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TTV DNA在肝组织中表达研究
目的探索TTV DNA在肝组织表达特点.方法选择TTV DNA高保守区设计一对引物,采用PCR扩增法,以地高辛标记TTV ORF1部分基因序列,合成Gla,G2b两种亚型的双链TTV DNA探针.应用巢氏PCR法筛选出TTV DNA阳性的慢性肝炎、肝硬化、原发性肝癌病人的肝组织标本共60份,同时用两种探针进行原位杂交.结果TTV DNA主要见于肝细胞、肝癌细胞的细胞核内,极少数肝细胞胞浆内TTVDNA呈弱阳性.TTVDNA阳性细胞在慢性肝炎、肝硬化、肝癌组织中均呈散在分布.肝癌组织与癌周组织中TTVDNA阳性细胞密集程度差别不明显.结论TTV是一种嗜肝病毒,TTVDNA在被感染肝组织及肝癌的细胞核内表达及复制.
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9株YONBAN相关TTV变异株全基因序列测定及其结构、分型的研究
目的对9个TTV新分离株全基因序列测定、基因结构及基因分型的研究.方法从9名TTV第4基因群感染阳性的婴儿血清中抽提其DNA,用longinverted PCR扩增出全基因组、克隆和测定全基因组序列,并对测序结果进行计算机分析.结果首次测定了TTV第4基因群共9个新分离株的全基因序列,其中8个分离株代表该基因群首次报道的8个新基因型.结论TTV基因组核酸序列具高度异质性及基因型的高度多样性,但是,其独特的转录特性和基因组的基本结构在各自的基因群及基因型中十分保守.
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TTV HCV重叠感染时TTV无明显致肝损伤作用
我们采用套式PCR方法回顾性研究了一组接受干扰素治疗的慢性丙型肝炎患者的TTV感染状况,对TTV重叠感染时丙型肝炎肝组织病变及干扰素治疗状况进行分析.研究结果对评价TTV致病性具有一定意义.
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TTV在恒河猴实验感染的初步研究
通过TTV在恒河猴的实验感染，了解TTV的嗜肝性及其在各组织中的分布。 从5只实验感染病毒的恒河猴各组织中抽提DNA, 经PCR检测各组织中TTV的感染;分别用病毒双链探针或单链负义探针, 与吸附在纤维膜上的组织DNA进行斑点杂交。PCR结果与双链探针的杂交结果一致，肝、骨髓、脾、胃、小肠和大肠组织及血清均阳性,都有TTV的感染。单链负义探针与各组织DNA杂交, 仅在肝、骨髓和小肠为阳性, 表示肝、骨髓和小肠可能有作为病毒复制中间体的正义DNA。提示TTV能侵染恒河猴的许多组织，但仅在肝、骨髓和小肠可能是病毒的复制场所, 故TTV可能具嗜肝性。
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输血相关病毒母婴传播的分子病毒学鉴定
为了解输血相关病毒(TTV)在我国母婴传播的可能及分子病毒学依据,应用半巢式PCR调查我院1998年1～12月间住院的87例产妇及其新生儿的TTV感染情况,用克隆后序列分析测定两对母婴同时阳性者TTV基因序列.结果发现,在87例产妇中有12例用半套式PCR可检测出TTV,检出率为13.8%,其中4例产妇与新生儿同时阳性(4.6%);配对比较两对母婴TTV序列片段(1915～2185核苷酸片段)同源性均为100%.结果说明,TTV在我国可通过母婴传播的途径感染.此结果丰富了对TTV传播途径的认识.TTV对胎儿的危害及新生儿生长发育的影响值得进一步研究.
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献血人群感染TTV的检测及部分DNA序列分析
目的调查志愿无偿献血人群中输血传播病毒(TTV)的感染情况和分析TTV DNA部分基因序列.方法以TⅣORF1保守区设计两对引物,用巢式多聚酶链式反应(PCR)检测TTV DNA,并克隆和测序.结果在血液筛查合格的无偿献血人群中检出TTV DNA的阳性率为5.0%(5/100).在单一转氨酶异常,HBV、HCV和HIV血清标记物正常的献血人群检出TTV DNA的阳性率为5.6%(4/71).两者有非常显著性差异(P＜0.01).与日本首例TTV-N22株相比,SZT1和SZT2株基因序列同源性为98.9%(3/272)和96.7%(9/272),SZT3和SZT4株为67.3%(89/272)和86.0%(38/272).结论在符合献血条件的人群中存在无症状TTV携带者.与之相比较,在ALT异常献血人群中TTV流行率相对较高,对其部分基因序列的比较显示了较大的变异性.
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急性病毒性肝炎的合理用药
目前已证实甲、乙、丙、丁、戊五型肝炎病毒是病毒性肝炎的致病因子.庚型肝炎病毒(HGV)、输血传播病毒(TTV)、Sen病毒等是否引起病毒性肝炎尚无定论.
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TTV流行病学和致病性的研究进展
TTV是1997年日本学者在一例输血后非甲～庚型肝炎患者血清中分离出的一种新病毒,随后在许多国家相继发现了这种病毒,国内外许多学者对TTV进行了大量研究.本文通过复习有关文献,对TTV流行病学和致病性方面的研究进展进行了概述,对未来的研究提出了一些粗浅的看法.
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输血传播病毒在妇产科的研究现状
TTV是一种新的DNA病毒,它广泛存在于世界人群中,感染率各学者报道不一,在人体的唾液、粪便、精液及眼泪中均发现其存在,传播途径多种多样,致病性及其与其他肝炎病毒的关系尚不能确定.在妇产科领域,母婴间是否存在垂直传播,孕妇及婴儿、儿童的感染率与感染的可能途径,各报道不一.本文就以上几个方面作一综述.
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TTV感染研究进展
自1989年人类克隆成功丙型和戊型肝炎病毒,病毒性肝炎被分为甲、乙、丙、丁、戊型,并建立了特异性的检测手段,但仍有10%～20%病毒性肝炎的病例不能分型。1995年Simons［1］等和kim等分别用代表性差异分析法,从非甲—非戊型肝炎患者血清中获得庚型肝炎病毒（HGV）克隆。虽庚型肝炎病毒部分地解释了非甲—非戊型肝炎的病因,但HGV感染更多地发生于HBV或HCV感染患者［2,3］,且对肝脏的致病性尚未完全得到证实,提示尚有甲—戊型肝炎病毒以外的病毒引起急、慢性肝炎。1997年,Nishizawa等［4］应用代表性差异分析法,从1例非甲—非庚型输血后肝炎患者血清中克隆到一个500bp的片段(N22),经与基因库中已知的DNA序列比较,未发现有与其相同或相似的序列,提示为一种新型病毒。由于该克隆来源于一例姓名为TT的输血后肝炎患者,因此命名为TT病毒（TTV）,恰巧与输血传播病毒(transfusion transmitted virus)三个英文名字的字头一致。现就TTV的研究情况作一简要综述。
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三明市健康人群乙型肝炎病毒患者和丙型肝炎病携带者TTV1-5基因群分布情况
目的：了解三明市健康人群、乙型肝炎病毒（H B V）患者和丙型肝炎病毒（H C V）携带者输血传播病毒（T T V）的感染情况,探讨三明市人群所感染T T V的基因群别分布情况。方法准备106名健康人群、64名H B V患者和36名H C V携带者的血浆。设计24对序列特异性引物，G1-G5群特异性巢式PCR，分别检测三组血浆中TTV的5种基因群的DNA。结果（1）使用群特异性PCR检测TTV，G4群TTV感染率高，为52.0%，然后依次为G5：39.1%，G3：32.7%，G1：25.7%，G2：8.4%。（2）T T V常常混合感染：检测出2种属于不同群T T V感染的实验标本为数不少（19.8%），有4份标本甚至检测出属于3种不同群TTV-DNA。HBV患者组，检测出2种属于不同群TTV的比率占56.3%，有5个实验对象和2个实验对象分别检测出3重(群)和4重(群) TTV感染。结论：1-5群的TTV都可以在三个组别中被检测出，HBV组和HCV组各群TTV的感染率比健康人群组高。TTV易发生混合群感染，
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不同镁离子浓度对TTV核酸检测的影响
目的:确定输血传播病毒TTV核酸检测方法中的佳镁离子浓度.方法:根据TTV ORF2区基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针.结果:在确定佳引物浓度之后,分别建立不同镁离子浓度的PCR检测体系,根据反应曲线选择佳镁离子浓度.结论:佳镁离子浓度应为4.0 mmol/L.
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ELISA和PCR两种方法检测TTV感染的结果比较
目的:通过ELISA和PCR方法检测TTV,分析两种方法检测结果的差异.方法:采用ELISA和PCR两种方法同时检测无偿献血者及非甲型～庚型肝炎患者血清标本TTV-Ab、TTV、DNA.结果:ELISA法检出率为2.63%(14/532),PCR法检出率为4.14%(22/532).结论:ELISA和PCR两种方法检测TTV感染的结果差别具有统计学意义(P＜0.05).
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献血员中TTV感染的检测及部分基因序列分析
目的探讨湛江地区献血员中输血传播病毒(TTV)的感染状况及部分TTV的基因序列.方法采用SDS和蛋白酶K法提取480份正常献血员、60份血清丙氨酸转氨酶(ALT)异常献血员的血清标本DNA,应用套式PCR方法检测TTV的感染状况,并对部分扩增出的阳性片段进行克隆测序,与国内外报道的序列进行同源性比较.结果在480份正常献血员血清标本中,52份(10.83%)TTV DNA阳性;在ALT异常的60份献血员血清标本中,15份TTV DNA阳性,阳性检出率为25%,明显高于正常献血员人群(χ2=9.847,P＜0.01).序列分析结果显示,从献血员中随机选出的5例TTV DNA阳性片段,其序列与日本株(AB008394)和中国株(TTV CH1)相应位置核苷酸序列的同源性大于97%,可能属同一基因型.结论湛江地区献血员中存在TTV感染,输血可能成为TTV感染的传播途径之一.
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HIV与输血传播病毒的母婴传播的调查
目的了解艾滋病高发区HIV与输血传播病毒(TTV)母婴传播情况.方法对华中地区某艾滋病高发农村228名母亲及其年龄小于15岁的子女180名进行入户流行病学调查,采集静脉血检测抗HIV、抗TTV,回顾性分析2种病毒的母婴传播特点.结果82例HIV阳性母亲1993年后生的103名儿童中,39例HIV阳性,母婴传播率为37.9%;59例抗TTV阳性母亲所生的76名儿童中,5例抗TTV阳性,母婴传播率为6.6%.结论HIV与TTV在当地均存在母婴传播;母婴传播是儿童感染HIV的主要途径.未对HIV流行地区高危生育期妇女进行有效的HIV监测与咨询,未及时采取有效干预措施是造成该地区儿童感染HIV的主要原因,亟需制定实施相应的对策,控制HIV进一步蔓延,保护HIV感染高发区妇女及儿童的健康.
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输血传播病毒(TTV)与原发性肝癌关系的研究
目的了解输血传播病毒(TTV)与原发性肝癌的关系.方法选择原发性肝癌48例(实验组)、非肝癌恶性肿瘤46例(对照1组)和正常体检人员58例(对照2组),检查3组中TTV-DNA感染情况,进行病例对照研究.TTV-DNA检查用套氏PCR方法.结果实验组TTV-DNA阳性率29.17%(14/48),对照1组和对照2组阳性率分别为13.04%(6/46)、13.79%(8/58).实验组与对照1组和2组相比接近显著性差异水平(x2=3.646,P=0.056;x2=3.774,P=0.052).结论TTV在原发性肝癌患者中检出率高,与正常对照组和非肝癌恶性肿瘤对照组相比接近显著性差异,TTV可能是原发性肝癌的一个致病因子.
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TLMV的初步流行病学调查
目的克隆中国株TTV样微小病毒(TLMV)的基因序列,进行初步流行病学调查.方法取门诊及住院患者和健康献血员151例,采静脉血5 ml,分离血清制备DNA模板,进行PCR扩增;将PCR产物电泳图在GIS凝胶成像系统上分析.结果提示健康献血员、丙型肝炎患者及慢性乙型肝炎患者体内TLMV含量较高.甲型肝炎、戊型肝炎、未分型肝炎及酒精性肝炎患者体内TLMV含量较低.结论中国人群体内存在TLMV感染.
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孕产妇血清和乳汁及新生儿脐血中输血传播病毒的感染状况
输血传播病毒(TTV)是一种新型病毒,因其结构与VB19病毒相似,可能影响胚胎发育,造成流产或新生儿异常[1].在不同人群中普遍存在着TTV感染,包括正常人群、献血员、静脉毒瘾者、各型肝炎患者、血液透析者等[2,3].我们对224例健康孕产妇的静脉血、乳汁及其新生儿脐带血标本进行TTV检测,以探讨孕产妇这一特殊人群的感染率及其在母婴间是否存在着相关传播关系.
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单一TTV急性感染患者肝组织学特点及Fas/FasL的表达
研究单一TTV急性感染患者肝组织病理损害特点及与Fas/FasL表达的关系.对某职业学校TTV感染流行期间18例住院确诊患者肝活检组织,采用HE、浸银Gomori染色及免疫组织化学染色方法进行观察.18例肝穿刺标本中出现汇管区炎14例(77.8%),胆小管损害6例(33.4%),肝小叶内灶状坏死7例(38.9%),小泡性脂肪变(微脂滴)3例(16.7%),汇管区纤维化2例(11.1%).免疫组化检测显示:77.8%病例肝组织不同程度Fas检测阳性,较密集分布在坏死区及汇管区旁.61.1%病例肝细胞不同程度FasL检测阳性,其炎性坏死区的单个核细胞多有FasL的表达.Fas/FasL表达阳性的肝细胞分布方式及表达程度有明显一致性.单一TTV感染可致患者肝组织轻度炎性病变,其特征是汇管区炎及胆小管损害.Fas/FasL介导的细胞凋亡机制可能参与了TTV致肝组织损害的过程.
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原位杂交证实TTV相关肝炎的病理研究
探讨TTV相关肝炎的病理变化.原位杂交法检测59例血清TTV阳性者肝组织TTVDNA.TTV 阳性与阴性组ALT、HAl比较无显著差别;TTV阳性组界面性炎症、融合性坏死、灶性坏死、汇管区炎与分级相关系数分别为0.872,0.880,0.824,0.943.虽然TTV存在嗜肝性,但其致病性尚不明确.
