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新调素受体(ErbB2/Neu)mRNA在坐骨神经损伤后的表达
为了解新调素(neuregulins,NRGs)受体,在周围神经的损伤、溃变和再生中的作用,我们研究了当外周神经损伤后,其受体ErbB 2/Neu在坐骨神经中的表达变化.10-13周龄的大鼠20只,分A,B两组 ,每组10只.A组手术暴露右侧臀区的坐骨神经后,并切除1.5cm长的坐骨神经;B组手术暴露右侧臀区的坐骨神经后,使用平钳钳夹挤压坐骨神经10秒钟两次;两组左侧均为正常对照组.分别在4天、8天、1 2天、24天和58天处死动物,取材坐骨神经置液氮中,并提取坐骨神经的RNA,做R NAse protection方法的分析.结果:ErbB2/Neu mRNA在成年大鼠的坐骨神经正常侧表达水平低.但在坐骨神经损伤侧,ErbB2/Neu mRNA的表达水平4天后开始增高,高峰从第8 天一直维持到第58天.横切断坐骨神经组(A组)比挤压坐骨神经组(B组)表达较高的水平.挤压神经组伴随神经的再生其表达水平增加.新调素受体在成年大鼠周围神经中有表达,并与周围神经的损伤和再生相关,可能是神经损伤和再生的一种调节信号.
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TGF-β1mRNA在坐骨神经损伤后的表达
为了解T GF-β1在周围神经的损伤、溃变和再生中的作用,我们研究了当外周神经损伤后,TGF-β1mRNA在坐骨神经中的表达变化.10-13周龄的大鼠 12只,分A,B两组,每组六只.A组手术暴露右侧臀区的坐骨神经后,并切除1.5c m长的坐骨神经;B组手术暴露右侧臀区的坐骨神经后,使用平钳钳夹挤压坐骨神经10 秒钟两次;两组左侧均为正常对照组.分别在8天、24天和58天处死动物,取材坐骨神经置液氮中,提取坐骨神经的RNA,做RNAse protection方法的分析.TGF-β1mRNA在大鼠的周围神经中表达.当其坐骨神经被损伤后,引起其轴索溃变和再生的发生,在切除坐骨神经组中,远侧断端的TGF-β1mRNA水平明显增高,并一直维持其较高的水平;在挤压坐骨神经组中,早期TGF-β1mRNA的水平升高,后期TGF-β1mRNA的水平则下降.TGF-β1在大鼠周围神经的损伤、溃变和再生过程中,起着重要的传递信号作用,似乎与神经的损伤程度呈正相关.
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蛋白质组学在肺癌研究中的应用
人类基因组计划全基因组测序已完成,绘制了基因框架图,掌握了大量的基因组序列的信息并全面了解了基因组和基因表达变化的方法.由于基因的功能除了由排序决定外,还受多种因素的影响,而蛋白质代表了基因的信息,其功能一旦出现异常即可直接引发疾病,因而研究蛋白质的改变对全面了解肿瘤的发生发展有重要意义[1].
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钙激活钾通道(Maxik)的表达变化在血管老化中的意义
心血管疾病是成胁老年人生命健康的主要疾病.在发达国家,心血管疾病排在死亡原因的首位,而衰老是心血管疾病的主要危险因素.我国老年人已达一亿四千多万,占总入口的10%以上,衰老相关的疾病尤其是心血管疾病严重影响着他们的健康和生活质量.对于机体及血管老化的机制国内外学者进行了许多研究,认为与基因突变、细胞凋亡、代谢失衡及糖基化衰老等多种因素有关,但仍未有一种学说能完整阐明血管衰老的机制.近年来,离子通道成为了防治心血管疾病的研究热点,其中由于钙激活钾通道(Maxik,BKCa,S101)在调节血管张力方面起了重要作用,因而成为了热点中的热点.本文就这一通道的组成特性,作用及衰老过程中通道的表达变化做一综述.
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口腔正畸固定矫治前后龈沟液中RANKL 、OPG 表达变化的影响(附110例报告)
在口腔生长发育过程中,由牙周病、口腔不良习惯、替牙障碍、外伤等原因造成的如牙齿排列不齐、颌骨大小形态位置异常、上下牙弓牙合关系的异常和面部畸形等称为错颌畸形[1,2]。随着医学技术的发展,固定矫治得到了广泛应用,并受到了大众的认可[3]。
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外伤性眼内炎房水中细胞因子的表达变化的临床意义
目的 分析外伤性眼内炎房水中细胞因子的表达变化的临床意义,探究细胞因子在外伤性眼内炎的作用机制.方法 选取健康日本大耳白兔38只为实验对象,采用随机数字表法将其平均分为A、B两组,A组为无菌组,B组为有菌组,分别建立无菌、有菌外伤动物模型.建模成功后,通过裂隙灯和间接显微镜观察两组实验动物眼外伤炎症情况,并于6h、12h、1d、2d、4d、8d、16d时对炎症情况进行评分.待实验动物受伤眼麻醉后,于建模前和建模后6h、12h、24h、48h、4d、5d时,采用ELISA法检测房水中TNF-α、IFNγ和IL-1β的含量变化情况.结果 两组模型分别在建模24小时和12小时后出现炎症反应,第8天时,炎症反应达到高峰.两组模型自第12小时开始,炎症评分出现显著性差异(P<0.05).两组模型的TNF-α、IFN-γ和IL-1β含量在建模初期就出现升高趋势,1天时达到高值,但两组模型TNF-α、IFN-γ和IL-1β含量在各时间段均无显著性差异(P>0.05).结论 房水中TNF-α、IFN-γ和IL-1β表达的升高与炎症程度相关,抑制TNF-α、IFN-γ和IL-1β的表达,可成为抑制眼外伤炎症反应的治疗措施.
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基因芯片与中医药抗肿瘤治疗的探讨
目的:探讨基因芯片与中医抗肿瘤治疗的可能性.方法:用肿瘤表达谱芯片研究中药土贝母作用后的胃腺癌细胞株RF21的基因表达变化.结论:加药组与对照组有多条基因变化,涉及细胞凋亡、抑制血管生成、免疫抑制、影响细胞骨架诸多方面.结论:可应用基因芯片进行中医抗肿瘤研究.
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兔实验性牙移动牙周组织中VEGF受体2(VEGFR-2)的变化
VEGFR-2属于酪氨酸激酶受体家族第三亚型,与VEGF有极强的亲和力,VEGFR-2同内皮细胞分裂、重组及胚胎时期原始内皮细胞的迁移有关.VEGF通过与VEGFR-2结合对新生血管形成起调控作用.本实验通过研究兔实验性牙移动牙周组织中VEGFR-2的表达变化,探讨VEGFR-2的表达在实验性牙移动牙周组织血管改建过程中的作用.
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大骨节病关节软骨细胞形态及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅹ型胶原表型和MMP-13表达的体外研究
目的 体外培养大骨节病(Kashin-Beck disease, KBD)患者和正常对照的关节软骨细胞并对比观察细胞形态、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅹ型胶原表型及基质金属蛋白酶13(MMP-13)的表达变化,以明确KBD软骨细胞的生长特性.方法 依据我国"大骨节病临床诊断标准"和病理学变化特征,选择KBD患者为KBD组(n=8),并设立正常对照组(n=8).在无菌手术条件下采集关节软骨,胶原酶等消化、分离后进行软骨细胞培养,光镜及透射电子显微镜观察形态,免疫组织化学及流式细胞术观察细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅹ型胶原和MMP-13的体外表达变化,对比研究KBD软骨细胞表型表达的特点.结果 KBD软骨细胞内空泡及核变形现象较正常增多,并有绒毛及胶原纤维不规则排列等超微结构变化.两组间Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅹ型胶原表型表达差异显著,其中KBD组II型胶原表型表达显著低于对照组(t=-5.54, P<0.001),而MMP-13表达显著增高(t=3.70,P<0.01).结论 KBD软骨细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅱ、Ⅹ型胶原表型和MMP-13的表达不同于正常对照组,以软骨细胞的退行性和增生性变化为著.
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探讨慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子的表达变化及临床意义
目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子的表达变化及临床意义。方法选取南昌大学第一附属医院收治的慢性乙型肝炎患者40例作为观察组,所有患者均予以外周血T淋巴细胞表面CD4*、CD8*、CD4*/CD8*比值、CTLA-4等共刺激分子的表达变化测定,同时选取健康患者39例作为对照组,统计两组患者的测定结果。结果观察组中治疗组、治疗无效组、治疗有效组CD4*、CD8*T淋巴细胞亚群绝对表达量均明显下降,低于对照组(<0.05);CD8*T淋巴细胞亚群相对表达量明显高于对照组(<0.05),另外未治疗组、治疗无效组CD4*/CD8*比值明显高于治疗有效组、对照组(<0.05)。结论进行共刺激分子表达变化研究可以为慢性乙型肝炎治疗提供一定的依据,为深入评价细胞免疫功能提供了新的研究角度。
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甲胎蛋白表达变化对AFP阳性胃癌侵袭转移能力的影响
AFP阳性胃癌(APGC),又称甲胎蛋白分泌型胃癌,是一种AFP阳性表达,具有高侵袭性、易早期发生肝、淋巴结转移、预后较差的特殊类型的胃癌。本文综合前人研究成果的基础从分子生物学方面就AFP阳性表达对AFP阳性胃癌的影响进行了综述。
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大鼠弥漫性脑损伤后组织金属蛋白酶抑制剂-1的表达与神经元凋亡的关系
组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)是基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的特异性抑制剂.已有研究证实,MMP-9和TIMP-1之间的平衡参与细胞外基质的重塑,与骨关节炎、血管形成、肿瘤转移和炎症反应密切相关.笔者用实时荧光定量RT-PCR测定Marmarou弥漫性脑损伤(diffase axonal injury,DAI)模型~([1])中TIMP-1mRNA的表达变化并观察皮层神经元凋亡的变化,探讨在DAI后继发脑损伤中的作用.
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短蛋白聚糖在脑损伤后表达上调的研究进展
中枢神经系统(CNS)在损伤后常发生复杂的细胞反应,如反应性胶质细胞肥大、增生和移位;这一过程其实是机体正常的修复能力的表现.发育当中的CNS有着可溶性的细胞外基质,为各种神经细胞提供了一个可移动的环境,即成熟环境.而细胞外基质可溶性的下降,有利于神经细胞的成熟和减小轴索的继续生长;但同时也阻碍了CNS损伤后的修复过程.短蛋白聚糖(brevican)是新发现的仅存在于CNS中的一种细胞外基质成分,它在脑损伤后表达上调,参与了CNS在损伤后的修复过程.近10年来国外学者对brevican在脑发育及脑胶质瘤形成和侵袭性方面,做了大量的工作;而在CNS损伤后表达改变的研究,也仅见于脑缺血模型和针刺伤模型;国内还未见相关研究报道.下面就brevican在CNS损伤后的表达变化及意义作一回顾.
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大鼠脊髓星形胶质细胞体外划痕损伤模型的建立
星形胶质细胞(astrocytes, Ast)培养和损伤模型是体外研究中枢神经系统损伤修复的基础和热点之一.长期以来,人们对大脑皮层及其他部位的Ast在中枢神经系统损伤修复中的功能做了较多的研究,而对脊髓的Ast有关研究较少.笔者采用机械划痕的方法,制备有效的脊髓Ast体外损伤模型,以便对脊髓Ast在损伤后的基因表达变化作进一步全面分析.
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视神经损伤后睫状神经营养因子受体的表达变化
视神经创伤、青光眼等疾患主要影响视网膜神经节细胞( RGCs),RGCs的死亡是视功能发生不可逆性改变的直接原因,因此,关于RGCs存活和再生的研究一直倍受眼科界关注.近十年来的研究发现,睫状神经营养因子(CNTF)能明显促进RGCs的存活和再生[1,2].睫状神经营养因子受体(CNTFR)是CNTF的特异性结合蛋白,它的表达变化与CNTF的作用密切相关.为进一步了解CNTFR mRNA在视神经损伤及修复过程中的表达情况,笔者应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对其进行了半定量研究.
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增生性瘢痕形成和成熟过程中细胞外信号调节激酶基因表达的变化
细胞外信号调节蛋白激酶(ERKs)是一类分布于细胞质内且具有丝氨酸和苏氨酸双重磷酸化能力的蛋白激酶,主要包含两种亚型:ERK1和ERK2,它们介导的信号通路在细胞生长因子影响细胞分裂、增殖和分化的过程中起重要的作用[1].因此,笔者拟通过检测不同形成时期的增生性瘢痕中ERKs信号通路中部分信使分子的基因表达变化,初步探讨该信号通路在增生性瘢痕发生和成熟过程中的作用.
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增生性与非增生性瘢痕中细胞骨架蛋白表达差异的研究
基因芯片是近二十年发展起来的一项新技术.马兵等[1]利用基因芯片的方法,对烧伤后早期的增生性瘢痕相关基因表达变化进行筛选,发现细胞凋亡、免疫相关、细胞骨架和运动、原(抑)癌基因、细胞信号等多种基因参与了增生性瘢痕的发生 .据此,笔者利用多种原位杂交技术,系统动态地研究细胞骨架和运动基因表达变化与瘢痕组织过度收缩之间相互关系,以期为发现治疗增生性瘢痕的新方法寻求理论依据.一、材料与方法1. 标本采集:所有病例均来自重庆市各医院,男女不限,年龄2~57岁,增生性瘢痕24例,非增生性瘢痕24例,按伤后3,6,9,12个月不同时间分组编号,每个时间点分别有6例.增生性瘢痕突出皮肤1 cm以上,有典型的挛缩症状.非增生性瘢痕突出皮肤不超过0.3 cm,无收缩,另设正常皮肤对照4例.
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烧伤感染时外周血中性粒细胞CD64的表达
为探讨烧伤患者感染时外周血中性粒细胞CD64的表达变化与感染的关系,笔者进行了如下研究.
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凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax在早期压疮组织中的作用
压疮是临床上一种常见的慢性皮肤溃疡.根据美国国家压疮顾问小组的分期标准,早期压疮是指局部组织受压一定时间后皮肤出现持续非苍白性充血征象,但表皮仍保持完整的组织改变.组织受压引起的缺血缺氧是其病理演变的主要诱因.许多研究证实:缺氧组织内会发生不同程度的细胞凋亡[1],而细胞凋亡机制也是近年来组织损伤与修复领域的研究热点之一.鉴于此,本研究旨在观察早期压疮组织中细胞凋亡现象及相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化,探讨其在早期压疮形成过程中的潜在作用.
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激光捕获显微切割技术在法医物证检验中的应用
近年来,一种叫做激光捕获显微切割技术被广泛应用于肿瘤学、基因组学、蛋白组学、神经生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学等领域.激光捕获显微切割技术可以将单个细胞切割下来,为此,可以对单个细胞或同类细胞进行检测和研究.研究者可以通过显微切割技术,将癌变的细胞和正常的细胞分别分离出来,或是将不同类型的细胞分别分离下来,与基因芯片技术或是定量PCR技术相结合,比较不同类型细胞的基因表达变化.对于基因组学研究,显微切割技术可以提高突变检测的灵敏度,而使用常规的方法,可能会有很多有用的信息被淹没在了众多背景信号当中.对于蛋白组研究,显微切割技术和二维电泳、质谱技术连用,可以比较正常和病变细胞中蛋白表达的变化,同时可以避免基质细胞的干扰.