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大鼠三叉神经中脑核内GABAA受体和GABAB受体的定位分布
目的观察大鼠三叉神经中脑核(Vme)内GABAA受体(GABAAR)和GABAB受体(GABABR)的定位分布,为研究GABA受体在面口部本体感觉信息传递和调控中的作用提供形态学依据. 方法用免疫细胞化学技术,染色结果在光学显微镜下进行观察.结果在Vme内可观察到大量GABAAR和GABABR样免疫反应阳性的胞体、纤维和终末,其不同亚单位的分布具有一定差别:1.GABABR1亚单位主要分布于Vme神经元的胞体,呈强阳性反应,而GABABR2亚单位只见于Vme神经元胞体周围的纤维和终末内,呈弱阳性反应,Vme神经元为阴性;2.在Vme内亦可观察到大量GABAAR免疫反应阳性的胞体、纤维和终末,其主要亚单位有α1、α2、α3和β.其中GABAARα1和GABAARα3亚单位只分布于神经元胞体,呈强阳性反应,GABAARα2和GABAARβ亚单位仅见于神经纤维和终末内,Vme神经元胞体为阴性;3.密集分布的GABABR2、GABAARα2和GABAARβ亚单位样免疫阳性纤维和终末似包绕在Vme神经元胞体的周围,其中以GABAARα2的免疫染色强,分布也较为集中.结论GABAA受体和GABAB受体的不同亚单位在Vme内的定位分布有一定差异,提示GABA能神经终末对面口部本体感觉信息的传递发挥抑制性调控作用,可能主要是由位于Vme神经元胞体内的GABAARα1和GABAARα3亚单位所介导.
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大鼠囊泡膜谷氨酸转运体样和谷氨酸脱羧酶样阳性终末与表达GABAA受体α3亚单位的三叉神经中脑核神经元之间的联系
目的观察大鼠三叉神经中脑核(Vme)内囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1和DNPI)样和谷氨酸脱羧酶(GAD)样阳性终末与GABAA受体α3亚单位(GABAARα3)样阳性神经元之间的联系. 方法免疫荧光组织化学三重染色技术,在激光共聚焦显微镜下观察. 结果在Vme吻尾方向上,有大量的神经元胞体呈GABAARα3样免疫阳性,这些神经元多为大的假单极神经元(直径为25～50μm).VGluT1样、DNPI样和GAD样免疫阳性终末密集分布于Vme内,一些VGluT1/DNPI样和GAD样阳性终末包绕在GABAARα3样阳性Vme神经元胞体周围,并与之形成密切接触. 结论 Vme神经元在介导口面部本体感觉信息的传递过程中,可能同时接受中枢其他来源的谷氨酸能和GABA能终末的调控,其中GABA能终末的作用可能是通过GABAA受体实现的.
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大鼠三叉神经中脑核内GAD样阳性终末与PAG和GABAA受体α3亚单位阳性共存神经元的联系
目的观察大鼠三叉神经中脑核(Vme)内谷氨酸脱羧酶(GAD)样阳性终末与磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)、GABAA受体α3亚单位(GABAA Rα3)和小白蛋白(PV)样阳性神经元之间的联系. 方法免疫荧光组织化学三重染色技术,在激光共聚焦显微镜下进行观察. 结果在Vme内可观察到大量的GABAA Rα3样、PAG样和PV样免疫反应阳性神经元,吻尾方向几乎在其全长出现,多为大的假单极神经元(直径为25～50μm).大约90%左右的PAG样阳性神经元同时呈GABAARα3样和PV样免疫阳性.在激光共聚焦显微镜下观察到,密集分布的GAD样阳性终扣聚集在PAG样和GABAARα3样双重标记的Vme神经元胞体周围,并与之形成密切接触. 结论GA-BA能神经元投射至Vme的神经终末可能通过位于Vme神经元胞体内的GABAARα3亚单位对谷氨酸介导的面口部本体感觉信息的传递发挥抑制性调控作用.
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三叉神经中脑核的研究进展
三叉神经中脑核是唯一的位于中枢内的初级感觉神经元,主要传递口面部本体感觉信息.由于其结构和分布的特殊性,使得人们对它的了解很不完全.近年来随着方法学的进步,有关三叉神经中脑核的研究逐渐增多起来.本文结合形态学和电生理学两个方面,综述了关于三叉神经中脑核的研究进展,以期为进一步阐明口面部本体感觉信息的产生和调控机制奠定基础.
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鱼类三叉神经中脑核位置及细胞形态的研究
目的:应用生物胞素法观察罗非鱼三叉神经中脑核位置及细胞形态特征.方法:本研究选用罗非鱼15只(雌雄不限),体长15～20 cm,浸入140 mg/L三卡因间氨苯酸乙脂甲磺酸盐(MS222)溶液中麻醉,在手术显微镜下暴露脑和神经,通过生物胞素(Biocytin)结晶追踪技术研究罗非鱼三叉神经中脑核的位置、细胞形态分布.结果:①罗非鱼的三叉神经中脑核位于中脑后交联水平.②三叉神经中脑核的下行纤维与运动核之间存在突触联系.③三叉神经中脑核的细胞形态为圆形或卵圆形.结论:罗非鱼的三叉神经中脑核位于中脑后交联的高度,其接受走行于三叉神经三大分支内的感觉纤维并发出的下行纤维与运动核形成突出联系.
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大鼠三联单叉神经中脑核内囊泡膜谷氨酸转运体样和GAD样阳性末梢与GABAA受体α1亚单位样阳性神经元的联系
近已在哺乳类动物脑内克隆出两种新的脑内特殊的Na+依赖的无机磷酸转运体,它们均属于囊泡膜谷氨酸转运体,被分别命名为VGluTl(Vesicular glutamate transporter of type1)和DNPI(differentiation-associatedNa+-dependent inorganicphosphate eotransporter).本研究应用免疫荧光组织化学三重染色技术,在激光共聚焦显微镜下观察了大鼠三叉神经中脑核(Vine)内VGIuT1样和DNPI样以及谷氨酸脱羧酶(GAD)样阳性末梢与GABAA受体α1亚单位(GABAARa1)样阳性神经元之间的联系.结果显示:①几乎所有的Vme神经元均呈GABAA受体α1亚单位样免疫阳性,吻尾方向在其全长出现,这些神经元绝大多数为大的假单极神经元(直径为25～50um),但也有小部分为直径小于25um的神经元.②大量的VGluT1样和DNPI样免疫阳性的神经纤维和末梢广泛分布于Vine内,其中DNPI样阳性纤维和末梢的分布密度高于VGIuT1;同时还观察到GAD样阳性纤维和末梢也密集分布于Vme内.③VGluT1样、DNPI样和GAD样免疫阳性终扣分别包绕在GABAA受体α1亚单位样阳性Vine神经元胞体周围,并与之形成密切接触.以上结果提示:Vme神经元在介导面口部本体感觉信息的传递中,可能同时接受中枢其他来源的谷氨酸能和GABA能末梢的调控,其中GABA能的投射末梢可能通过位于Vine神经元内的GABAA受体对面口部本体感觉信息的传递发挥抑制性调控作用.
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大鼠GAD样、甘氨酸样和SP样阳性终末与三叉神经中脑核神经元接触--Confocal显微镜观察
应用免疫荧光组织化学双重染色和三重染色技术,在激光共聚焦显微镜下观察了大鼠三叉神经中脑核(Vme)内谷氨酸脱羧酶(GAD)样、甘氨酸(Gly)样和P物质(SP)样阳性终末与磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)样阳性神经元之间的联系.结果显示:①几乎所有的Vme神经元均呈PAG样免疫阳性,这些神经元绝大多数为大的假单极神经元.②密集分布的GAD样或Gly样免疫阳性的神经终扣分别聚集于PAG样阳性的Vme神经元胞体周围,并与之形成密切接触.③SP样免疫阳性终末与PAG样阳性的Vme神经元形成接触,且这些终末中有部分与5-羟色胺(5-HT)免疫活性物质共存.以上结果表明:GABA能、Gly能和SP能投射至Vme的神经终末,可能在初级神经元即Vme水平对谷氨酸介导的口面部本体觉信息的传递具有抑制性调控作用.
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支配不同咀嚼肌的初级运动神经元在三叉神经中脑核团和三叉神经运动核团中的空间分布
目的:研究三叉神经运动核团(trigeminal motor nucleus,Mo5)和三叉神经中脑核团(mesencephalic trigeminal nucleus,Me5)对小鼠不同咀嚼肌的调控分布.方法:将8～12周龄C57BL/6小鼠分6组,每组3只,分别注射逆行性荧光示踪剂(Fluorogold,FG)到其颧肌、颞肌、咬肌、二腹肌前腹、翼内肌中,并以胸锁乳突肌作为对照组.通过荧光染色,显微镜下观察小鼠的三叉神经相关核团对于调控不同咀嚼肌群的表达及空间分布.结果:咬肌、颞肌和颧肌标记的初级运动神经元细胞出现在Me5和Mo5,翼内肌和二腹肌前腹标记只出现在Mo5,胸锁乳突肌注射后,在Me5和Mo5中均无标记神经元.结论:Mo5并没有关于升降颌肌群严格的空间分布,Me5并没有标记全部升颌肌群.
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大鼠三叉神经中脑核到三叉神经运动核的间接投射通路研究
目的:搞清大鼠三叉神经中脑核(mesencephalic trigeminal nucleus,Vme)与三叉神经运动核(trigeminal motor nucleus,Vmo)神经元之间的间接投射通路.方法:将束路追踪剂霍乱毒素b亚单位(cholera toxin b subunit,CTb)注入一侧咬肌神经跨节标记Vme神经元及其中枢突,同时将四甲基罗达明(tetramethyl rhodamine,TMR)注入对侧Vmo逆行标记运动前神经元,激光共聚焦显微镜下观察二者之间的重叠分布和接触情况.结果:CTb跨节标记终末(Vme神经元的中枢突)与TMR逆标神经元(Vmo的运动前神经元)的胞体或树突重叠分布区域包括:(1)三叉上核(supratrigeminal nucleus,Vsup)尾端,该区域范围小,其内CTb跨节标记终末极密集;(2)Vmo周边区域,以Vmo与Vsup之间的区域为主,其内CTb跨节标记终末呈中等密度分布;(3)小细胞网状结构(parvi-cellular reticular formation,PCRt),该区域范围广,CTb跨节标记终末在该区域呈松散分布.激光共聚焦显微镜下可见上述区域内一些CTb标记终末与其中的部分TMR逆标神经元的胞体或树突形成密切接触.结论:大鼠Vme神经元的中枢突经分布在Vsup,Vmo周边区域及PCRt内广泛的运动前神经元向Vmo发出间接投射.
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GAD67-GFP基因敲入小鼠5-羟色胺样和P物质样阳性终末与三叉神经中脑核神经元的联系
本研究应用免疫荧光组织化学三重标记技术,在激光共聚焦显微镜下观察了GAD67-GFP基因敲入小鼠三叉神经中脑核(Vme)内5-HT样和P物质(substance P,SP)样阳性终末分别与小白蛋白(parvalbumin,PV)样和GFP阳性神经元之间的联系.结果显示:(1)Vine内有较多的PV样阳性神经元,这些神经元绝大多数为大、中型的假单极神经元,直径约为18～40 μm;也可观察到少量的GFP阳性神经元,多为小的多极神经元,直径约为8～15 μm;(2)5-HT样阳性终末广泛分布于Vme内,其中有部分阳性终末分别聚集在PV样或GFP阳性的Vme神经元的胞体周围,计数结果表明:大约有77.7%和22.3%的5-HT样阳性终末分别与PV样或GFP阳性胞体相接触;(3)SP样阳性终未也广泛分布于Vme内,并分别与PV样或GFP阳性神经元的胞体形成密切接触,其巾有78.2%和21.8%的阳性终末分别与PV样或GFP阳性胞体相接触.以上结果提示,在口面部本体感觉信息向更高一级中枢传递过程中,5-HT能和SP能神经终末小仅对初级传入发挥直接的调控作用,还可能通过影响Vme内的GABA能神经元的活动,从而间接对该信息的传递发挥调控作用.
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三叉神经中脑核内假单极神经元的电生理和形态特性
为了探讨三叉神经中脑核(Vme)神经元的电生理和形态学特征,本研究应用红外可视脑片膜片钳技术、biocytin细胞内标记技术以及免疫组织化学染色方法观察大鼠Vme内假单极神经元的电生理和形态学特征.结果显示:(1)长时程去极化方波刺激能够引起Vme神经元重复放电,且根据放电模式的不同,可将其分为快适应型神经元和慢适应型神经元两种类型,其中快适应型神经元占绝大多数;(2)经biocytin细胞内标记并染色后,光学显微镜下观察两种类型的Vme神经元在形态上均为假单极神经元,无显著差别.以上结果提示:形态学类型相同的Vme神经元的电生理学特点具有多样性,这可能与Vme神经元担负复杂的口面部本体觉信息的传递功能有关.
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神经损伤对三叉神经中脑核神经元Trk受体表达的影响
本研究应用免疫荧光结合逆行束路追踪技术观察了轴突切断对支配咬肌的三叉神经中脑核(Me5)神经元所含Trk受体蛋白,即TrkA、TrkB和TrkC表达的影响.通过大鼠咬肌神经给予荧光金,标记支配咬肌的Me5神经元;分别于切断咬肌神经后7和14 d对脑切片进行免疫组织化学染色并观察荧光金(FG)标记的Me5神经元表达的三种Trk受体.以双标记神经元占荧光金标记神经元总数的百分率为指标进行统计学分析,结果显示:(1)神经切断后7和14 d,TrkA免疫反应阳性神经元比例有显著性增加(P＜0.05);(2)神经切断后随着存活时间的延长,TrkB免疫阳性神经元比例逐渐增加,但无显著性区别(P＞0.05);(3)TrkC表达无显著性变化(P＞0.05).本研究结果提示,咬肌神经切断对三种Trk受体的表达有不同的影响,Trk受体表达的模式可能反应出Me5神经元对外周神经损伤后的一种适应.
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大鼠囊泡膜谷氨酸转运体和5-羟色胺阳性终末与三叉神经中脑核神经元的联系
本研究应用免疫荧光组织化学三重染色技术和免疫电镜双重标记技术,对大鼠囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1和VGluT2)和5-羟色胺(5-HT)阳性终末与三叉神经中脑核(Vme)神经元之间的联系进行了观察.在激光共聚焦显微镜下,Vme内可观察到许多磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)阳性神经元,其中绝大多数为大的假单极神经元.VGluT1和VGluT2免疫阳性的神经纤维和终末广泛分布于Vme内,其中VGluT2阳性纤维和终末的分布密度高于VGluT1.在Vme内还可观察到相当数量的5-HT阳性终末,其中部分终末同时呈VGIuT2免疫阳性.一些VGIuT1、VGluT2、5-HT及VGluT2/5-HT双重标记的阳性终末与PAG阳性的Vme神经元胞体形成密切接触.在电镜下,分别用银加强的金颗粒和DAB反应产物显示VGluT1/VGluT2和5-HT阳性终末.在Vme内只观察到部分终末呈VGluT2和5-HT双重免疫阳性,并且这些终末主要形成非对称性突触.以上结果提示,在口面部本体感觉信息向更高一级中枢传递过程中,谷氨酸能和5-HT能神经终末可能通过Vme神经元对该信息进行复杂的调控.
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大鼠囊泡膜谷氨酸转运体样和P物质样阳性终末与三叉神经中脑核神经元的联系
近在哺乳类动物脑内克隆出两种囊泡膜谷氨酸转运体-VGluT1和VGluT2,目前人们已将两者作为脑内谷氨酸能终末的特异性标记物.本研究应用免疫荧光组织化学三重染色技术,在激光共聚焦显微镜下对大鼠三叉神经中脑核(Vme)内VGluT1/VGluT2样和P物质(SP)样阳性终末与磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)样阳性神经元之间的联系进行了观察.结果显示:(1)Vme内有较多的PAG样阳性神经元,在吻尾方向上亘其全长出现,这些神经元绝大多数为大的假单极神经元,直径为25～50 μm.(2)大量的VGluT1样、VGluT2样和SP样免疫阳性的神经纤维和终末广泛分布于Vme内,其中VGluT2样阳性纤维和终末的分布密度高于VGluT1;部分SP样阳性纤维和终末同时呈VGluT1样或VGluT2样免疫阳性.(3)一些VGluT1/VGluT2样、SP样或VGluT1/VGluT2和SP双重标记的免疫阳性终扣分别包绕在PAG样阳性的Vme神经元胞体周围,并与之形成密切接触.以上结果提示:Vme神经元在将口面部本体感觉信息向更高一级中枢传递过程中,可能接受中枢其它来源的谷氨酸能和SP能终末的调控,其中谷氨酸能的投射末梢可能通过与突触后膜上的相应受体结合而发挥作用而SP则可能在突触前发挥间接的调控作用.
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大鼠三叉神经中脑核神经元放电滞后现象的动力学分析
目的:利用非线性动力学理论的分析手段阐明三叉神经中脑核神经元放电滞后现象的产生机制.方法:应用脑片全细胞膜片钳技术记录大鼠三叉神经中脑核(Mes V)神经元在三角波电流刺激下的放电特征,运用动力学方法对其进行分析.结果:Ⅱ型MesV神经元放电表现出滞后现象,加入4-AP转型后滞后现象消失;非线性动力学分岔理论可以对以上现象做出解释.结论:Ⅱ型神经元的亚临界霍普夫分岔使得其存在滞后现象.
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大鼠三叉神经中脑核内PPD、PPE样阳性终末与PAG 和PV共存神经元的联系
［陈鹏，李金莲，李继硕. 解剖学报，2001;32(2):109-113］ 目的观察大鼠三叉神经中脑核(Vme)神经元内磷酸激活的谷氨酰胺酶 (PAG)和小白蛋白(PV) 的共存关系，以及前强啡肽原(PPD)样和前脑啡肽原(PPE)样阳性终末与PAG和PV共存神经元之间的联系. 方法免疫荧光组织化学双重和三重染色技术，在激光共聚焦显微镜下观察. 结果在Vme内可见大量PAG样和PV样免疫反应神经元，吻尾方向上几乎在其全长出现，多为大的假单极神经元. 许多PAG样阳性神经元同时呈PV样免疫反应，双标细胞占全部标记细胞的95%以上.在激光共聚焦显微镜下观察到，少量PPD样或PPE样阳性终末围绕在PAG样和PV样双重标记的Vme神经元胞体周围，并与之形成密切接触. 结论在面口部本体感觉信息由V me向更高一级神经元传递的过程中，PV可能和谷氨酸一起发挥着重要的作用，与此同时Vme 神经元还可能接受中枢内强啡肽样和脑啡肽样神经终末对它的调控.(甄志强)
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大鼠三叉神经初级传入神经元的NADPH-d分布
目的 探讨尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH-d)在大鼠三叉神经节(TG)和三叉神经中脑核(MTN)中的表达.方法 大鼠常规麻醉、固定后,参照Paxinos和Watson的大鼠脑立体定位图谱,用冷冻切片机于Bregma-9.8 mm和Bregma-7.4 mm之间作MTN冠状切片,TG作水平切片,片厚均为20 μm.每隔4张取一张,采用NADPH-d组织化学染色及计算机图像分析系统对所取脑片进行观察.结果 在生理条件下,TG的初级感觉神经元大部分呈现阳性反应,在TG的神经元之间可见NADPH-d阳性神经纤维,形成细胞周围的篮样结构；NADPH-d阳性神经元在整个MTN从尾端到头端都有表达,有许多NADPH-d阳性神经纤维组成了稠密的丛.结论 NADPH-d在TG和MTN中高度表达,表明大鼠TG和MTN的三叉神经的传入信息是由硝基能神经纤维传入.推测NO可能在口腔颌面部的疼痛和本体感觉中起到一定的作用.
