首页 > 文献资料
-
Y染色体微缺失和精子染色体非整倍体与不育关系的探讨
目的:探讨Y染色体AZF区微缺失和精子染色体非整倍体与男性不育的关系.方法:采用多重PCR-凝胶电泳技术对32例男性不育患者AZF 4个区15个序列标签位点(STS)进行微缺失检测,并应用X、Y、18号染色体探针对其中16例弱精子症患者和8例健康男性进行三色荧光原位杂交,分析精子染色体非整倍体.结果:32例患者中4例在AZF区有微缺失,缺失率12.5%.病例组计数47 691个精子,对照组计数28 952个精子,杂交率分别为99.53%和99.93%.非整倍体主要类型为YY18、XX18、XY18、Y1818和X1818.病例组依次为(0.102±0.154)%、(0.103±0.073)%、(0.273±0.278)%、(0.381±0.493)%和(0.318±0.585)%,非整倍体率为5.64%;对照组则为(0.050±0.040)%、(0.030±0.031)%、(0.098±0.080)%、(0.093±0.087)%和(0.085±0.106)%,非整倍体率为4.28%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论:Y染色体AZF区域发生微缺失和精子染色体非整倍体增加可能是男性不育的重要病因之一.
-
人精子荧光原位杂交技术与男性不育
研究人类精子染色体非整倍体是当今生殖医学领域的又一热点.早在1978年人们就用去透明带的仓鼠卵做精子穿透试验,进行精子非整倍体的研究,此项研究方法学复杂,不适合大样本量研究.近十年来应用荧光原位杂交(fluores-cence in situ hybridization,FISH)技术可以对成千上万条精子进行检测,大大促进了精子非整倍体的研究.这项技术已用于许多男性不育的非整倍体率的研究.初的研究使用单色探针,其缺陷是不能区分精子染色体二体和二倍体.双色FISH就可鉴别二体和二倍体精子,近来的研究采用多色FISH,同时对精子的多条染色体进行非整倍体的研究,能够更全面地了解非整倍体率与男性不育的关系.
-
精子染色体检测的研究进展
男性不育症病因包括少精子症、弱精子症、畸形精子症、无精子症及抗精子抗体所致的免疫性不育等,其中少、弱、畸形精子症患者较为多见,其染色体异常是引起不育、流产、死胎、先天缺陷、脑发育迟缓的一个重要原因[1].因为绝大多数染色体异常是在减数分裂过程中产生的,因此,直接对成熟的精子进行染色体分析,有助于发现染色体异常的机制和各种影响因素的作用,对制订相应的预防策略具有重要意义.本文对近年来精子染色体检测技术的研究概况综述如下.
-
FISH技术检测人精子染色体实验及影响因素
荧光原位杂交(FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术.随着分子生物学技术的发展,FISH技术也在不断发展和进步,其应用领域也在不断扩展和延伸.我们应用FISH技术对重金属铅、锰职业接触者的精子染色体进行实验研究,其实验程序为精子标本制备-精子核去凝集-荧光原位杂交-精子染色体分析.现将实验过程及影响因素进行分析总结.
-
环磷酰胺体外对人精子诱变性研究
目的: 探讨环磷酰胺(CP)在体外测试系统中对人精子的诱变性. 方法: 使用不同浓度的CP与人精子和代谢活化酶作用3h,再与地鼠卵体外授精,研究精子染色体和2细胞胚微核诱变作用. 结果: CP有损伤精子染色体和诱发2细胞胚微核作用. 结论: CP在代谢活化酶作用的离体测试系统中,对人精子有诱变性,应慎用.
-
采用TUNEL检测人精子凋亡及其初步应用
在不育、职业性毒物接触和吸烟男性均发现精子凋亡增多[1,2].目前,国外报道的精子凋亡检测方法主要有精子染色体结构检查(SCSA)、TdT介导缺口末端原位标记法(TUNEL)、吖啶橙染色(AOT)、彗星实验等[3].我们应用二氨基联苯胺(DAB)显色TUNEL方法检测精子凋亡,探讨其在精子凋亡临床和基础研究中的应用.
-
47,XYY综合征患者精子染色体的FISH研究
目的 分析47,XYY 综合征患者的精子染色体组成,评估其子代染色体异常的风险.方法 采用多色荧光原位杂交(FISH)技术,利用CSPX、Y、18 及GLP13、21 探针和精子核杂交,杂交信号归类计数,与对照进行统计学分析.结果 经χ2检验和Fisher精确概率检验,47,XYY 患者的精子常染色体异常数明显高于正常对照(P＜0.05),性染色体异常数与正常对照相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 47,XYY患者不增加其子代性染色体异常的风险,而常染色体发生次级不分离的风险却远高于对照.因此,通过应用FISH技术分析该类患者的精子染色体,可为评估其子代染色体异常风险提供客观的实验数据.
-
中药治疗对精子非整倍体率及辅助生殖结局的影响
目的研究中药治疗对少弱畸形精子症患者的精子染色体非整倍体率及辅助生殖技术（as‐sisted reproductive technology ，ART ）结局的影响。方法将58例要求接受 ART 的少弱畸形精子症患者随机分为试验组和对照组。试验组26例，采用生精汤治疗3个月后进行精子染色体分析，再接受辅助生殖治疗；对照组32例，直接进行辅助生殖治疗，2组均采用卵胞质内单精子显微注射（intracyto‐plasmic sperm injection ，ICSI）受精方式，观察2组的受精率、卵裂率、优胚率、可用胚胎率、妊娠率及流产率。结果治疗前，试验组和对照组的精子非整倍体率分别为2.3％和2.1％，差异无统计学意义。治疗后，试验组经复查，精子染色体非整倍体率为1.7％，与治疗前相比，差异有统计学意义（P ＜0.05）；试验组和对照组的受精率分别为82.55％和80.80％，卵裂率分别为99.25％和98.77％，优胚率分别为24.91％和24.07％，可用胚胎率分别为76.23％和70.68％，妊娠率分别为57.69％和31.25％，流产率分别为7.70％和12.50％，种植率分别为38.98％和22.20％，其中妊娠率和种植率2组间差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论中药治疗可降低精子染色体非整倍体率，改善辅助生殖技术的结局。
关键词： 中药 精子染色体 非整倍体 辅助生殖技术 卵胞质内单精子显微注射 -
引物介导的原位DNA合成技术及其在精子染色体非整倍性研究中的应用
对引物介导的原位DNA合成技术及其在精子染色体非整倍性研究中的应用作一综述.PRINS技术是一种新的分子细胞遗传学方法,因该法能提供快速(1～4h)、准确及高效的结果,正作为荧光原位杂交的替代或补充方法在人类染色体研究中加以应用.
-
应用荧光原位杂交技术对精子染色体非整倍性的研究
目的探讨人类精子染色体数目异常与自然流产的相关性. 方法采用多色荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)方法,利用CEP(chromesome enumeration DNA probes)X、Y、18及LSI(locus specific identifier DNA probes)13、21两种探针混合液与二硫苏糖醇处理过的自然流产者丈夫的精子核杂交,记数杂交信号,与对照组进行比较.结果经卡方检验,自然流产组丈夫精子染色体X、Y、18、13、21双体型及其它数目异常明显高于正常对照组(P<0.005),说明流产者丈夫精子染色体异常是流产的重要原因之一.结论 FISH技术是一种快速、准确、简单、实用性强的检测精子染色体的好方法.
-
人精子与外周血淋巴细胞染色体着丝粒点的对比研究
染色体着丝粒点(centromeric dots,Cd)结构研究从80年代初,Moroi等[1]发现硬皮病患者血清中存在自身抗着丝粒点抗体(ACA),从而建立Cd结构的免疫荧光技术.目前国内外已有近30余篇有关Cd结构的研究报道[2-7].然而,这部分研究均以体细胞为对象,尚未见正常男性精子染色体Cd结构的研究报道.我们对正常男性精子和外周血淋巴细胞染色体Cd结构进行分析和比较研究,探讨Cd结构变化在体细胞和生殖细胞是否一致,从而从一个侧面完善对着丝粒点的研究.
-
畸形精子症患者精子染色体非整倍体的研究
目的:研究畸形精子症患者精子染色体的非整倍体率.方法:应用18号、X和Y染色体着丝粒探针,采用荧光原位杂交(FISH)技术比较畸形精子症患者(畸精组,n=18)和生育力正常且精子正常形态率、浓度、活力等均正常男性(对照组,n=5)精子中18号、X和Y染色体的非整倍体率.结果:畸精组共计数精子58178条,对照组共计数精子16369条.畸精组和对照组杂交效率分别为97.5％和98.3％；染色体非整倍体类型主要有二体(XX 18、YY18、XY18、Y1818和X1818)和二倍体(1818XX、1818YY、1818XY).畸精组和对照组的18号染色体二体率分别为0.29±0.16％和0.03±0.02％,性染色体二体率分别为0.65±0.24％和0.05±0.02％,二倍体率分别为0.14±0.12％和0.04±0.03％.18号、X和Y染色体非整倍体率组间均有统计学差异(P＜0.05).结论:与生育力和精液各参数均正常男性相比,畸形精子症患者18号、X和Y染色体非整倍体率明显升高.
关键词： 畸形精子症 荧光原位杂交(FISH) 精子染色体 非整倍体 -
甘油冷冻保护剂及冷冻降温速度对人精子功能及染色体的影响
为研究冷冻对人精子生育力及染色体的影响.本实验选用健康、已生育、25～35岁男性供精者的精液,以7.5%的甘油作冷冻保护剂,通过冷冻前后精液常规分析、穿卵试验、染色体核型分析,发现在冷冻-复苏后,精子活动率、穿卵率均有一定程度下降,精子染色体数目和结构异常的发生频率冻贮前后无显著差异.但在活力好、具有生育能力的精子中,携X-染色体的精子与携Y-染色体的精子所占比例发生了显著改变,由冻前的X:Y＝50:50变成冻后的60.85:39.15.
-
冷冻人精子的染色体畸变分析
背景与目的: 人精液冷冻是辅助生殖技术的重要环节.自国家批准设立人类精子库,冷冻精子在辅助生殖中大量应用,对冷冻保存后人精子染色体的畸变研究就更加重视.本文就冷冻保护剂(Cryoprotective mediem,CPM)对人精子染色体畸变进行了分析.材料与方法: 分为4个冷冻保护剂组.Ⅰ组:甘油-卵黄柠檬酸型(G-Y-C);Ⅱ组:甘油-蜂蜜型(G-H);Ⅲ组:甘油-HEPES-HTY型(G-H-H);Ⅳ组:甘油-Tyrede型(G-T).将加入CPM的人精子采用缓冻法处理,于冻后半年取出,以37 ℃水浴复温后作人精子染色体畸变分析.结果: 4组CPM的精子染色体断裂率和畸变率均没有显著提高(P>0.05).结论: 这4种CPM在临床上应用是可靠的.
