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胃癌线粒体DNA拷贝量的变化
目的:通过比较线粒体基因组(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数在胃癌和癌旁胃黏膜组织间的差异,阐述mtDNA与胃癌发生的关系.方法:PCR分别扩增胃癌组织和癌旁胃黏膜组织各20例共40个样本的线粒体D-1oop两个高变区HV1(hypervariable region)和HV2;并以核基因组的β-actin作为定量标准物.聚丙烯酰胺凝胶电泳(po1yacrylamide ge1 electrophoresis,PAGE)银染比较mtDNA拷贝数在癌和正常组织间的差异.结果:HV1和HV2拷贝量(用β-actin标准化)在胃癌组织和癌旁组织间有显著的差异(P<0.01);其拷贝量与组织类型,癌组织浸润深度未发现有统计学联系(P>.05);而与核内一些重要的酶:碱性磷酸酶(AKP)、环腺苷酸磷酸二脂酶(cAMP-PDE)和环鸟苷酸磷酸二脂酶(cGMP-PDE)表达有一定关系(P<.05).结论:胃癌的发生与胃上皮细胞内mtDNA量的减少有着密切的关系.有望成为一种新的肿瘤分子标志物.
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磷酸二脂酶Ⅲ型抑制剂抑制体外循环炎性反应的临床观察
体外循环(CPB)手术可通过多种致炎因素诱发全身性炎性反应,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)等细胞因子在其中发挥着极为重要的作用.本实验通过对CPB手术前后TNF-α、IL-6及内皮素1(ET-1)的动态观察,评价磷酸二脂酶(PDE)Ⅲ型抑制剂氨力农在抑制CPB诱导的全身性炎性反应方面的作用.
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探讨中国传统性医学--从"伟哥热"引发的思考
蓝色精灵伟哥(Viagra),药学名为西地那非.在全球引起了轰动效应.在抗心绞痛的研究中无意发现有改善勃起功能的作用而使之进入临床试验.它作为首选5型PDE(5型磷酸二脂酶)抑制剂应用于临床的.男性性功能障碍原因包括心理性、器质性,西地那非被证实是有效的且不被抗高血压治疗所影响.然而,西地那非的效力随男性勃起功能障碍严重性的增加而下降.总之,西地那非是应急使用药品,治疗勃起功能障碍也只能是暂时性、一次性的,不是治本的,尽管有良好的耐受性,但仍可能有远期副作用.在伟哥风行一时的今天,中国传统性医学是值得人们去探讨及研究的领域.
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米力农的临床应用及进展
米力农是一种磷酸二脂酶Ⅲ(PDEⅢ)抑制剂,作为一种非儿茶酚胺、非洋地黄类的正性肌力药,在治疗充血性心力衰竭(CHF)和扩血管等方面发挥了越来越重要的作用.在美国等多国,静脉注射米力农已被广泛用于改善心力衰竭病人的心脏功能[1,2].在我国,米力农应用的时间还不长,关于此药的具体研究也尚未深入.因此本文对其药效学、药代学、临床应用及进展等情况做一综述.
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西地那非治疗肺动脉高压回顾
Croom KF等人进行了一项研究,对枸橼酸西地那非对于肺动脉高压的治疗进行了回顾.枸橼酸西地那非是一种磷酸二脂酶-5(P D E,)抑制剂,在美国、欧洲和其他国家已经被批准用于治疗肺动脉高压(PAH).
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人磷酸二脂酶基因反义RNA重组腺病毒载体的构建
目的:探讨人磷酸二脂酶5(PDE5)基因反义RNA重组腺病毒载体的构建方法.方法:根据基因库确定具有完整PDE5A1启动子活性的cDNA基因序列,并设计反义链,两端加内切酶修饰;通过转载体克隆方法构建转入载体(pENTR)并测序;借助Gateway腺病毒表达载体系统进行重组反应构建重组腺病毒表达载体pAd/CMV/V5/antisense-PDE5A1;Pac Ⅰ酶切后转染293A细胞系进行包装、扩增;病毒质粒酶切后电泳鉴定及PCR检测;CsCl梯度离心法纯化病毒,病毒空斑实验进行滴度测定.结果:pENTR载体测序证实目的基因序列及插入方向正确;pAd/CMV/V5/antisense-PDE5A1酶切后电泳鉴定,可见145 bp的片段;PCR检测证明实验设计的目的反义基因成功插入腺病毒载体中;重组腺病毒滴度达108~1010/μl.结论:借助Gateway腺病毒表达载体系统可成功地将人工合成的反义基因装入到腺病毒载体中;纯化病毒液量和滴度符合体内基因转染实验的要求.
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环磷酸腺苷的研究进展
环磷酸腺苷(cyclic Adenosine-3',5'-monophosphate,简称cAMP)是核苷酸的衍生物,为蛋白激酶致活剂,是有机体中广泛存在的一种具有生理活性的重要物质,由ATP在腺苷活化酶催化下生成,是细胞内传递激素和递质作用的中介因子,因此被称为"第二信使".其灭活酶为磷酸二脂酶.它对很多酶催化的反应具有调节作用,可调节与细胞内贮藏的糖和脂肪反应的一系列酶的活性,对蛋白质的生物合成也具有调节控制作用.可广泛参与细胞功能的调节,能舒张平滑肌、扩张血管、改善肝功能、促进神经再生、抑制皮肤外层细胞分裂和转化异常细胞的功能、促进呼吸链氧化酶的活性、改善心肌缺氧等.国外对其生理活性、作用机理进行了大量研究,涉及疾病治疗、信号表达、基因复制等方面.环磷酸腺苷(cAMP)可以通过化学合成、生物发酵、天然产物分离提取等方法获得.
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非那根辅助治疗哮喘持续状态附16例报告
哮喘持续状态时患者极为紧张,张口呼吸,大汗淋漓,多明显发绀,端坐呼吸.如病情不能有效控制,甚至出现呼吸、循环衰竭. 哮喘病防治原则是消除病因.控制急性发作,促进排痰,积极控制感染.用药时常选用下列气管舒张剂单用或联用,常用药物有:拟肾上腺类药物,多选用对β-受体兴奋剂.可激活腺苷酸环化酶,催化三磷酸腺苷合成环磷酸腺苷(CAMP),使肥大细胞内CAMP增加抑制生物活性物质释放.茶碱类药物,多用氨茶碱可抑制细胞内磷酸二脂酶,减慢环磷酸腺苷(CAMP)的分解速度,以增加CAMP在细胞内的含量.肾上腺皮质类激素,具有提高β2受体对拟肾上腺类药物的作用效应.并有抗炎,抗过敏作用.因此,三者有协同作用.还有抗胆碱能类药物,钙拮抗剂,色甘酸二钠噻哌酮等等.