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食管癌细胞Ezrin基因转录调控区克隆及其启动子活性的鉴定
目的:克隆食管癌侵袭转移相关基因Ezrin的转录调控区序列,进行启动子活性鉴定及初步的生物信息学分析.方法:利用在线程序对Ezrin基因可能的转录调控区进行GC含量和CpG岛分析以及转录因子结合位点预测,采用PCR法从食管癌细胞基因组DNA中克隆Ezrin基因-1759/+134和-726/+134区段,构建萤火虫荧光素酶报告基因表达质粒pGLB-hE(-1759/+134)和pGLB-hE(-726/+134),检测所克隆片段的启动子活性.结果:Ezrin基因5'侧翼区为高GC含量区,存在CpG岛,无典型的TATA盒,然而转录因子Spl结合位点却无处不在.与对照质粒pGLB相比,重组质粒pGLB-hE(-726/+134)具有较强的荧光素酶活性,pGLB-hE(-1 759/+134)的荧光素酶活性约是pGLB-hE(-726/+134)的2倍.结论:Ezrin基因的-726/+134区段具有启动子活性,含有Ezrin基因的核心启动子区和调节性启动子区;-1759/-726区段具有增强启动予活性的作用,含有Ezrin基因增强子元件区.
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埃兹蛋白与肿瘤转移的相关研究进展
埃兹蛋白为膜细胞骨架连接蛋白(membrane cytoskeleon cross linker protein)属ERM(ezrin、radixin、moesin)家族成员,是1981年由Bretscher在鸡的小肠上皮细胞刷缘中首次被纯化的.ezrin不仅在细胞的运动、迁移、有丝分裂、黏附及细胞极性等生理功能中发挥着重要作用,而且,大量实验已证实,ezrin还参与多种不同来源肿瘤的转移[1,2].
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散发性结直肠癌组织中ezrin mRNA的表达及临床意义
目的 研究散发性结直肠癌(SCRC)组织中ezrin mRNA的表达,探讨其在SCRC发生发展中的作用以及与ezrin蛋白表达部位、临床病理参数之间的关系.方法 运用TaqMan实时逆转录一聚合酶链反应(real-time RT-PCR)技术检测132例SCRC患者的肿瘤组织及43例患者的癌旁正常组织中ezrin mRNA的表达;免疫组化法检测相应组织中ezrin蛋白的表达.结果 SCRC组织中ezrinmRNA含量和ezrin蛋白表达阳性率均显著高于癌旁正常组织(P<0.05);转移组ezrin mRNA含量和ezrin蛋白表达阳性率均高于未转移组(P<0.05).转移组胞膜为主型ezrin蛋白表达阳性率(31.1%)显著高于未转移组(6.9%,P=0.0006);转移组胞浆为主型ezrin蛋白表达阳性率(55.4%)与未转移组(63.8%)的差异无统计学意义(P>0.05);胞膜为主型组ezrin mRNA含量与胞浆为主型组的差异无统计学意义(P>0.05).年龄<50岁组ezrin mRNA含量高于年龄≥50岁组(P=0.016);右半结肠组胞膜为主型ezrin蛋白表达阳性率显著高于左半结肠和直肠(P=0.0003),左半结肠组胞浆为主型ezrin蛋白表达阳性率显著高于右半结肠和直肠(P=0.004).ezrin mRNA、ezrin蛋白在SCRC中的表达与性别、肿瘤大小、侵袭程度、分化程度均无关(P>0.05).结论 ezrin mRNA和ezrin蛋白表达的增高与SCRC的发生发展密切相关;ezrin蛋白表达从胞浆到胞膜的移位在肿瘤转移中可能起着重要作用;ezrin mRNA含量可能与患者年龄相关,ezrin表达部位可能与SCRC发生部位相关.ezrin mRNA、ezrin蛋白水平及表达部位可能成为临床判断SCRC预后的重要参考指标.
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食管鳞癌中Ezrin和CD44-v6的表达及其临床意义
目的 探讨ezrin和CD44-v6在食管鳞癌中的表达及其与淋巴结转移,病理学分级等的关系.方法 应用组织芯片技术进行免疫组化S-P法染色,检测71例食管鳞癌患者癌组织标本及癌旁正常上皮中ezrin和CD44-v6的表达情况,并结合临床相关因素进行统计学分析.结果 71例癌旁正常上皮中,ezrin表达阳性33例,CD44-v6表达阳性18例;71例食管鳞癌组织中,ezrin表达阳性64例,CD44-v6表达阳性58例.Ezrin的表达与淋巴结转移关系密切,有淋巴结转移组ezrin强阳性率明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05);CD44-v6的表达与肿瘤组织的病理学分级、淋巴结转移关系密切,在淋巴结转移组CD44-v6表达阳性率显著高于无淋巴结转移组(P＜0.05).CD44-v6阳性表达组的ezrin表达阳性率显著高于CD44-v6阴性表达组(P＜0.05).Ezrin与CD44-v6同时表达的48例患者中,淋巴结转移率高达60.0%,而ezrin与CD44-v6同时不表达的6例患者中,均无淋巴结转移.结论 联合检测ezrin和CD44-v6的表达有助于综合判断食管鳞癌的恶性程度和转移潜能,ezrin有望成为判断肿瘤预后的新指标.
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ezrin与乳腺浸润性导管癌发生发展及预后的关系
目的 探讨ezrin蛋白在乳腺浸润性导管癌及导管内增生性病变中的表达及其临床病理意义.方法 采用免疫组织化学方法,检测临床病理及随访资料完整的88例乳腺浸润性导管癌和54例导管内增生性病变组织中ezrin的表达情况,分析其与CD44v6、E-cadherin表达的关系及其临床病理意义;采用Kaplan-Meier法和Cox回归模型分析ezrin表达与乳腺导管浸润癌患者预后的关系.结果免疫组化染色结果显示,在乳腺正常导管上皮、普通型导管增生、不典型导管增生和浸润性导管癌组织中,ezrin的强阳性表达率分别为9.1%、16.7%、43.3%和64.8%.ezrin在乳腺不典型导管增生和浸润性导管癌组织中的强阳性表达率明显高于乳腺普通型导管增生和正常导管上皮组织(P＜0.05),而在浸润性导管癌组织中的强阳性表达率亦明显高于不典型导管增生组织(P＜0.05).在乳腺浸润性导管癌组织中,ezrin强阳性表达率与腋窝淋巴结转移状况、组织学分级、TNM分期及CD44v6的表达呈正相关,与E-cadherin的表达呈负相关(P＜0.05).ezrin强阳性表达组患者的术后生存时间明显短于阴性组(P＜0.05).结论 ezrin可能在乳腺浸润性导管癌的发生、发展中发挥重要作用,ezrin强阳性表达提示乳腺浸润性导管癌患者的预后较差.
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食管鳞状细胞癌组织中埃兹蛋白与淋巴管生长因子表达的意义
目的 探讨埃兹蛋白(Ezrin)、淋巴管生长因子-C(VEGF-C)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其与临床病理的关系.方法 采用免疫组织化学法检测49份ESCC组织及其周围正常食管组织中Ezrin、VEGF-C的表达.结果 Ezrin在ESCC及其周围正常食管组织中表达率为85.7%(42/49)和26.5%(13/49),VEGF-C在ESCC及其周围正常食管组织中表达率为59.2%(29/49)和12.2%(6/49),差异均有统计学意义(P＜0.05).Ezrin、VEGF-C的表达程度与ESCC的临床分期、淋巴结转移相关(P＜0.05),与ESCC的分化程度、浸润深度无关(P＞0.05).结论 Ezrin与VEGF-C的联合检测可能成为判断ESCC转移与预后的重要指标.
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Ezrin蛋白在胃癌组织中的表达及其意义
目的 探讨胃癌组织中Ezrin蛋白的表达及其与胃癌临床病理特征的关系.方法 采用S-P免疫组化法检测50例胃癌组织、30例胃黏膜不典型增生和30例正常胃黏膜中Ezrin蛋白的表达.结果 Ezrin蛋白在正常胃黏膜、不典型增生和胃癌组织中的阳性表达率分别为30.0%、36.7%和86.0%,Ezrin的表达在正常胃黏膜和胃癌以及不典型增生和胃癌之间有显著差异(P<0.05).Ezrin蛋白的表达程度与胃癌的临床分期、淋巴结转移及浸润深度有关(P<0.05),与胃癌分化程度、性别无关(P>0.05).结论 Ezrin蛋白在胃癌中的高表达与胃癌的-临床分期、淋巴结有无转移及浸润深度有关,对其的检测可能成为预测胃癌转移及预后的重要指标.
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Ezrin蛋白与肿瘤转移研究新进展
转移是恶性肿瘤的主要生物学特征之一,恶性肿瘤具破坏性的一面,常常是导致肿瘤患者死亡的主要原因.近年来随着分子生物学理论、技术和人类基因组学发展,人们逐渐对肿瘤转移这一基因调控下的多因素、多阶段发展的复杂病理过程有了较深入的认识,并发现了一些与转移高度相关的基因及其产物.
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KISS-1、Ezrin蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨KISS-1、Ezrin蛋白在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化法分别对21例正常胃黏膜组织、23例癌旁不典型增生组织、45例胃癌组织中KISS-1、Ezrin蛋白的表达进行检测.结果 正常胃黏膜、癌旁非典型增生和胃癌组织中KISS-1蛋白的阳性表达率依次递减,经两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05);正常胃黏膜、癌旁非典型增生和胃癌组织中Ezrin蛋白的阳性表达率依次递增,且两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05);相关性分析发现KISS-1、Ezrin 蛋白在胃癌中的表达具有显著的负相关性(r=-0.537,P<0.01).结论 KISS-1、Ezrin蛋白参与胃癌的发生发展过程,且可能起协同作用.
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Ezrin功能特点及其与肺癌关系的研究进展
Ezrin(埃兹蛋白)是ERM蛋白家族(Ezrin-Radxin-Moesin)的一员,是近年来新发现的一种膜细胞骨架连接蛋白.Ezrin参与控制细胞的形态、黏附、运动及细胞的增殖和生存转换生长信号等过程,同时与肺癌及其他多种肿瘤的侵袭力、转移、临床预后有密切关系.现就PTEN在肺癌中的研究进展做简要综述.
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DNAzymes针对Ezrin mRNA的反义技术靶点筛选及验证
目的 分析肿瘤远处转移相关蛋白(Ezrin mRNA)的结构,寻找并验证DNAzymes作用的佳靶点.方法 利用RNAstructure与RNAdraw程序分析Ezrin mRNA结构,计算其一、二级结构,两种程序同时计算出碱基未配对的单链成环区,且连续存在4个以上,则将其设为反义技术的靶区域,在此区域内设计DNAzymes的作用靶点,再依据低自由能原则,运用计算机中的OligoWalk程序进行筛选,以此方式得到各反义技术的作用靶点,以实验方法验证预测结果.结果 两种软件预测的共同的单链区共42个,其中完全匹配的单链区21个,编码区具27个.AU1655、AU1751、AU 1766、AU1789及GU2623位于连续未配对碱基超过10个的单链区,仅AU1655、AU1751、AU 1766、AU1789符合要求.酶切反应结果显示DNAzymes在AU1751位点能够为理想地切割Ezrin mRNA.结论 相对于传统的单纯依靠实验来寻找靶点,核酸二级结构联合热动力学参数能够更精确、快速地处理靶点的设计和选取问题.AU1751位点相对应的DNAzymes不易形成稳定的自身杂合体,有利于DNAzymes结合RNA.
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Ezrin和EZH2与肿瘤关系的研究进展
近年来随着分子生物学的高速发展以及对于肿瘤方面的不断深入研究，越来越多的与肿瘤相关联的蛋白和基因被人们所发现，并受到广泛的重视，而且也将这些蛋白基因高度应用于医学研究中。在目前众多的研究结果中Ezrin和EZH2是两个被深入研究的基因，但是目前对于Ezrin和EZH2的研究结论并不十分全面和具体，还存在一些其他因素。因此对于Ezrin和EZH2更为深入的研究是十分必要的，本文就Ezrin和EZH2的结构、功能与肿瘤的相关性做一简要综述便于日后进一步研究。
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Ezrin蛋白表达下调对胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移能力的影响及初步机制的研究
目的 探讨小分子干扰RNA(siRNA)下调Ezrin蛋白表达对人胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移能力的影响及可能机制. 方法 采用脂质体法将Ezrin siRNA及阴性对照质粒分别转染SGC-7901细胞,qRT-PCR及Western blotting分别检测SGC-7901细胞中Ezrin mRNA及蛋白的表达情况,transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化,Western blotting检测YAP蛋白表达. 结果 转染Ezrin siRNA后,SGC-7901细胞Ezrin mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),抑制了细胞侵袭和转移(P<0.05),YAP蛋白表达下调(P<0.05). 结论 Ezrin siRNA可抑制SGC-7901细胞迁移和侵袭,其机制可能与抑制YAP蛋白表达相关.
关键词： Ezrin 胃癌细胞株SGC-7901 迁移 侵袭 -
胃癌组织中Ezrin和PTEN表达的相关性及临床意义
目的 探讨胃癌组织中Ezrin和PTEN表达的相关性及其临床意义.方法 收集56例胃癌组织,另收集30例正常胃粘膜组织作为对照.采用Elivision免疫组化方法检测各组粘膜中Ezrin和PTEN的表达情况,并分析其相关性及临床意义.结果 Ezrin在正常胃粘膜组织及胃癌组织中的阳性表达率分别为43.9%、78.6%.PTEN则分别表达为100%、62.7%;Ezrin和PTEN的表达与患者年龄、性别无关而与肿瘤的TNM分期、病变部位、血清CEA水平相关(P<0.05);Ezrin和PTEN二者表达强度之间呈明显负相关(r=-0.280,P<0.05).结论 联合检测Ezrin和PTEN的表达有助于胃癌恶性程度和转移潜能的预测.
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埃兹蛋白(Ezrin)在胃癌中的表达及其临床意义
目的:研究ERM蛋白家族中的一成员Ezrin蛋白在胃癌中的表达及其临床意义.方法:用免疫组化SP法检测40例胃癌组织、20例胃良性肿瘤组织、10例正常胃粘膜中Ezrin的表达,分析Ezrin与胃癌临床病理因素之间关系.结果:10例正常胃粘膜中未见Ezrin表达,而在40例胃癌组织中Ezrin阳性表达率为55%(22/40),两者差异有统计学意义(P＜0.05).且Ezrin表达与胃癌分化程度、淋巴结转移相关(P＜0.05).与患者年龄、性别、胃癌大小、浸润深度无关(P＞0.05).结论:Ezrin表达与胃癌的淋巴结转移及恶性程度有关,有助于预后判断及治疗方法选择,Ezrin表达是反映胃癌生物学行为的有价值指标.
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苦参碱对人卵巢癌细胞株HO-8910PM增殖及侵袭运动能力的影响
目的 研究苦参碱对人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM增殖及转移相关能力的影响及其作用机制.方法 以MTT法和台盼蓝拒染法检测苦参碱对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞增殖的影响;Transwell小室法检测其对HO-8910PM细胞侵袭运动能力的影响;考马斯亮蓝染色法检测不同质量浓度苦参碱对H0-8910PM细胞细胞骨架的改变及免疫细胞化学方法检测药物作用前后HO-8910PM细胞Ezrin蛋白的表达.结果 苦参碱对HO-8910PM细胞增殖抑制呈明显剂量和时间效应;1.5 g/L苦参碱能明显抑制细胞的增殖,作用6 h后能抑制HO-8910PM细胞体外侵袭人工基底膜和运动能力,抑制率分别为(41.52±10.76)%和(39.73±10.67)%;1.0、1.5g/L苦参碱作用HO-8910PM细胞24 h后使细胞骨架明显改变,并上调Ezrin蛋白的表达.结论 苦参碱能抑制高转移性人卵巢癌细胞HO-8910PM的增殖能力和侵袭运动能力,其抗肿瘤侵袭运动的机制与细胞骨架和Ezrin蛋白表达的改变有关.
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益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾保护作用及足细胞骨架相关蛋白的影响
目的 探讨益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾脏保护作用及可能的机制.方法 健康雄性SD大鼠60只随机分为对照组10只和造模组50只,造模组采用尾iv阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法复制膜性肾病大鼠模型.造模成功后再随机分为模型组、盐酸贝那普利组和益肾通络方低、中、高剂量(6.61、13.22、26.44 g/kg)组,各组按照相应剂量ig给药,每天1次,连续给药4周.给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)、血清总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;免疫荧光检测各组大鼠肾组织IgG免疫复合物沉积情况,电镜下观察肾小球基底膜及足细胞形态结构;免疫组化及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组大鼠肾足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin的表达.结果 与模型组比较,各治疗组大鼠UTP、TC水平均显著下降(P＜0.01),TP、ALB水平均显著上升(P＜0.01);益肾通络方中、高剂量组与盐酸贝那普利组疗效相当,效果优于益肾通络方低剂量组;各组大鼠BUN、Scr相比无明显差异.与对照组比较,模型组大鼠肾足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin mRNA表达显著减少(P＜0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肾足细胞相关蛋白ezrin、synaptopodin mRNA表达均有不同程度增加(P＜0.01);益肾通络方中、高剂量组大鼠肾组织ezrin、synaptopodin mRNA表达量与盐酸贝那普利组相当,均高于益肾通络方低剂量组.结论 益肾通络方对膜性肾病大鼠具有治疗作用,其机制可能与防止足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin降解、维持足细胞骨架及足突结构完整性相关.
关键词： 益肾通络方 膜性肾病 足细胞骨架相关蛋白 Ezrin Synaptopodin -
三氧化二砷对肝细胞癌组织ezrin基因表达的影响
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对肝细胞癌(HCC)组织ezrin基因表达及血清甲胎蛋白(AFP)水平的影响.方法 24例可切除HCC患者,其中男性20例,女性4例；年龄42～74岁,平均年龄为58.6岁.术前接受As2O3治疗14d(10mg/d,静脉滴注).取治疗前的病灶活组织检查标本和治疗后手术切除标本,采用免疫组织化学方法均行ezrin表达检测,同时比较治疗前、后血清AFP水平的变化,并分析血清AFP水平与ezrin基因表达的相关性.结果 治疗前ezrin表达强阳性、弱阳性和阴性例数分别为6例、7例和11例,而As2O3治疗后分别为2例、5例和17例,两组比较差异有统计学意义(x2=5.619,P＜ 0.05).治疗前血清AFP为325.5 ng/L,治疗后AFP为278.6 ng/L,前后比较差异有统计学意义(Z=-2.360,P＜ 0.05).结论 AS2O3可明显下调HCC肿瘤细胞ezrin表达,有抑制HCC细胞生长、抑制复发转移的作用.
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Ezrin 蛋白与肿瘤转移关系的研究进展
Ezrin蛋白是ERM(Ezrin/Radixin/Moesin)家族的重要成员,是细胞骨架与细胞膜之间的连接蛋白,对细胞膜区域的整合和稳定性起到结构和功能调控的作用.Ezrin蛋白参与了微绒毛的形成及细胞形态的维持、细胞运动及黏附、细胞骨架的重塑及细胞信号转导过程,且可以作为膜的有机体和连接体连接细胞膜与细胞骨架,如:与细胞膜分子CD43、CD44、E-cadsdherin、ICAM-1等及细胞骨架成员F-型肌动蛋白(F-actin)的连接,并且有令人注目的临床证据显示:Ezrin蛋白家族和黏附分子在控制癌细胞具有的如粘附性的细胞功能及浸润转移的生物学特性上显得尤为重要.目前许多研究表明Ezrin蛋白与多种肿瘤的发生、转移和预后相关,如:妇科肿瘤、消化道肿瘤、黑色素瘤及鼻咽癌、成人软组织肿瘤、儿童骨肉瘤和横纹肌肉瘤等.Ezrin蛋白在肿瘤细胞中的表达异常,提示其在肿瘤的浸润、转移机制中发挥重要作用.有研究显示:Ezrin蛋白的异常表达可赋予肿瘤细胞高转移活性,影响并参与到肿瘤转移的多个环节,如:从原发灶脱落并具有运动性、侵入周围组织及脉管系统、穿透基底膜、选择性的在靶器官增殖形成转移灶等.对Ezrin蛋白在肿瘤中的全面研究,可以为肿瘤的诊断、治疗和预后评价提供新的思路和标准.
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黄芩素对人肝癌细胞株SMMC-7721体外迁移及侵袭的影响
目的:通过观察黄芩素对人肝癌细胞株SMMC-7721体外迁移侵袭能力及Ezrin、MMP-9、VEGF表达的影响,探讨黄芩素对人肝癌细胞株SMMC- 7721体外迁移侵袭的作用及其可能机制.方法:体外培养SMMC-7721,经黄芩素干预后用划痕愈合实验和侵袭小室实验分别检测黄芩素对SMMC-7721细胞迁移运动能力和侵袭能力的影响;RT-PCR和免疫细胞化学法检测黄芩素作用于SMMC-7721细胞48h后对Ezrin、MMP-9、VEGF mRNA和蛋白表达的影响.结果:划痕愈合实验显示各浓度实验组划痕愈合宽度占原宽度的比例比对照组明显下降(P<0.05);体外侵袭实验显示实验组穿过人工基底膜胶的细胞数明显减少(P<0.05);实验组Ezrin、MMP-9、VEGF mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0.05).结论:黄芩素可能通过直接或间接下调Ezrin、MMP-9、VEGF mRNA和蛋白的表达而抑制人肝癌细胞株SMMC- 7721体外迁移侵袭,传统中药黄芩可望为肝癌临床治疗提供新的安全、有效、价廉的治疗方法.
