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同种心脏瓣膜、带瓣血管的免疫原性及其移植后受体细胞替换
液氮冻存的人同种异体心脏瓣膜、带瓣血管(CVH)的耐久性及其远期疗效是影响其临床应用的主要因素.CVH移植后的远期疗效(12~15年后),与植入时供体组织活性的保持及其程度、植入后受体免疫排斥反应的有无及其程度、受体细胞替换供体组织的有无及其程度均有着密切的关系.本文就CVH的免疫原性及其移植后免疫排斥反应、移植后受体细胞替换供体组织方面的实验研究和临床研究结果作一简述.
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自体内皮细胞化组织工程同种心脏瓣膜的初步构建
同种心脏瓣膜以优良的生理特性及组织结构特点广泛应用于瓣膜替换手术及婴幼儿复杂先心病矫治术中,取得良好的临床疗效,但远期易出现钙化、毁损,因而再次移植率较高.2002年3月至2003年12月本研究应用组织工程学方法改良同种心脏瓣膜,构建新型的自体内皮细胞化的组织工程同种心脏瓣膜,以减轻移植后免疫排斥反应,延长瓣膜使用寿命.
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同种心脏瓣膜及带瓣血管的研究及应用
1同种瓣的发展历史及生物学特点自1966年Ross[1]首次应用同种异体主动脉治疗1例肺动脉闭锁病人获得成功后,经过了几十年的发展,保存手段不断改进,使同种瓣临床应用的疗效不断发展,由于与机械瓣和生物瓣相比具有更好的血流动力学特性,越来越受到临床的重视.
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免疫原性在同种心脏瓣膜中的研究进展
深低温保存后的同种心脏瓣膜以优良的生理特性及组织结构等特点,广泛应用于瓣膜替换手术及婴幼儿复杂先心病矫治术中,并取得良好的临床疗效[1],有效地减少了由人工瓣膜引起的心内膜炎的发生率,但同种瓣移植后远期钙化毁损、再次移值率高.目前认为这是由于其免疫原性及移植后免疫排斥反应所致,同种瓣移植后免疫排斥反应及探讨相应的治疗措施是多年来研究的热点,现就此问题作一综述.
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去细胞同种心脏瓣膜的再内皮细胞化
目的:初步构建受体内皮细胞化的组织工程同种心脏瓣膜,减轻移植后免疫排斥反应,并探讨内皮细胞适宜的种植方法,增强内皮细胞与细胞外基质的黏附性.方法:实验于2004-06在阜外医院心血管外科先心病研究室完成.①实验材料:取冠状动脉搭桥患者术中剩余的大隐静脉(该材料是术中多余弃掉部分,患者知情同意),研究方案获伦理委员会批准.②实验方法:采用低渗液-去污剂(10 g/L去氧胆酸)-核酸酶法去除同种心脏瓣膜组织中的全部细胞成分,构建去细胞的同种心脏瓣膜;取培养3~4代的成人大隐静脉内皮细胞,依照内皮细胞密度分为生理密度种植组:以1.5×108 L-1密度种植;超生理密度种植组:以(4~5)×108 L-1密度种植;生理密度反复种植组:以1.5×108 L-1密度,反复种植3 d.③实验评估:种植于脱去全部细胞的同种心脏瓣膜上,静态培养5 d,扫描电镜观察内皮细胞的覆盖情况.结果:去细胞同种心脏瓣膜的细胞外基质有着良好的细胞黏附性;3种不同的内皮细胞种植密度,其中以内皮细胞超密度(4~5)×108 L-1种植,静态培养5 d,同种组织瓣膜表面基本覆盖单层内皮细胞,细胞间相互延伸汇合,形态结构良好.以生理密度种植内皮细胞覆盖率较低,细胞大多孤立存在,细胞间较少相互延伸汇合.生理密度反复种植3 d,内皮细胞覆盖率低于超生理密度种植组,细胞间可见相互延伸汇合,细胞形态结构良好.结论:去细胞同种心脏瓣膜的再内皮细胞化保留了同种心脏瓣膜的正常结构、功能及良好的组织相容性,有望延长瓣膜的使用寿命,取得更好的临床疗效.
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同种瓣移植术后免疫反应的作用及其对策
人同种心脏瓣膜移植术后瓣膜的远期功能和寿命仍不理想.既往认为机械性因素是引起同种瓣移植术后退行性变的主要原因,而移植术后免疫排斥反应在瓣膜退行性变中所起的作用一直存在争议.近年来,随研究深入,证实免疫排斥反应是加速同种瓣退行性变的重要因素,通过抗免疫排斥反应的方法来提高瓣膜远期耐久性可以取得较好的疗效.现综述如下.
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两种去细胞人心脏瓣膜的免疫原性分析
目的 应用组织工程学方法去除人同种心脏瓣膜(HV)的内皮细胞成分或全部细胞成分,比较两种去细胞HV的免疫原性变化.方法 采用低渗液-去污剂(1% Triton)-核酸酶[1 μg/ml核糖核酸酶(RNase)和10μg/ml去氧核糖核酸酶(DNase)]去细胞法去除HV表面的内皮细胞成分,保留间质细胞及细胞外基质结构的完整性;采用低渗液-去污剂(1%去氧胆酸)-核酸酶[20 μg/ml RNase和200 μg/ml DNase]去细胞法去除HV组织中所有细胞成分,保留完整的细胞外基质.免疫组织化学方法测定HLA-DR抗原在HV组织中的表达;行大鼠皮下移植试验,组织学评价及定性、定量分析组织的钙化程度.结果 免疫组织化学结果证实HV去内皮细胞和去全部细胞后组织中HLA-DR抗原表达均下降,但去全部细胞HV的HLA-DR抗原表达下降更为显著.大鼠皮下移植实验结果表明深低温液氮保存HV和去内皮细胞HV组织中有大量炎性细胞浸润,以淋巴细胞为著,管壁组织更为显著;去全部细胞HV炎性反应较轻,仅组织边缘有少量炎性细胞浸润.钙盐染色深低温液氮保存HV和去内皮细胞HV组织中可见钙盐沉积,呈现大量黑色颗粒,管壁组织更为显著;而去全部细胞HV组织中钙盐沉积极少.原子吸收光谱法定量分析结果表明去全部细胞HV组织中钙离子含量明显低于去内皮细胞HV和深低温液氮保存HV (P<0.05),后两者差异无统计学意义(P>0.05).结论 去全部细胞HV组织免疫原性显著下降,移植后炎性反应和组织钙化程度显著减轻.去内皮细胞HV组织免疫原性及移植后炎性反应有所下降,但移植后组织钙化程度仍显著增高,且管壁组织钙盐含量增高较瓣叶组织更加显著,提示组织中大量的间质细胞可能是参与HV移植后免疫反应、导致HV移植后钙化毁损的主要组织成份.
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心脏、血管(循环系)疾病
中图分类号 名称中图分类号名称R54心脏、血管(循环系)疾病心脏、血管(循环系)肿瘤入R732;心脏、血管梅毒入R759.1。R540.4+7心血管机能试验R540.4诊断学心血管造影术入R816.2。〈心血管同位素造影术,4版改入R817.42〉R540.4+8颈动脉搏动图R540.4+1心电图R541心脏疾病猝死入此。R540.4+2心电向量图R541.1先天性心脏血管病R540.4+3心尖搏动图R541.2风湿性心脏病参见R593.21。R540.4+4心音图R541.3高血压性心脏病R540.4+5超声心动图R541.4冠状动脉(粥样)硬化性心脏病(冠心病) 冠状动脉供血不全、心绞痛等入此。R540.4+6心导管插入术R541.5肺原性心脏病同种心脏瓣膜homologous cardiac valveR541.6血液循环衰竭