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小口径微孔聚氨酯人工血管的动物体内植入研究
将内径4mm的聚氨酯微孔人工血管植入Beagle狗体内,置换一段腹主动脉,研究血管内腔的内皮细胞化过程.该小口径血管具有以下特点:内腔偶联水蛭素以增加抗血栓性;顺应性接近天然血管;血管内表面孔径为40μm,并且管壁的孔径由内到外呈梯度增大.植入初始,人工血管内腔先吸附血浆纤维蛋白.14d见有少量梭形内皮样细胞生成.41d后形成完整内膜,由表面的内皮细胞单层和其下的平滑肌细胞组成.90d后生成稳定的内膜,平均厚度223μm.偶联水蛭素组和无偶联水蛭素组的通畅率分别为88.9%和75.0%.结果表明,改善抗血栓性、顺应性和微观结构可提高小口径人工血管的性能,有效促进内腔自然内皮细胞化,显著提高长期通畅率.
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去细胞同种心脏瓣膜的再内皮细胞化
目的:初步构建受体内皮细胞化的组织工程同种心脏瓣膜,减轻移植后免疫排斥反应,并探讨内皮细胞适宜的种植方法,增强内皮细胞与细胞外基质的黏附性.方法:实验于2004-06在阜外医院心血管外科先心病研究室完成.①实验材料:取冠状动脉搭桥患者术中剩余的大隐静脉(该材料是术中多余弃掉部分,患者知情同意),研究方案获伦理委员会批准.②实验方法:采用低渗液-去污剂(10 g/L去氧胆酸)-核酸酶法去除同种心脏瓣膜组织中的全部细胞成分,构建去细胞的同种心脏瓣膜;取培养3～4代的成人大隐静脉内皮细胞,依照内皮细胞密度分为生理密度种植组:以1.5×108 L-1密度种植;超生理密度种植组:以(4～5)×108 L-1密度种植;生理密度反复种植组:以1.5×108 L-1密度,反复种植3 d.③实验评估:种植于脱去全部细胞的同种心脏瓣膜上,静态培养5 d,扫描电镜观察内皮细胞的覆盖情况.结果:去细胞同种心脏瓣膜的细胞外基质有着良好的细胞黏附性;3种不同的内皮细胞种植密度,其中以内皮细胞超密度(4～5)×108 L-1种植,静态培养5 d,同种组织瓣膜表面基本覆盖单层内皮细胞,细胞间相互延伸汇合,形态结构良好.以生理密度种植内皮细胞覆盖率较低,细胞大多孤立存在,细胞间较少相互延伸汇合.生理密度反复种植3 d,内皮细胞覆盖率低于超生理密度种植组,细胞间可见相互延伸汇合,细胞形态结构良好.结论:去细胞同种心脏瓣膜的再内皮细胞化保留了同种心脏瓣膜的正常结构、功能及良好的组织相容性,有望延长瓣膜的使用寿命,取得更好的临床疗效.
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左心辅助泵(人工心)内皮细胞化的实验研究
培养猪主动脉内皮细胞,用预衬细胞外基质结合使用bFGF的方法实现静置条件下PU材料的内皮细胞化,并观察内皮化材料在LVAP泵腔内模拟流体条件下内皮细胞的贴壁率和丢失率以及内皮细胞的形态变化.结果显示:用预衬基质结合使用bFGF的方法,静置条件下可以实现PU材料的内皮化.镜下观察细胞形态良好,在LVAP泵腔内模拟流体条件下冲击1、2 h后,细胞贴壁率分别为74.42%和59.7%,丢失率分别为25.58%和40.30%.扫描电镜观察,细胞总的形态变化不明显,轻度收缩,部分细胞有脱落.本实验为实现LVAP泵腔内壁流体条件下内皮化初步摸索了条件和实验方法.
关键词： 左心辅助泵 内皮细胞化 碱性成纤维细胞生长因子 细胞外基质 聚氨酯 -
bFGF促进内皮细胞在聚氨酯材料上黏附的机理探讨
bFGF能够促进内皮细胞在人工聚氨酯材料上的黏附,但其分子机制尚不清楚.本文采用Western Blot结合图像处理分析方法,观察了bFGF对血管内皮细胞β1整合素表达的影响,结果显示bFGF处理组和对照组平均灰度值分别为166.11±9.86和175.32±5.12,两组免疫酶显色有明显差异,表明bFGF能够诱导内皮细胞膜表面β1 整合素合成增加.我们推测bFGF通过上调内皮细胞β1整合素表达,增强了内皮细胞在聚氨酯材料上的黏附.本文提示bFGF是实现人工心、血管内皮细胞化的一种有效辅助因素.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 聚氨酯 整合素 内皮细胞化 -
医用聚氨酯生物相容性研究新进展
聚氨酯因有良好的生物相容性和机械性能,而被广泛用于生物医学领域.但聚氨酯长期植入人体内,也会引起机体的炎症反应,使材料发生老化降解现象.因而要进一步提高医用聚氨酯的生物相容性,使其与机体生理环境更加相容,不诱发或少诱发炎症反应,就要使材料表面更加生物化,可以维持蛋白的正常构象.本文综述了以仿生化为基础提高医用聚氨酯材料生物相容性的两种主要途径--表面内皮细胞化及仿生物膜结构(表面磷脂化),并总结了其实施方法及存在的问题.
