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谈食品微生物检验质量控制
在食品微生物检验工作中,检验流程包括检验思路的确定、标准检验方法的使用、培养基的配制、样品前处理、检验结果的判断、原始记录、报告等许多环节,其中手工操作也较多,影响结果准确性的因素也较多,实验室必须通过行之有效的质量控制措施,持续地加以监督和控制,并结合必要的室间质量控制手段,才能确保检验结果的准确性。主要可从下几方面进行质量控制:1检验人员方面:实验室的检验水平与检验人员素质密切相关,业务技术水平和工作责任心是检验人员素质的核心所在。这就要求检验人员必须具备扎实的理论基础知识和熟练的操作技能,要求检验人员具备高度的工作责任心和工作热情。实验室可通过培训和继续教育、实验室间的交流,必要时进行考核等手段,来不断提高检验人员的业务水平,在实验室质量体系文件中强调检验人员工作责任心的重要性,通过制定的奖惩制度来规范检验人员的工作行为。2仪器设备方面:实验室所有仪器均应在检定有效期内使用,必要时还要进行期间核查。在此基础上可通过一些监控手段来确保仪器设备保持佳性能,如高压蒸汽灭菌器,可用生物指示剂嗜热脂肪杆菌ATCC7953(2)或化学指示剂如变色胶带监视灭菌效果;需要控制温度的仪器,应在工作前和工作后做好温度的记录,不符合应及时调整;生物安全柜要定期由专业人员更换滤网,对紫外线消毒设备必须三个月检查一次其消毒性能等等。3检验耗材方面:如培养基:目前大多数实验室都是使用市售干粉培养基,这些来自著名公司的培养基,质量比较稳定,但在购买和使用前首先要对外观色泽和均一性、pH值、水分含量、批次或批号、琼脂凝胶的硬度、选择性等进行初次评估。用质控菌株进行预测,确保培养基、试剂达到预期效果。在使用市售培养基时应注意以下几方面:(1)选用国内外知名品牌和信誉度好的产品;(2)要根据培养基储存条件储存,尽量少包装;(3)要根据日常工作需要作为计划,控制在有效期内用完;(4)购回试剂应对品名、生产日期、保质期做好记录,检查密封性、标签牢固性;(5)在配置时应仔细检查原料,如发现结块、变色严禁使用;(6)所有培养基要有配制称量时要有记录,把剩余培养基密闭好;(7)严禁使用过期的、污染的、失了水的培养基。又如标准菌株:必须做好明确的作业指导书,实施标准菌株的规范管理,做好菌株的传代验证,这样才能确保标准菌株在实验中应起的作用等等。4样品采集方面:因样品采集并非实验人员进行,样本采集是否合格规范要求,是实验成败的又一关键因素。因此,从事食品微生物检验的工作人员,要注意加强与采样人员的沟通,向样品采集者讲解采集样本的方法、要求,指导他们规范采集样本,如无菌要求、随机方法、种类、数量、采集部分、冷藏或保温、运送方式、安全要求等。实验室收到样本后,应仔细核对检验内容与送检单,对不符合检验要求的样本,注明原因退回。
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辽阳市医疗机构消毒工作质量检测
于1996~2000年,对辽阳市各级医疗机构的消毒工作质量进行了监测.检测时,压力蒸汽灭菌效果用嗜热脂肪杆菌(ATCC 7953)芽孢菌片进行;对使用中消毒液取1 ml,加9 ml相应中和剂中,以细菌总数≤100 cfu/ml为合格;对消毒后1 h内物体表面采样、检测,以Ⅰ、Ⅱ类场所物体表面细菌总数≤5 cfu/cm2,Ⅲ类场所者≤10 cfu/cm2,Ⅳ类场所者≤15 cfu/cm2为合格;对室内空气于消毒处理后用9 cm直径普通营养琼脂平板沉降5 min采样,以Ⅰ类场所空气细菌总数≤10 cfu/m3为合格,Ⅱ类场所者≤200 cfu/m3,Ⅲ类场所者≤500 cfu/m3为合格;用紫外线强度计检测紫外线灯辐射照度值≥70 μW/cm2为合格.
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两种压力蒸汽灭菌化学指示卡监测效果比较
为了选择准确监测压力蒸汽灭菌效果的化学指示卡,在本区一家医院的供应室对国产新华牌压力蒸汽灭菌化学指示卡与3M压力蒸汽灭菌化学指示卡指示结果的准确性进行了比较试验.每次试验时,将两种指示卡与生物指示剂[嗜热脂肪杆菌(ATCC 7953)芽孢]各1份,同时放入1个标准试验包中心,一式3个标准试验包,分别置于灭菌柜室上、中层中央和下层排气口处.试验组设计分别在下排式压力蒸汽灭菌器内进行121℃30 min与121℃10 min的试验,在预真空压力蒸汽灭菌器内进行132℃6 min与132℃2 min的试验,试验重复进行3次.试验后,观察两种指示卡颜色变化情况,生物指示剂(连同阳性对照)经56℃培养48 h后观察结果.
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压力蒸汽灭菌B-D试验与生物检测的矛盾结果
B-D试验用于检测预真空压力蒸汽灭菌器空气排除效果,生物指示剂是检测其压力蒸汽灭菌效果.对XMQ-1.2单门脉动真空压力蒸汽灭菌器(江苏连云港千樱医疗设备有限公司产,柜室容积为1500mm×250mm×1050mm,分二层),每日冷锅前将一次性B-D试验包(3M公司产)平放于距下排气口20 cm处,抽真空3次,132℃作用4min取出;在放置待灭菌包时,将25cm×25cm×30 cm的试验包(内装3件平纹长袖手术衣,4块小手术巾,2块中手术巾,1块大手术巾,30块10cm×10cm的8层纱布敷料,中央布放3M生物指示剂与嗜热脂肪杆菌芽孢菌片)分别置于柜室上层中央及下层前、后,抽真空3次,132℃作用4 min取出,与未灭菌的阳性对照管(菌片投入培养基管中)一起于56℃培养48h(菌片为7d).
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压力蒸汽灭菌指示器材贮存期对指示结果影响的实验观察
用于检测压力蒸汽灭菌效果的1种化学指示器材与2种生物指示器材,贮存时间在1年内,均能准确指示121℃压力蒸汽灭菌效果;贮存1~2年者,多数器材的准确性有所下降.
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沂源县厂矿医疗单位消毒工作质量调查
1994~1996年,对沂源县18所厂矿医疗单位的消毒与灭菌工作质量进行了调查.结果,物体表面样本检测,细菌总数≤10cfu/cm2且未检出致病菌者占8.3%(5/60);室内空气细菌总数超标(>500cfu/m3)率为72.3%(34/47);使用中消毒液细菌总数超标(>250 cfu/ml)率为22.4%(1 1/49).用嗜热脂肪杆菌(ATCC 7953)芽胞菌片检测,压力蒸汽灭菌的合格率为78.8%(26/33),但其中敷料的无菌率仅为52.4%(11/21).
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辽宁省部份医疗机构消毒工作质量检测
于1995~1999年,对辽宁省部份省、市、县级医疗机构的消毒工作质量进行了监测。检测时,压力蒸汽灭菌效果用嗜热脂肪杆菌(ATCC 7953)芽胞菌片进行;对使用中消毒液取1 ml,加入9 ml相应中和剂溶液中,以细菌总数<100 cfu/ml为合格;对消毒后4 h内物体表面采样、检测,以Ⅰ、Ⅱ类场所物体表面细菌总数<5cfu/cm2,Ⅲ类场所者<10 cfu/cm2,Ⅳ类场所者<15 cfu/cm2为合格;对室内空气于消毒后用平板沉降15 min采样,以Ⅰ类场所空气细菌总数<10 cfu/m3,Ⅱ类场所者<200 cfu/m3,Ⅲ类场所者<500cfu/m3为合格,用紫外线强度计检测紫外线灯辐照度值>70μW/cm2为合格。结果,所测医疗机构的消毒工作质量(附表)不能令人满意。
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压力蒸汽灭菌锅维修后进行生物监测的体会
生物监测是通过标准化的菌株和合乎要求的抗力的生物指示剂来考核灭菌过程是否达到医疗产品的无菌保证水平,是判断压力蒸汽灭菌效果的可靠的方法.它是利用嗜热脂肪杆菌芽孢的活菌对灭菌效能进行监测,根据其微生物是否死亡来判断压力蒸汽灭菌的效果.2003年3月-2007年11月我院供应室进行60次生物监测.现将体会介绍如下.
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3M指示卡的使用方法
化学指示剂是对高压灭菌的一种监测方法,利用化学指示剂在一定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点,以判断是否达到灭菌所需参数.指示卡(带)上印有热敏化学指示剂,其显色效应是以嗜热脂肪杆菌的耐热参数(121 ℃作用20 min)为依据而设计的,使用时将指示卡夹于物品中随同加热,根据指示卡变色情况来判断是否达到要求.此外尚有指示胶带主要用于物品包装的表面情况监测,每个灭菌包内外都应使用化学指示剂监测.
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手控法排除下排气灭菌柜内冷空气提高灭菌效率和效果
使用淄博医疗器械厂生产的下排气压力灭菌柜.将其内锅层排气管处的自动疏水阀改为手控式.按下排气压力灭菌柜的标准步骤操作,当操作档转至消毒档位置,内锅层压力达到HMpa(淄博压力真空表厂生产)以上时,手控法将疏水阀开关逆时针旋转3~4周,温度很快上升,数分钟后如内锅层压力指示稳定下降,继续逆时针旋转3~4周,直至温度、压力达到标准后计时.应用此法,内锅层内的冷空气很快被排除,温度很快提升,灭菌时间可缩短10~15分钟(总计的灭菌时间),同时也保证了灭菌质量.消毒物品经一年来跟踪监测合格率均为100%.监测法主要以生物法(嗜热脂肪杆菌菌片)、化学法(三M胶带及121℃化学指示卡)、物理法(留点湿度法)及定期对无菌物品的培养为主.