紫外分光光度法定量检测发酵液中紫杉烷类化合物

目的:建立一种真菌发酵液中紫杉烷类化合物定量检测的紫外分光光度法.方法:真菌发酵液经乙酸乙酯提取后通过薄层层析制成供试品溶液,在241nm处测定紫外吸收值.结果:该检测方法具有良好的线性,精密度和较高的回收率.结论:是一种检测真菌发酵液中紫杉烷类化合物含量的有效方法.

285 紫杉醇的生物合成：紫杉烷13α-羟化酶是依赖细胞色素P450的单加氧酶

红豆杉中细胞色素P450紫杉烷10β-羟化酶基因的分子克隆及其在酵母中的表达

工程酵母细胞高压破碎、蛋白低温保藏和去糖基化处理对7-木糖紫杉烷糖基水解酶LXYL-P1-2活性的影响

紫杉醇主要来源于红豆杉，作为一种“重磅炸弹”式的抗肿瘤药物，自1992年12月被美国 FDA批准上市以来，一直是销售额大的植物抗肿瘤药。但由于紫杉醇的天然含量极低，约占含量高的树皮部位的万分之二，加之红豆杉生长缓慢，早期从野生红豆杉中获取紫杉醇曾给红豆杉资源造成毁灭性破坏。目前主要依靠化学半合成或苗圃栽培手段制取。苗圃栽培虽然对保护野生红豆杉资源具有积极意义，但栽培红豆杉中紫杉醇含量低微的本质没有发生改变。另一方面，红豆杉中存在着大量的紫杉醇结构类似物，其中包括含量数十倍于紫杉醇的7-木糖-10-去乙酰紫杉醇，而后者在脱除木糖基之后形成的10-去乙酰紫杉醇仅需在 C10位乙酰化即可产生紫杉醇[1]。如能将这类副产物转变成紫杉醇，不仅可以减少其对环境的污染，还可以“变废为宝”，大大提高红豆杉资源的利用率。脱除木糖基可用化学法或生物酶法来完成，其中后者的专一性强、环境友好。但由于天然细胞中β-木糖苷酶的酶量普遍偏低，用筛选得到的微生物直接进行转化效率不高[2-3]，本实验室已尝试用基因工程方法解决这一问题。我们已从具有转化7-木糖-10-去乙酰紫杉醇为10-去乙酰紫杉醇能力的真菌香菇中克隆得到了7-木糖紫杉烷糖基水解酶 LXYL-P1-2，该酶隶属于糖基水解酶的第3家族，是一种全新的和双功能的β-木糖苷酶和β-葡萄糖苷酶，能高效且专一性地水解包括7-木糖-10-去乙酰紫杉醇在内的7-木糖紫杉烷的木糖基，生成相应的7-羟基紫杉烷。已对该酶及其重组菌开展了酶的表征、高密度发酵与生物催化等研究[4-6]。本文报告工程酵母细胞高压破碎条件、蛋白低温保藏和去糖基化处理对 LXYL-P1-2酶活性的影响，为利用纯化的重组酶进行酶结构与功能关系等的研究提供保障。

紫杉烷类化合物SINENXAN A的结构修饰及其衍生物的构效关系研究

为寻找新的综合性能好的紫杉烷类化合物,对sinenxan A (SIA )进行结构修饰.在SIA及其修饰物的C14位引入不同的的侧链,共合成新的紫杉醇类似物21个,对其中的15个化合物进行了3种癌细胞的体外抗肿瘤活性测定,这些化合物的活性与紫杉醇比较,相差甚远.本文初步讨论了SIA衍生物的构效关系.

中国红豆杉细胞培养物中紫杉烷的LC-ESI-MS代谢轮廓分析

目的建立小剂量生物样中紫杉烷的快速分析方法,为紫杉烷代谢特征研究提供新的分析方法和手段.方法用LC-ESI-MS方法,先对包含了5种已知成分的紫杉烷混合溶液进行分析,以调整和优化质谱运行参数.随后正离子和负离子方式同时扫描,获得样品的总离子流图和多个色谱峰的相对分子质量信息,通过选择离子监控(SIM)对准分子离子峰进行MS/MS测定,分析化合物的结构特点和主要取代基,结合文献检索和遗传相关性分析,推测紫杉烷的结构.结果毛细管电压为25 V、碰撞诱导能量为25 eV时,获得较好的一级和二级质谱信号.具有多个乙酰取代基的紫杉烷在正离子扫描时,产生强的铵加合离子峰,含多个羟基的紫杉烷易产生质子加合峰.对样品中13个色谱峰进行了指认,其中8个经对照品和文献的比较可以确定其分子结构,另外5种可以推测紫杉烷母核的类型和取代基的数目和种类.结论用LC-MS方法快速分析样品中紫杉烷的类型及其变化是可行的,为研究紫杉烷的代谢规律提供了有力的分析工具.

紫杉烷类药物对SD大鼠CYP3A1作用效应的研究

目的 研究紫杉烷类抗癌药紫杉醇和多西紫杉醇对Sprague-Dawley(SD)大鼠肝细胞CYP3A1活性的作用.方法 本实验将15只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(尾静脉注射给予生理盐水,每只1 mL,每日1次,连续3 d),地塞米松诱导组(灌胃给予地塞米松,100 mg·kg-1·d-1,连续3 d)、酮康唑抑制组(腹腔注射给予酮康唑,50 mg·kg-1·d-1,连续3 d)、紫杉醇实验组(尾静脉注射给予紫杉醇,6.7 mg·kg-1·d-1,连续3 d)、多西紫杉醇实验组(尾静脉注射给予多西紫杉醇,30mg·kg-1·d-1,连续3 d).采用HPLC检测以睾酮为探针药物经大鼠肝微粒体温孵后转化的代谢产物6 β-羟基睾酮的生成速率以评价各组间CYP3A1酶的活性.结果 空白对照组、地塞米松诱导组、酮康唑抑制组、紫杉醇实验组、多西紫杉醇实验组6 β-羟基睾酮的生成速率分别为(643.1±6.0),(2 671.1±225.7),(78.3±4.8),(724.8±36.6)和(489.3±70.6)pmol·mg(pro)-1min-1;数据经SPSS16.0统计软件分析,表明紫杉醇纽和多西紫杉醇组6 β-羟基睾酮的生成速率与地塞米松诱导组、酮康唑抑制组的差异均有极显著性(P<0.01),与生理盐水空白对照组的差异均无显著性(P>0.05).结论 紫杉醇和多西紫杉醇对大鼠肝细胞CYP3A1酶活性无诱导或抑制作用.

31例紫杉烷类注射剂过敏反应临床观察

目的:分析紫杉烷类注射剂过敏反应相关因素,为临床安全用药提供参考.方法:收集我院临床上报的31例紫杉烷类注射剂ADR病例报告,按患者一般情况、给药途径、用法用量、合并用药、过敏反应发生时间、临床表现、涉及的器官或系统、严重程度及转归进行统计分析.结果:31例紫杉烷类注射剂过敏反应多数发生于给药后15分钟以内,女性多于男性,既往有过敏史的患者用药后过敏反应发生率较高,严重过敏反应发生率为51.61%,预防用药和减慢滴注速度可减轻过敏反应程度.结论:临床应用紫杉烷类药物应加强用药监测和重视不良反应上报工作.

云南红豆杉种子的化学成分研究

目的 研究云南红豆杉Taxus yunnanensis种子的化学成分.方法 通过色谱技术进行分离纯化,利用核磁共振技术鉴定化合物的结构.结果 从云南红豆杉种子中分离得到12个紫杉烷类化合物,分别鉴定为7-表-10-去乙酰基紫杉醇(1)、9α,10β-二乙酰基-2α-羟基-5α-桂皮酰基-3,11-环化紫杉烷-4(20)-烯-13-酮(2)、2α,7α,10β-三乙酰基-9α-羟基-5α-桂皮酰基-3,11-环化紫杉烷-4(20)-烯-13-酮(3)、2α-乙酰基-9α,10β-二羟基-Sα-桂皮酰基紫杉烷-4(20),11-二烯-13-酮(4)、2α,7β,9α,10β-四乙酰基-5α-桂皮酰基-11,12-环氧紫杉烷-4(20)-烯-13-酮(5)、7β,9α,10β-三乙酰基-5α-桂皮酰基紫杉烷-4(20),11-烯-13α-醇(6)、9-去乙酰基紫杉宁A(7)、5α-去桂皮酰基紫杉欧吉酚(8)、2α,5α,10β,13α-四乙酰基-1β,7β,9α-三羟基-4,20-环氧紫杉烷-11-烯(9)、7β,9α,10β-三乙酰基-2α,5α,13α-三羟基紫杉烷-4(20),11-二烯(10)、7,9,10,13-tetra-O-deacetylabeobaccatin Ⅵ (11)、taxacustin (12).结论 化合物2、3、7～12为首次从该植物中分离得到.

美丽红豆杉种子化学成分的研究(Ⅲ)

目的研究美丽红豆杉Taxusmairei种子的化学成分.方法采用柱色谱、制备TLC、制备HPLC法和光谱法分离鉴定化学成分.结果从美丽红豆杉种子中分离得到6个紫杉烷类化合物,鉴定为13α-acetylbrevifoliol(Ⅰ)、taxayuntin E(Ⅱ)、acetyltaxinine B(Ⅲ)、5-epi-canadensene(Ⅳ)、2α,9α,10β,13-tetraacetoxy-20-cinnamoyloxy-taxa4(5),11(12)-diene(Ⅴ)、taxachitrienes B(Ⅵ).结论它们均为首次从该植物种子中获得.

东北红豆杉针叶中紫杉烷类化学成分的研究

目的 研究东北红豆杉Taxus cuspidata针叶中紫杉烷类化学成分.方法 用色谱法分离,用理化性质及波谱方法(1D 'NMR、2D NMR及FAB-MS)分析鉴定其化学结构.结果 从东北红豆杉针叶中分离得到6个化合物,分别鉴定为10β-羟基-2a,9a,13a-三乙酰氧基-5a-肉桂酰氧基紫杉-4(20),11-二烯(10β-hydroxy-2a,9a,13a-tri-acetoxy-5a-cinnamatetaxa-4(20),11-diene,Ⅰ)、7,13-二去乙酰基-9,10-去苯甲酰基taxchinin C(7,13-dideacetyl-9,10-debenzoyltaxchinin C,Ⅱ)、2-去乙酰基taxin B(2-deacetyhaxin B,Ⅲ)、7,9-二去乙酰基-5-去肉桂酰基紫杉宁J(7β,9a-dideacetyl-5-decinnamoyhaxinine J,Ⅳ)、2a,13a-二羟基-9a,10β-二乙酰基-5a-肉桂酰基紫杉-4(20),11-二烯(2a,13a-dihydroxy-9a,10β-diacetoxy-5a-cinnamatetaxa-4(20),11-diene,Ⅴ)、5-去肉桂酰基taxuspine D(5-decin-namoyltaxuspine D,Ⅵ).结论 化合物Ⅰ～Ⅲ,Ⅴ和Ⅵ均为首次从该植物中获得.

紫杉烷类抗肿瘤药物纳米制剂的研究进展

紫杉烷类药物主要包括紫杉醇、多西他赛,以及具有紫杉烷骨架结构的衍生物,它们具有高效广谱的抗肿瘤活性,然而制剂开发却一直受到其自身水溶性差的限制.纳米给药系统在实现靶向性给药、缓释给药、提高难溶性药物溶解度以及降低药物不良反应等方面均表现出良好的应用前景,因而采用纳米载体传递紫杉烷类药物得到广泛关注.综述了近几年紫杉烷类药物纳米制剂的研究进展,以期为新型药物剂型的开发和应用提供参考.

南方红豆杉化学成分的研究进展

南方红豆杉是我国的特有植物,在我国自然生长的5种红豆杉中分布广,蕴藏量也大,其化学成分研究在我国展开得早,研究的时间长也彻底,到目前为止已经从我国南方红豆杉的根、茎、叶、皮、种子等不同部位中分离鉴定出147种化合物,包括二环紫杉烷类、各种三环紫杉烷类、松香烷类、9(10→20)重排的松香烷类和海松烷类二萜,以及木脂素类、黄酮类和酚类化合物.现总结过去20年南方红豆杉在化学成分方面的研究概况.

012以色列产欧洲红豆杉中新的紫杉烷衍生物

不同铂类联合紫杉烷在妇科恶性肿瘤化疗中的毒副反应对比分析

目的 探究几种不同的铂类联合紫杉烷在妇科恶性肿瘤化疗中的毒副反应的大小.方法 选取某医院从2007年6月--2013年2月收治的90名妇科恶性肿瘤患者,将其进行分组,实验组一的30名患者采用奈达铂与紫杉烷联合治疗的方法,实验组二30名患者采用奥沙利铂与紫杉烷联合治疗的方法,实验组三30名患者采用卡铂与紫杉烷联合治疗的方法,治疗一段时间后检测患者有无发热、皮疹、腹泻、神经感觉异常、恶心呕吐等症状以及患者的肝功能情况.结果 三种治疗方案对患者的各项毒副作用虽然有差别,但均P>0.05,无统计学意义.结论 奈达铂与紫杉烷联合治疗、奥沙利铂与紫杉烷联合治疗以及卡铂与紫杉烷联合治疗的结果在毒副作用方面无统计学意义,因此在临床上治疗妇科恶性肿瘤时可以根据患者的实际情况选择不同的治疗方案.

白蛋白结合型紫杉醇的作用机制和其给药系统的研究进展

紫杉烷类药物是被批准用于临床治疗肿瘤的重要新型药物，主要用于转移性乳腺癌、卵巢癌和非小细胞肺癌的治疗。然而，目前市售的溶剂型紫杉醇尽管采用适当的术前用药，仍然具有与溶剂相关的严重副作用和过敏反应。白蛋白结合型紫杉醇（nab-paclitaxel）是一种新型的无溶剂紫杉醇，它不需要合成的溶剂作为载体，不需要皮质类固醇或抗组胺药物等预处理，静脉滴注时间短（30min）。其利用了白蛋白的自然生物特性，通过gp-60（糖基化囊膜蛋白）介导的内皮细胞跨膜转运和一种与白蛋白结合的蛋白SPARC（一种酸性的富含半胱氨酸的分泌蛋白）的相互作用而增加肿瘤组织对紫杉醇的摄取和蓄积。临床前模型研究证实白蛋白结合型紫杉醇与溶剂型紫杉醇相比，抗肿瘤活性明显增强。以此为基础，近年国内外进行了一系列白蛋白结合型紫杉醇应用于各种恶性肿瘤化疗的临床研究，取得了令人鼓舞的效果。本文对白蛋白结合型紫杉醇的抗癌机制、体内运输机制和临床研究进行综述。

南方红豆杉化学成分的分离与鉴定

目的 研究南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)枝叶的化学成分.方法 采用反复硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相制备柱色谱等方法进行分离纯化;运用现代波谱技术确定化合物的结构.结果 从南方红豆杉枝叶甲醇提取物的氯仿萃取部分分离得到13个紫杉烷类化合物和1个非紫杉烷类化合物,分别鉴定为三尖杉宁碱(cephalomannine,1)、9α,10β,13α-triacetoxy-5α-cinnamoyoxytaxa-4(20),11-diene(2)、2-deacetoxytaxinine J(3)、13-cinnamoylbaccatin Ⅲ(4)、7β,9α,10β,13α,20-pentaacetoxy-2α-benzoyloxy-4α,5 α-dihydroxytax-11-ene (5)、2-deacetoxydecinnamoyl taxinine J(6)、Taxin B(7)、2α,7β,13α-triacetoxy-Sα,10β-dihydroxy-9-keto-2(3-20) abeo-taxane(8)、taxuspineB(9)、taxachitriene A(10)、taxcuspine X(11)、7-epi-10-deacetyl taxol(12)、N-Methyltaxol C(13)、芹菜素(apigenin,14).结论 化合物6、9、12、13、14为首次从南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)中分离得到,化合物7、8为首次从南方红豆杉枝叶分离得到.

日本产东北红豆杉种子的化学成分研究

目的 对日本产东北红豆杉种子中的化学成分进行研究.方法 采用硅胶柱色谱和HPLC高效液相色谱技术分离纯化化学成分,利用理化常数和波谱数据鉴定化合物结构.结果 从日本产东北红豆杉的种子中分离得到了8个紫杉烷类化合物,分别鉴定为7,2′-didesacetoxyaustrospicatine(1),2′-deacetoxyaustrospicatine (2),taxezopidine G(3),2α-acetoxy-2′,7-dideacetoxyaustrospicatine (4),taxagifine(5),taxuspine Z(6),taxuspine C(7),5α-cinnamoyl-9α,10β,13α-triacetoxytaxa-4 (20),11-diene(8).结论 化合物1,2,4,6均为首次从该植物种子中分离得到.

两种紫杉烷类二萜化合物的分离鉴定

目的：从中国红豆杉细胞培养物提取紫杉烷类二萜化合物。方法：95%乙醇提取，溶剂萃取，硅胶柱层析，重结晶。结果和结论：首次从中国红豆杉细胞培养物中分离得到两个紫杉烷类二萜化合物，经鉴定为14β-(2-甲基丁酰氧)-2α,5α, 10β- 三乙酰氧-紫杉- 4(20),11-二烯(1)和5α-肉桂酰氧 -7β,9α, 10β,13α-四乙酰氧-紫杉-4(20),11-二烯（2）。

Cyelin E与晚期乳腺癌患者紫杉烷敏感性和预后的关系

[目的]探讨Cyclin E表达与乳腺癌患者含紫杉烷化疗的敏感性和预后的关系.[方法]湖北省肿瘤医院2001～2004年晚期或复发转移的乳腺癌患者56例进行了含紫杉类药物的联合化疗,免疫组化检测Cyclin E表达水平.[结果]Cyclin E高表达率为34%(19/56),Cyclin E高表达与紫杉烷化疗有效率无明显联系(χ2=0.1,P=0.8).然而,低表达Cyclin E的患者中位生存时间29.1个月(95%CI:25.7～32.7).明显长于高表达患者的23.4个月(95%CI:19.7～27.2)(Log-Rank=4.1,P=0.04).[结论]在乳腺瘟患者中,Cyclin E不能准确判断紫杉类药物的近期疗效,但Cyclin E高表达可能是提示长期预后差的生物标志之一.