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  • 重症手足口病患儿血清Th17、Treg动态变化及预后评估价值

    作者:孙涛;杜凤梅

    目的:动态监测肠道病毒71型(EV71)阳性重症手足口病患儿外周血Th17、CD4+CD25+Treg表达变化及其意义.方法:收治重症手足口病患儿60例作为重症组,同期选择普通组105例,健康对照组30例.监测各组CD4+CD25+Treg、Th17及细胞因子TGF-β、IL-6、IL-10、IL-17的表达.结果:重症组Th17、IL-6、IL-10、IL-17的表达明显高于健康对照组(P<0.01),而CD4+CD25+Treg、TGF-β的表达明显低于健康对照组(P<0.01).结论:重症组手足口病患儿中Th17表达升高、CD4+CD25+Treg表达降低,且与病情严重程度相关,可作为预测病情严重程度及预后评估的重要参考指标.

  • 冬夏季节肾虚型痹证大鼠CD4+CD25+Treg表达变化

    作者:张淼;王彤;陈怀民;陈彦钦;邓杨春

    目的:以中医学“天人相应”的整体调控思想为指导,以“肾应冬”为切入点,从褪黑素高位调节的角度,通过动物实验探讨肾虚型痹证CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达的变化.方法:采用胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠模型,以冬至、夏至两个时间点,测定各组大鼠血清中CD4+CD25+ Treg/CD4+ Treg变化.结果:与正常组大鼠相比,CIA模型组、手术组及伪手术组CD4+CD25+Treg/CD4+Treg水平均明显降低,并且差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).说明痹证可导致Treg水平降低.在季节性比较中,冬季正常组、CIA模型组及伪手术组大鼠Treg水平明显低于夏季组,且差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论:Treg水平的改变具有自然节律性,人体冬天的免疫能力低于夏天,正与冬季阳气藏于内的中医理论相一致.

  • 长期艾烟干预对Wistar大鼠外周血T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+Treg的影响

    作者:刘平;潘秀颉;韩丽;杨佳;胡海;蔡虹;李若曦;朱茂祥;杨陟华

    目的:探讨长期艾烟干预对细胞免疫的影响.方法:32只Wistar大鼠随机分为空白组、低浓度组、中浓度组和高浓度组,每组8只.除空白组外,其余各组每日在相应浓度的艾烟环境中暴露20 min,6个月后用流式细胞仪检测各组大鼠外周血中的T淋巴细胞亚群及CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)占CD4+细胞的比例.结果:与空白组相比,艾烟干预各组CD3+CD4+、CD3+ CD8+T细胞比例及CD3+ CD4+/CD3+ CD8+比值差异无统计学意义(P>0.05),但CD4+ CD25+ Treg占CD4+细胞的比例均显著降低(P<0.05),各项指标在艾烟干预备组间均差异无统计学意义(P>0.05).结论:长期艾烟干预对CD3+ CD4+、CD3+ CD8+T细胞及CD3+CD4+/CD3+ CD8+无影响,但可下调大鼠外周血中CD4+ CD25+ Treg在CD4+T细胞中的比例,艾烟预处理可能通过该途径发挥对机体的免疫调节作用.

  • FoxP3、CD4+CD25+调节性T细胞、TLR2和TLR9在儿童传染性单核细胞增多症中的变化

    作者:王强;王佐凤;曹玫;汪智英

    本研究旨在探讨TLR2(Toll-like receptors,TLRs)、TLR9和CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)及其转录因子FoxP3在儿童传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)发病中的作用.2010年4月至2011年1月我院儿科诊治的初次发病的急性期IM患儿35例(IM急性期组),IM恢复期组35例以及健康对照儿童35例(对照组)纳入研究.采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2、TLR9、FoxP3mRNA的表达,运用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群CD4+ CD25+的表达.结果显示:IM急性期组TLR2mRNA(4.03±0.56)、TLR9 mRNA(8.88±1.56)相对表达水平显著高于对照组TLR2 mRNA(2.22±0.57)、TLR9mRNA(3.63±1.30)及恢复期组TLR2 mRNA(2.76±0.83)、TLR9 mRNA(5.34±1.60)相对表达水平(P<0.01).IM急性期组FoxP3 mRNA(2.82±0.90)、CD4+ CD25+ (2.38±1.32%)表达水平显著低于对照组FoxP3mRNA(4.65±1.23)、CD4+ CD25+ (7.85±1.97%)及恢复期组FoxP3 mRNA(4.11±1.37)、CD4+ CD25+(6.81±1.84%)(P<0.O1),IM恢复期组FoxP3 mRNA、CD4+ CD25+表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:IM急性期存在CD4+ CD25+ Treg数量降低及其特异性转录因子FoxP3表达下调,而TLR2和TLR9在IM急性期表达上调.

  • 调节性T细胞与系统性硬化症的关系

    作者:张蓓;高惠英;李小峰

    系统性硬化症(SSc)是一种自身免疫性疾病,具有高亲和力的抗体,并与其他自身免疫性疾病可能存在重合,如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等.自身免疫性疾病是由于机体自身免疫耐受损坏所致.调节性T细胞(Treg细胞)在免疫耐受的维持和免疫应答的调节中起着至关重要的作用.近有些研究表明,SSc患者Treg细胞比例增加.然而,有一些研究报道,SSc患者Treg细胞均减少.这相反的结果导致我们很难理解Treg细胞在SSc发病中的作用.因此,本文将对Treg细胞与SSc之间的关系进行综述.

  • 哮喘患儿单个核细胞FOXP3mRNA表达应用实时荧光定量RT-PCR检测的临床意义

    作者:范光明

    目的 探讨哮喘患儿单个核细胞FOXP3 mRNA 表达应用实时荧光定量RT-PCR 检测的临床意义.方法 选取来本院就诊的29 例哮喘患儿和24 例正常健康儿童作为对照,对两组病例应用流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD25+Treg 的比例,并鉴定PCR 产物特异性.结果哮喘患儿组CD4+CD25+Treg 检测结果为(8.26±2.04)%,显著低于对照组(12.71±2.53)%,差异有统计学意义(P < 0.01).哮喘患儿组FOXP3/β-actin的2- △ Ct 值为(0.49±0.15),对照组为(0.62±0.18),两者比较,有显著性差异(P < 0.05).外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA 表达与淋巴细胞中CD4+CD25+Treg 比例呈正相关(r=0.679,P < 0.05).经融解曲线分析显示FOXP3 和β-actin 均仅有单一扩增产物.结论对于哮喘患儿单个核细胞FOXP3 mRNA 表达水平应用实时荧光定量RT-PCR 检测,方法简便,结果稳定、可靠.

  • 逍遥散加味治疗慢性乙型肝炎肝郁脾虚兼血瘀证的临床研究

    作者:凌春萍;毛德文;陈月桥;梁潇月;王挺帅

    目的:观察逍遥散加味治疗慢性乙型肝炎肝郁脾虚兼血瘀证的临床效果,探讨逍遥散加味对慢性乙型肝炎免疫介导发病机制的干预效应.方法:将符合纳入标准的80例慢性乙型肝炎肝郁脾虚兼血瘀证患者随机分为治疗组和对照组(各40例),对照组单纯口服恩替卡韦分散片治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用逍遥散加味方颗粒剂,疗程均为48周.治疗48周后比较两组患者疗效指标差异.结果:经治疗后,治疗组患者在恢复肝功能、提高HBeAg转阴率及HBeAb阳转率、降低HBV-DNA水平、改善肝脏硬度检测值及下调CD4+ CD25+ Treg细胞亚群水平均优于对照组(P<0.05),且总有效率治疗组为87.5%,对照组为60%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:逍遥散加味治疗慢性乙型肝炎可以显著保护患者肝脏功能,改善临床症状,提高临床疗效,其作用机制可能与下调CD4+CD25+Treg细胞亚群的水平有关.

  • 骨髓间充质干细胞对肾病综合征大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响

    作者:杨焕丹;张锐锋;封东进;朱冰冰;吕娟

    背景:CD4+CD25+调节性T细胞功能降低、数量下降已被公认为是肾病综合征患儿免疫失调的重要表现。骨髓间充质干细胞具有免疫调节功能,可上调CD4+CD25+调节性T细胞,抑制淋巴细胞增殖,并已在许多免疫性疾病方面成功应用。
      目的:观察骨髓间充质干细胞移植对原发性肾病综合征大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞的影响。
      方法:自SD大鼠分离骨髓间充质干细胞,经体外传代培养及鉴定后制备细胞悬液。30只SD大鼠随机均分为3组,生理盐水组和干细胞移植组尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型,干细胞移植组注射阿霉素当日尾静脉射干细胞1×107;正常组不做处理。
      结果与结论:①与正常组比较,生理盐水组大鼠均出现肾病综合征表现,以腹水、大量蛋白尿、低蛋白血症、高胆固醇血症为特征;干细胞移植组较生理盐水移植组则有明显改善(P<0.05)。②造模第28天,干细胞移植组和生理盐水组大鼠造模后外周血CD4+ CD25+Treg/ CD4+ Treg均明显高于正常组(P <0.05);干细胞移植组与生理盐水组比较差异无显著性意义(P>0.05)。③造模第28天,干细胞移植组大鼠外周血单个核细胞FoxP3mRNA的表达显著高于生理盐水组和正常组(P <0.05)。提示骨髓间充质干细胞移植对阿霉素肾病综合征模型有一定的治疗作用,其机制可能与上调FoxP3在组织局部的表达而诱导CD4+CD25+Treg产生有关。

  • 口服rhβ2GP1对EAPS小鼠Treg/Th17比率的影响

    作者:徐立;马静茹;刘磊;戴鹤玲;付嘉;方艳秋;谭岩

    目的:通过口服低剂量抗原(rhβ2GP1)干预EAPS疾病进展过程中小鼠外周血CD4+ CD25+ Treg和Th17数量和功能变化,探讨EAPS口服耐受机制.方法:ELISA法检测小鼠外周血浆中IL-17、IL-2、IL-6、TGF-β水平变化;计算小鼠流产率(%)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和血小板计数(PLT)判断APS病理改变;流式细胞术检测小鼠PBMC中CD4+ CD25+ Treg及Th17细胞变化.结果:与模型组相比,耐受组小鼠IL-17、IL-2、IL-6水平明显降低,APTT缩短,TGF-β、PLT升高,流产率降低,均差异显著(P<0.05);耐受组小鼠PBMC中CD4+ CD25+ Treg和Th17细胞百分率及两者的比率与模型组相比差异显著(P<0.05),而与对照组则无差异(P>0.05).结论:CD4+ CD25+ Treg/Th17在EAPS口服耐受的诱导中发挥重要作用.

  • 脐血CD4+CD45+调节性T细胞体外扩增及其抑制复发性流产患者免疫细胞功能研究

    作者:秦卫兵;崔蓉;杨宁;王一峰;苗竹林;韦相才;欧汝强

    目的:建立有效的脐血CD4+CD45+调节性T(Treg)细胞体外培养体系,探讨其对复发性流产患者免疫细胞功能的抑制作用,为开发新的复发性流产免疫治疗方法奠定实验基础.方法:应用免疫磁珠分选法从脐血淋巴细胞中获得Treg细胞,体外进行长期培养、扩增,分别应用MTT法和51Cr释放法检测扩增后的Treg细胞对复发性流产患者效应T细胞和NK细胞功能的抑制作用;ELISA法检测Treg对复发性流产外周血Th1/Th2细胞因子的影响.结果:经过5、15、25天培养,Treg细胞的扩增倍数分别为(6.5±0.6)倍、(18.2±2.5)倍和(52.7±4.8)倍,Treg细胞的纯度分别为(93.2±3.4)%、(88.6±2.9)%和(81.9±3.3)%.培养25天后的脐血Treg细胞对复发性流产的CD4+CD25-效应T细胞和NK细胞杀伤活性具有明显抑制作用,能使外周血中IFN-γ水平下降,IL-10水平升高.结论:培养扩增后Treg细胞能在体外有效抑制复发性流产患者外周血免疫细胞功能,并能使外周Th1型细胞因子水平下降,Th2型细胞因子水平升高.

  • 大鼠骨髓间充质干细胞对免疫耐受的作用

    作者:王劲松;秦晓晔;舒振波;宋岩

    目的:体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs),观察和检测其生长特性及表面标记,探讨它对免疫耐受的作用.方法:通过密度梯度离心、贴壁筛选法分离培养大鼠 BMSCs,观察细胞形态学变化,应用流式细胞术测定其表面分子 CD34、CD44 的表达.、将培养第 3 代的 BMSCs 经尾静脉输注大鼠,应用流式细胞技术检测大鼠外周血中CD4+CD25+Treg 比率,通过3H-TdR 掺入实验检测 BMSCs 对大鼠胸腺细胞自发增殖反应的影响.结果:体外培养的大鼠 BMSCs 呈贴壁生长,似成纤维细胞样,表面分子 CD44 表达阳性率为98%,但 CD34 表达阴性.输注 BMSCs 的大鼠外周血中CD4+CD25+Treg 占2.5%±O.69%,明显高于对照组(0.8%±0.14%)和PBS输注组(1.0%±0.23%),P<0.05;胸腺细胞白发增殖活性(cpm值3 275.41±1 736.05)明显低于正常对照组(7 368.25±2 532.13)和PBS输注组(6 143.71±2 380.47),P

  • CD4+CD25+免疫调节性T细胞对CD4+T细胞介导的移植物抗宿主病预防作用的研究

    作者:韩梅;王冠军

    目的:研究CD4+CD25+免疫调节性T(Treg)细胞在小鼠骨髓移植后,对移植物抗宿主病的预防作用及其作用机制.方法:用C3H(H-2k)小鼠骨髓作为供体,提取C3H(H-2k)小鼠CD4+T及CD4+CD25+T细胞,C3H×B6(H-2k/b)F1小鼠为骨髓移植的受者.在受者接受致死量全身放射后,输注供者去除T细胞的骨髓(ATBM),使其造血功能重建(ATBM组).于不同的实验组给予CD4+(CD4组)T细胞,CD4+CD25+T(CD25组)或二者同时输注(CD4/CD25组).观察各组小鼠移植物抗宿主病(GVHD)的发生率.结果:所有10只ATBM组小鼠至骨髓移植后60天仍全部存活,无GVHD发生;所有10只CD4组小鼠在骨髓移植10天内全部死于GVHD(P<0.01);所有5只CD25组小鼠于骨髓移植后60天仍全部存活,无明显GVHD发生(P>0.05);同样,所有6只CD4/CD25组小鼠至骨髓移植后仍全部存活,无明显GVHD发生(P>0.05).结论:在同种异基因小鼠的骨髓移植模型中,CD4+CD25+T不诱导GVHD的发生,并有预防CD4+T细胞介导的GVHD发生的作用.

  • 鼻咽癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞含量、活检组织EB病毒含量检测的临床意义

    作者:黄幼生;巫翠萍;何金龙;罗志飞;李群

    [目的]探讨鼻咽癌患者外周血调节性T细胞(Treg)变化与其活检组织中EB病毒含量的关系及临床意义.[方法]收集鼻咽石蜡组织样本105例(鼻咽癌70例,慢性鼻炎35例)及对应患者血液样本58例,采取15名体检健康者血液样本做对照.采用流式细胞术检测血液样本外周血Treg含量;荧光实时定量PCR技术检测石蜡组织样本中EB病毒含量.[结果]①鼻咽癌、慢性鼻炎组外周血CD4+CD25+Treg水平均明显高于健康对照组(P<0.05);有淋巴结转移的鼻咽癌组外周血CD4+CD25+Treg水平高于无转移组(P=0.046).②鼻咽癌组织中EB病毒含量明显高于慢性鼻炎组(P<0.05);EB病毒含量与癌转移无关(P=0.63).③鼻咽癌组织中EB病毒与外周血CD4+CD25+Treg水平无明显相关性(γ=0.378,P=0.403).[结论]鼻咽癌患者外周血CD4+CD25+Treg水平变化可能与鼻咽癌转移相关,与其组织中EB病毒含量无关.

  • 糖皮质激素对重症肌无力患者外周血调节性T细胞中Foxp3及其胞内CTLA-4表达的影响

    作者:庄战强;许文华;吴元波;张翠萍;李庆;任明山

    目的 研究糖皮质激素治疗重症肌无力( MG)患者外周血CD4 +CD25 +调节性 T 细胞( Treg )中 Foxp3 和胞内CTLA-4的表达水平的变化. 方法 收集MG患者34例,分为非治疗组8例和糖皮质激素治疗组26 例. 另将20 例健康者设为对照组. 采用流式细胞仪检测分析患者和健康者外周血CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4的变化.结果 ① MG非治疗组患者外周血 CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4水平较对照组显著下降( P<0. 05 );②糖皮质激素治疗能显著提升CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4表达比例( P <0. 05 ) ,但仍低于对照组( P <0. 05);③ CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4表达呈正相关性(r=0. 870,P<0. 001). 结论 MG患者外周血CD4 +CD25 +Treg Foxp3和胞内CTLA-4呈低表达,糖皮质激素治疗能显著提升Foxp3和胞内CTLA-4表达水平,但尚未达正常者免疫状态.

  • CD4+CD25+调节性T细胞与类风湿关节炎研究进展

    作者:陈瑞莲;刘健

    CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是调节性T细胞中为重要的一群,因其具有免疫调节和免疫抑制作用,近年来受到医学工作者和研究人员的密切关注.

  • 补肾生血法对慢性再生障碍性贫血患者CD4+CD25+Treg的影响

    作者:雍彦礼;孙凤;李冀

    目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者外周血CD4+CD25+Treg的影响,进一步阐述补肾生血法治疗CAA的疗效机制。方法:应用流式细胞术检测CAA患者治疗前后外周血CD4+CD25+Treg的表达水平。结果:治疗组治疗前患者外周血CD4+CD25+Treg水平低于正常对照组(P<0.05),治疗后外周血CD4+CD25+Treg水平较治疗前明显升高(P<0.05);治疗组治疗后与正常对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:补肾生血法通过提高CAA患者外周血CD4+CD25+Treg的表达水平,抑制异常的细胞免疫状态,以促进骨髓造血功能的恢复。

  • 体外受精-胚胎移植反复失败患者外周血中CD4+CD25+Treg的表达

    作者:娄华;王兴玲;孙丽君;管一春;张彩霞;于晓娜

    目的:探讨外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞( CD4+ CD25+ Treg)在体外受精-胚胎移植反复失败(RIF)发病机制中的作用.方法:用流式细胞分析技术检测12例RIF组、15例胚胎移植妊娠组、15例正常未孕组患者外周血中CD4+CD25+ Treg的表达.结果:RIF组患者外周血中CD4+CD25+Treg的表达率为(0.80±0.56)%,低于正常未孕组的(4.05±0.91)%,两组差异有统计学意义(P<0.05);胚胎移植妊娠组患者外周血中CD4+ CD25 +Treg的表达率为(11.01 ±2.09)%,高于RIF组,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论:辅助生殖中反复植入失败可能与CD4+ CD25+ Treg的表达下降有关,这为免疫治疗提供了理论依据.

  • CD4+ CD25+Treg细胞和Th17细胞与寻常型银屑病发病的相关性

    作者:张玉丽

    CD4+ CD25+ Treg细胞和Th17细胞是CD4+T细胞的新亚群,参与自身免疫病、感染和肿瘤等疾病的发生发展.研究表明CD4+ CD25+ Treg细胞和Th17细胞与寻常型银屑病的发病密切相关.通过对CD4+ CD25+ Treg细胞和Th17分化发育和功能发挥过程中的关键调节因子进行阻断或加强,可以上调或下调CD4+ CD25+ Treg细胞和Th17在寻常型银屑病中的表达,以用于寻常型银屑病的预防和诊治.

  • CD4+CD25+Treg细胞在移植免疫耐受的研究进展

    作者:翟晓强;曾甫清

    CD4+CD25+Treg细胞是一类特殊的调节性T细胞,它具有免疫无能性和免疫抑制性两大功能特性,能通过多种机制诱导和维持免疫耐受,经过免疫磁珠分选后,能够在体外大量扩增,在器官移植领域有潜在的应用价值.

  • 慢性心力衰竭患者Th17/Treg失衡的研究及其意义

    作者:彭芝斌;邓世磊;杨泽敏;贺立群;李裕舒

    目的 探讨慢性心力衰竭(CHF) 患者外周血Th17/Treg 的失衡及意义.方法 采用流式细胞分析法,检测71例CHF 患者(CHF 组) 和27例正常对照者(对照组) 外周血Th17、CD4+CD25+ Treg 细胞比例.结果 CHF 患者外周血Th17细胞比例显著高于对照组, 且心功能NYHA 分级Ⅲ~Ⅳ级者比例明显高于Ⅰ~Ⅱ级者. CHF 患者外周血CD4+CD25+Treg细胞比例显著低于对照组,且心功能NYHA 分级Ⅲ~Ⅳ级者比例明显低于Ⅰ~Ⅱ级者.结论 CHF 患者外周血Th17细胞比例增加,CD4+CD25+Treg 细胞比例下降, Th17/Treg失衡可能参与了心力衰竭的发生发展.

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