首页 > 文献资料
-
氟吡汀对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其机制研究
目的:探讨钾离子通道开放剂氟吡汀对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及交感芽生的影响,为神经病理性疼痛药物治疗提供理论依据.方法:成年雄性SD大鼠18只,体重250～350 g,按随机数字表法随机分为3组,每组6只:假手术组(S组),对照组(C组),氟吡汀组(F组).S组大鼠暴露腰5 (L5)脊神经,但不结扎.其余组大鼠暴露L5脊神经并结扎,建立疼痛模型.S组和C组大鼠腹腔注射生理盐水2 ml/kg,F组大鼠腹腔注射氟吡汀5mg/kg,并连续给药7d.各组大鼠术前3d及术后1、3、5、7d检测机械痛阈(paw withdrawal pressure threshold,PWPT)和缩足反射潜伏期(paw withdrawal latency,PWL).术后第7d,各组大鼠取手术侧L5背根神经节采用免疫荧光染色标记法检测背根神经节内篮状结构变化.结果:与S组比较,C组大鼠PWPT和PWL术后第1d起显著降低(P＜0.05),维持至术后第7d.与C组比较,F组大鼠术后第3d起PWPT和PWL明显提高,差异有统计学意义(P＜0.05).与C组比较,经过氟吡汀治疗后,F组大鼠术后第7d手术侧L5背根神经节内篮状结构显著减少(P＜0.05).结论:氟吡汀通过抑制背根神经节内交感芽生以减轻神经病理性疼痛.
-
TNF-α在坐骨神经冷冻致神经病理性疼痛模型大鼠脊髓的表达
目的:观察大鼠坐骨神经冷冻(SCN)后行为学及脊髓肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化.方法:74只SD大鼠随机分为3组:正常对照组(N组,n=9),假手术组(S组,n=27)和造模组(C组,n=38),C组根据术后3周时机械缩足阈测定值又分为机械痛敏组(C28+)和未出现机械痛敏组(C28-).各组在手术前及手术后1、2和4周进行机械缩足阈和自噬评分测定.每时间点随机取6只大鼠用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定脊髓腰膨大处的TNF-α表达.结果:术后1周时,C组术侧后足机械缩足阈较术前和S组显著增高(P＜0.01),随后逐渐下降,至术后4周时,机械缩足阈明显低于术前和S组水平(P＜0.05),而对侧后足机械缩足阈术后持续低于术前和S组(P＜ 0.05或P＜ 0.01).仅造模组出现机械痛敏,术后4周时,术侧痛敏发生率达35％,远高于对侧的5％(P=0.013).自噬仅发生于造模组术侧后足,在术后1周至2周内为严重(术后1周发生率为18.4％,术后2周为24％).与S组和N组比较,C组术后各时间点双侧脊髓TNF-α表达均呈不同程度增加(P＜ 0.05或P＜0.01),尤以出现机械痛敏大鼠增加为显著(P＜0.01).结论:脊髓TNF-α表达可能在冷冻致神经病理性疼痛中枢敏化中有重要作用.
-
牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物不同穴位注射对神经病理性疼痛大鼠的疗效比较
目的:比较不同穴位注射牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物(神经妥乐平)治疗大鼠神经病理性疼痛的疗效.方法:构建L5脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型大鼠,将成功模型随机分为5组(n=10),分别为SNL组、神经妥乐平+L5“夹脊”穴组、神经妥乐平+L5“环跳”穴组、神经妥乐平+ L5“委中”穴组及神经妥乐平+L5“足三里”穴组,于穴位注射0d、1d、3d、5d、7d、10d、14d测定大鼠双足50％机械缩足反应阈值.结果:神经妥乐平注射四个不同的穴位均有较好的镇痛作用,四个穴位镇痛强度之间无显著差异.结论:在本实验条件下,“委中”、“环跳”、“足三里”、L5”夹脊”穴注射神经妥乐平治疗神经病理性疼痛均有较好的镇痛疗效.
关键词： 牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物 穴位 脊神经结扎 神经病理性疼痛 -
神经病理性疼痛大鼠母爱行为对子鼠炎性痛及下丘脑催产素表达的影响
目的:探讨神经病理性疼痛大鼠母爱行为对子鼠炎性痛及下丘脑催产素表达的影响.方法:健康成年SD大鼠随机分为四组:CCI雄性(C1组)、CCI雌性(C2组)、假手术雄性(S1组),假手术雌性(S2组),每组12只.手术组建立慢性缩窄性损伤(CCI)模型.四组大鼠按照C1C2组和S1S2组进行配对,将F1代子鼠采用随机数字表法分为2小组,即:FC2组和FC2'组、FS2组和FS2'组,其中FS2'组与FC2'组在出生后互换喂养,而FC2组和FS2组仍由原母鼠喂养.检测四组母鼠回收和舔舐仔鼠的母爱行为.福尔马林实验检测子鼠炎性痛反应,ELISA法测定血清内促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和皮质醇(COR)浓度并用免疫组织化学法检测视上核催产素(OT)表达.结果:与FS2组或FC2'组相比,FC2组或FS2'组回收潜伏期、回收总时间和舔仔潜伏期时间延长,舔仔总时间缩短.FC2组、FS2'组Ⅱ相痛觉评分、血清CRH和COR浓度明显高于FC2'和FS2组,Ⅰ相痛觉评分四组间无差异,而OT的表达则明显降低.结论:神经病理性疼痛大鼠的母爱行为虽然对子鼠基础痛域无明显影响,但会增强子鼠对新发生疼痛的感知,这些行为改变可能与子鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴应激激素升高及下丘脑催产素表达下调有关.
关键词： 神经病理性疼痛 母爱行为 下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴 催产素 -
N-乙酰天冬氨酰谷氨酸肽酶抑制剂对神经病理性疼痛大鼠脊髓水平瞬时感受器电位香草酸受体1表达的影响
目的:研究鞘内注射N-乙酰天冬氨酰谷氨酸(N-acetylaspartylglutamate,NAAG)肽酶抑制剂(2-PMPA)对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及脊髓水平瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)表达的影响.方法:取鞘内置管成功的雄性SD大鼠24只,体重200～250 g,随机分为3组(n=8):假手术组(sham组)、坐骨神经慢性压迫性损伤组(CCI组)和2-PMPA治疗组(2-PMPA组).sham组只暴露坐骨神经,但不结扎,术后鞘内注射生理盐水;CCI组坐骨神经结扎后鞘内注射生理盐水;2-PMPA组坐骨神经结扎后鞘内注射2-PMPA 100 μg.所有组每次给药剂量均为10μl,每日1次,连续7d.分别于术前及术后7d时,以热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足阈值(MWT)测定大鼠痛阈,然后处死大鼠,采用免疫荧光和Western blot法测定脊髓水平TRPV1的表达.结果:三组大鼠术后7dTWL和MWr值分别为(17.8±1.1)、(5.5±1.0)、(12.0±1.4)s和(13.1±1.2)、(4.3±0.9)、(10.5±1.0)g.与sham组比较,CCI组术后7d时TWL和MWT值均降低,脊髓TRPV1表达水平显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与CCI组比较,2-PMPA组术后7d时TWL和MWT值均升高,脊髓TRPV1表达水平显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:鞘内注射NAAG肽酶抑制剂可以有效地治疗神经病理性疼痛,其作用机制可能与抑制脊髓水平TRPV1的表达有关.
-
选择性背根神经节脉冲射频术联合普瑞巴林治疗带状疱疹后神经痛的临床观察
目的:观察选择性背根神经节脉冲射频术联合普瑞巴林治疗带状疱疹后神经痛的临床疗效及安全性.方法:100例带状疱疹后神经痛患者,采用数字表法随机均分为两组,对照组(n=50)∶口服普瑞巴林300 mg/d治疗;观察组(n=50)∶在口服普瑞巴林300 mg/d治疗的基础上联合选择性背根神经节脉冲射频术治疗.观察治疗前及治疗后不同时期(术后1月、术后2月和术后3月)疼痛程度和睡眠质量的变化.采用简化McGill评分(short-form of McGill pain questionnaire,SF-MPQ)及睡眠质量综合评定治疗效果,并记录并发症和不良反应的发生率.结果:两组治疗后各时期SF-MPQ评分均较治疗前明显降低,睡眠质量评分均较治疗前明显增加(P＜0.01);观察组治疗后各时期SF-MPQ评分较对照组同期明显降低,睡眠质量评分较对照组同期明显升高(P＜0.01).观察组在治疗后12h内未出现颈部血肿和气胸.两组患者在口服普瑞巴林后出现程度不等的不良反应,患者均可耐受.结论:选择性背根神经节脉冲射频术联合普瑞巴林治疗带状疱疹后神经痛效果好,可迅速缓解患者疼痛症状、改善患者睡眠质量且安全性良好.
-
脊髓胶质细胞在rhEPO预防神经病理性疼痛中的作用机制的研究
目的:探讨预防性给予重组人红细胞生成素对雄性大鼠L5脊神经切断大鼠机械、热痛觉过敏的影响及可能的机制.方法:选用Sprague-Dawley (SD)雄性大鼠30只,选用L5脊神经切断神经病理性模型；随机分成3组(n=l0):假手术+生理盐水组、损伤+生理盐水组、损伤+重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO) (5000 U/kg)组；术前1天给药,连续给药7天.采用von Frey纤维和Hargreaves法测定各组机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)；采用实时定量多聚酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法检测脊髓胶质细胞标志物白细胞分化抗原11b (cluster of differentiation antigen 11b,CD11b)和胶质细胞酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的mRNA表达水平.结果:与生理盐水预给药手术组相比,预防性腹腔注射rhEPO 5000 U/kg,能显著缓解大鼠的机械、热痛高敏行为(P＜0.05,P＜0.01),降低脊髓胶质细胞白细胞分化抗原和胶质细胞酸性蛋白的mRNA表达水平(P＜0.05).结论:发现预防性给予rhEPO能预防神经病理性疼痛的发生.其效应与其抑制胶质细胞活性相关.
关键词： 神经病理性疼痛 人红细胞生成素 痛觉高敏 白细胞分化抗原11b 胶质细胞酸性蛋白 -
大鼠分级坐骨神经缩窄致神经病理性疼痛模型的行为学及病理学评估
目的:建立不同程度的大鼠神经病理性疼痛模型,评价其行为学和病理学变化的关系.方法:30只雄性SD大鼠随机均分为C,N0,N1,N2,N4组(n=6),用分级坐骨神经缩窄法建立动物模型.在术前和术后3、7、10、14天测定大鼠右后爪50％缩爪阈值.术后第15天取右侧坐骨神经横断面切片行Luxol fast blue染色,计算坐骨神经环扎远端髓鞘计数占近端髓鞘计数百分比(the ratios of the myelin sheath counts in the distal sections to those in the proximal sections of the sciatic nerve,DPR).用SPSS 13.0进行数据分析.结果:大鼠右后爪50％缩爪阈值在C组和N0组无明显改变,在N1、N2和N4组大鼠术后较术前明显下降,至术后14天N0＞N1＞N2＞N4 (P＜0.05).C组和N0组大鼠右侧坐骨神经无明显病理学改变,N1、N2和N4组环扎远端神经纤维出现不同程度的脱髓鞘改变.术后14天大鼠50％缩爪阈值与其DPR值间Spearman相关系数rp=0.901 (P＜ 0.001).结论:大鼠分级坐骨神经缩窄模型可导致手术侧坐骨神经不同程度的脱髓鞘病变,引起不同程度的神经病理性疼痛,其病理学变化与行为学有显著相关性.
-
鞘内注射IRF8反义寡核苷酸对CCI模型大鼠痛阈的影响
目的:探讨鞘内注射小胶质细胞干扰素调节因子8(interferon regulatory factor 8,IRF8)反义寡核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)对大鼠慢性坐骨神经缩窄损伤(chronic constriction injury of sciatic nerve,CCI)模型疼痛行为的影响.方法:雄性SD大鼠40只随机分为4组:Sham组、AS组、MM组、NS组,每组10只.除Sham组外,其他三组均鞘内置管并制备CCI模型,AS组、MM组、NS组依次于CCI后12h鞘内注射IRF8反义/错义ODN、等体积生理盐水,1次/d,连续6d.制模前测量各组大鼠的基础阈值,制模后1、3、5、7、10、12、14 d对大鼠进行疼痛行为测定.制模后7、14 d western blot检测IRF8、离子钙接合蛋白Iba1表达.结果:与Sham组比较,NS组、MM组大鼠神经损伤后右后爪机械痛阈和热痛阈均显著降低(P＜0.05),脊髓IRF8、Ibal蛋白表达显著增强(P＜0.05).AS组于CCI后第10 d起右足机械痛阈和热痛阈下降,但仍高于MM组、NS组(P＜0.05).CCI后第7、14 d IRF8、Ibal蛋白表达,AS组较MM组、NS组显著减弱(P＜0.05),但仍强于Sham组(P＜0.05).AS组第14d IRF8、Ibal蛋白表达较第7d增强(P＜0.05).结论:经鞘内注射IRF8反义寡核苷酸可抑制脊髓内IRF8表达和小胶质细胞活化而缓解CCI大鼠神经病理性疼痛.
-
紫杉醇诱导的大鼠神经病理性疼痛中外周及中枢神经系统NGF动态变化
目的:观察紫杉醇诱导神经病理性疼痛大鼠脊髓背角及背根神经节各时间点神经生长因子(NGF)的表达.方法:雄性SD大鼠150只,随机分为空白对照组(BL组,n=10只),溶剂对照组(C组,n=70只)和制模组(T组,n=70只),在制模前及制模后0.5、1、1.5、2、4、6和8周共8个时间点,称量体重,测量机械痛觉过敏及超敏发生率,以及热痛阈值,采用western blot方法检测脊髓背角和背根神经节NGF蛋白表达.结果:制模后1～1.5周至6～8周T组与C组大鼠热痛阈均较BL组下降(P＜0.05),6～8周时T组热痛阈显著回升并高于C组(P＜0.05).制模后0.5～8周T组机械痛觉过敏及超敏发生率高于C组及BL组(P＜0.05).制模后除4周外各时间点T组背根神经节NGF含量均高于BL组(P＜0.05),制模后0.5周至2周C组大鼠背根神经节NGF含量较BL组增高(P＜0.05),制模后6周至8周,T组高于C组(P＜0.05).分别于制模后1.5周及0.5周T组及C组脊髓背角内NGF含量高于BL组(P＜0.05),T组及C组增高趋势分别持续至制模后8周及4周,制模后6周至8周T组高于C组(P＜0.05).结论:紫杉醇注射液诱导神经病理性疼痛大鼠脊髓背角及背根神经节各时间点NGF的表达上调,较紫杉醇注射液溶剂聚氧乙烯蓖麻油(cremophor EL,CrEL)对疼痛行为及NGF蛋白表达的影响均更为显著和持久.
-
脉冲射频治疗神经病理性疼痛的系统评价
目的:评价脉冲射频治疗神经病理性疼痛的镇痛效果及有效性.方法:数据库检索Pubmed、CENTRAL、EMBASE.com、Cochrane中心、中国生物医学文献数据库、万方数据库,检索时限均从建库开始至2015年2月11日.严格根据纳入排除标准,收集脉冲射频治疗神经病理性疼痛的随机对照试验,依据Cochrane Handbook 5.1.0偏倚风险评估工具评价纳入文献质量,文献数据利用Revman 5.3软件进行Meta分析.结果:终7项试验纳入本次研究,共380名受试者.Meta分析结果表明:脉冲射频组(1天、1周、1月、3月、6月)比对照组有更好的镇痛效果,同时比对照组有更高的镇痛有效率和优良率.统计结果均有显著性意义.结论:与传统方法如神经阻滞相比,脉冲射频治疗神经病理性疼痛6月内效果更明显,有效率更高,且术后并发症、不良反应少,易恢复,是较理想的治疗神经病理性疼痛的方法,但远期镇痛效果差,需要反复治疗,是该方法的不足之处.
-
氯胺酮对神经病理性疼痛脊髓背角生长相关蛋白表达的影响
目的:观察氯胺酮对脊神经结扎大鼠脊髓背角生长相关蛋白43(GAP-43)表达的影响.方法:25只雄性SD大鼠,随机分成5组;假手术组,氯胺酮Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,生理盐水组.行为学上应用von Frey Hair测定上述各组机械缩足时间变化(n=5),采用免疫组织化学方法测定脊髓背角GAP-43表达的变化(n=5).结果:氯胺酮组和生理盐水组,1周后均形成神经病理性疼痛模型.腹腔注射不同剂量氯胺酮均可逆转机械性痛觉过敏,氯胺酮组机械缩足时间与生理盐水组比较有显著统计学意义(P＜0.001).各组GAP-43表达随氯胺酮药物浓度增大而含量增加,生理盐水组亦可见GAP-43表达.结论:GAP-43可以阻断神经病理性疼痛中枢敏化的形成,氯胺酮能在很大程度上增强GAP-43的表达,从而起到治疗神经病理性疼痛的作用.
-
神经病理性疼痛引起成年大鼠空间记忆损害和内侧前额叶的NMDA受体NR2B亚基下调表达
目的:探讨神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)引起的成年大鼠的空间记忆障碍与内侧前额叶(medial prefrontal cortex,mPFC) NMDA受体NR2B亚基表达的关系.方法:选择健康的Wiser雄性大鼠50只,随机分为5组(每组10只),分别为假手术组(sham operated group,SO组),神经病理性疼痛模型组(neuropathic pain group,NP组),生理盐水组(NS组),Ro25-6981组(Ro组)和CX546组(CX组).其中,NS组、Ro组和CX组是在NP模型基础上分别在mPFC区注射生理盐水、Ro25-6981和CX546.采用单侧坐骨神经主干慢性压迫法(chronic constriction injury,CCI)制备NP模型.SO组和NP组分别于术后第7d、14d、21 d和28 d测量机械缩足阈(mechanical withdrawalthreshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL).术后第21～28 d,进行八臂迷宫实验.术后第24 d,利用立体脑定位仪将生理盐水、Ro25-6981或CX546分别注射到mPFC,制备成NS组、Ro组或CX组动物模型.迷宫实验完成后立即处死大鼠,通过RT-PCR、免疫荧光和Western Blotting方法测定内侧前额叶的NR2B亚基mRNA和蛋白表达水平.结果:与SO组比较,NP组的MWT和TWL降低(P＜0.05).与SO组比较,NP组的空间记忆功能明显减退(P＜0.05).与NS组比较,Ro组的空间记忆功能明显减退(P＜0.05),CX组的空间记忆功能明显改善(P＜ 0.01).与SO组比较,NP组与NS组的NR2B亚基mRNA和蛋白表达均明显降低(P＜0.05).与NS组比较,Ro组的mRNA和蛋白表达明显降低(P＜0.05),而CX组的mRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.01).结论:NP所致空间记忆障碍可能与mPFC区的NR2B亚基下调表达有关.
-
大鼠坐骨神经慢性压迫后脊髓背角GCH1基因表达与疼痛的关系
目的:探讨大鼠坐骨神经慢性压迫(chronic constriction injury,CCI)后,脊髓背角内三磷酸鸟苷环化水解酶1 (GTP cyclohydrolase 1,GCH1)基因的表达变化与神经病理性疼痛产生的关系.方法:wistar大鼠64只被随机分为CCI组和Sham组,每组32只.对CCI组大鼠行右侧坐骨神经结扎；建立CCI模型,Sham组仅暴露坐骨神经不结扎,于术前1天及术后1、3、7、10、14、21、28天测定大鼠机械痛阈值,并分别在术后3、7、14、28天职腰4～6段脊髓,进行免疫组化和Western Blotting检测,观察脊髓背角GCH1表达的变化情况.结果:CCI组大鼠术后各时间点后肢机械痛阈值均显著低于Sham组(P＜0.05),术后第1天开始疼痛阈值便明显降低,直至术后第28天,均低于术前水平(P＜0.05).免疫组化结果显示:CCI组大鼠术后脊髓背角神经元GCH1的表达呈先升高后降低的趋势；与Sham组相比,术后各时间点GCH1的表达均明显增高(P＜0.05).Western Blotting检测与免疫组化结果基本一致,CCI组术后3天、7天、14天GCH1表达均高于Sham组(P＜0.05).结论:周围神经损伤引起的痛觉过敏随脊髓背角内GCH1表达升高而增强,随其表达降低而减轻,可以认为GCH1可能参与了神经病理性疼痛的形成.
-
NMDA受体NR2B特异性拮抗剂Ifenprodil对CCI大鼠神经病理性疼痛的预防作用
目的:观察预先给予ifenprodil是否可以预防坐骨神经慢性压榨性损伤(CCI)大鼠的神经病理性疼痛.方法:体重在180～200 g的雄性SD大鼠随机分为4组:假手术+生理盐水组、假手术+ifenprodil组、CCI+生理盐水组及CCI+ifenprodil组.建立外周神经慢性压榨性损伤(CCI)动物模型,假手术组大鼠同样分离坐骨神经,但不结扎神经.假手术+ifenprodil组及CCI+ifenprodil组大鼠在术前30 min及术后第1、2 d连续三天腹腔内注射ifenprodil(10 mg/kg);假手术+生理盐水组及CCI+生理盐水组大鼠则以同体积生理盐水代替ifenprodil进行腹腔内注射.使用von Frey纤维测量大鼠手术侧机械痛阈.比较各组大鼠手术前后的机械痛阈.结果:CCI+生理盐水组大鼠的机械痛阈在术后第7 d及14 d均明显低于术前(P＜0.05);其余各组大鼠的机械痛阈在术后较术前无显著性差异(P＞0.05);CCI+ifenprodil组大鼠术后7 d及14 d的机械痛阈显著高于CCI+生理盐水组(P＜0.05).结论:预先给予选择性作用于NR2B亚基的NMDA受体拮抗剂(ifenprodil)可有效预防外周神经损伤所导致的神经病理性疼痛.因此NR2B的活化在神经病理性疼痛的形成过程中起重要作用.
关键词： ifenprodil 神经病理性疼痛 预防 -
鞘内注射GDNF对神经病理性疼痛大鼠脊髓水平p-Akt表达的影响
目的:探讨神经病理性疼痛大鼠脊髓水平p-Akt的表达变化及鞘内给予胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)后对其表达的影响.方法:实验1:SD雄性大鼠分为对照组和CCI组.CCI组又分为术后1d组(D1组)、术后3d组(D3组)、术后7d组(D7组)和术后14 d组(D14组).分别于术后1、3、7、14 d测定热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)后处死并取其脊髓背角,采用Western blot方法测定Akt (p-Akt)蛋白表达情况.实验2:SD雄性大鼠分为对照组、D14'组、D14’+PBS组、D14' +GDNF组.与实验1相同时间点测定TWL,并于第14 d处死,取其脊髓背角,采用Western blot和免疫组化法检测p-Akt表达变化.结果:与对照组相比,CCI组大鼠TWL明显降低(P＜0.01);与D14'组和D14'+PBS组相比,D14' +GDNF组大鼠TWL明显升高(P＜0.01).CCI组脊髓组织中p-Akt表达水平于术后3d开始升高,一直持续到术后14d (P＜ 0.01);D14’+GDNF组p-Akt表达水平较D14’组和D14’+PBS组显著下降(P＜0.05).结论:大鼠脊髓组织中Akt信号通路可能参与了神经病理性疼痛的发生,鞘内注射GDNF减轻神经病理性疼痛与降低脊髓组织p-Akt的水平有关.
关键词： 胶质细胞源性神经营养因子 神经病理性疼痛 磷酸化 Akt -
尼氟灭酸对CCI模型鼠DRG神经元TMEM16A表达的抑制作用
目的:观察尼氟灭酸(niflumic acid,NFA)干预后,TMEM 16A在坐骨神经压榨性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元上的表达,研究TMEM16A是否参与神经病理性疼痛.方法:制备CCI模型,热板实验检测热缩足反射潜伏期(thermalwithdrawal latency,TWL).在模型制备后第ld开始以腹腔注射形式给予不同浓度的NFA干预14d,取大鼠L4～6 DRG神经元进行实验.免疫荧光实验明确TMEM16A在DRG神经元中的分布;运用RT-PCR技术和Westem Blot技术在给予不同浓度NFA干预后,检测CCI模型DRG神经元上TMEM 16A的mRNA水平和蛋白的表达.结果:(1) CCI组的TWL较正常组明显缩短,给予10 μM、50 μM和300 μM的NFA干预后,各组TWL较CCI组均明显延长(P＜0.01,刀=6);50μM的NFA干预组较10 μM的NFA干预组TWL也明显延长(P＜0.05,n=6);但300 μM的NFA干预组与50 μM的NFA干预组相比,TWL时间差异无统计学意义. (2)免疫荧光显示TMEM16A主要存在于DRG神经元上;(3) CCI组mRNA水平较正常组明显增高;随着NFA浓度的增加,DRG神经元TMEM 16A的mRNA水平较CCI组逐渐降低,差异具有统计学意义(P＜ 0.01,n=6). (4) CCI组TMEM16A蛋白表达较正常组的明显增高;随着NFA浓度的增加,DRG神经元上TMEM16A蛋白表达较CCI组逐渐减低,差异具有统计学意义(P＜ 0.01,n=6).结论:尼氟灭酸能抑制神经病理性疼痛大鼠DRG神经元TMEM16A的表达,而且与尼氟灭酸的剂量相关,提示钙激活氯通道可能参与或调控神经病理性疼痛的发生.
-
鞘内注射GDNF对神经病理性疼痛大鼠脊髓水平p-Shc表达的影响
目的:探讨神经病理性疼痛大鼠脊髓背角水平p-Shc的表达变化及鞘内注射胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对其表达的影响.方法:实验1:雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组和CCI组.CCI组又分为术后1d组(D1组)、3d组(D3组)、7d组(D7组)和14d组(D14组),分别于术后1、3、7、14d测定热缩足潜伏期(thermal withdraw latency,TWL)和机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)后处死并取其脊髓背角,采用Western blot方法测定Shc/p-Shc蛋白表达情况.实验2:雄性SD大鼠分为sham组、D14组、D14+PBS组、D14+GDNF组.与实验1相同的时间点测定TWL和MWT,并于第14d处死并取其L4～5脊髓背角,采用Western blot方法检测Shc/p-Shc的表达变化.结果:与sham组相比,CCI组大鼠TWL和MWT明显降低(P＜0.01);与D14组和D14+ PBS组相比,D14+ GDNF组大鼠TWL和MWT明显升高(P＜0.01).CCI组脊髓背角内p-Shc表达水平于术后3d开始升高(P＜0.05),一直持续到术后14 d(P＜ 0.01);D14+GDNF组p-Shc表达水平较D14组和D14+PBS组显著下降(P＜0.05).结论:大鼠脊髓背角内接头蛋白Shc可能参与了神经病理性疼痛的发生,鞘内注射GDNF减轻神经病理性疼痛可能与降低脊髓背角Shc的磷酸化水平有关.
关键词： 胶质细胞源性神经营养因子 神经病理性疼痛 磷酸化Shc -
校正后中文版神经病理性疼痛量表的多中心验证
目的:验证中文版神经病理性疼痛量表(Neuropathic Pain Questionnaire,NPQ).方法:三个研究中心共入选神经病理性疼痛患者60例,伤害感受性疼痛患者60例.入选的患者自行填写中文版NPQ,必要时由经培训的研究人员为患者解释量表中的问题.使用Cronbach's Alpha系数和Guttman分半系数评价中文版NPQ的信度.使用ROC曲线下面积、敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值评价量表的内容效度.结果:入组120例患者,其中男47例,女73例.中文版NPQ量表的信度好(Cronbach's Alpha系数为0.838,Guttman分半系数为0.818);中文版NPQ的内容效度好(ROC曲线下面积为0.985,敏感度为88.3％,特异度为98.3％,阳性预测值为98.1％,阴性预测值为89.4％).结论:中文为母语的患者可以使用本研究验证的中文版NPQ作为神经病理性疼痛的诊断工具.
-
趋化因子CXCL16及受体CXCR6在神经病理性疼痛小鼠背根神经节中的表达变化
目的:检测神经病理性疼痛小鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中CXC型趋化因子配体16(C-X-C Motif Chemokine Ligand 16,CXCL16)及其受体CXCR6的表达情况,探讨CXCL16在疼痛的发生发展过程中所发挥的作用.方法:采用ICR小鼠进行坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI),诱导神经病理性疼痛,取术侧不同时间点L4~6节段DRG,通过实时定量PCR、Western Blot和免疫荧光的方法,检测SNI后CXCL16和CXCR6的mRNA和蛋白表达变化;鞘内注射CXCL16重组多肽,观察对疼痛行为的影响.结果:①SNI 3 d后可见小鼠DRG中Cxcl16 mRNA的表达显著增加(P<0.001),可持续至14 d(P<0.001),SNI后7 d CXCL16蛋白表达也显著增加(P<0.05),免疫荧光结果表明CXCL16主要分布在DRG中小型神经元中;②CXCR6的mRNA和蛋白在SNI 7 d显著增加(P<0.05);③鞘内注射CXCL16多肽引起小鼠机械性触诱发痛.结论:外周神经损伤诱导CXCL16和CXCR6在DRG表达增加,CXCL16能够导致痛觉过敏,提示它可能在神经病理性疼痛中发挥作用.
