启膈方对人食管癌细胞Eca109、TE13及Cx26表达的影响

目的 探讨启膈方治疗食管癌的可能作用机制.方法 采用人食管癌细胞Eca109及TE13,将各细胞分为对照组及启膈方高剂量组、启膈方低剂量组.采用MTr法观察启膈方对食管癌细胞增殖的影响,应用Transwell小室法检测启膈方对食管癌细胞迁移的影响,应用激光共聚焦显微镜及流式细胞术观察启膈方对食管癌细胞间隙连接蛋白26 (Cx26)表达的影响,采用RT q-PCR法观察启膈方对食管癌细胞中Cx26水平的影响.结果 启膈方正常剂量在体外环境不能抑制Eca109及TE13细胞增殖.启膈方高剂量组Eca109迁移细胞数明显少于对照组和启隔方低剂量组(P＜0.01),启膈方高、低剂量组TE13迁移细胞数明显少于对照组,且启膈方高剂量组明显少于启隔方低剂量组(P ＜0.05或P＜0.01).经启膈方作用后的食管癌细胞Eca109和TE13中Cx26蛋白及mRNA水平表达明显增高(P＜0.05). 结论 启膈方可抑制人食管癌细胞Eca109、TE13的增殖与迁移,并能够增强Cx26在蛋白水平及转录水平的表达,使食管癌细胞间隙连接增强,从而抑制细胞的迁移.这可能是其治疗食管癌的部分作用机制.

肝细胞癌组织中细胞间隙连接蛋白Cx32的表达改变

目的:探讨细胞间隙连接蛋白Cx32在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及正常肝组织中的表达、定位及其在HCC发生中的意义和机制.方法:应用SP免疫组化方法检测Cx32蛋白在34例HCC组织和10例正常肝组织中的表达和定位.结果:Cx32蛋白在HCC及正常肝组织中的阳性率分别为38.2%和90%,经X2检验,Cx32蛋白在HCC中的表达低于正常肝组织(P＜0.01).HCC各级(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)的阳性率分别为57.1%、40%和29.4%,其中HCCⅡ和HCCⅢ与正常肝组织相比在统计学上有显著性差异(P＜0.05).并且随着HCC分化程度的降低,其阳性率也随之下降,但HCC各级之间在统计学上无显著性差异.Cx32蛋白在正常肝细胞中定位于相邻细胞间相互接触的细胞膜上;而在HCC中既定位于细胞质,又定位于细胞膜不与邻近细胞接触的游离缘上.结论:间隙连接蛋白Cx32在HCC中的表达下调及定位异常可能是HCC发生的重要环节.

复方藤梨根制剂对荷人肺巨细胞癌裸鼠移植瘤生长及Cx43基因表达水平的影响

细胞间隙连接通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)是细胞间的一种重要连接方式,在细胞分化、生长控制和维持体内环境平衡等方面起重要作用.近年来研究表明,肿瘤和转化细胞中普遍存在GJIC的缺陷,GJIC在肿瘤的发生及转移过程中有着极为重要的作用.间隙连接蛋白是由许多同源性基因编码的多基因家族,它们的表达和分布异常与肿瘤的形成关系密切.在近的一些实验中,人们把野生型连接蛋白(connexin,Cx)基因转染到肿瘤细胞中,可见肿瘤的生长受到明显抑制,间隙连接通讯功能上调,细胞恢复正常生长,认为连接蛋白基因是一类肿瘤抑制基因家族[1].Cx43是一种主要的细胞间隙连接蛋白,在多种肿瘤细胞中都有Cx43表达的下降.为此,许多学者正在研究上调Cx43表达的药物,以此来实现其抑制肿瘤生长、分化、转移等作用.目前,对环磷酸腺苷(cAMP)、维甲酸、β-胡萝卜素上调Cx43表达的研究较多,中药提取物如姜黄素类似物、茶多酚等上调Cx43表达的研究已有报道.我们在体内观察复方藤梨根制剂(FFTLG)对荷人肺巨细胞癌(PG)裸鼠移植瘤的生长和瘤体组织Cx43表达的影响,并进一步探讨其作用机制.

CX43在应激性溃疡发生发展过程中的表达与细胞凋亡、增殖的关系

探讨细胞间隙连接蛋白43(CX43)在胃粘膜遭受应激损伤时的变化及与细胞凋亡、增殖发生的关系.制作大鼠水浸-束缚应激(WRS)模型.采用原位末端标记(TUNEL)法检测WRS结束前后不同时间点细胞凋亡的发生;免疫组化ABC法原位检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达;原位杂交法检测CX43 mRNA表达变化.结果发现,正常大鼠胃粘膜上皮散在TUNEL-细胞,PCNA蛋白主要在胃腺颈部近胃小凹处呈中等阳性表达,CX43 mRNA在胃腺区呈中等阳性表达.WRS 2h～WRS后5h TUNEL-细胞较对照组明显增多,并逐渐达高峰,PCNA蛋白和CX43 mRNA的表达明显低于对照组;WRS后8～12h TUNEL-细胞逐渐减少,而PCNA表达达高峰,CX43 mRNA表达恢复并明显增加;WRS后24h TUNEL-细胞仍高于正常水平;PCNA及CX43表达基本恢复至正常水平.相关分析:CX43 mRNA表达与PCNA蛋白表达呈显著正相关.结果提示,CX43 mRNA的表达可能与胃粘膜腺细胞区结构稳定、增殖和分化有关,并影响上皮细胞凋亡发生.

NF-κB和Cx32在肝细胞癌中的表达

目的 探讨细胞间隙连接蛋白CX32和NF-κB在肝细胞癌及其癌周组织中的表达和意义.方法 应用免疫组化技术检测48例HCC和12例正常肝组织中NF-κB和Cx32的表达情况.结果 Cx32蛋白表达定位于肝细胞胞浆和/(或)细胞膜,在HCC及正常肝组织中阳性率分别为37.50%、88.91%.Cx32在HCC中的表达明显低于正常肝组织的水平(P<0.01).并与HCC分化程度相关;NF-κB在肝组织、HCC中的表达分别为21.34%、71.28%(P<0.05).CX32和NF-κB在HCC中的表达呈负相关.结论 Cx32表达的缺失可能与HCC的发生有重要关系.

Cx26和Cx43在宫颈癌中的表达及意义

目的:检测宫颈癌与正常宫颈组织中Cx26和Cx43的表达并探讨其临床意义.方法:收集正常宫颈组织、不典型增生、原位癌和浸润癌标本,用免疫组织化学方法检测肿瘤组织和正常组织中Cx26和Cx43蛋白的表达,并比较不同分化程度的浸润癌组织中Cx26和Cx43蛋白表达的变化.结果:Cx26和Cx43蛋白在宫颈癌组织和正常组织均定位于细胞膜和细胞质,Cx26和Cx43蛋白的表达在正常宫颈组织、不典型增生、原位癌和浸润癌组织中依次降低.不同分化程度的浸润癌中Cx26蛋白的表达均明显低于正常宫颈,差异有统计学意义(P＜0.05),且浸润癌的分化程度越低Cx26蛋白的表达越低.Cx43蛋白仅在低分化型浸润癌中的表达较低,在高、中分化型浸润癌的表达无明显降低(P＞0.05).结论:Cx26和Cx43与宫颈癌的发生密切相关,并与肿瘤的发展和预后有关.

Cx43、PTEN 在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及临床意义

卵巢癌是女性生殖系统肿瘤中死亡率高的肿瘤，由于卵巢组织的解剖与内分泌的复杂性使卵巢癌的早期诊断极为困难因此，寻找卵巢恶性肿瘤早期诊断指标已经成为研究热点。间隙连接蛋白43（connexin 43，Cx43）为一种细胞间隙连接蛋白，多种肿瘤细胞中都有间隙连接蛋白43表达的下降与缺失［1］。同源磷酸酶-张力蛋白（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten， PTEN）为第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因，位于10q23．3，转录产物为515kb mR-NA，PTEN 异常表达与一些肿瘤细胞的生物学行为密切相关，因此在许多肿瘤中出现其高突变率和功能缺失［2］。本实验研究采用免疫组化方法检测卵巢上皮性肿瘤组织中间隙连接蛋白43与的同源磷酸酶-张力蛋白表达状况，探讨其与卵巢恶性肿瘤发生、发展的关系为卵巢恶性肿瘤的早期诊治及其预后判断提供科学的实验依据。

风湿热诊治进展

风湿热(rheumatic fever)是A组乙型溶血性链球菌感染后引起的全身结缔组织免疫性炎性疾病,主要侵犯心脏、关节,其他器官如皮肤、浆膜、中枢神经系统及肺、肾等内脏亦可受累,但以心脏为本病唯一留有后遗症的器官[1].近年来风湿热临床表现多为不典型,误诊率增加,为了提高临床医师对本病再认识,本文就近年来风湿热诊治情况进行探讨,为早期诊断和有效治疗提供参考.1发病机制我国在20世纪80年代初期风湿热已极为少见,80年代后期又有上升趋势,但出现严重二尖瓣狭窄很少见,不典型病例增多,多数认为与抗生素大量应用、人体对链球菌免疫反应变异、某些细菌毒力增强等有关.虽然有关风湿热发病机制研究有很大进展,但具体发病机制目前仍未完全阐明.现认为风湿热发病可能与以下几方面有关:①易感组织对链球菌的免疫反应,风湿热发病不是因为链球菌直接作用的结果而是由于机体免疫反应的结果,目前认为链球菌抗原的分子模拟机制是风湿热主要发病机制,CX3CR(编码细胞间隙连接蛋白的3CRl基因)在风湿热患者血清呈高表达,而CD36mRNA水平呈显著下降[2].

先天性心脏圆锥动脉干畸形患者Cx43基因突变的初步研究

目的探讨先天性心脏圆锥动脉干畸形(CTD)患者细胞间隙连接蛋白43(CX43)基因突变的发生情况.方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析结合DNA测序,对37例CTD、26例非CTD先心病、10例正常小儿进行了CX43编码序列检测.结果正常对照SSCP均表现为相同的带型.37例CTD中,仅1例法洛四联症(TOF)合并房间隔缺损(ASD)的患者出现了不同于正常对照的SSCP带型,经测序证实发生了717G→A碱基替换,但由于不引起所编码氨基酸的改变,考虑为沉默多态位点.其他CTD患者及26例非CTD先心病患者均未检测到CX43编码序列的突变.结论CX43基因突变在CTD等先心病患者中可能并不常见.717G→A可能是一种新的单核苷酸多态位点.

复方藤梨根制剂调节PG细胞间隙连接蛋白Cx43基因表达水平的研究

目的 探讨复方藤梨根制剂对高转移性人肺癌细胞(PG)的生长及细胞间隙连接蛋白Cx43表达水平的影响.方法 采用MTT法体外观察不同浓度复方藤梨根制剂对PG细胞的杀伤作用;应用流式细胞仪检测用药后PG细胞Cx43的表达水平.结果 4个浓度的复方藤梨根制剂对PG细胞均有杀伤作用,呈剂量依赖关系.与对照组相比,Cx43表达水平逐渐上升.结论 复方藤梨根制剂对PG细胞具有生长抑制作用,其机制可能与上调间隙连接蛋白Cx43表达水平有关.

强精片对雷公藤所致不育症大鼠精液质量的影响及机制

目的 探讨益肾活血利湿中药强精片对雷公藤所致不育症大鼠精液质量的影响及其机制.方法 实验动物为50只雄性SD大鼠,10只作为空白组,另40只以雷公藤灌胃制作不育症模型并随机等分为模型组及强精片低、中、高剂量组,四组均予雷公藤20 mg/(kg·d)灌胃;强精片低、中、高剂量组同时分别予强精片58、105、233 mg/(kg·d)灌胃;空白组予等量生理盐水灌胃;均1次/d.灌胃后4周检测各组精液质量、血清性激素水平及睾丸组织Cx43蛋白表达.结果 各强精片组精液质量均好于模型组,血清睾酮水平及睾丸组织Cx43蛋白表达均高于模型组,且呈现出一定的量效关系(P<0.05或<0.01).结论 益肾活血利湿中药强精片可改善不育症大鼠的精液质量,其作用机制可能为调节血清睾酮水平及睾丸组织Cx43蛋白表达.

细胞间隙连接蛋白与肿瘤

细胞间隙连接蛋白是机体固有的、与细胞生长发育及增殖分化等密切相关的膜表面分子,是维持机体组织器官正常结构及功能的基础.因此,它的异常与某些先天性发育畸形或功能障碍性疾病以及癌症等的发生发展密切相关.本文即就Cx分子的结构、功能以及与某些疾病尤其与肿瘤的关系等进行概述,进而探讨它在医学研究及应用中的价值.

体外培养的成肌细胞间隙连接蛋白43的表达及变化

表皮生长因子通过间隙连接蛋白信号转导调节间隙连接通讯

细胞间隙连接通讯(GJIC)是细胞获取外界能量、信息的一种细胞间直接的通讯方式,其连接通道是一种亲水性的膜通道,允许细胞间分子量小于1KDa的离子、分子的交换和代谢.细胞膜通道的装配蛋白称细胞间隙连接蛋白(connexin,CX),通道的形成和启闭(gating process)受细胞内外的PH值、膜电压、膜脂及膜的流动性、Ca2+浓度、CX磷酸化等的调节.