多重荧光定量PCR对三种主要致病性曲霉菌的检测研究
摘要： 目的 建立一种能同时鉴定烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉菌的多重荧光定量PCR诊断方法,并将之应用于侵袭性曲霉菌病的诊断研究.方法 构建多重荧光定量PCR方法,对该方法进行实验评价,并将之应用于侵袭性曲霉菌病患者的痰标本检测,初步评价该方法的临床诊断效能.结果 建立的多重荧光定量PCR方法,制定标准曲线,R2在0.989～0.999之间,斜率分别为-3.117、-3.583、-3.674；只与烟曲、黄曲、黑曲的DNA发生特异性反应,无非特异性扩增；低检测浓度为1×102孢子/ml;重复性检测试验,获得Ct值标准差为0.12～0.20,变异系数为0.37％～0.80％；对分离自26例侵袭性曲霉菌病患者的56份深部痰标本进行检测,敏感率为85.7％(48/56),特异性为92.0％(46/50),阳性预测值为92.3％(48/52),阴性预测值为85.2％(46/54).结论 研究建立的多重荧光定量PCR方法检测侵袭性曲霉菌病患者的深部痰标本有较高的敏感性、特异性和阴、阳性预测值,且快速、简便,将有助于侵袭性曲霉菌病的早期准确诊断.
-
肺的肾素-血管紧张素系统
循环肾素一血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)是重要的血压和水电解质调节系统.近年来研究发现心脏、血管壁、肾脏和脑等组织局部也具有独立的RAS,主要调节局部组织的生长和分化.我们已经认识到局部RAS在组织损伤和修复过程中起着重要作用.在肺损伤中RAS成分的表达和血管紧张素转化酶的升高提示肺存在RAS,血管紧张素Ⅱ至少在部分上介入肺损伤反应.肺循环和肺实质中局部RAS活化可能影响肺损伤的程度.RAS基因多态性研究以及与特殊表型的关系有助于我们深入了解RAS在肺部的作用,为进一步的靶向治疗提供帮助.
关键词： 肾素-血管紧张素系统 血管紧张素转化酶基因多态性 肺损伤 -
转录因子T-bet和支气管哮喘
支气管哮喘是一种以嗜酸粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞浸润为特征的慢性气道炎症,同时一系列细胞因子对这种气道炎症起到加强或消弱的作用.气道炎症是气道高反应性的基础,也是气道重塑的重要原因.Th淋巴细胞可以分化成Th1、Th2两种细胞亚群,每种细胞亚群均有特异的功能和细胞因子.Th1细胞与细胞免疫有关,介导迟发性超敏反应,保护机体不受细胞内病原体和病毒的侵袭.Th2细胞辅助B细胞功能,介导体液免疫应答,以清除蠕虫和其他细胞外的寄生虫,与移植物耐受、抑制自身免疫疾病有关.IFN-γ是Th1特征性细胞因子,Th1还产生IL-2、TNFβ,IL-4是Th2细胞相应的特征性的细胞因子,另外Th2细胞还分泌IL-5、IL-6、IL-9、IL-13[1,2],但不生成IFN-γ.IL-4促进B细胞分化合成IgE,IL-5是嗜酸粒细胞的存活发育因子[3].对于不同的免疫刺激或细胞因子,这两种Th可增高并形成免疫调控环路,即Th1分泌的细胞因子可抑制Th2细胞的活性,反之亦然.有足够的证据表明,这种调控环路的破坏可能是引起哮喘的关键所在[4,5].
-
睡眠呼吸暂停与糖代谢紊乱
睡眠呼吸暂停综合征和糖尿病都属于常见病,流行病调查和实验证据表明睡眠呼吸暂停和糖代谢紊乱相关,尽管两者之间的因果关系尚不明确,但现有的证据表明睡眠呼吸暂停与糖代谢改变独立相关,并能终发展为2型糖尿病,本文将就睡眠呼吸暂停与糖代谢紊乱的关系作一综述和探讨.
-
呼出气冷凝液中8-异前列腺素F2α的检测及其临床意义
8-异前列腺素F2α是目前研究比较多的一种呼出气中的标志物,反映了呼吸系统疾病炎症反应及氧化应激变化,有较好特异性及灵敏度.本文就呼出气冷凝液中8-异前列腺素F2α的来源、代谢、检测方法、影响呼出气中8-异前列腺素F2α水平的因素和临床意义等进行综述.
关键词： 呼出气冷凝液 8-异前列腺素F2α 呼吸系统疾病 临床意义 -
阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与慢性咳嗽
阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征是慢性咳嗽的病因之一.胃食管反流、鼻后滴流、气道炎症可能是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诱发慢性咳嗽的机制.持续气道正压通气是有效治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征所致慢性咳嗽的首选治疗方案.
关键词： 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 慢性咳嗽 诊断 治疗 -
急性肺损伤中的细胞凋亡及凋亡调控
细胞凋亡在维持机体内环境稳定,炎症细胞激活与清除,肺内细胞的增殖、发育、肺血管重建等方面,有着重要的意义.本文试图从细胞凋亡的角度对急性肺损伤的发病机理做一综述.
-
调节性T细胞在哮喘治疗中的新进展
支气管哮喘的免疫机制Th1/Th2平衡紊乱受多种因素的调节.该文主要描述了CD4+调节T细胞的两个主要亚群:自然调节性T细胞和获得性调节性T细胞,它们分别在抑制自身免疫反应和获得性免疫反应起重要作用.获得性CD4+调节T细胞又可根据分泌不同的细胞因子IL-10和TGF-β,分为Tr1型细胞和Th3型细胞.了解调节性T细胞的免疫调节机制有助于开拓哮喘治疗的新方法.
-
内皮祖细胞与呼吸系统疾病
内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一组具备相似特征的异源性异质祖细胞.这些细胞具备以下两个基本特征:表达祖细胞相关标记和具备向成熟内皮细胞分化的能力.胎儿期EPCs参与血管系统的发育.出生后,EPCs来源于骨髓干细胞池,参与内皮修复和血管生成.骨髓中的EPCs经活化、募集进入外周血中.内源性及外源性EPCs具备归巢能力,即在特定生理条件下,EPCs定向迁移至特定部位,黏附及进入血管内皮层.EPCs与呼吸系统疾病密切相关.EPCs是与呼吸系统疾病密切相关的有效生物标志物;EPCs参与呼吸系统疾病的发病,也是呼吸疾病治疗的重要靶点;外源性EPCs还是呼吸系统疾病靶向基因治疗的潜在载体.
-
NF-κB在平滑肌细胞增殖信号转导中的调控作用
平滑肌细胞过度增殖是支气管哮喘和慢性支气管炎的气道重建、动脉粥样硬化、血管成形术后再狭窄等许多疾病的重要病因,多种刺激因素如细胞因子、生长因子、炎性介质等均能诱导平滑肌细胞增殖,但平滑肌细胞增殖的信号转导途径尚不完全清楚,研究平滑肌细胞增殖的信号转导途径对于阐明这些疾病的发病机制、选择针对性的治疗方案具有重要意义.近年研究表明转录因子核因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)的激活在平滑肌细胞增殖中起着至关重要的作用,许多上游事件如丝裂素激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、磷酸肌醇-3激酶 (phosphoinositide 3-kinase,PI-3K)等均可激活NF-κB,这些信号级联反应的结果导致DNA合成增加、细胞增殖.因此探讨NF-κB的生物学特征及其在平滑肌细胞增殖信号转导过程中的调控作用,并采取适宜的干预性治疗在平滑肌增殖的疾病中具有重要意义.
-
钾通道与缺氧性肺动脉高压
钾通道在缺氧性肺动脉高压的发生中有重要地位,相关研究已成为当前热点.本文拟就肺动脉平滑肌细胞上钾通道的分类及特性、钾通道活性及表达的变化与缺氧性肺血管收缩的关系、钾通道的氧感受机制、钾通道活性的调控因素及该通道与血管活性物质的关系等方面作一综述.
