蓝氏贾第鞭毛虫河北株的分离及其基因型研究

目的探讨河北承德地区蓝氏贾第鞭毛虫包囊大小与基因型的关系.方法对河北承德地区进行贾第虫流行病学调查,分离出3株贾第虫(CH2、CH3、CH4).用PCR技术对此3虫株DNA进行tim基因扩增和序列测定,并与GenBank登记虫株比较和用DNAstar软件处理.结果此3株贾第虫株的基因型属2型(JH型).结论该地区贾第虫包囊形态之大小,与基因型并无直接关系.

双抗夹心ELISA检测犬粪贾第虫抗原方法的建立及应用

目的 建立简便、特异的检测犬粪贾第虫抗原贾第素α-12的双抗夹心ELISA方法. 方法 利用辣根过氧化物酶标记抗贾第素α-12单克隆抗体4C9,通过过滤、超声的方法处理犬粪样品.以抗贾第素α-12单克隆抗体3H10为捕获抗体,5％脱脂奶粉作为封闭剂,辣根过氧化物酶标记的抗贾第素α-12单克隆抗体4C9为检测抗体,经底物显色后,用酶标仪测量490 nm处的吸光度(A)值.通过棋盘滴定法确定抗体适包被浓度、佳封闭剂、待检粪液佳稀释度及酶标抗体佳稀释度.应用建立的ELISA方法对122份犬粪样品进行检测. 结果 建立的双抗夹心ELISA检测标准阳性样品的A490为0.465,标准阴性样品的A490为0.098;优化的佳检测条件为:抗体包被浓度为0.01 mg/ml,封闭剂为1％ BSA,粪液稀释度为1∶2,酶标二抗稀释度为1∶400,该试验与犬等孢球虫、犬隐孢子虫、犬蛔虫样品均无交叉反应,批间和批内变异系数较小,重复性好.应用本方法对122份犬粪进行检测,阳性率为36.9％. 结论 建立的双抗夹心ELISA方法特异性高,重复性好,为贾第虫流行病学调查提供了一种更简便、快速、特异的免疫学检测方法.

我国人体贾第虫病流行病学及基因分型的研究进展

贾第虫是一种重要的机会致病寄生原虫,其宿主范围广泛,包括人、哺乳动物和鸟类,呈世界性分布.贾第虫病可导致严重腹泻,对人类健康构成很大威胁.贾第虫在全球的感染率较高,尤其是在发展中国家,因此有必要对人体贾第虫病进行深入研究.国外对贾第虫病的报道和研究较多,而我国近几年才开始重视对人体贾第虫病的调查和研究.本文对我国贾第虫病的流行病学、基因分型、防治措施等方面进行综述,旨在为我国人体贾第虫病的深入研究及有效防控提供参考.

贾第虫种类、基因型及其分子流行病学研究进展

贾第虫是一种重要的人兽共患肠道原虫,其中蓝氏贾第虫分类较为复杂,至少包含7个(A～G)有效集聚体.基于有限的形态学和宿主特异性研究无法准确鉴定贾第虫基因型及其传播途径,分子生物学分析方法有效地解释了贾第虫病复杂的流行病学及其人兽共患传播机制.

蓝氏贾第鞭毛虫的细胞骨架

国外的研究表明,贾第虫虽然是一种较低级的真核生物,但确有与其他生物相似的高度发达的、复杂的细胞骨架系统.贾第虫的细胞骨架与虫体的运动、增殖及致病密切相关.因此,将贾第虫的骨架成分作为新药物开发的靶点,筛选对细胞骨架有损伤作用的药物,破坏贾第虫的细胞骨架使其丧失吸附功能,失去致病能力是值得探寻的新途径.

UV法测定奥硝唑分散片的含量

奥硝唑是一种继甲硝唑、替硝唑之后的第三代新型硝基咪唑类衍生物,具有良好的抗厌氧菌作用和抗滴虫作用,国外已广泛用于治疗由厌氧菌、阿米巴原虫、贾第虫、毛滴虫感染引起的各种疾病.本文采用紫外分光光度(UV)法测定含量,结果表明,本法简便、迅速、结果准确.

寄大志于小虫——记我国著名寄生虫学学者卢思奇教授

[编者按] 卢思奇教授是我国著名寄生虫学学者,潜心从事医学寄生虫学教学和科研工作30余载,在机会性致病原虫,尤其是在贾第虫研究方面做出了突出贡献.在贾第虫的研究过程中,他从初始的流行病学调查到对细胞核仁的观察,历经从宏观到微观的全部过程.卢思奇教授寄大志于小虫,将自己的人生理想和志愿全身心地倾注于小小的寄生虫研究上,体现了他对科学研究的韧性和执着.卢思奇教授治学严谨、为人宽厚、谦虚,深受学生和学界同仁的爱戴.

中试装置去除饮水中贾第虫与隐孢子虫的简介

为了从饮水中有效地去除贾第虫孢囊和卵囊,需要采取多种处理方法,通常包括进行有效的水源防护,优化处理及配备完好的配水系统.本研究主要针对3种处理装置开展了研究,分析了原水和净化后的水样,测定贾第虫孢囊与隐孢子虫卵囊的浓度和去除率,以及孢囊与卵囊浓度和水的浑浊度及微粒物的粒度之间的关系.

吐鲁番地区乡村小学生感染情况调查

目的 了解吐鲁番地区乡村小学生贾第虫感染情况.方法 采集吐鲁番地区5所小学学生共762份粪便标本,经直接涂片法及碘液染色法检查是否感染贾第虫.结果 共检测762份粪便样品,检获32个贾第虫分离株,总感染率为4.20％ (32/762).不同年龄段人群感染差异有统计学意义(P＜0.05),以7～8岁年龄段高;不同性别人群感染差异无统计学意义(P＞0.05);不同乡村小学生感染率不同.结论 只有采取多种综合措施,才可以减少贾第虫的感染和传播.

肠道贾第虫病42例的临床分析

目的:观察贾第虫病的临床表现及甲硝唑对贾第虫病的治疗作用.方法:用甲硝唑治疗42例贾第虫病患者,剂量为0.4g,日3次,连服7～10d为一疗程,其中服1个疗程的有35例,服2个疗程的有5例,服3个疗程的有2例.结果:经治疗后,全部患者的症状如腹泻及(或)腹痛等胃肠道症状均消失,粪检结果恢复正常.患者服药期间的不良反应轻,仅有轻微的胃肠道反应,如恶心、厌食等.结论:甲硝唑治疗贾第虫病具有疗效好、耐受性好的优点.

便常规标本查出贾第虫包囊致病

我们于2002年4月,从1例住院病人的便常规标本中,查出贾第虫包囊,现报告如下.

云南中缅边境居民贾第虫感染影响因素分析

目的 了解云南那邦口岸中缅双边贾第虫感染危险因素.方法 2008年整群随机抽取中国盈江县那邦镇和缅甸拉咱市边境自然村,对调查点内居住时间＞1年的边民进行流行病学问卷调查及新鲜粪便碘液涂片镜检,采用logistic回归方法对数据进行统计分析.结果 共调查6个自然村903人,平均年龄为(22.81±18.82)岁；总贾第虫感染率为13.51％,其中调查2个中国自然村286人,感染率为2.10％；调查4个缅甸自然村617人,感染率为18.80％；单因素分析结果表明,国籍、年龄、民族、用手抓饭、喝生水、饮用水源、近1月内腹泻、使用厕所类型和粪便带粘液为可能的危险因素；多因素分析结果表明,国籍、年龄、民族、喝生水和粪便带粘液为主要危险因素.结论 直接饮用被粪便污染的水源是缅甸边民贾第虫流行的主要原因.

贵阳市生活污水中隐孢子虫及贾第虫检测

目前,污染饮用水的致病性原虫主要是肠贾第鞭毛虫和隐孢子虫.2种虫类污染饮用水源及供水系统导致的流行性疾病暴发事例在国外时有报道[1,2].贵州省贵阳市市区居民生活饮用水获得的方式仍以市政自来水为主,但集中式饮用水水源地的水质月报中仍未将2种原虫的检测归为常规监测项目.为了解贵州省贵阳市饮用水源是否受到致病性原生动物的污染,于2006年对贵阳市主要饮用水源地周边的12个生活污水排污处的水样进行了监测.现将结果报告如下.

犬贾第虫巢式PCR检测方法的建立

目的 建立犬贾第虫巢式PCR检测方法并进行验证.方法 根据犬贾第虫Rnase P基因序列设计两对特异性引物,通过优化Mg2+浓度和退火温度建立巢式PCR检测方法,并进行灵敏度和特异性验证.用优化的巢式PCR方法检测60份犬临床粪样.结果 建立的巢式PCR方法的佳Mg2+浓度为3.0 mmol/L;佳退火温度为53℃;对犬贾第虫的低检测量可达1个虫体DNA/ml;对柔嫩艾美尔球虫、伊氏锥虫、弓形虫、阴道毛滴虫、犬心丝虫等寄生虫基因组DNA的扩增结果均为阴性;60份犬临床粪样贾第虫的检出率为61.7％.结论 建立的巢式PCR检测方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于犬贾第虫感染的临床检测.

天津市某污水处理厂出水中贾第虫和隐孢子虫含量及其潜在健康危害

[目的]了解天津某郊野公园补给河流纳入的处理后污水中贾第虫和隐孢子虫(简称“两虫”)的浓度水平及其对人群潜在的健康危害. [方法]于2014年3-7月每2周对补给河流上游A污水处理厂出水进行采集,共采集9份样品.水样经沉淀浓缩、密度梯度纯化、免疫荧光染色后经荧光显微镜检测“两虫”,测定其浓度.采用定量微生物风险评价法对人群通过绿地灌溉和湖泊玩耍暴露于“两虫”的潜在健康危害进行评价.[结果]出水中均能检测出“两虫”,其中浓度范围分别为11～53包囊/L和0～20卵囊/L.在常规氯消毒后排放时,贾第虫和隐孢子虫的年感染概率分别为5.69×10-3和2.46×10-3,均高于美国环境保护署地表水处理法规定的1.0×10-4.若采用紫外线或臭氧进行消毒,其感染“两虫”的概率为2.75×10-5. [结论]A污水处理厂出水中均能检出“两虫”,其浓度水平与国内外报道的污水处理厂相当.处理后的水经氯消毒后排放至河流经灌溉绿地或湖泊玩耍接触人群,存在感染“两虫”的潜在健康危害.出厂水若采用紫外线或臭氧消毒则可降低“两虫”对人群的健康危害.

贾第虫病的实验诊断

该文对贾第虫病的病原学、免疫学及分子生物学检查方法的研究进展进行了综述,讨论了影响检查结果的因素,并简要介绍了检测贾第虫粪抗原的商品化试剂盒及包囊活性的鉴定方法.

湖北赤壁市农村儿童感染贾第虫的初步分析

目的 评估湖北省赤壁市农村儿童感染贾第虫情况,并初步进行类型分析,为加强贾第虫病的防治提供依据. 方法 从赤壁市进行隐孢子虫调查的儿童粪便样本中,随机抽取20份样本,基于贾第虫磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase,tpi)基因,采用巢式PCR检测粪便标本中的贾第虫,对阳性样本的tpi基因片段进行测序,与GenBank中参考序列进行同源性比对分析,确定贾第虫的集聚体类型. 结果 PCR检测结果显示,1份样本为贾第虫阳性,测序后经分析鉴定为集聚体A,与美国威斯康辛州的污水厂污水分离株1503同源性为99％. 结论 该地区农村儿童存在贾第虫感染,应加强贾第虫感染检测和卫生宣教.

贾第虫在同社区中人与犬相互传播的流行病学和分子生物学证据

临床腹泻患者贾第虫感染和分子特征研究

目的 初步了解临床腹泻患者贾第虫的感染情况及分子特征.方法 以2014年5-7月上海市某医院临床腹泻患者为研究对象,收集粪便样本95份,进行卢戈氏碘液染色,用光学显微镜检查贾第虫包囊.采用巢式PCR法扩增贾第虫磷酸丙糖异构酶基因(tpi),扩增产物测序后用BLAST、ClustalX 1.83和MEGA6.0软件进行同源性和系统发育分析.结果 形态学观察发现1例腹泻患者感染贾第虫,阳性检出率为1.05％.其粪便样本经卢戈氏碘液染色后显微镜下可见清晰的包囊.对样本进行PCR检测,扩增片段大小约为530 bp,测序结果显示为贾第虫.经序列比对分析,并以tpi基因构建系统发育树,分析鉴定该分离株为集聚体B,与已报道的人源贾第虫分离株(KF271445)同源性为100％.结论 临床腹泻患者中存在贾第虫感染,本研究结果可为了解贾第虫基因型特点及贾第虫病流行病学研究提供参考.

我国首株牛源贾第虫的分子鉴定

目的 通过16S及内转录间区(ITS)rDNA基因序列的扩增、克隆以及序列分析,从分子水平对首次在我国分离腚的一株牛源贾第虫进行种类及基因型鉴定.方法 根据GenBank中登录的贾第虫rRNA基因序列,设计引物,采用热启动-降落PCR方法从牛源贾第虫基因组DNA中扩增出目的片段,经TA克隆至pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,然后进行序列分析.结果 成功地扩增出该株牛源贾第虫的16S rRNA全基因及rDNA ITS序列,大小为1 715 bp,包括1 447 bp的16S rDNA全长序列和243 bp的ITS间区序列,以及25 bp的26S rDNA基因5末端.序列分析表明此牛源贾第虫为E型蓝氏贾第虫.结论 本研究从分子水平鉴定我国首株牛源贾第虫为蓝氏贾第虫(E型),并首次报道了该虫株的rDNA 16S及ITS序列,为牛源贾第虫的进一步研究奠定了基础.