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1-32 美他多辛的一般生殖毒性
目的研究美他多辛对大鼠是否具有生殖毒性.方法按照一般生殖毒性试验规范的要求给药,各组分别灌胃给予美他多辛0、400、800、1 600 mg/kg.结果一般毒性表现:400 mg/kg组大鼠未见明显毒性反应,800 mg/kg组个别大鼠出现后肢麻痹,1 600 mg/kg组雌雄大鼠都有后肢麻痹,消瘦,增重减慢.生殖毒性:雄性800 mg/kg组附睾精子数减少,生育率降低.1 600 mg/kg组睾/体比降低,附睾精子数减少,交配率和生育率降低.雌性800 mg/kg和1 600 mg/kg组受精率、妊娠率降低.胚胎毒性:400 mg/kg组胎鼠体重减轻,800 mg/kg和1 600 mg/kg组着床前死亡率增加,胎鼠身长、尾长、体重均减小,胸骨发育迟缓.致畸性:各组均未发现外观、内脏和骨骼畸形.结论在本实验条件下,美他多辛对SD大鼠无致畸性,对成年大鼠生殖毒性的大无作用剂量为400 mg/kg,胚胎发育毒性的无作用剂量小于400 mg/kg.
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045高丽参皂苷对未成年大鼠卵巢功能的调节作用
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成年大鼠心肌微血管内皮细胞的分离与培养
目的 本文建立一种简便、高效的成年大鼠心肌微血管内皮细胞分离及培养的方法.方法 选取7~8周龄Wistar大鼠,麻醉后开胸取出心脏,采用离体心脏灌流和酶消化法进行心肌微血管内皮细胞的分离;取第3代细胞观察其增殖特征并绘制增殖曲线;用免疫细胞化学和免疫荧光对细胞的第Ⅷ因子相关抗原和CD31进行鉴定,利用基质胶检验其血管形成能力.结果 体外培养心肌微血管内皮细胞呈多边形或梭形,具有典型的铺路石样生长特点;同时,第Ⅷ因子相关抗原和CD31呈阳性;具备血管形成能力.结论 本方法培养的成年大鼠心肌微血管内皮细胞具有较高的纯度,方法简便易行,可用于心血管疾病基础及临床研究.
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提高成年大鼠神经干细胞单克隆形成率的方法
目的探索提高神经干细胞单克隆形成率的方法并证实所分离培养的神经干细胞仍具有多分化潜能. 方法对神经干细胞单克隆方法进行改良,即在单克隆培养液中加入1/2原代克隆培养液.将所得到的单细胞克隆球消化、分离、增殖成大量的神经干细胞球,用含血清的DMEM分化培养液促其分化.14d后,分别用神经元和胶质细胞的特异性标记物MAP-2标记神经元、GFAP标记星形胶质细胞和CNP标记少突胶质细胞. 结果平均每块含1/2原代克隆培养液的96孔培养板中有2~3只孔可形成克隆球,而含纯新鲜培养液的培养板中仅0.5~1.0只孔可形成克隆球.这些单细胞克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球分化后分别呈MAP-2、GFAP和CNP免疫荧光阳性. 结论单细胞克隆实验中加入1/2原代克隆培养液可提高神经干细胞的单克隆形成率,单克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球亦具有多分化潜能.
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银杏内酯B对成年大鼠神经干细胞向神经元分化的促进作用
目的探讨银杏内酯B对神经干细胞分化为神经元的促进作用. 方法采用无血清培养和单克隆实验技术在体外分离培养出大量来源于同一细胞的单细胞克隆球,并将其均匀种植于24孔培养板中,分3组分别加入含银杏内酯B、BDNF和不加任何细胞因子的完全培养液.培养7 d和14 d后终止,用神经元特异性标记物微管相关蛋白-2(MAP-2)的单克隆抗体进行免疫荧光标记,荧光显微镜下观察和计数MAP-2标记的阳性细胞并对细胞面积和周长进行图像处理. 结果两个时期银杏内酯组MAP-2阳性细胞数均明显多于单纯对照组而少于BDNF组;分化7 d和14 d时银杏内酯组MAP-2阳性细胞的面积和周长明显大于单纯对照组,而略小于BDNF组.结论银杏内酯B亦具有类似BDNF促进神经干细胞分化为神经元的作用.
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成年动物骨骼肌细胞原代培养及转染外源基因的初步研究
目的观察损伤对成年动物骨骼肌卫星细胞增殖的影响,以获取基因治疗自体移植的载体. 方法以阳离子脂质体介导法将pRSV-LacZ或pRch-TH质粒转入培养肌细胞. 结果骨骼肌损伤后,分离出的肌卫星细胞及组织块游离成肌细胞数均显著增高;外源基因能在细胞内表达. 结论损伤可诱导成年骨骼肌卫星细胞增殖并促进体外培养肌细胞成活.
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成年大鼠窦房结的解剖学定位和组织学特点的定量观察
目的 对成年大鼠窦房结(SAN)进行定位和形态学观察,为心脏传导系统的研究提供依据.方法 采用二级Wistar成年大鼠20只,对右心房及与之相连的近段上腔静脉做水平连续切片,对切片行HE、Masson染色,光镜下观察连续切片,定位SAN并观察组织结构.结果 成年大鼠SAN位于上腔静脉与右心房交界区及交界区以上的上腔静脉近段壁内,呈马蹄形/C形.大鼠SAN组织结构疏松,间质胶原纤维含量丰富,主要含有P细胞、T细胞和少量心房肌细胞.结论 成年大鼠SAN位置、形态提示我们取材时一定要保留近段上腔静脉.
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成年SD大鼠肾脏中6种镁离子转运体的表达
目的 研究成年SD大鼠肾脏中6种镁离子转运体的表达情况.方法 提取大鼠肾脏总RNA,逆转录后进行6种镁离子转运体基因的RT-PCR反应,后进行半定量分析.结果 成年大鼠肾脏中6种镁离子转运体都有表达,其中MagT1、TRPM7表达量高.结论 MagT1、TRPM7有可能在成年大鼠肾脏细胞内外Mg2+转运过程中起着重要作用.
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Tarlov及BBB运动功能评估体系的比较
开放场地试验是评估实验性脊髓损伤后动物后肢运动功能常采用的方法之一,Tarlov评估体系自1958年诞生至今,已沿用多年.1995年,Basson、Beattle和Bresnahan提出一种以3人姓氏首写字母命名为BBB的新评估体系(the BBB rating scale)[1].我们以成年大鼠为模型,分别以Tarlov及BBB体系对脊髓完全及不全横切术后瘫痪后肢运动功能的恢复进行了评估,并比较其优劣.
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大鼠嗅上皮神经干细胞培养及鉴定
胚胎及成年神经干细胞(neural stem cell, NSC)的成功培养为中枢神经系统疾病治疗带来了新的策略.从颅外组织如嗅上皮获取NSC可能是自体NSC移植的理想途径.研究表明,成年人及小鼠的嗅上皮中含有NSC[1-3].本研究观察新生及成年大鼠嗅上皮NSC的增殖及分化特性,为嗅上皮NSC的进一步研究提供参考.
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关键词:
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β射线照射后成年大鼠纹状体内S-100及OX-42的表达
纹状体属于端脑基底核内的一个神经核团,在维持正常的肌肉紧张度方面起重要作用,胶质细胞参与纹状体生理及病理过程,S-100是酸性钙结合蛋白,主要在中枢神经系统中的胶质细胞内表达,S-100具有神经保护功能,它可以提高神经元的存活率,促进胶质细胞伸出神经突起.OX-42在中枢神经系统中的小胶质细胞中特异表达,可以将OX-42阳性细胞按形态分为静止形小胶质细胞、激活形小胶质细胞、活化形小胶质细胞.
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大鼠胚胎性腺异体异位埋植的研究
为探讨胚胎性腺(睾丸与卵巢)异体异位埋植后的生长发育和内分泌功能,将大鼠胚胎睾丸和卵巢分别移入摘除性腺的成年雄性和雌性大鼠颈部皮下和肾被膜下.埋植后分不同时间取出埋植物,常规染色观察埋植物在异体异位的生长发育.细胞化学和免疫组织化学法观察埋植物的功能状态.放射免疫法测定血清性激素浓度 . 结果显示埋植的胚胎性腺在异体可生长发育至成年状,3-β羟甾脱氢酶、性激素与性激素受体在睾丸与卵巢的内分泌细胞中呈阳性反应,血清促性腺激素和性激素在埋植后均有明显增加.由此证明胚胎性腺埋植到异体成年大鼠体内后可正常发育并具内分泌功能.
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KATP通道开放剂、热休克蛋白及金属硫蛋白对心肌细胞保护作用的实验研究
自1993年以来对一系列内源性心肌细胞保护物质在不同的缺血、缺氧心肌细胞的模型上进行了较深入的研究.具体研究内容如下:①首次采用了热休克蛋白(HSP70)脂质体包裹技术,在培养的大鼠心室肌细胞上,证明热休克蛋白具有直接的心肌细胞保护作用.②在培养的大鼠心室肌细胞和分离的成年大鼠心室肌细胞模型上,首次证明KATP开放剂具有直接的心肌细胞保护作用.
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姜黄素对大鼠放射性损伤的保护作用
目的:探讨辐射后过氧损伤及姜黄素抗自由基损伤作用,为辐射后过氧化损伤的防护提供科学依据.方法:实验设阴性对照(A)组、阳性对照(B)组(辐射)、姜黄素50 mg/kg(C)组、姜黄素100 mg/kg(D)组、姜黄素200 mg/kg(E)组,除A组外,各组大鼠接受剂量为2 Grav,2 min的X线照射,辐射后每天分别以相应的药物剂量给大鼠灌胃共7 d.1 d后宰杀取血和组织作生化分析.结果:阳性对照(B)组大鼠出现明显中毒症状.姜黄素给药后大鼠血浆及脑中的丙二醛(MDA)含量下降,全血及肝中的谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)活力明显增加,呈现一定的剂量依赖关系.结论:姜黄素能减弱辐射导致的自由基损伤.
关键词: 姜黄素 辐射损伤 丙二醛(MDA) 谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX) 成年大鼠 -
神经发生与脑缺血疾病治疗
在过去相当长的时间里,成年哺乳类动物脑组织神经元被认为是终极细胞,一旦发育成熟,就不再进行增生和分化.随着神经生物学的发展,先后在成年大鼠、小鼠、豚鼠、沙鼠、兔、树鼩、猴、短尾猿等动物脑中发现存在神经干细胞(neural stem cell,NSC),这些细胞在适当的条件下可以产生新的神经元,即具有神经发生(neurogenesis)功能.在随后的研究中科学家发现,成年人大脑也存在神经发生现象[1].这些新的神经元可能替代已经坏死和凋亡的神经元行使功能,这些发现给人类神经退行性疾病以及脑血管病的治疗提供了新的契机.
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成年大鼠心肌细胞分离培养及兴奋-收缩耦联表征
目的:比较两种细胞分离液分离成年大鼠心肌细胞,进一步表征成年大鼠心室肌细胞兴奋-收缩耦联。方法 Langendorff装置进行主动脉逆流灌流,分别用两种细胞分离液分离成年大鼠心肌细胞,无血清培养并进行腺病毒感染。显微镜下观察单个心肌细胞的形态学特点,荧光显微镜下检测病毒感染。采用IonOptix仪器检测心肌细胞肌节收缩-舒张指标以及心肌细胞钙离子摄入-排出指标。结果两种分离液均可获得70%横纹清晰的长杆状心肌细胞,培养可存活7 d以上。腺病毒感染48 h,绿色荧光蛋白持续表达7 d以上。分离液一获得的心肌细胞不能很好地随电场刺激产生收缩,分离液二获得的细胞可用于检测兴奋-收缩耦联特性,心肌细胞肌节缩短分数为11.61%±2.15%,舒张时间为(0.177±0.031) s,钙瞬变幅度为30.79%±9.74%,钙瞬变衰减时间为(0.300±0.074) s。结论两种分离液均可用于分离和培养成年大鼠心肌细胞,并用于腺病毒转染等长时程研究。分离液二更适用于检测成年大鼠心肌细胞的兴奋-收缩耦联特性。
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低浓度一氧化碳对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶的影响
为探讨低浓度一氧化碳对成年及老龄大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响.实验选用Wistar雄性健康3月龄成年及18月龄老龄大鼠.成年鼠组暴露于自然空气、10、25 mg/m3 CO,老龄鼠组暴露于自然空气、10 mg/m3CO.每组均为5只.暴露方式为静式染毒,2小时/天,染毒30天.测定全血、心组织、脑组织GSH-Px.结果表明,成年大鼠在25 mg/m3CO染毒下,第30天血液及脑组织GSH-Px明显升高,而10 mg/m3CO染毒时,老龄大鼠及成年大鼠GSH-Px均未见异常变化,提示25 mg/m3是成年鼠CO的阈浓度,10 mg/m3是成年鼠CO的阈下浓度.同时还说明,在10mg/m3CO引起GSH-Px升高方面,老龄大鼠并不比成年大鼠更敏感.
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二恶英的毒性研究进展
二恶英(dioxin)是非人为生产、没有任何用途伴随存在于各种环境介质的一类环境持续存在的污染物,是两类含氯化合物的总称.一类是多氯代苯并-对-二恶英(PCDDs),由于氯原子置换的个数与位置的不同而形成75个异构体,如二苯并(1,4)二恶英、2,7-二氯二苯并-二恶英和2,3,7,&四氯二苯并-对二恶英(2,3,7,&TCDD,简称TCDD);另一类是多氯氧芴,也称氯代二苯并呋喃(PCDFs),这类化合物与PCDDs一起生成,有着极为相似的化学结构和性质,有135个异构体,如2,3,7,8四氯二苯并呋喃和1,2,3,7,&五氯二苯并(1,4)呋喃等.在这210多种异构体中,含4~8个氯原子的异构体具有毒性作用,其中以TCDD毒性强….研究资料显示,TCDD对成年大鼠腹腔注射的半数致死量约为50μg/kg.其毒性相当于氰化钾的130倍,砒霜的900倍,是目前世界上已知有毒化合物中毒性强的"].二恶英对环境所造成的污染及其有害影响已引起广泛关注,本文就近几年有关二恶英的毒性研究进展作一综述.
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β酪啡肽7在成年大鼠十二指肠内的稳定性及对胆囊收缩素基因表达的影响
目的:本实验研究了β酪啡肽7在成年大鼠十二指肠内的吸收和稳定特性及其对胆囊收缩素表达的影响.方法:(1)比较吸收和阻断吸收两种状态下灌注的β酪啡肽7浓度变化,从而定性判断其在成年大鼠肠道内的吸收特性;(2)体外酶解实验观察β酪啡肽7对大鼠十二指肠黏膜的酶解特性;(3)半定量RT-PCR法检测灌喂β酪啡肽7对肠黏膜胆囊收缩素和生长抑素基因表达的变化.结果:β酪啡肽7在成年大鼠十二指肠内不被吸收但被肠黏膜酶快速降解,且显著刺激肠黏膜中胆囊收缩素基因的表达,该效应被纳洛酮部分逆转;β酪啡肽7显著抑制生长抑素基因表达.结论:除了内源性阿片肽系统外,β酪啡肽还可能通过抑制生长抑素基因表达来促进肠粘膜中胆囊收缩素的表达,从而影响肠运动机能.