首页 > 文献资料
-
氯化甲基汞对大鼠大脑即早基因表达的影响
[目的] 研究即早基因(IEG)在氯化甲基汞神经毒性机制中的作用.[方法] 应用Fos和Jun蛋白免疫组织化学方法,对腹腔注射氯化甲基汞(0.6 mg/kg及6.0 mg/kg)的大鼠不同脑区c-fos,c-jun表达水平进行观察.[结果] 经图像分析及统计检验结果显示,急性染汞2 h后,大鼠脑组织皮层、海马CA3区及小脑的Fos、Jun表达的阳性面积比[Aa(%)]、平均灰度和阳性细胞个数(n)3个参数与对照组相比,差异有显著性(P<0.05),即染汞组IEG表达高于对照组.例如:高剂量组、低剂量组和对照组在海马CA3区的Fos表达的平均灰度分别为136±8,149±14,178±15.[结论] 提示第三信使IEG作为转录调控因子参与了氯化甲基汞对中枢神经损害的毒性过程.这对深入阐明汞神经毒性的分子机制提供了一定的实验依据.并建议将IEG作为氯化甲基汞神经毒性检测和评价的效应指标.
-
28 d灌胃给予氯化甲基汞对Wistar雌性大鼠免疫系统影响的研究
目的 研究氯化甲基汞对雌性大鼠免疫系统的影响.方法 将Wistar雌性大鼠随机分为3组:分别灌胃给予0(对照组)、0.75(低剂量组)和1.5(高剂量组)mg/(kg· BW)氯化甲基汞,连续进行28 d.实验结束后,取血并处死实验动物,对脏器称重计算脏器系数,并进行全血和脾淋巴细胞分型、ConA诱导淋巴细胞转化实验以及抗体生成细胞检测(PFC)等相关免疫检测.结果 0.75和1.5 mg/(kg·BW)组与对照组比较,肝脏系数均降低,肾脏系数均升高;全血淋巴细胞分型中,1.50 mg/(kg·BW)组CD4/CD8的比值降低,B细胞的比例升高;脾淋巴细胞分型中0.75 mg/(kg· BW)组B细胞比例降低,1.50 mg/(kg·BW)组CD4/CD8细胞比值降低、NK细胞比例升高;0.75和1.50 mg/(kg· BW)组PFC检测结果显著降低.结论 经口28 d连续给予一定剂量氯化甲基汞可对雌性大鼠产生免疫毒性作用.
-
宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力和海马神经元超微结构的影响
目的研究宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力及海马神经元超微结构的影响.方法对妊娠7～10天的小鼠每天灌胃给予0和4mg/kgbw氯化甲基汞.以出生6周龄仔鼠进行学习记忆能力测试及透射电镜技术观察宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力及海马神经元超微结构的影响.结果氯化甲基汞暴露组学习记忆能力显著低于对照组(P<0.05).超微结构显示海马神经元细胞膜结构不清,部分核膜消失,核膜皱缩,核孔不清,染色质淡染;线粒体肿胀变大、粗面内质网扩张、空泡变性,核糖体减少;轴突环出现分层;有髓神经纤维脱髓鞘、板状分离.结论甲基汞可致小鼠学习记忆障碍和海马神经元超微结构改变;宫内接触氯化甲基汞引起海马神经元超微结构的改变与小鼠学习记忆障碍密切相关.
-
甲基汞对脑神经胶质细胞凋亡及c-fos表达的影响
为探讨氯化甲基汞(MMC)所致脑发育损伤及其与c-fos表达的关系,采用光镜、电镜等形态学方法,观察了MMC对体外培养的大鼠脑神经胶质细胞的损害作用,并应用免疫细胞化学方法(SP法)观察MMC对培养神经胶质细胞c-fos 表达的影响.结果表明,体外培养的胶质细胞接触MMC后,出现胞浆浓缩、轴突回缩、染色质边聚、固缩等现象,呈凋亡的典型形态.MMC 0.02 mmol/L作用于神经胶质细胞10 min后,c-Fos蛋白阳性细胞百分率随其后的培养时间而变化:c-Fos蛋白阳性细胞率0.5 h开始增高,2 h达高峰,4～6 h又逐渐减少.MMC 0.00125、0.005、0.02、0.08和0.32mmol/L作用10 min后,0.32 mmol/L组的阳性率显著高于除0.08 mmol/L组外的其他各组(P<0.01).提示MMC可诱导体外培养大鼠脑神经胶质细胞c-fos表达,并诱发其凋亡.MMC诱发神经细胞凋亡可能与c-fos介导有关.
-
枸杞多糖对新生鼠氯化甲基汞慢暴露染毒致成年期生育能力下降的干预作用
目的：探讨早期低剂量接触氯化甲基汞（ Methyl Mercury Chloride ， MMC）对大鼠生殖功能和生长发育的影响以及枸杞多糖（ Lycium Barbarum Polysaccharides ，LBP）的早期干预。方法：将60只健康7日龄大鼠随机分为对照组（ CON）、MMC组、MMC＋LBP组、LBP组，MMC组和MMC＋LBP组均颈部皮下注射MMC，CON组颈部注射相同剂量的生理盐水， MMC＋LBP组同时喂养LBP，雌雄合笼，自然观察各组体重发育以及生殖繁育能力以及子代仔鼠早期生长发育和存活状况。再将已孕母鼠哺乳期仔鼠染毒，观察母鼠产仔情况。结果：1）MMC组毛色萎缩，精神状态倦怠、动作不活泼、食欲不振。2）MMC组生长较缓慢且随染毒时间的延长而明显。3）MMC组染毒大鼠未产仔，MMC＋LBP组有产仔，但产死率高、出生后存活率低于CON；LBP组产死率较CON低。4）MMC＋LBP组有畸胎，且仔鼠出生体重与正常CON和LBP组仔鼠出生体重有统计学意义（P＜0.01）。5）染毒仔鼠影响其已孕母鼠再次生育。结论：MMC对大鼠有生殖发育毒性，LBP可抑制MMC引起的生殖毒性。
-
枸杞多糖对氯化甲基汞诱导海马神经干细胞损伤的保护作用
目的 观察分析枸杞多糖对氯化甲基汞所诱导神经干细胞(NSCs)损伤的影响.方法 取孕16 d SD大鼠胚胎的海马组织,分离纯化得到海马NSCs.将纯化后的海马NSCs增殖、生长10 d后,按随机分组方法 将其分为空白对照组(DMEM/F12培养基);枸杞多糖组(DMEM/F12培养基+枸杞多糖);氯化甲基汞组(DMEM/F12培养基+氯化甲基汞);氯化甲基汞+枸杞多糖组(DMEM/F12培养基+氯化甲基汞+枸杞多糖).分别测定各组生长环境中的海马NSCs分化、生长的情况,观察分析氯化甲基汞对海马NSCs的损伤作用,以及枸杞多糖干预后对海马NSCs的影响.结果 氯化甲基汞组和空白对照组比较,加入氯化甲基汞后的海马NSCs分化后的神经元比例(3.63%±0.62%)和神经元的周长(63.36μm ±5.57 μm)都较空白对照低;枸杞多糖组和其他各组比较,海马NSCs分化后的神经元比例(7.75%±0.59%)和神经元的周长(253.3μm ±11.21μm)都较其他各组高;氯化甲基汞+枸杞多糖组和氯化甲基汞组比较,前者生长环境下的海马NSCs分化后的神经元比例(5.92%±0.98%)和神经元的周长(111.9μm ±6.07μm)较氯化甲基汞组高.结论 氯化甲基汞对海马NSCs的分化、生长具有损伤作用;枸杞多糖可以减轻氯化甲基汞对海马NSCs的损伤作用,并能促进海马NSCs向神经元的分化及神经元的生长.
-
氯化甲基汞对秀丽隐杆线虫运动和感觉功能的影响
目的 分析神经毒物氯化甲基汞对模式生物秀丽隐杆线虫运动和感觉行为的影响,初步探讨利用秀丽隐杆线虫研究氯化甲基汞神经毒性的可能性.方法 采用氯化甲基汞对L1期、L4期幼虫分别急性(30 min)染毒[终浓度分别为0(溶剂对照)～202.5 μmol/L和0～1 200 μmol/L]和慢性(24 h)染毒[终浓度分别为0(溶剂对照)～80 μmol/L和0～ 150.μmol/L].测定半数致死浓度(LCs0)及行为学指标.结果 氯化甲基汞致L1期、L4期秀丽隐杆线虫的LC50(30 min)分别为(65.93±8.89) μmol/L和(206.71±35.43) μmol/L,LC50(24 h)分别为(11.59±0.79) μmol/L和(24.89±4.88) μmol/L,L1期秀丽隐杆线虫对氯化甲基汞的毒性较L4期敏感.随着氯化甲基汞暴露剂量的升高,急性和慢性染毒L1期、L4期秀丽隐杆线虫的弯曲频率和头部摆动频率均呈下降的趋势,基本运动能力呈减弱趋势,触碰反应呈迟钝的趋势.结论 氯化甲基汞可抑制运动和感觉功能,秀丽隐杆线虫可用于氯化甲基汞神经毒性的研究.
-
氯化甲基汞对APL模型裸鼠的作用研究
目的 研究氯化甲基汞(MMC)对急性早幼粒细胞性白血病(APL)模型裸鼠的作用.方法 去除免疫力BALB/C裸鼠经3 Gy 60Co照射10 min,尾静脉接种5×107/ml对数生长期NB4细胞0.1 ml,建立APL裸鼠模型.隔2日灌胃给予10 mg/kg(0.1 ml/10 g)的MMC或三氧化二砷(ATO)(ATO作抗癌阳性对照),探讨MMC对APL裸鼠白细胞计数及分类、脾/体比值及生存期等的影响.结果 MMC能降低APL裸鼠的白细胞计数、白血病细胞比例及脾/体比值,延长APL裸鼠生存期,且与APL对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 4MMC对APL裸鼠各项指标有一定影响,可通过进一步的机制研究探讨将其用于治疗.
-
氯化甲基汞蓄积对成年大鼠脑组织中Aβ1-42的影响
目的 探讨不同剂量氯化甲基汞蓄积时长差异对成年大鼠记忆力及脑组织中Aβ1-42的影响.方法 通过灌胃给予大鼠不同剂量的氯化甲基汞,采用水迷宫观察大鼠记忆力变化,采用免疫组织化学方法观察不同时间点各组大鼠脑组织中Aβ1-42的变化.结果 氯化甲基汞明显增加学习及记忆潜伏期,并增加了脑组织内β淀粉样蛋白沉积,大剂量组与其他各组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且与汞蓄积量明显相关.结论 氯化甲基汞促进Aβ1-42在脑组织中沉积是引起认知损害的机制之一.
-
氯化甲基汞对成年大鼠脑组织中GFAP和MBP的影响
目的：探讨不同剂量氯化甲基汞蓄积对成年大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的影响。方法120只 SD大鼠随机分为正常对照组、氯化甲基汞小剂量组(0.5 mg/kg )、氯化甲基汞中剂量组(1.0 mg/kg )、氯化甲基汞大剂量组(2.0 mg/kg)。每天灌胃1次,连续染毒,各组染毒时间分别为1、2、4周。采用免疫组织化学方法观察不同时间点各组大鼠脑组织中 GFAP、MBP的变化。结果各染毒时间组中氯化甲基汞剂量增加,大鼠脑组织 GFAP表达升高和 MBP表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。同一剂量组不同染毒时间比较,随染毒时间延长,GFAP表达升高；MBP表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论氯化甲基汞促进星形胶质细胞增殖,破坏髓鞘,并与汞的蓄积量与染毒时间相关。
-
甲基汞对培养大鼠脑神经细胞损伤的影响
目的通过体外实验探讨氯化甲基汞(methylmerculy chloride,MMC)所致脑发育损伤及其与c-fos表达的关系.方法采用形态学试验方法,观察MMC对体外培养大鼠脑神经细胞的损害作用,并应用免疫细胞化学方法观察MMC对神经元、神经胶质细胞c-fos表达的影响.结果体外培养的神经细胞接触0.3μmol/L MMC后,出现胞浆浓缩、轴突回缩,染色质边聚、固缩等现象,呈凋亡的典型形态.神经细胞培养体系中加入0.3μmol/L MMC持续作用后,神经元和神经胶质细胞中c-fos阳性细胞率在0.5h开始增高,并随时间的延长而增加,2h以后维持较高水平.培养细胞接触MMC 10min、2h、6h后,实验组神经元c-fos阳性表达率分别为8.78%,68.26%,64.96%,神经胶质分别为7.74%,66.61%,72.52%.结论 MMC可诱导体外培养大鼠脑神经细胞c-fos高表达,并诱发其凋亡.MMC诱发神经细胞凋亡可能与c-fos介导有关.
-
氯化甲基汞致脑发育损伤形态学研究
目的:探讨氯化甲基汞(MMC)致大鼠不同发育阶段脑组织形态结构改变.方法:雌性Wistar大鼠体重(120±20)g,随机分为3个实验组和对照组各30只.3个实验组母鼠从妊娠前90天至仔鼠出生后30天连续喂饲含有不同剂量(0.75、1.50和3.00 mg/kg)MMC的普通饲料,对照组给予普通饲料.脑切片经苏木精-伊红染色,在光镜下观察长期接触低剂量MMC仔鼠脑组织形态结构.采用荧光原位末端标记法,在激光共聚焦显微镜下计数两组生后不同时间点仔鼠大脑、小脑和海马发生凋亡的神经元,以PCD阳性率表示凋亡的多少.结果:在实验设计的接触剂量下,仔鼠大脑、小脑和海马神经元体积缩小、固缩,核染色质致密等凋亡形态特征.实验组和对照组生后不同时间点仔鼠脑神经元都存在凋亡.结论:大鼠长期低剂量接触不同浓度MMC可使其生后仔鼠大脑、小脑和海马部分神经元出现凋亡形态学改变,随仔鼠脑汞含量升高神经元凋亡率明显增加.
-
氯化甲基汞对发育阶段大鼠小脑PKCδmRNA及蛋白表达的影响
目的：观察氯化甲基汞对发育大鼠小脑中 PKCδmRNA及蛋白表达的影响。方法：建立发育大鼠小脑甲基汞损伤实验模型。采用核酸原位杂交方法（ In Situ Hybridization ， ISH ）检测δ型蛋白激酶C（ PCKδ） mRNA表达。采用Western blot方法检测PKCδ蛋白表达。结果：实验组和对照组仔鼠在出后就即可检测到小脑蒲肯野细胞PKCδ表达，且随生后时间延长表达水平虽有增高但幅度很小。各实验组仔鼠脑汞含量明显高于对照组，且实验组小脑蒲肯野神经元PKCδmRNA表达阳性率及小脑组织胞浆和胞膜PKCδ蛋白表达水平显著升高（ P＜0．05）。结论：氯化甲基汞以剂量依赖方式和时间依赖方式促进仔鼠小脑蒲肯野细胞PKCδmRNA及蛋白表达。PKCδ亚类可能是甲基汞介导神经毒作用的关键靶分子。
关键词： 氯化甲基汞 脑发育 PKCδexpression -
氯化甲基汞对仔鼠小脑PKCα mRNA表达的影响
目的:观察氯化甲基汞对仔鼠小脑中PKCα mRNA表达的影响.方法:建立氯化甲基汞致仔鼠小脑发育损伤大鼠实验模型.采用核酸原位杂交方法检测α型蛋白激酶C(PCKα)mRNA表达.结果:和对照组相比,各实验组仔鼠在出生后3天至出生后30天,小脑蒲肯野细胞PKCα mRNA表达均明显增高.小脑蒲肯野细胞PKCα mRNA表达随出生后时间的延长,其表达量逐渐增多.并且氯化甲基汞浓度与PKCα mRNA表达量呈正比,随氯化甲基汞浓度增高,小脑蒲肯野细胞PKCα mRNA表达明显增多.结论:氯化甲基汞以剂量依赖方式和时间依赖方式促进仔鼠小脑蒲肯野细胞PKCα mRNA表达.氯化甲基汞可通过上调神经元中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶促进小脑神经元凋亡进而损伤中枢神经系统.
-
氯化甲基汞诱导大鼠不同发育阶段脑神经细胞凋亡
目的:通过观察氯化甲基汞(MMC)诱导大鼠不同发育阶段脑神经细胞凋亡,揭示甲基汞致脑发育损伤的分子机制.方法:建立长期接触低剂量氯化甲基汞致脑发育损伤大鼠动物实验模型.采用荧光标记DNA片段分析试剂盒ApoAlertTM DNA Fragmentation Assay Kit检测长期接触低剂量氯化甲基汞对不同发育阶段仔鼠不同脑区(大脑、小脑和海马)神经元凋亡的影响.结果:实验组和对照组出生后不同时间点仔鼠脑神经元都存在凋亡.随仔鼠脑汞含量的增加,大脑、小脑和海马神经元凋亡均明显增加(P＜0.05).结论:长期接触低剂量氯化甲基汞致脑发育损伤与其诱导神经元过渡凋亡有关.
-
氯化甲基汞诱导NCI-H446细胞凋亡的体外实验研究
目的 探讨氯化甲基汞(MMC)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的可能机制.方法 通过分子生物学方法,检测调控细胞凋亡的关键基因Bcl-2、Bax和caspase-3在mRNA水平的表达情况.结果 MMC组细胞Bcl-2 mRNA水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至24 h达到低;Bax及caspase-3 mRNA水平高于对照组,并存在着时间依赖性增高趋势,至24 h达到高.结论 MMC能够在体外诱导NCI-H446细胞发生凋亡.
关键词： 氯化甲基汞 NCI-H446细胞 细胞凋亡 -
氯化甲基汞抗裸鼠皮下U251胶质瘤细胞的体内实验研究
目的 在建立裸鼠皮下U251胶质瘤模型基础上,通过体内实验及相关形态学研究,分析氯化甲基汞(MMC)的抗脑胶质瘤作用.方法 制备裸鼠皮下U251胶质瘤模型,随机分为对照组和实验组,实验组裸鼠注射U251脑胶质瘤细胞1 w后,每天灌胃给予10 mg/kg体重MMC,连续5 d,对照组给予相同体积的生理盐水.全部裸鼠于肿瘤接种后14 d处死.结果 大体病理显示实验组肿瘤体积明显小于对照组,病理组织学观察发现实验组U251胶质瘤细胞生长密度较对照组低,并可见细胞体积变小、核固缩等凋亡的形态学改变.透射电镜显示实验组肿瘤细胞发生核固缩、染色质周边化、核断裂、胞浆空泡变性等改变,实验组瘤体汞含量明显高于对照组.结论 MMC对裸鼠U251胶质瘤细胞增殖具有明显的抑制作用,其机制可能是通过诱导胶质瘤细胞凋亡实现的,相关分子机制有待进一步深入研究.
-
氯化甲基汞诱导脑胶质瘤细胞凋亡的形态学变化及意义
目的:通过观察氯化甲基汞(MMC)诱导大鼠脑胶质瘤细胞凋亡的形态学改变,探讨MMC的抗脑胶质瘤作用.方法:制备大鼠脑胶质瘤动物模型,将造模成功的大鼠随机分为对照组和实验组,实验组大鼠注射C6脑胶质瘤细胞1周后,每天灌胃给予10 mg·kg-1 MMC,连续5 d;对照组给予相同体积的生理盐水.除自然死亡外,其余存活大鼠在第24天全部处死,取大鼠脑组织,光镜及透射电镜观察其病理组织学改变.结果:大体病理显示,实验组大鼠肿瘤体积明显小于对照组;光镜下显示,实验组大鼠C6胶质瘤细胞生长密度低于对照组,并可见细胞体积变小、核固缩深染的凋亡形态学改变细胞.透射电镜显示,实验组大鼠肿瘤细胞发生核固缩、染色质周边化、核断裂、胞浆空泡变性等改变;对照组大鼠肿瘤细胞核体积增大,外形不规则,核常染色质为主,核仁突出.结论:MMC具有抑制大鼠体内C6胶质瘤增殖的作用,其机制可能是通过诱导胶质瘤细胞凋亡实现.
-
氯化甲基汞对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响
目的:探讨氯化甲基汞(MMC)对发育大鼠小脑组织转录因子CREB DNA结合活性的影响.方法:将妊娠大鼠于妊娠7～10 d连续4 d每日灌胃给予氯化甲基汞4 mg*kg-1,取生后1、3、7、14 d大鼠小脑组织提取核蛋白.采用凝胶移位法观察MMC对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响.结果:对照组和实验组各发育阶段小脑组织CREB在凝胶移位电泳中均呈现两条迟滞带;对照组和实验组P1-7大鼠幼仔小脑CREB DNA结合活性随生后发育时间延长呈下降趋势;实验组大鼠幼仔小脑CREB DNA结合活性均高于相应对照组.结论:CREB参与大鼠脑发育的调节;甲基汞所致发育脑组织损伤可能与其引起CREB DNA结合活性升高有关.
关键词： 氯化甲基汞 CREB DNA结合活性 发育脑 -
氯化甲基汞对不同发育阶段小鼠脑组织神经元c-fos基因表达的影响
目的:探讨氯化甲基汞(Methylmercury chloride,MMC)对不同发育阶段小鼠大、小脑组织神经元c-fos表达的影响.方法:选用1、4、8、16、28天龄和成年(P1、P4、P8、P16、P28、AD)雄性昆明系小鼠,实验组腹腔注射10 mg*kg-1 MMC,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,染毒后各天龄组小鼠按下述时间点在麻醉状态下取脑组织, P8组小鼠在30、45、60、120和180 min时间点及其余各组在45 min时间点迅速取脑组织,常规石蜡包埋,采用原位杂交法观察MMC对大、小脑神经元c-fos基因表达的影响.结果:P8小鼠大脑和小脑c-fos mRNA阳性细胞率在第30分钟时开始增加,45 min时间点高,随着时间的延长逐渐减少;P8实验组45 min阳性表达率小脑高于大脑(P<0.05);45 min时间点实验组大脑和小脑c-fos mRNA阳性细胞率随小鼠天龄的增加而减少;P1、P4、P8天龄组大脑阳性细胞率高于对照组高(P<0.05);P1、P4、P8、P16、P28天龄组小脑阳性细胞率高于对照组 (P<0.05).结论: MMC可诱导小鼠大、小脑神经元c-fos基因表达,这可能是MMC神经损伤的机理之一.
