阴性,好在获得免疫力后再妊娠.然而,现不主张对巨细胞病毒感染、弓形虫病、单纯疱疹等病做孕期筛查.因这3种病原体感染所导致胎儿异常,可行孕期超声检查,并进一步行羊水或脐血穿刺查病原体以确诊.
-
单纯疱疹病毒感染与老年人心房颤动的相关性研究
目的 探讨单纯疱疹病毒(HSV)感染与老年人高敏C反应蛋白(hsCRP)水平升高及心房颤动(房颤)的相关. 方法 回顾性筛选2 603例连续年龄≥60岁房颤患者,排除有器质性心脏病和已知房颤危险因素的患者,终49例纳入数据分析;对照组为中国心律失常登记研究的55例老年人.分析临床基线特征,检测单纯疱疹病毒(HSV)-1和HSV-2抗体及hsCRP水平. 结果 房颤患者与对照组比较,HSV-1 (314.5±63.6) mg/L比(216.0±50.7) mg/L和HSV-2(400.1±57.2)mg/L比(306.3±64.5)mg/L,抗体水平升高(P＜0.01).线性回归分析结果显示,血浆hsCRP水平与HSV-1和HSV-2抗体呈正相关(r值分别为0.291、0.188,均P＜0.01).多因素回归分析,HSV-1和HSV-2抗体水平与房颤发生相关(OR值分别为1.035、1.034,均P＜0.01).抗HSV-1为284.96mg/L预测房颤发生率的敏感性为67.3％,特异性为92.7％;抗HSV-2为366.26 mg/L抗体预测的敏感性为67.3％,特异性为85.5％. 结论 血浆HSV-1抗体和HSV-2抗体升高与老年人房颤的发生相关.
-
河南省3084例育龄男女弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒感染状况调查分析
目的 了解目前河南省育龄人群感染弓形虫(Tox)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ/Ⅱ型的现状.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2011年7-9月来郑州大学第一附属医院进行孕前咨询的3084例育龄男女进行上述病原(TORCH)感染的特异性IgM及IgG抗体检测.依据研究人群的性别及年龄进行分组,并对组间的TORCH特异性抗体阳性率采用x2检验进行统计学分析.结果 育龄人群TORCH IgM抗体总阳性率为5.5％ (170/3084),其中RV IgM抗体阳性率高(2.9％),其次为HSV(1.0％)；在IgG抗体方面,HSV IgG抗体阳性率高(90.4％),其次为CMV IgG(89.7％)、RV IgG(48.1％)和Tox IgG(0.7％).从年龄来看,＞ 30 ～ 40岁组各病原体的IgM抗体阳性率普遍较低；而IgG抗体方面,Tox、CMV及HSV IgG抗体阳性率随着年龄的增长呈现上升趋势,但RV IgG抗体阳性率却随着年龄的增长呈下降趋势.育龄女性人群的CMV和HSV IgG抗体阳性率显著高于男性(x2=83.470和7.026,P＜0.01).结论 河南省育龄人群中存在一定比例的TORCH现症感染及较低的RV IgG阳性率,建议育龄人群孕前进行TORCH筛查.
-
生殖道常见病原体感染与稽留流产
流产是指妊娠周数小于28周、胎儿体质量不足1000 g而中止妊娠者,分为自然流产和人工流产.自然流产的发生率高达妊娠总数的10％～15％[1],而稽留流产是自然流产的一种特殊情况,指宫内胚胎或胎儿死亡后未及时排出者,多数为妊娠小于12周的早期流产[2],患者可出现阴道流血或下腹胀痛等流产症状或无任何症状,血绒毛膜促性腺激素(HCG)升高或尿HCG阳性,B超表现为孕囊形态不规则,未见原始心管搏动或枯萎孕囊.若死亡的胚胎组织在宫腔内滞留过久,容易机化黏连导致清宫困难,亦可发生严重的凝血功能障碍,导致弥漫性血管内凝血,致流产大出血等可能.
-
转座子piggyBac介导的HSV-tk基因在妇科恶性肿瘤细胞中长期稳定表达的研究
目的 研究piggyBac(PB)转座子介导转移外源基因HSV-tk在多种妇科恶性肿瘤细胞中的表达情况,探讨其作为一种可整合的非病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用价值.方法 通过PCR技术扩增HSV-tk基因的编码区,定向克隆至PB表达载体PB[Act-RFP]DS,经酶切、测序鉴定为重组载体PB[Act-RFP,HSV-tk]DS(pPB/TK).联合3种小同的转染试剂FuGENE HD、jetPEI及lipofectamine 2000,分别将pPB/TK转染入4种常见的妇科恶性肿瘤细胞株HeLa、JEG-3、SKOV3和HEC-1B.转染后以mRFP1为报告基因,经荧光显微镜观察和流式细胞仪分析转染效率;逆转录(RT)-PCR技术检测HSV-tk和mRFP1基因的表达;四甲基偶氮唑蓝实验测定不同浓度的更昔洛韦(GCV)对转染后细胞的杀伤作用.转染后细胞经流式细胞仪分选,极限稀释单克隆培养建立稳定转染株,并以反向PCR技术确定转座子插入基因组的位点.结果 (1)成功构建重组载体pPB/TK.(2)在3种转染试剂的辅助下,pPB/TK均可有效转染入HeLa、HEC-1B、SKOV3和JEG-3细胞;不同转染试剂辅助下pPB/TK在同种细胞中的转染效率各不相同,在HeLa细胞中,FuGENE HD的转染效率[(78.7±9.2)%]高于lipofectamine 2000[(54.1±11.4)%]和jetPEI][(46.5±7.4)%],分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);同一转染试剂辅助下pPB/TK在不同细胞中的转染效率也不相同,以FuGENE HD为转染试剂,pPB/TK在HeLa、JEG-3和SKOV3细胞中的转染效率分别为(78.7 ±9.2)%、(74.4±8.9)%和(83.2±9.7)%,高于HEC-1B细胞的(39.5±8.7)%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(3)RT-PCR结果显示,4种细胞均有HSV-tk和mRFP1基因mRNA的表达.(4)GCV对转染有pPB/TK的HeLa、JEG-3、SKOV3和HEC-1B细胞的半数抑制浓度分别为1.29、3.35、0.09和13.28 μg/ml.10μg/ml GCV对转染有pPB/TK的SKOV3细胞抑制率高于单独转染pORF-HSVtk者,细胞抑制率分别为(86±9)%和(52±12)%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).(5)稳定转染株在转染后3个月仍可观察到mRFP1表达,并可榆测纠基因组中有TTAA位点的插入整合.结论 PB转座子可介导外源基因在多种妇科恶性肿瘤细胞中的长期稳定表达,有望为肿瘤基因治疗提供更为安全有效的转基因技术平台.
-
缺氧反应元件增强单纯疱疹病毒胸苷激酶/GCV对乏氧环境Ewing肉瘤细胞杀伤作用的研究
目的 构建一种由缺氧反应元件(hypoxia responsive element,HRE)调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus-thymidine kinase,HSV-TK)基因的真核表达载体,观察HRE能否增强HSV-TK/GCV(gancyclovir,GCV)系统对乏氧环境中的人Ewing's肉瘤细胞系SK-ES细胞的杀伤作用,为弥补放、化疗的不足,探索有效的治疗方法.方法 (1)将合成的HRE片断,插入到pIRES2-EGFP(pIRES2-EGFP)的双顺反子荧光蛋白报告基因的真核启动子的增强子部位,获得重组质粒pHRE;以PCR法扩增HSV-TK基因中TK基因片断,将其克隆到pIRES2-EGFP及pHRE的双顺反子荧光蛋白报告基因上游的多克隆位点,获得重组质粒pTK及pHRE-TK.(2)通过脂质体将pHRE-TK、pHRE、pTK及pIRES2-EGFP导入SK-ES细胞,分别在乏氧(O2浓度为3%)和富氧(O2浓度为21%)环境中培养,荧光显微镜观察报告基因增强性绿色荧光蛋白表达变化,并进行荧光吸光度分析;再予以GCV处理5 d后,用MTF法检测GCV对培养细胞的杀伤效果.结果 (1)测序结果证实,重组质粒pHRE含HRE片断,pTK及pHRE-TK含HSV-TK片断,均为单拷贝正向插入,序列正确.(2)对比各组细胞EGFP荧光吸光度值发现:①在乏氧环境中培养,pHRE和pHRE-TK组细胞荧光吸光度值高于在富氧环境培养的荧光吸光度值(P＜0.01);②在乏氧环境培养,pHRE组和pHRE-TK组细胞荧光吸光度值高于pTK组和pIRES2-EGFP组(P＜0.01);③在富氧环境培养的各组细胞之间荧光吸光度值差异无统计学意义(P＞0.05).(3)对比GCV对各组细胞杀伤效果发现:①在乏氧、富氧两种环境培养的pHRE-TK和pTK组细胞对GCV的敏感性均高于pHRE组细胞(P＜0.01),敏感性随GCV浓度增加而增大;②在乏氧环境培养的pHRE-TK组细胞对GCV的敏感性高于pTK组(P＜0.01),而在富氧环境中培养的pHRE-TK组与pTK组细胞对GCV的敏感性差异无统计学意义(P＞0.05);③在乏氧环境培养的pHRE-TK组细胞对GCV的敏感性高于在富氧环境中培养的pHRE-TK组细胞(P＜0.01);而在乏氧、富氧两种环境培养的pTK组细胞对GCV的敏感性差异无统计学意义(P＞0.05).结论 (1)成功地构建了含有HRE及HSV-TK基因片断的真核表达载体.(2)在缺氧的SK-ES细胞内,HRE使报告基因EGFP表达增强.(3)HRE能增强HSV-TK/GCV系统对乏氧环境中的SK-ES细胞的杀伤效率.
-
逆转录病毒介导的胸苷激酶基因治疗难治性卵巢癌裸鼠模型的观察
目的:运用HSV-TK/GCV系统治疗卵巢癌裸鼠移植肿瘤模型,比较不同治疗方式的疗效.方法:常规培养包装细胞PA317,PA317细胞含有携带HSV-TK基因的逆转录病毒,测定病毒滴度.在移植瘤内多点注射PA317细胞以及浓缩病毒,现察GCV治疗后的肿瘤体积变化,对移植肿瘤进行组织病理分析,PCR检测TK基因在移植肿瘤组织的转导情况.比较两种不同治疗方式的疗效.结果:常规细胞培养上清重组逆转录病毒滴度为6×104 cfu/mL;注射PA317细胞后肿瘤生长受到抑制,P<0.05;注射浓缩病毒后肿瘤生长抑制不明显,P>0.05;PCR检测证实TK基因在肿瘤组织中的转导;病理检测见中、重度治疗反应.结论:HSV-TK/GCV系统对人难治性卵巢癌裸鼠移植肿瘤有治疗作用,不同治疗方式疗效不同.
-
转染HSV-tk骨髓基质干细胞旁观者效应机制的研究
目的:研究转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶(HSV-tk)基因的骨髓基质干细胞(BMSCs)旁观者效应的机制.方法:培养BMSCs,扩增Ad-CMY-tk后转染骨髓基质干细胞(BMSCs/tk);应用Transwell培养板使BMSCs/tk与C6细胞不相互接触,观察旁观者效应;观察0.22μm滤膜过滤后的条件培养液对C6细胞的作用.建立大鼠脑荷瘤模型,移植BMSCs/tk后,测定其血清中IFN-γ的变化;免疫组化观察荷瘤大鼠肿瘤内部淋巴细胞浸润及微血管密度.结果:在混合培养实验中,BMSCs/HSV-tk诱导BMSCs的凋亡率明显高于对C6的凋亡率,两者差异有统计学意义,q=8.214,P=0.032.应用Transwell培养板培养后,BMSCs/HSV-tk诱导BMSCs凋亡率明显降低.BMSCs/HSV-tk/G-CV培养上清液可明显诱导C6细胞凋亡,但将其用0.22μm的滤膜过滤后,诱导凋亡的作用消失.脑荷瘤大鼠移植BMSCs/HSV-tk后血清IFN-γ浓度明显增高,肿瘤组织内CD4+细胞数、CD8+细胞数明显增加,微血管密度降低.结论:BMSCs/HSV-tk通过诱导BMSCs细胞凋亡后释放的凋亡小体介导旁观者效应,并发挥免疫学调节机制,对C6细胞可产生明显的抑制作用.
