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严重急性呼吸综合征患者与疑似患者急性时相反应蛋白水平观察
严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)具有极强传染性、聚集性,以发热、肺部侵润病灶、白细胞计数正常或下降为临床征象[1].该病初期尚无客观的实验室诊断指标,对SARS准确诊断和鉴别造成很大困难,在一定程度上增加了疑似患者的范围.我们调查了SARS患者与疑似患者血清淀粉样蛋白A(SAA)、C反应蛋白(CRP)水平,了解其临床应用价值.
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斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估
目的 建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)定量测定血清淀粉样蛋白A(SAA)并评估其分析性能.方法 选用2株商品化抗SAA单克隆抗体,分别结合于硝酸纤维素膜和胶体金,制备免疫金渗滤试剂板条(SAA-DOT)以定量检测SAA.按照EP文件,评估SAA-DOT的分析性能(检测限、精密度、准确性、线性范围等).结果 SAA-DOT低检测限为5 mg/L；10和100 mg/L的批内变异系数(CV)分别为9.07％和10.21％,天间CV分别为11.33％和11.53％；线性范围为5～ 230 mg/L；SAA-DOT的测定结果与商品化乳胶增强速率散射比浊法(LERN)试剂具有良好的相关性(r=0.995,P＜0.05).表观健康者血清SAA浓度中位数为5.7 mg/L,95％可信区间为0～9.6 mg/L.结论 基于DIGFA的SAA-DOT简便、快速,能在5 min内完成检测,各项分析性能指标达到国家食品药品监督管理局(SFDA)对体外诊断试剂的要求,可用于临床患者血清标本的检测.
关键词： 斑点免疫金渗滤法 血清淀粉样蛋白A 即时检验 乳胶增强速率散射比浊法 -
血清淀粉样蛋白A在感染性疾病中的诊断价值
血清淀粉样蛋白A （serum amyloid A protein，SAA）是一种急性时相反应蛋白，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质，相对分子量约为12000。在急性时相反应中，经白细胞介素1（interleukin-1，IL-1）、IL-6和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）刺激，肝细胞可迅速合成SAA，浓度在4～6 h 内达到峰值，从正常水平的1～5 mg/L 升高到1000 mg/L，但半减期短，只有50 min左右[1]。血清SAA水平是反映感染性疾病的灵敏指标，有助于感染的诊断、病情评估及转归预测。
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血清淀粉样蛋白A水平在慢性阻塞性肺疾病急性加重期的变化及其意义
目的：探讨血清淀粉样蛋白 A （serum amyloid A ，SAA ）水平在慢性阻塞性肺疾病急性加重期（acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease ，AECOPD）患者中的变化及其临床意义。方法：选择2012年6月—2013年12月收治的AECOPD患者140例和同期就诊的COPD缓解期患者80例及健康对照者40例，检测血清中SAA、C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）及白细胞介素‐8（IL‐8）水平。结果：与健康体检者比较，COPD患者的血清SAA、TNF‐α、IL‐8、CRP水平均显著升高（P＜0．05），AECOPD组的血清SAA、TNF‐α、IL‐8、CRP水平显著高于COPD缓解组（P＜0．05）；血清SAA与TNF‐α、IL‐8显著相关（r分别为0．78、0．69，P＜0．01），CRP与 TNF‐α、IL‐8也具有显著相关性（r分别为0．68、0．62，P＜0．01）；SAA的ROC曲线下面积（0．841）大于CRP的ROC曲线下面积（0．749），差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论：血清SAA有望作为一项新的AECOPD的生物标志物，其血清浓度与疾病的严重程度相关；早期检测SAA的变化有助于判断病情的变化，指导疾病的治疗，值得在临床推广。
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成人社区获得性肺炎严重程度与乳酸脱氢酶、血清淀粉样蛋白A相关性分析
目的:分析成人社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)患者严重程度与乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid protein A,SAA)的相关性.方法:选择2017年11月至2018年10月就诊于我院的CAP患者100例,记录患者性别、年龄、个人病史、体质指数(body mass index,BMI),测量血压、心率、每分钟呼吸次数,评估意识状态,完善胸部CT、血气分析,进行血常规、尿素氮、降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、LDH、SAA检查.根据病情将患者分为普通肺炎组(n=62)、重症肺炎组(n=38),比较两组患者各项指标差异,分析各项指标与肺炎严重程度的关系.结果:普通肺炎组白细胞(WBC)、PCT、CRP、LDH、SAA水平低于重症肺炎组(P<0.05).Logistic回归分析提示,LDH、SAA与患者病情严重程度相关(P<0.05);受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析提示LDH的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.894,截点为228.5 U/L,敏感度为81.6％,特异度为87.1％,Youden指数为0.687[95％置信区间(CI)0.819～0.969,P=0.000];SAA的AUC为0.802,截点为170 mg/L,敏感度为84.2％,特异度为85.5％,Youden指数为0.697(95％CI 0.714～0.889,P=0.000).结论:LDH、SAA与CAP患者病情严重程度相关,可反映患者病情的严重性,有利于患者病情的评估.
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血清淀粉样蛋白A联合C反应蛋白检测在手足口病患儿中的诊断价值
目的 探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)、C-反应蛋白(CRP)和SAA/CRP对手足口病早期诊断的临床应用价值.方法 2015年4月至12月间杭州市儿童医院收治的873例手足口病患儿作为研究对象,另选取487名正常儿童为健康对照组.散射比浊法检测两组SAA水平,免疫比浊法检测两组CRP水平.采用Mann-Whitney U检验,用受试者工作特征(ROC)曲线分析诊断效能.结果 手足口病组和健康对照组SAA中位值分别为330.5和4.0 mg/L,两组比较差异有统计学意义(Z=-29.02,P＜0.01);CRP分别为10.0和1.0 mg/L,两组比较差异有统计学意义(Z=-23.79,P＜0.01);SA A/CRP分别为23.06和2.40,两组比较差异有统计学意义(Z=-24.79,P＜0.01).SAA诊断手足口病的ROC曲线下面积为0.980,高于SAA/CRP(0.911)和CRP(0.899);取SAA=10.30 mg/L为阈值,其灵敏度为91.6％,特异度为96.6％.结论 SAA与CRP联合检测有助于提高手足口病早期的诊断效率.SAA可为儿童手足口病的辅助诊断提供有用的参考信息,值得临床广泛应用.
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2型糖尿病血清淀粉样蛋白A水平与颈总动脉内中膜厚度相关
169 例短病程2型糖尿病患者,根据大动脉内中膜厚度(IMT)分为动脉粥样硬化(AS)组和非AS组,测定血清淀粉样蛋白A(SAA)水平,结果显示2型糖尿病组SAA水平较对照组高,AS组高于非AS组,并与年龄、体重指数、腰臀比及颈总动脉IMT呈正相关;年龄、C反应蛋白及SAA是影响颈总动脉IMT的相关因素.
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鼠血清淀粉样蛋白A家族对肺Lewis细胞株体外迁移的作用及可能机制的初步研究
背景与目的:血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)通常被认为是炎症反应的主要蛋白之一,然而近来的许多研究提示SAA参与了多种恶性肿瘤的发生、发展,本研究旨在探讨鼠SAA家族所有成员在肿瘤转移中的作用和机制.方法:表达和纯化鼠SAA1-GST、SAA2-GST、SAA3-GST、SAA4-GST融合蛋白,采用体外迁移实验,观察和比较鼠4种融合蛋白对Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞、Ba/mTLR4/mMD2细胞及其对照Ba/κ B细胞的迁移作用.通过蛋白免疫印迹杂交(Western blot)观察4种融合蛋白作用后LLC细胞的pI κ B蛋白表达情况.结果:成功表达和纯化了鼠SAA1-GST、SAA2-GST、SAA3-GST、SAA4-GST融合蛋白.与GST相比,鼠4种融合蛋白均能显著地促进LLC细胞的迁移(P＜0.05),其作用是GST的3.1～4.1倍,并且它们四者间的作用差异并无统计学意义(P＞0.05).鼠4种融合蛋白与GST相比,均能明显地促进Ba/mTLR4/mMD2细胞的迁移(P＜0.05),其作用是GST的1.6～2.1倍,而对照Ba/κ B细胞无此作用(P＞0.05).Western blot结果显示,SAA1-GST、SAA2-GST、SAA3-GST、SAA4-GST较GST作用的LLC细胞的pIKB蛋白表达明显增强.结论:鼠SAA家族的4个成员可以促进某些细胞株细胞的体外迁移,并且它们可能通过激活由Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)介导的核因子kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κ B)信号转导通路发挥该作用.
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老年COPD患者血清MMP-9、SAA、SOD和ET-1水平与病情急性发作的相关性分析
目的:探讨老年COPD患者四项血清炎性指标测定的临床价值.方法:血清MMP-9、SAA、SOD和ET-1测定均采用双抗体夹心ABC-ELISA测定.结果:老年COPD急性期组患者血清MMP9、SAA和ET-1水平均显著高于稳定期组和正常对照组(P<0.05,P<0.01),SOD水平则低于稳定期组和正常对照组(P<0.05,P<0.01),而两组患者的肺功能指标显示显著降低(P均<0.01).血清MMP-9、SAA、SOD和ET-1水平与FEV1%pred的相关性分析均呈显著相关和负相关关系(r=-0.761、r=-0.902、r=0.534、r=-0.698,P<0.01,P<0.05).结论:四项血清指标的变化与老年患者COPD的急性发作关系密切.
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血清急性淀粉样蛋白A水平与白塞病活动度的相关性研究
目的·评估血清急性淀粉样蛋白A (A-SAA)与白塞病(BD)活动度的相关性.方法·收集活动期BD (n=40)、缓解期BD(n=15)、大动脉炎(TA,n=12)、类风湿关节炎(RA,n=25)、系统性红斑狼疮(SLE,n=25)患者与健康对照(HD,n=15)的血清,分组比较不同患者的A-SAA、血沉(ESR)和C反应蛋白(CRP)的水平.分析A-SAA与国际白塞病学会(ISBD)疾病活动指数的相关性以及A-SAA与其相关下游分子IL-8的相关性.结果·A-SAA水平在活动期BD患者中异常升高[(115.70±87.78) mg/L],在RA及TA患者中也升高,分别为(68.72±61.50) mg/L和(96.25±87.41) mg/L;SLE患者中未见其升高.A-SAA与ISBD指数及血清IL-8水平相关.结论·A-SAA可作为评价BD活动度的检测指标之一.
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无管化经皮肾镜取石术对输尿管上段结石伴感染的疗效观察
目的 观察无管化经皮肾镜取石术(percutaneous nephrolithotomy,PCNL)和经尿道输尿管镜取石术(ureteroscopic lithotripsy,URL)对输尿管上段结石伴感染的疗效比较,及术前术后血清高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP),干扰素诱导蛋白10(interferon-inducible protein 10,IP-10)和血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)水平的变化.方法 选择2012年1月至2014年12月在我院就诊的输尿管上段结石合并感染的患者240例,按照手术方式不同分为观察组150例和对照组90例,观察组予以无管化PCNL治疗,对照组予以URL治疗.观察两组的手术成功率,结石清除率,并发症发生率,手术时间,术后高体温,体温恢复正常时间,尿白细胞恢复正常时间和住院时间,及两组治疗前后hs-CRP,IP-10和SAA水平的变化.结果 观察组的结石清除率和手术清除率明显高于对照组(P＜0.05),而两组的并发症发生率差异无统计学意义(P＞0.05).观察组的手术时间,术后高体温,体温恢复正常时间,尿白细胞恢复正常时间和住院时间明显短于或者低于对照组(P＜0.01).两组治疗前的hs-CRP,IP-10和SAA水平差异无统计学意义(P＞0.05),治疗后均较治疗前明显降低(P＜0.01),而观察组的降低水平更为明显(P＜0.01).结论 无管化PCNL治疗输尿管上段结石伴感染的疗效优于URL,具有微创,并发症少,更易于控制术后机体的炎症.
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血清淀粉样蛋白A经p38-MAPK/SR-BⅠ途径促进巨噬细胞炎症反应
为探讨血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A,SAA)对巨噬细胞B类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor class B type Ⅰ,SR-BⅠ)的表达以及炎症反应的影响及分子机制,采用SAA、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38-MAPK)激动剂anisomycin或抑制剂SB203580处理THP-1巨噬细胞,以实时定量PCR、Western blot和ELISA分别检测细胞中SR-BⅠ、炎症因子及磷酸化p38-MAPK的表达.结果显示,与对照组相比,SAA处理THP-1细胞后,SR-BⅠ的表达下调,而炎症因子与磷酸化p38蛋白的表达则上调,且这种效应呈浓度和时间依赖性(P＜0.05).与SAA单独处理组比较,SAA与p38-MAPK激动剂anisomycin共孵育细胞后,细胞SR-BⅠ表达下调,炎症因子及磷酸化p38蛋白表达增加(P＜0.05);而SAA与p38-MAPK抑制剂SB203580共同处理细胞后,细胞SR-BⅠ表达增加,炎症因子及磷酸化p38蛋白表达减少(P＜0.05).结果提示,SAA可促进THP-1巨噬细胞炎症反应,其机制与p38-MAPK的磷酸化及SR-BⅠ表达的下调有关.
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血清MCP-1、SAA水平对2型糖尿病伴OSAHS患者早期认知功能损伤的诊断效能
目的 探讨在2型糖尿病伴阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者早期认知功能损伤中采用血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血清淀粉样蛋白A(SAA)的诊断效能.方法 选取2016年4月至2017年5月诊断明确的2型糖尿病患者123例,分为2型糖尿病伴OSAHS组78例,单纯2型糖尿病组45例,另选择同期37例健康查体者为对照组.对三组血清MCP-1、SAA水平及蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分进行测定,分析三组对象血清MCP-1、SAA水平差异及其与认知功能的关系,应用ROC曲线分析MCP-1、SAA水平对早期认知功能损伤的诊断效能.结果 三组对象一般资料比较无统计学差异(P均＞0.05).与对照组相比,糖尿病伴OSAHS组、单纯2型糖尿病组患者MoCA总分均降低,且以糖尿病伴OSAHS组低,差异有统计学意义(P均＜0.01);血清MCP-1、SAA水平均增高,且以糖尿病伴OSAH组高,差异有统计学意义(P均＜0.01).糖尿病伴OSAHS组患者血清MCP-1、SAA水平与MoCA评分分别成负相关(r=-0.771,P=0.003;r=-0.771,P=0.003).血清MCP-1、SAA水平预测认知功能障碍的ROC曲线下面积分别为0.773 (95％ CI:0.691 ～0.856)、0.771 (95％ CI:0.689～0.851).结论 2型糖尿病伴OSAHS患者血清MCP-1、SAA水平与患者认知障碍损伤程度呈正相关,血清MCP-1、SAA水平可以预测认知功能损伤.
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血清淀粉样蛋白A水平在慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床意义
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清淀粉样蛋白A(SAA)水平变化的临床意义.方法 选取AECOPD住院患者40例,依据2011年慢性阻塞性肺疾病全球倡议(GOLD)标准分为A组6例、B组11例、C组8例、D组15例,记录患者CAT评分、缓解期肺功能,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定SAA.观察各组急性期与缓解期血清SAA水平、白细胞计数及中性粒细胞百分比的变化;分析血清SAA水平与第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1)、白细胞计数及中性粒细胞比例的相关性.结果 A、B、C、D各组急性期血清SAA水平显著高于缓解期,差异有统计学意义(P＜0.01);急性期血清SAA水平在A、B、C、D各组间差异显著(P＜0.01),且呈递增趋势;AECOPD患者血清SAA水平与FEV1％预计值呈负相关(r=-0.746,P＜0.01);与白细胞计数(r=0.783,P＜0.01)、中性粒百分比(r=0.621,P＜0.01)呈正相关.结论 SAA弥补了单独运用FEV1％预计值或CAT评分作为AECOPD患者病情评估指标的不足;SAA比白细胞计数及中性粒细胞比例有更好的诊断价值,可能为探索AECOPD的炎症机制提供一个新的视角和手段.
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血清淀粉样蛋白A、C反应蛋白及细胞因子在急性胰腺炎中的变化
急性胰腺炎特别是急性重症胰腺炎的发病过程中血清淀粉样蛋白A(SAA)的测定是提示坏死形成的重要指标,C反应蛋白(CRP)也是一种反映急性胰腺炎严重程度的标志.本实验对急性胰腺炎患者血清进行二者和细胞因子的检测,探讨二者对急性胰腺炎病情判断的应用价值.
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血清淀粉样蛋白A量子点免疫层析全血定量检测试剂的制备及性能评价
基于量子点荧光免疫层析技术制备SAA全血检测试剂盒,建立SAA全血检测体系,评价SAA量子点荧光免疫检测试剂的性能及临床诊断效果.采用夹心法原理,利用水溶性量子点和体外重组表达的SAA鼠单克隆抗体作为核心原料制备SAA全血检测试剂.以SAA国际标准物质作为校准品,并利用表面健康人和感染患者的全血样本验证试剂的灵敏度、精密度、正常值范围和诊断阳性率.结果表明SAA量子点荧光免疫检测试剂的反应时间为5 min,线性范围为2.5 ～ 150 mg/L,功能灵敏度为2.3 mg/L,精密度≤10％,具备良好的全血检测性能.以10 mg/L作为SAA正常值上限,诊断细菌感染和病毒感染的灵敏度在90％以上.以水溶性量子点技术制备的SAA免疫层析检测试剂能够方便、快速、准确地检测全血样本中的SAA含量,适合作为疑似感染患者的辅助诊断方法,指导医生制订治疗方案.
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人血清淀粉样蛋白A的重组表达及免疫学检测标准品的初步研究
构建人SAA1原核表达载体,建立SAA1蛋白大肠杆菌表达条件和纯化工艺,评价重组SAA1蛋白在制备免疫学检测标准物质中的应用前景.采用同源重组的方法构建表达载体,在N端加入6×His和SUMO标签帮助SAA1蛋白的可溶性表达和纯化;在小量体系中评价SUMO-SAA1蛋白的可溶性表达后,用镍亲和柱和阴离子交换层析方法纯化蛋白,用蛋白酶切除SUMO标签后再通过镍亲和柱层析方法获得高纯度人SAA1重组蛋白;用西门子N-Latex SAA试剂评价重组蛋白的免疫反应性和稳定性,并与SAA国际标准物质进行比较研究.结果表明SUMO-SAA1在大肠杆菌中大部分为可溶性表达且表达量高,产物纯度可达90％以上,稳定性良好并与SAA国际标准物质具有类似的免疫反应性.利用SUMO标签的助溶作用,成功在大肠杆菌中表达了人SAA1重组蛋白,该蛋白适合作为制备SAA1免疫检测的参考标准物质的原材料.
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阿卡波糖对2型糖尿病患者IL-6、降钙素、hs-CRP、SAA、TNF-α因子的影响
目的 观察阿卡波糖对2型糖尿病患者白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、降钙素、超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)因子的影响.方法 回顾性分析浙江衢化医院2014年1月～2015年1月期间收治的确诊为2型糖尿病的患者共50例,按随机数字表法分为观察组和对照组,各25例,对照组给予注射胰岛素治疗,观察组在对照组的基础上给予阿卡波糖治疗,均治疗1个月,记录2组患者IL-6、降钙素、hs-CRP、血清淀粉样蛋白A(SAA)、TNF-α因子情况.结果 观察组患者治疗后IL-6、TNF-α值均低于对照组(P＜0.05).观察组患者治疗后降钙素、hs-CRP、SAA均低于对照组(P＜0.05).结论 阿卡波糖对2型糖尿病患者的IL-6、降钙素、hs-CRP、SAA、TNF-α等因子有一定改善作用.
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六味补气颗粒剂联合舒利迭治疗COPD稳定期患者的临床研究
目的 观察六味补气颗粒剂联合舒利迭对慢性阻塞性肺疾病稳定期(肺肾气虚证)患者的临床疗效.方法 按照纳入和排除标准筛选的60例慢性阻塞性肺疾病稳定期(肺肾气虚证)患者随机分成对照组(30例)和观察组(30例).对照组在西医常规对症治疗基础上给予舒利迭吸入剂治疗,观察组在对照组治疗基础上给予六味补气颗粒剂治疗,疗程均为8周,比较2组患者治疗前后的临床疗效、急性加重次数、CAT评分以及血清淀粉样蛋白A(SAA)水平等变化.结果 临床疗效方面,观察组与对照组总有效率分别为93.33％％和70.00％ (P＜0.01).治疗后,观察组急性加重次数显著低于对照组(P＜0.01).2组患者治疗前后CAT评分、血清SAA水平比较均有显著下降(P＜0.01);治疗后观察组咳痰、乏力、自汗等症状的改善明显优于对照组(P＜0.05～0.01),CAT评分与对照组相比有一定差异(P＜0.05),血清SAA水平显著低于对照组(P＜0.01).结论 六味补气颗粒剂联合舒利迭可有效改善慢性阻塞性肺疾病稳定期(肺肾气虚证)患者的临床症状,减少急性加重次数,降低血清SAA水平,临床疗效满意.
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羟苯磺酸钙与厄贝沙坦联合治疗早期糖尿病肾病的疗效观察
目的 探讨羟苯磺酸钙和厄贝沙坦联合治疗早期糖尿病肾病的疗效.方法 50例早期糖尿病肾病患者随机均分为两组:羟苯磺酸钙和厄贝沙坦联合治疗组(A组)和单用厄贝沙坦组(B组).测定两组治疗前后血压、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿白蛋白排泄率(UAER)及血清淀粉样蛋白A(SAA)水平的变化.结果 与治疗前比较,治疗后A组血压、FBG、HbA1c、UAER、SAA水平均下降(P＜0.05),B组血压、FBG、HbA1C均下降(P＜0.05),但UAER、SAA水平下降不明显(P＞0.05).结论 羟苯磺酸钙与厄贝沙坦联合治疗早期糖尿病肾病能有效减少尿蛋白的排出,可能与降低SAA水平有关.
