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带状疱疹患者外周血IL-2与IL-10水平及临床意义
目的研究带状疱疹(HZ)患者Th1/Th2型细胞因子水平及临床意义.方法采用双抗体夹心ELISA法测定HZ患者急性期及恢复期血清白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)水平.结果 HZ患者急性期血清IL-2水平较正常对照组明显下降,IL-10水平明显升高(P<0.01);恢复期血清IL-2水平较急性期明显升高,而血清IL-10则明显下降(P<0.01);且HZ患者急性期和恢复期IL-2与IL-10呈负相关性(P<0.01).结论 HZ患者外周血Th1/Th2型细胞因子失调,在HZ的发生发展中可能起作用.
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高效抗逆转录病毒疗法(HAART)对HIV/AIDS患者免疫功能的影响
目的 评价高效抗逆转录病毒疗法(highly active antiretroviral therapy, HAART)对HIV/AIDS患者的疗效.方法 采用HAART治疗73例HIV/AIDS患者,流式细胞仪测定治疗前后HIV/AIDS患者体内CD4+,CD8+T淋巴细胞数量,定量ELISA法检测血浆细胞因子IL-2,IL-10和TGF-βl水平.结果 经HAART治疗后,CD4+T细胞数量显著回升(P＜0.01),但CD8+T细胞变化不大(P＞0.05).血浆IL-10水平较治疗前明显下降(P＜0.05),IL-2水平较治疗前升高(P＜0.05),TGF-β1的水平显著降低(P＜0.01).结论 HAART治疗HIV/AIDS患者疗效显著,对于重建免疫功能、改善体内细胞因子失调有明显效果.
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复方红花酊对白癜风豚鼠模型TNF-α和IL-10表达的影响
目的 探讨复方红花酊对TNF-α和IL-10的影响及促进黑色素形成作用.方法 实验动物随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(复方卡力孜然酊)、复方红花酊高剂量组、中剂量组、低剂量组.建立白癜风皮损模型,并应用相对应药物涂擦治疗,测量其TNF-α和IL-10平均光密度及黑色素颗粒细胞数目,比较其作用.结果 复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组对皮损有复色作用;与正常对照组比较,模型组TNF-α的表达显著增高,IL-10的表达明显减少,黑色素含量明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组中TNF-α的表达明显降低,IL-10的表达明显增高,各组黑色素含量均明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05);复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组中的TNF-oα表达水平与黑色素含量呈显著负相关(P＜0.05),IL-10表达水平与黑色素含量呈显著正相关(P＜0.05).结论 复方红花酊通过调节TNF-α和IL-10的表达水平可影响黑色素的生成,进而对白癜风产生一定的治疗作用.
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外源性IL-10转染大鼠DC细胞对角膜移植术后房水中细胞因子的影响
目的:探讨外源性IL-10转染大鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)对角膜移植术大鼠房水中细胞因子IL-4和IFN-γ表达的影响.方法:制备细胞8-DC,GFP-DC及IL-10-GFP-DC.55只SD受体大鼠,随机抽取6只6眼,作为阴性对照组,其余随机分成4组:阳性对照组(术前3d受体大鼠尾静脉注射1mL PBS)、8-DC组、GFP-DC组、IL-10-GFP-DC组,分别于术前3d受体大鼠尾静脉注射1mL已制备的细胞悬液(8-DC,GFP-DC,IL-10-GFP-DC).以Wistar大鼠为供体建立角膜移植实验模型.术后观察各组大鼠的角膜植片状态,并于术后第14d采用ELISA方法检测大鼠房水中IL-4和IFN-γ因子的表达.结果:IL-10-GFP-DC组角膜植片的存活时间显著延长.IL-10-GFP-DC组细胞因子IL-4表达较其他各组高,而IFN-γ的表达较其他各组低,差异具有统计学意义.结论:外源性IL-10基因转染的未成熟树突状细胞能抑制角膜移植排斥反应,诱导免疫耐受的形成.其中干扰大鼠房水中细胞因子IL-4和IFN-γ的表达是诱导角膜移植免疫耐受的机制之一.
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白细胞介素-10修饰的未成熟树突状细胞对角膜移植术后的影响
目的:研究白细胞介素-10(IL-10)修饰的未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDC)对大鼠同种异体角膜移植术后免疫耐受的影响.方法:用培养的供体来源的imDC及IL-10-imDC预处理受体,建立Wistar-SD大鼠穿透性角膜移植模型.供体Wistar大鼠18只;受体SD大鼠36只,受体鼠随机分为3组,每组均为12只.A组(对照组):受体鼠不经任何预处理即行角膜移植术;B组:角膜移植前3d,每只受体鼠经尾静脉注射供体的imDC,细胞数为2×106个;C组:角膜移植前3d,每只受体鼠经尾静脉注射用IL-10修饰的供体imDC,细胞数为2×106个.观察术后各组受体角膜植片的存活时间;术后第14d各组随机抽取4只鼠取术眼角膜行组织病理学检查及免疫组化法检测NF-κB的表达.结果:三组植片存活时间分别为10.17±2.16,19.83±2.25,27.57±1.72d;三组组间比较,差异均有显著性(P＜0.01).A组角膜植片显著水肿、增厚,出现大量的淋巴细胞和单核细胞浸润,角膜基质排列紊乱.B,C两组植片炎性细胞浸润均显著减少,角膜厚度及结构基本正常.NF-κB在A组即对照组中呈高表达(P＜0.05),B,C组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论:IL-10可有效抑制树突状细胞(dendritic cells,DC)成熟.摄取供体的imDC能显著延长角膜植片的存活时间.IL-10-imDC可抑制NF-κB的表达水平,从而抑制角膜排斥反应的发生.
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白细胞介素-10对体外培养人牙囊细胞集落刺激因子-1表达的影响
目的:研究白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞集落刺激因子-1(colony stimulating factor-1,CSF-1)表达的影响.方法:体外培养人牙囊细胞,取第5代细胞加入25 ng/ml IL-0作用0、1、3、6、9、12 h,用RT-PCR法检测CSF-1 mRNA表达的变化.然后取第5代细胞,加入25 ng/ml IL-10作用0、2、4、6、8 h,用ELISA法检测上清液中CSF-1蛋白的含量.结果:牙囊细胞经IL-10作用后,CSF-1 mRNA表达在3～12 h降低,蛋白分泌在6～8 h减少.结论:IL-10通过降低CSF-1的表达,间接地对单核细胞进入牙囊并在其中聚集发挥抑制作用,从而抑制破骨细胞吸收牙槽骨和牙齿萌出通道的形成.
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白细胞介素-10对体外培养人牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响
目的:研究白细胞介素-10(Intedeukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞增殖和牙囊细胞碱性磷酸酶活性的影响.方法:体外培养人牙囊细胞,取生长状态良好的第5代细胞,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测IL-10对细胞增殖的作用;用碱性磷酸酶试剂盒检测IL-10及其抑制剂对细胞碱性磷酸酶活性的作用.结果:0、1、10、25、50、100 ng/mL IL-10对人牙囊细胞的增殖影响无显著性差异(P>0.05);10 ng/mL IL-10作用0、1、3、5、7 d对人牙囊细胞的增殖影响无显著性差异(P>0.05).10 ng/mL IL-10作用3～7 d降低人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05),10ng/mL IL-10抑制剂作用5～7 d增加人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05).结论:IL-10对人牙囊细胞的增殖无影响.IL-10降低人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性,说明IL-10抑制人牙囊细胞向成骨方向分化.
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Th1/Th2在乳腺癌组织中的表达与意义
目的:探讨Th1类细胞因子IL-2,IFN-γ及Th2类细胞因子IL-4和IL-10在青年和老年乳腺癌组织中的表达模式.方法:采用免疫组化方法检测105例良恶性乳腺组织中IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10的表达,并比较其阳性表达率和程度的差异.结果:青年组与老年组乳腺癌组织中Th1类细胞因子IL-2,IFN-γ阳性表达率较乳腺纤维瘤组显著降低,Th2类细胞因子IL-4和IL-10阳性表达率较乳腺纤维瘤组升高,差异有统计学意义(P＜0.01).IL-2的表达水平在青年组与老年组随乳腺癌临床分期的增加而降低(P＜0.05),青年组IL-2的表达水平低于老年组,差异有统计学意义(P＜0.01);在青年组和老年组中腋窝淋巴结阳性组IL-4的表达水平均明显高于淋巴结阴性组(P＜0.01).结论:乳腺癌癌组织中呈现Th2型免疫反应优势状态,Th1/Th2平衡向Th2方向漂移.在青年乳腺癌组织中Th1/Th2的比值更低.这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一.IL-2和IL-4联合检测对评价患者机体免疫水平、判断预后具有重要意义.
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罗红霉素对LPS诱导的肺泡巨噬细胞NF-κB活化及对TNF-α,IL-10释放的影响
目的:探讨罗红霉素(RM)对内毒素(LPS)诱导下肺泡巨噬细胞(PAM)核因子-κB(NF-κB)活化及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-10表达的调节作用. 方法:收集大鼠支气管肺泡灌洗液中PAM进行培养,分为正常对照组、模型组和RM治疗组. 用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)法和放射免疫法分别测定各组核提取物中NF-κB活性和细胞培养上清中TNF-α,IL-10含量. 结果:模型组NF-κB活性明显高于正常对照组,用RM干预后NF-κB活性高于正常对照组(P<0.05),但比模型组低(P<0.05). LPS刺激1~4 h内TNF-α含量高于正常对照组;RM(20 mg/L) 能够抑制培养上清液中TNF-α的升高(P<0.05). NF-κB活性与TNF-α浓度有相关性(r=0.684,P<0.01). LPS刺激在观察早期IL-10高于正常对照组(P<0.05),使用RM干预后IL-10无明显变化(P>0.05). 正常对照组与治疗组TNF-α/IL-10比值在观察期间无明显上升和下降,模型组TNF-α/IL-10比值变化明显. 结论:RM可能通过PAM NF-κB活化的抑制,减少了TNF-α的释放,调节TNF-α/IL-10的比例,对LPS诱导的急性肺损伤模型有保护作用.
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白细胞介素-10对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用
目的: 探讨白细胞介素-10(IL-10)对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用及机制. 方法: 将SD大鼠36只随机分为3组,每组12只,即假手术对照组(Control)、肺移植组和肺移植加IL-10处理组. 观察受体气管内滴入IL-10对移植肺再灌注损伤的保护作用. 肺功能指标包括血氧分压、肺湿干重比、肺通透性指数、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数和分类;ELISA法检测受体血清中肿瘤坏死因子α(TNFα)含量. 结果: 肺移植术后1 h,肺湿干重比、肺通透指数和BALF中中性粒细胞百分比分别为(6.57±0.89)、(23.49±5.13)×10-4和(49.84±6.53)%,显著高于对照组(P﹤0.01),经气管内给予受体大鼠IL-10可明显降低上述指标至(4.23±0.58)、(15.96±3.04)×10-4和(20.33±4.26)%(P﹤0.01);肺移植组血清TNFα含量(μg/L)为(0.86±0.11),较对照组显著升高(P﹤0.01),IL-10可明显降低血清TNFα水平至[(0.39±0.05),P﹤0.01]. 结论: IL-10对移植肺缺血/再灌注损伤有显著的保护作用,与其抑制中性粒细胞激活和炎性因子TNFα分泌有关.
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加味芍甘附子汤对CIA大鼠血清IL-6、IL-10含量的影响
目的 观察加味芍甘附子汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠血清IL-6、IL-10含量的影响,并借以探讨本方治疗RA的作用机理.方法 SD雄性大鼠50只随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、甲氨喋呤组(C组)、(九王)痹颗粒组(D组)、加味芍甘附子汤组(E组).除A组外,其余4组分别给予每只大鼠尾根部皮内注射CⅡ乳剂0.1mL,10天后加强注射0.1mL,诱导成关节炎模型.从造模后第20天起开始给予相应药液灌胃,A、B组:清洁水,1次/日;C组:甲氨喋呤水溶液,1次/周;D组:(九王)痹药液,1次/日;E组:加味芍甘附子汤药液(1.5g/mL),1次/日.连续用药35天.用酶联免疫法测定其血清中IL-6、IL-10的含量.结果 加味芍甘附子汤能明显降低CIA大鼠血清中IL-6的含量,与(九王)痹颗粒组及甲氨蝶呤组相比均有显著性差异(P<0.01);在提高CIA大鼠血清中IL-10的含量方面与甲氨蝶呤相似无明显差异(P>0.05);在改善大鼠全身及关节局部症状方面,治疗组及药物对照组均优于模型组,其中以加味芍甘附子汤组为明显.结论 加味芍甘附子汤能明显改善CIA大鼠的全身和关节局部症状,其作用机理可能与抑制血清IL-6、IL-10等炎症介质的产生有关.
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白细胞介素-10启动区基因多态性与慢性丙型肝炎的相关性
目的探讨白细胞介素-10(IL-10)启动区-592位点的基因多态性与慢性丙型肝炎的发生、发展以及转归的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法检测85例慢性丙型肝炎患者和75名健康对照者IL-10基因启动区域-592位点的基因型.结果 IL-10基因启动区-592位点基因型在慢性丙型肝炎患者与健康对照之间的分布无显著性差异(P＞0.05);IL-10基因启动区-592位点基因型在血清HCV RNA＞105拷贝/mL组和HCV RNA≤105拷贝/mL组之间的分布无显著性差异(P＞0.05);IL-10基因启动区-592位点基因型在慢性丙型肝炎组和肝硬化组之间的分布无显著性差异(P＞0.05);IL-10基因启动区-592位点基因型在ALT≥80U/L组中A/A基因型出现的比率高于ALT＜80U/L组,两组之间分布存在显著性差异(P＜0.01).结论 IL-10基因启动区域-592位点的基因多态性与慢性丙型肝炎和肝硬化患者的病毒血症水平无显著相关性;IL-10启动区域-592位点的基因多态性可能与慢性丙型肝炎患者的肝脏炎症反应有关.
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免疫抑制因子对宫颈癌患者来源的树突状细胞的体外作用
目的观察白细胞介素-10(IL-10)及血管内皮生长因子(VEGF)对宫颈癌患者来源的树突状细胞(DC)的体外抑制作用.方法培养宫颈癌患者自体DC的小牛血清体系中加入粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和肿瘤坏死因子-α(TNF-α);流式细胞术检测免疫表型;甲基噻唑蓝法(MTT)法检测异体混和淋巴细胞反应(MLR)和细胞毒实验;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测培养细胞上清液中IL-10和VEGF含量.结果 10例宫颈癌患者外周血单个核细胞培养10 d后,获得(40±20)%的DC,此类DC共刺激分子的表达减低,刺激自体T细胞杀伤癌细胞能力不足,分泌IL-10及VEGF的含量却升高.结论 IL-10和VEGF抑制了宫颈癌患者自体DC的功能.
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α-干扰素对慢性粒细胞白血病来源的树突状细胞的免疫调节作用(Ⅰ)
目的于慢性粒细胞白血病(CML)来源的树突状细胞(DCs)无血清培养基中,加入α-干扰素(IFN-α),以探讨IFN-α对CML-DCs表达共刺激分子及分泌IL-10、IL-12 P70的影响.方法在诱导CML-DCs的培养基中,除加入SCF、GM-CSF、TNF-α及IL-4外,还加入不同浓度IFN-α.培养10～14 d后,流式细胞仪检测细胞免疫表型;G显带法显示Ph1染色体;噻唑蓝(MTT)法检测CML-DCs刺激正常人外周血淋巴细胞增殖状况;ELISA法检测培养上清IL-10及IL-12 P70含量.结果 IFN-α(300U*mL-1)组较无IFN-α组,CML-DCs的CD40、CD83、CD86及MHC-I类抗原的表达均升高一倍;异体混合淋巴细胞反应(MLR)中OD值增加一倍;Ph1染色体阳性比例、IL-10及IL-12 P70浓度均减低.结论 IFN-α能够部分纠正CML-DCs免疫表型及功能缺陷,同其解除了CML血清中IL-10对CML-DCs分化的抑制有关.
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急性白血病患儿血清IL-10、IFN-γ的检测及其相关性
目的了解小儿急性白血病的免疫病理机制,探讨TH1/TH2型细胞因子平衡性在发病中的作用,为临床免疫防治白血病提供理论依据.方法应用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测了39例急性白血病患儿化疗前后血清IL-10和IFN-γ水平,并进行相关性分析.结果白血病患儿治疗前或复发时血清IL-10明显升高,IFN-γ明显降低,治疗后病情缓解时IL-10水平下降而IFN-γ水平升高,两者呈负相关关系.结论小儿白血病的免疫病理机制与TH1/TH2细胞功能紊乱有密切关系,血清IL-10、IFN-γ水平变化可作为监测小儿白血病治疗反应的一种手段.
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安非他明对小鼠白细胞介素-10释放的影响及多巴胺D3受体的调控作用
目的 研究安非他明(AM)对细菌脂多糖(LPS)刺激后小鼠白细胞介素-10(interleukin-10, IL-10)释放的影响以及多巴胺D3受体在此过程中参与的调控作用.方法 实验Ⅰ:采用多巴胺D3受体基因敲除小鼠(D3RKO)以及具有相似遗传背景的野生型小鼠(C57BL/6J),腹腔注射AM(5 mg/kg)10 min后再注射LPS(150 μg/kg)刺激,在LPS给药后不同时间点(0、30、60、90、120、240 min)心脏穿刺抽血进行IL-10测试,观察上述不同时间点D3RKO和C57BL/6J小鼠IL-10的分泌情况.实验Ⅱ:在实验Ⅰ所确定的小鼠IL-10分泌高时间点,观察不同剂量AM (0、2、5、10 mg/kg) 对D3RKO和C57BL/6J小鼠IL-10分泌的影响.结果 实验Ⅰ:AM 5 mg/kg在LPS注射后可以引起D3RKO和C57BL/6J小鼠IL-10分泌增多,其中60 min达大值,与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).实验Ⅱ:C57BL/6J小鼠以AM 5 mg/kg作用后IL-10增多为显著,D3RKO小鼠以AM 2 mg/kg作用后IL-10升高为显著,与生理盐水对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),且二者之间亦存在统计学差异.结论 AM对小鼠免疫功能的抑制可能是通过增加IL-10分泌而起作用;小剂量AM即可引起D3RKO小鼠血中IL-10升高,提示多巴胺D3受体可能参与了AM对小鼠免疫功能抑制作用的调控.
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冠脉搭桥术对患者体内IL-6、IL-10的影响
目的:探讨细胞因子IL-6、IL-10在冠状动脉搭桥术患者血中的变化规律.方法:应用ELASA方法对15例冠状动脉搭桥术患者静脉血中细胞因子IL-6、IL-10进行测定.结果:患者冠脉搭桥术前、术中及术后血中细胞因子IL-6和IL-10的水平存在统计学意义(P＜0.001).结论:冠状动脉搭桥手术过程中存在炎症反应,细胞因子的释放在此过程中起作用.
关键词： 冠状动脉疾病/外科手术 白细胞介素-6 白细胞介素-10 -
TNF-α和IL-10与重症脓毒症患者预后的相关性研究
目的：探讨血清肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）和白介素‐10（IL‐10）浓度变化在重症脓毒症患者预后评估中的应用。方法：采用酶联免疫吸附法 C（ELISA 法）对97例重症脓毒症患者入 ICU时的血清 TNF‐α、IL‐10进行测定，根据患者预后效果将97例患者分为生存组和死亡组，对比分析两组 TNF‐α和 IL‐10的变化；同时选取同期健康体检者30例设对照，观察脓毒症组与对照组血清TNF‐α和 IL‐10的水平差异。结果：重症脓毒症患者入 ICU 首日 TNF‐α和 IL‐10水平明显高于健康对照组（P＜0．05）；死亡组存活组比较，TNF‐α和 IL‐10的表达明显增加，差异有统计学意义（P＜0．01）。结论：TNF‐α和 IL‐10在重症脓毒症的发生发展中起着重要作用，为脓毒症患者预后评估及治疗的选择提供理论依据。
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血清PCT、CRP、IL-8和IL-10联合检测在诊断肝硬化合并腹水感染中的临床应用
目的:探讨血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL-8)、IL-10联合检测在肝硬化合并腹水感染中诊断中的价值.方法:采用系统分层抽签方式选取肝硬化腹水患者96例,其中48例合并腹水感染患者(合并感染组),48例为单纯肝硬化腹水患者(非感染组),另外选择48例同期体检的健康者为对照组.测定三组受试者血清PCT、CRP、IL-8和IL-10水平,分析其与肝功能指标谷草转氨酶(AST)及谷丙转氨酶(ALT)相关性,各指标单独及联合测定在肝硬化合并腹水感染诊断中的价值.结果:三组受试者血清PCT、CRP、IL-8、IL-10水平比较差异存在统计学意义(P<0.05).组间两两比较,非感染组血清PCT、CRP、IL-8、IL-10水平均明显高于对照组;合并感染组则明显高于非感染及对照组(P<0.05).肝硬化合并腹水感染者血清PCT、CRP、IL-8、IL-10与AST、ALT水平间呈显著正相关(P<0.05).ROC曲线分析,PCT在肝硬化合并腹水感染诊断中价值高,曲线下面积(AUC)为0.776,其次为CRP(0.723)、IL-10(0.685),IL-8(0.606)差.PCT+CRP+IL-8+IL-10联合检测肝硬化合并腹水感染的灵敏度(97.2％)及诊断符合率(92.3％)均显著高于四项指标单独检测和两两联合、PCT+CRP+IL-8、PCT+CRP+IL-10联合检测(P<0.05).结论:肝硬化合并腹水感染患者血清PCT、CRP、IL-8和IL-10均出现异常升高,其可辅助诊断患者感染与否及肝损伤程度,尤其是四项联合检测在肝硬化合并腹水感染中具有较高灵敏度,同时可弥补单项指标测定诊断符合率低的缺点.
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构建表达白细胞介素-10的胚胎神经干细胞的研究
目的：探索构建表达白细胞介素‐10的胚胎神经干细胞的方法。方法：利用分子克隆技术构建表达白细胞介素‐10（IL‐10）的慢病毒载体，转染293细胞获得表达IL‐10的重组慢病毒；感染胚胎神经干细胞，检测细胞上清中分泌的IL‐10的表达量。结果：成功构建了表达白细胞介素‐10的慢病毒，并在体外培养的小鼠神经干细胞实现稳定表达。结论：利用慢病毒转染能够有效构建稳定表达细胞因子IL‐10的神经干细胞。
