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仙茅水提取物灌胃给予大鼠后入血成分研究
目的:测定并确认仙茅水提取物的入血成分.方法:大鼠灌胃给予仙茅水提取物,以HPLC测定不同血浆样品的色谱图,确认入血成分的色谱峰,以HPLC-MS-MS和NMR确定入血成分的结构.结果:苔黑酚葡萄糖苷和仙茅苷是仙茅水提取物的主要成分,含量分别为4.26％和0.96％.其中,苔黑酚葡萄糖苷以原型吸收入血,而仙茅苷等其他成分在本实验色谱条件下未从血中检测到.仙茅苷原型没有入血的原因可能是其在胃中很快被降解为其他成分.结论:仙茅的入血成分为苔黑酚葡萄糖苷,为仙茅的药效物质基础研究以及进一步的体内代谢研究提供参考.
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HPLC同时测定盐肤木提取物中4种有效成分含量
目的 建立HPLC同时测定盐肤木提取物中没食子酸、苔黑酚葡萄糖苷、没食子酸乙酯和五没食子酰葡萄糖4种成分含量的方法.方法 采用Hypersil-Gold Dim C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1％甲酸,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长273 nm.结果 没食子酸、苔黑酚葡萄糖苷、没食子酸乙酯、五没食子酰葡萄糖的进样量分别在0.025 7～0.514 μg(r=1)、0.097 3～1.946 μg(r=1)、0.040 1～0.801 μg (r=1)、0.102 0～2.036 μg (r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.86％(RSD=2.10％)、99.34％ (RSD=1.91％)、98.80％ (RSD=2.39％)、100.79％ (RSD=2.04％),方法的精密度、稳定性、重复性均满足分析要求.结论 该方法简单、快速、高效,结果准确,重复性好,可用于盐肤木提取物的质量控制.
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苔黑酚葡萄糖苷对抗甲基苯丙胺诱导的小鼠焦虑样行为研究
目的:探讨苔黑酚葡萄糖苷(Orcinol Glucoside,OG)对甲基苯丙胺(Methamphetamine,MA)引起的焦虑样行为的影响以及对海马区多巴胺、高香草酸、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸的影响.方法:通过高架十字迷宫实验研究OG对MA(1 mg/kg)诱导的焦虑样行为影响;通过小鼠自发活动实验观察OG对MA诱发的小鼠高活动量的影响;采用高效液相质谱联用技术检测小鼠脑内多巴胺和5-羟色胺及其代谢物含量.结果:OG能够显著性增加MA处理小鼠进入高架十字迷宫开放臂时间,降低MA小鼠的自发活动;神经化学检测发现MA组小鼠脑内海马区多巴胺、5-羟色胺及高香草酸含量明显增加;而OG能够显著性降低MA小鼠脑内高香草酸含量,同时有降低MA诱导的多巴胺及5-羟色胺水平增加的趋势.结论:OG能够有效减轻MA引起的焦虑样行为,且对MA导致的脑内高香草酸水平有回调作用,可作为对抗MA精神症状的潜在治疗药物.
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苔黑酚葡萄糖苷对L02细胞肝药酶CYP3A的调控作用研究
目的 观察苔黑酚葡萄糖苷对体外培养的正常肝细胞株L02中CYP3A的影响,探讨苔黑酚葡萄糖苷是否通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的活性.方法 分别用cAMP-PKA信号通路中蛋白激酶A(PKA)激动剂环腺苷酸(cAMP)类似物8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)及其抑制剂H-89、苔黑酚葡萄糖苷干预L02细胞,MTT法检测细胞活力,完整细胞免疫组化法检测PKA蛋白表达,红霉素-N-脱甲基法检测CYP3A活性,Western blotting检测细胞中孕烷X受体(PXR)蛋白表达.结果 与对照组(加入不含药的无血清培养基)相比,苔黑酚葡萄糖苷处理后的细胞CYP3A的活性增强,PKA、PXR蛋白表达增强,与8-Br-cAMP的作用相似.结论 苔黑酚葡萄糖苷可通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的表达,表明其可能是仙茅表现出辛热药性的主要成分之一.
关键词： 苔黑酚葡萄糖苷 仙茅 肝L02细胞 cAMP-PKA信号通路 CYP3A -
仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在Caco-2细胞模型中吸收的机制
目的 研究仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在人结肠癌细胞Caco-2细胞模型中的吸收机制.方法 利用Caco-2细胞模型研究仙茅苷(curculigoside)、苔黑酚葡萄糖苷(orcinol glucoside)的双向跨膜转运特征,通过高效液相色谱法测定二者的质量浓度,计算其表观渗透系数(Papp),考察时间、药物质量浓度对二者吸收和转运的影响.结果 仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在Caco-2细胞模型中,各自在细胞绒毛面Apical (AP)和基底面Basolateral (BL)的双向转运基本相同,随着药物浓度的增加转运速率在减小,随着转运时间的延长转运速率略有减小.结论 仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷具有良好的肠吸收特性,在Cilco-2细胞模型中的吸收为被动转运.
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酒仙茅炮制工艺的正交试验优选
目的 优选酒炙仙茅的炮制工艺.方法 以仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、水溶性浸出物的含量为综合评价指标,选择黄酒比例、炒制温度、炒制时间为考察因素,采用L9(34)正交试验优选酒炙仙茅的炮制工艺.结果 酒炙仙茅的佳炮制工艺为每100kg仙茅加10kg黄酒,于100～ 110℃炒制10min.结论 优化的酒炙仙茅工艺合理可行.
