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仙茅苷对电刺激应激小鼠神经精神活动的影响
目的 探讨仙茅苷对电刺激应激小鼠记忆、抑郁、焦虑样行为的影响.方法 采用电刺激前和电刺激后两个时间点给药,通过恐惧记忆测试、强迫游泳及旷场实验,观察仙茅苷(每日20 mg/kg,腹腔注射,7d)对电刺激应激小鼠恐惧记忆、抑郁及焦虑等神经活动的影响.结果 与对照组小鼠比较,电刺激前给药不影响小鼠在受到电击24 h及48 h后的凝滞时间;而电刺激后给药的小鼠在给药结束后再次测得的凝滞时间较对照组显著提高(P＜0.05).在电刺激后给药的实验中,仙茅苷能显著缩短小鼠不动时间(P＜0.05);电刺激前给药组亦有相同趋势,但差异并无统计学意义(P＞0.05).电刺激前后给药均不影响小鼠在中央格停留时间比(P＞0.05);与对照组比较,药物组电刺激前后给药具有提高小鼠运动总路程的趋势,但差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 仙茅苷具有改善电刺激应激小鼠抑郁的症状及抑制记忆退化的作用.
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高效液相色谱法测定健男春胶囊中仙茅苷的含量
目的建立高效液相法测定健男春胶囊中仙茅苷的含量.方法 Nova-pakC18(250mm×4.6mm,10μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(40∶60),流速为1.0ml·min-1,检测波长为275nm.结果仙茅苷在0.3485～2.7880μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=2×106X+34221(r=0.9999),平均回收率为95.88%,RSD为2.16%,重复性RSD为3.49%.结论本法简便,快速,灵敏,准确,重现性好.
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高效液相法测定制仙茅中仙茅苷的含量
仙茅为石蒜科植物仙茅的干燥根茎,具有补肾阳,强筋骨,祛寒湿的功效,用于阳痿精冷等症.仙茅中含有仙茅苷(Curculigoside)、仙茅素等.其中仙茅苷经药理实验证明能大幅度地促进巨噬细胞的增生能力及吞噬作用,提高机体免疫力,为其有效成分.仙茅为常用中药,我们对仙茅米泔水制品进行研究,并进行对比实验,建立了高效液相法测定米泔水制仙茅中仙茅苷的含量的测定方法,实验结果令人满意.
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仙茅有效成分仙茅苷的提取工艺及分析方法研究
目的 优化仙茅中有效成分仙茅苷的提取工艺,建立仙茅苷含量检测的HPLC方法.方法 系统考察了各单因素对仙茅苷提取率的影响,采用正交设计优化了提取工艺,建立了高效液相色谱法(HPLC)测定仙茅提取液中仙茅苷含量的方法.结果 佳的提取工艺为:80％体积分数的甲醇回流提取3h,料液比为1∶50,此时仙茅苷的提取率为0.244％;建立的HPLC方法精密度、稳定性、重复性和加样回收率良好,灵敏度较高.结论 采用正交试验设计得到的仙茅苷提取工艺,具有较高的仙茅苷提取率.该提取工艺及HPLC分析方法可为中药仙茅的质量控制(包括提取及分析)提供可供参考的实验数据.
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盐制仙茅工艺的正交实验优选
目的 用正交设计法优选盐仙茅的炮制工艺,为该药材的临床用药提供参考.方法 采用HPLC测定仙茅苷含量,流动相乙腈-0.1％磷酸溶液(21:79),检测波长285 nm;以仙茅苷含量为评价指标,通过L9(34)正交试验法考察食盐用量、蒸制压力、蒸制时间对盐仙茅炮制工艺的影响.结果 佳炮制工艺为食盐用量1.5％,蒸制压力为0.01 MPa,蒸制时间为1.5h.结论 该工艺节时、节能、合理可行,为盐仙茅的工业化生产提供参考.
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酒仙茅炮制工艺的正交试验优选
目的 优选酒炙仙茅的炮制工艺.方法 以仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、水溶性浸出物的含量为综合评价指标,选择黄酒比例、炒制温度、炒制时间为考察因素,采用L9(34)正交试验优选酒炙仙茅的炮制工艺.结果 酒炙仙茅的佳炮制工艺为每100kg仙茅加10kg黄酒,于100～ 110℃炒制10min.结论 优化的酒炙仙茅工艺合理可行.
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二丁二仙合剂质量标准的建立
目的:建立二丁二仙合剂质量标准.方法:采用TLC法对二丁二仙合剂中紫花地丁、黄柏进行定性鉴别;用HPLC法对制剂中淫羊藿苷、仙茅苷进行含量测定.结果:定性鉴别分离度较好,专属性强;淫羊藿苷的含量测定线性范围为5.77~184.50 μg·ml-1(r=0.9999),平均回收率为96.55%(RSD=1.14%,n=9);仙茅苷的含量测定线性范围为12.36 ~395.50 μg·ml-1(r=1.0000),平均回收率为100.58%(RSD=2.92%,n=9).结论:所建立方法准确可靠、灵敏度高、专属性强,可用于二丁二仙合剂的质量控制.
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不同炮制法对仙茅中仙茅苷含量的影响
目的:比较不同炮制方法 对仙茅中仙茅苷含量的影响.方法:采用HPLC法测定仙茅苷含量,以Wondasil C18-WR柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1％ 磷酸水溶液(13:5:82)为流动相,流速:1.0 ml·min-1,检测波长:283 nm,柱温:35℃.结果:采用不同炮制法处理仙茅后,仙茅中仙茅苷含量高低为:乌豆汁制仙茅>酒蒸仙茅>酒炙仙茅>米制仙茅>米泔制仙茅>生仙茅.结论:仙茅经炮制后仙茅苷的含量都有所增加.
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高效液相色谱法测定健骨颗粒中仙茅苷的含量
目的:建立健骨颗粒中仙茅苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱ODS-C18柱(4.6 mm×250mm,5 μm),0.1%磷酸溶液-乙腈(75:25)为流动相,检测波长为283 nm.理论板数按仙茅苷峰计算应不低于5 000.结果:仙茅苷在0.062 7～6.27 μg范围内线性关系良好.回归方程为A=2.294 5C-1.279 4(r=0.999 9).平均回收率为97.3%(n=9),RSD为1.0%.结论:该方法简便、快速、灵敏、准确、重复性好.可用于健骨颗粒中仙茅苷的质量控制.
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仙茅煎剂中仙茅苷的含量测定
仙茅为石蒜科植物Curculigo orchioides Gaerth的干燥根茎,味辛,性热、有毒,具有补肾阳、强筋骨、祛寒湿等功效,用于阳痿精冷、筋骨痿软、腰膝冷痹、阳虚冷泻等病症.仙茅苷为仙茅的主要成分,本文采用HPLC法测定仙茅苷含量,以此作为煎剂的质量控制指标.
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仙茅药材的质量标准研究
目的:建立仙茅药材的质量标准.方法:采集31个不同产地的仙茅、购买11批市售仙茅药材,按2010年版《中国药典》(一部)要求对其中的浸出物、总灰分、酸不溶灰分、水分、重金属、仙茅苷等指标进行分析.结果:不同产地仙茅含量差异较大,以四川、云南的仙茅药材质量好.市售11批药材中大部分批次的灰分和酸不溶灰分含量均符合药典标准；水溶性浸出物含量以28.0％～35.0％居多；醇溶性浸出物含量以云南、广西的含量高,达14.66％；醚溶性浸出物含量以1.5％～2.0％居多.6个不同产地批次仙茅药材的重金属砷、铅、汞、铜的含量符合规定,镉的含量则远高于0.3 mg·kg-1的标准规定.结论:所建标准可用于仙茅药材质量评价.
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仙茅苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生及Akt/GSK-3β/CRMP-2表达的影响
目的:研究仙茅苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生的作用并探讨其机制.方法:健康成年雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组、模型对照组、仙茅苷给药组,用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注大鼠模型(MCAO),大鼠神经功能损伤采用Zea-Longa标准评价,Western Blot法检测大鼠缺血侧脑组织p-Akt、Akt、p-GSK-3β、GSK-3β、p-CRMP-2、CRMP-2蛋白的表达,免疫荧光染色法检测大鼠缺血侧脑组织NF200蛋白的表达.结果:与MCAO组比较,仙茅苷能明显改善大鼠的神经功能损伤,促进NF200、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达,抑制p-CRMP-2蛋白表达.结论:仙茅苷能改善局灶性脑缺血/再灌注大鼠的神经功能缺损,可能通过促进Akt、GSK-3β的磷酸化,抑制CRMP-2的磷酸化,进一步促进轴突再生.
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仙茅苷对血管性痴呆模型大鼠海马区Caspase-3、PARP-1和雌激素受体表达的作用
目的:研究仙茅苷对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马区Caspase-3、PARP-1和雌激素受体(ER)表达的作用.方法:确立SD大鼠对照组后,用构建的血管性痴呆模型大鼠随机分成模型组、药物仙茅苷低(24 mg/kg)和高剂量(72 mg/kg)组(予以仙茅苷灌胃4周),每组8只.用药结束后,按设计用Morris水迷宫测试大鼠空间学习记忆功能;流式细胞术分析海马区神经细胞元凋亡;Caspase-3、PARP-1和ER蛋白水平用Western Blot测定;Caspase-3、PARP-1和ER mRNA表达用Realtime PCR检测.结果:Morris水迷宫试验结果显示,药物组和模型组大鼠逃避潜伏期均明显延长(P ＜0.05～0.01),模型组大鼠更明显(P＜0.01);药物组和模型组大鼠空间探索距离百分比均降低(P ＜0.05 ～0.01),模型组大鼠降更明显(P＜0.01).与对照组比较,药物组和模型组大鼠海马神经细胞凋亡率显著提高(P＜0.01),模型组大鼠更明显(P＜0.01).与对照组比较,模型组的Caspase-3、PARP-1蛋白和mRNA表达均增加(P＜0.05);与模型组相比,仙茅苷各剂量组可见ER表达增加(P＜0.05),Caspase-3和PARP-1表达降低(P＜0.05).与对照组比较,模型组的Caspase-3和PARP-1表达增加(P＜0.01),而ER未见明显变化(P＞0.05);与模型组相比,仙茅苷各剂量组ER表达均增加(P＜0.01),Caspase-3和PARP-1表达不明显(P＞0.05),但不同剂量仙茅苷组间未见明显差异(P＞0.05).结论:结果表明仙茅苷具有改善血管性模型大鼠空认知功能的作用是通过抑制海马区神经细胞凋亡,下调Caspase-3和PARP-1表达,上调海马ER表达实现的.
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高效液相色谱法测定健骨颗粒中仙茅苷的含量
目的:采用高效液相色谱法测定健骨颗粒中仙茅苷含量.方法:样品经水溶解后上中性氧化铝柱净化,采用色谱柱Capcell PAK ODS-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(25:75)为流动相,流速0.8 mL.min-1,检测波长为283 nm.结果:线性范围为3.135～62.7μg·mL-1,r=0.9999;平均加样回收率(n=9)为97.3%.结论:该方法灵敏度高,专属性好,操作简便,重复性好.
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高效液相色谱法测定金骨颗粒剂中仙茅苷的含量
目的：高效液相色谱法测定金骨颗粒剂中仙茅苷的含量。方法：本品以甲醇提取，提取物加水溶解后用醋酸乙酯萃取，萃取液进行高效液相色谱法分析。色谱柱Alltima C18(5 μm，4.6 mm×250 mm)，流动相为甲醇-异丙醇-水(20∶5∶75)，流速：0.8 mL.min-1；柱温：30 ℃；检测波长：283 nm。结果：加样平均回收率为98.68%，RSD为2.1%(n=5)。结论：实验结果表明，该法灵敏度高、专属性好、操作简便、重现性好。
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HPLC-DAD法同时测定更年安片中6个活性成分的含量
目的:建立同时分析测定更年安片中6个活性成分(2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2 -O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、仙茅苷、丹皮酚、哈巴俄苷、五味子醇甲)的方法.方法:采用HPLC-DAD法,色谱柱为奥泰Alltima ODS( 250 mm×4.6mm,5μm),以乙腈为流动相A,0.05％磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长为254 nm(测定五味子醇甲)、284 nm(测定仙茅苷、丹皮酚、哈巴俄苷)、330 nm(测定2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2 -O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊花糖苷).结果:2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、仙茅苷、丹皮酚、哈巴俄苷、五味子醇甲线性范围分别为0.0404～1.616 μg(r =0.9999),0.0194～0.774 μg(r =0.9998),0.0202 ～0.810μg(r =0.9997),0.0201～0.804μg(r=0.9999),0.0206～0.826μg(r=0.9998),0.0398～1.592 μg(r=0.9999).平均加样回收率(n=6)分别为97.8％,98.2％,97.9％,98.3％,101.2％,97.5％；RSD分别为1.2％,1.1％,0.95％,1.1％,0.97％,1.1％.结论:该方法操作简单,重复性好,为评价和监控更年安片的质量提供可靠的方法.
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高效液相色谱法测定仙茅中仙茅苷的含量
目的:建立反相高效液相色谱法测定仙茅中仙茅苷的含量.方法:样品经甲醇提取,色谱柱为Alltima C18(5 μm ,4.6mm×250mm),柱温40 ℃,甲醇-异丙醇-水(20∶5∶75)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长283 nm.结果:仙茅苷在0.25～2.59 μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.67%,RSD为2.6%(n=4).结论:本方法简便、可靠,重现性好.
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更年安片质量分析
目的:通过对更年安片119批次样品进行标准检验及探索性研究,对该品种的质量及标准状况作出总体分析及评价.方法:标准检验依据中国药典2005年版增补本,包括TLC鉴别及HPLC含量测定.探索性研究采用显微鉴别法以检查处方中原粉投料药材；对何首乌及五味子的薄层色谱鉴别进行再研究；建立了在同一色谱条件下测定更年安片中6个化学成分(2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、仙茅苷、丹皮酚、哈巴俄苷、五味子醇甲)已明确)的HPLC方法.结果:按现行质量标准检验,合格率100％；按探索性研究检验,提高了方法的可控性.结论:探索性研究增加了标准的专属性、可控性及安全性,为进一步修订药品标准、控制药品质量提供参考.
