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竹节参皂苷类化合物 HPLC 指纹图谱研究
目的：建立竹节参药材皂苷类成分HPLC指纹图谱的研究方法，为竹节参药材的质量控制提供依据。方法：采用Hibar C18（4．6 mm ×250 mm，5μm）色谱柱，以乙腈－0．1％的磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速1．0 mL? min－1，检测波长203 nm，柱温30℃；测定了7批市售竹节参药材的HPLC指纹图谱。结果：竹节参的指纹图谱共检出12个共有峰，通过对照品比对指认了其中的7个共有皂苷类成分，7批药材中有6批相似度均达到0．9以上。结论：该方法精密度、稳定性、重复性好，特征性及专属性强，可用于竹节参药材的质量控制。
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竹节参皂苷类化学成分的研究
目的:对竹节参中的皂苷类化学成分进行研究.方法:采用正丁醇萃取,制备高效液相色谱等方法分离制备竹节参中的皂苷类成分,应用波谱等方法鉴定化合物的结构.结果:从竹节参中分离得到了5个皂苷类化合物,分别鉴定为巨花雪胆皂苷B(1),竹节参皂苷Ⅴ(2)、IV(3)、IVa(4)和Cynarasaponin C(5).结论:化合物1和化合物5为首次从人参属植物中分离得到.
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竹节参的主要药效与作用机制
竹节参又名竹节人参、北三七、竹节三七等.系五加科人参属植物竹节参(Panax ja-ponicus C.A.Mey)的干燥根茎,具有滋补强壮、活血散瘀、消肿止痛等多种功效.在土家族苗族聚居区民间医疗中被视为"草药之王",属珍稀濒危的名贵中草药.近几年已越来越成为研究与应用的热点.为此,笔者就其主要药效与作用机制研究简述如下.
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HPLC测定竹节参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量
目的：建立同时测定竹节参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量的高效液相色谱方法。方法用70%乙醇超声提取竹节参药材,采用Agilent Poroshell 120 C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长203 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果在该色谱条件下,人参皂苷Rg1、Re、Rb1达到基线分离,线性关系良好,加样回收率分别为99.5%、103.0%、100.5%。结论该方法操作简便,重复性好,分析周期短,能准确测定竹节参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量,可为竹节参的质量控制提供参考依据。
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竹节参总皂苷的制备工艺及含量测定
目的:优选竹节参总皂苷的提取纯化工艺,并测定其含量.方法:运用正交试验设计,以药材中总皂苷的转移率作为考察指标,筛选佳提取工艺;用正丁醇萃取合并醇溶-丙酮沉淀法纯化得到精制皂苷;分别采用分光光度法和HPLC测定其中总皂苷和三萜苷元齐墩果酸的含量.结果:提取工艺以药材粗粉10倍量的60%乙醇,浸泡2 h后加热回流提取3次,每次3 h佳;纯化工艺中以正丁醇萃取3次,以85%乙醇充分溶解后,边搅拌边缓慢加入4～5倍量丙酮沉淀效果佳.经纯化后总皂苷可达83.48%,其中三萜苷元齐墩果酸可达38.30%.结论:本工艺条件对竹节参总皂苷的提取收率高且稳定,测定方法简便可行,重现性好.
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竹节参HPLC-ELSD指纹图谱和化学成分分析
目的:建立竹节参药材HPLC-ELSD液相指纹图谱,分离纯化鉴定其主要特征峰的单体化合物,客观评价竹节参内在质量差异.方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD),梯度洗脱,测定了10批竹节参样品.色谱条件为YMC-pack ODS-AQ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈(A)-0.5%乙酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～5 min,20%～40% A;5～20 min,40%～40% A),流速为1.0 mL·min~(-1),柱温30℃.EL5D检测器:漂移管温度为40℃,氮气释放压力为33 Psi.通过采用反复硅胶柱色谱和半制备HPLC的方法分离纯化竹节参的化学成分,并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定.结果:建立了10批竹节参样品HPLC-ELSD指纹图谱,分离纯化鉴定了5个主要化学成分,分别为人参皂苷Re,竹节参皂苷Ⅳ,Ⅳa,Ⅴ,Pjs-2.结论:综合竹节参指纹图谱和化学成分分析,能较全面的表征不同产地竹节参内在成分的差异,为竹节参内在质量评价提供依据.
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不同加工竹节参中多元活性成分同时测定及灰色关联度分析
建立超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定竹节参中皂苷、氨基酸及核苷类共33种成分含量的方法,考察不同加工方法对竹节参药材中目标成分的影响.采用XBridge(R) C18 (4.6 mm×100 mm,3.5μm),以0.1％甲酸水-0.1％甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,柱温30℃,多反应监测离子扫描模式(MRM)测定;用灰色关联度分析(GRA)对不同加工竹节参进行综合分析与评价.结果表明,33种成分在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.999 0;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为95.33％～ 101.8％,RSD均小于5％.GRA评价结果显示,微波干燥、完整根茎不去皮的竹节参样品综合质量较好.所建立的方法准确、可靠,可用于竹节参药材内在质量的综合评价,该研究可为竹节参适宜产地加工方法的优选及其加工方法的规范化和标准化提供基础资料.
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微生物转化人参皂苷研究进展
人参皂苷属于达玛烷型四环三萜类,是由苷元与糖连接而成的一种苷,依据苷元不同,可分为原人参二醇皂苷如Rbl、Rb2、Re、Rd、Rh2等和原人参三醇皂苷如Re、Rg1、Rg2、Rf、Rh1等[1].人参皂苷主要存在于五加科人参属植物,如人参、三七、西洋参、高丽参、越南人参、珠子参、竹节参,以及葫芦科绞股蓝属绞股蓝和喙果绞股蓝等植物的根、茎、叶或花蕾中12J,是人参属植物的主要活性成分之一,具有多方面药理活性.2002年,日本学者Zou等[3]从云南野生三七中分离出六种新型达玛烷型三萜皂苷.现已分离出的人参皂苷有50多种[4],相信将来会有更多的人参皂苷被发现.
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厚朴等药材TLC条件的优选试验
目的 探讨厚朴等药材的薄层色谱(TLC)条件.方法 对厚朴、厚朴花、竹节参、荜茇,豆蔻等5种药材的TLC展开系统进行优化试验,选择低毒、低污染的试剂替代<中国药典>2005版含苯系统,并与原系统比较分离检测效果.结果 新系统的薄层色谱分离效果好,鉴别特征明显、专属性强,多数优于原舍苯系统,已被<中国药典>2010版采用.结论 所建的TLC方法 简便、安全、环保.
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竹节参总皂苷的大孔吸附树脂纯化与离子交换树脂脱色工艺研究
目的 优化竹节参总皂苷大孔吸附树脂纯化和离子交换树脂脱色的工艺方法.方法 以竹节参皂苷Ⅳa为对照品,采用香草醛-高氯酸显色后用分光光度法测定竹节参总皂苷的量;以动态吸附和静态解吸附实验方法筛选适宜型号的大孔吸附树脂并优化分离纯化工艺参数;以竹节参总皂苷保留率、脱色率为指标筛选合适类型的离子脱色树脂并优化其脱色效果.结果 X-5型大孔吸附树脂对竹节参总皂苷有较好的纯化效果,其佳纯化条件为上样质量浓度为生药0.2 mg/mL,上样量为每克树脂10 g生药,洗脱剂为70％乙醇,洗脱剂用量为每克树脂5mL;脱色工艺研究表明,732型阳离子交换树脂对大孔吸附树脂法得到的竹节参皂苷粗品具有良好的脱色效果,优化后的脱色工艺的操作方法是大孔吸附树脂醇洗脱液经回收溶剂至无醇味后,调整浓缩液pH值为10,上样于732型阳离子交换树脂,收集流出液脱色率大于50％的馏份,此时每克树脂脱色竹节参总皂苷量为290.5 mg.经减压干燥后,终获得的精制竹节参总皂苷外观呈类白色至黄白色,其质量分数大于85.0％,总转移率超过70.0％.结论 建立的方法能较好地分离纯化竹节参总皂苷,适用于工业化生产.
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竹节参化学成分及药理活性研究进展
竹节参在土家族苗族聚居区民间医疗中被誉为"草药之王",属珍稀濒危的名贵"七类"中草药.由于其兼具北药人参滋补强壮和南药三七活血化瘀之功效,近年来受到了广泛的关注.就竹节参的化学成分与药理活性研究概况进行综述,以期为竹节参的全面开发利用提供参考.
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天然与细胞培养竹节参的抗炎、镇痛作用研究
目的:对比研究天然竹节参和植物细胞培养竹节参的抗炎和镇痛活性,确定细胞培养竹节参的活性成分.方法:以二甲苯致小鼠耳肿胀为急性炎症模型,以小鼠醋酸扭体实验为止痛模型,分别对天然竹节参,细胞培养竹节参及细胞培养竹节参的分离产物总皂苷、多糖等成分进行抗炎和镇痛试验.结果:细胞培养竹节参中、高剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响与对照组比较,差异有显著性和非常显著性统计学意义(P<0.05,P<0.01);天然竹节参组及细胞培养竹节参中、高剂量组对醋酸致小鼠扭体反应的影响与对照组比较,差异有显著性及非常显著性统计学意义(P<0.05,P<0.01);竹节参分离产物总皂苷中、高剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响与对照组比较,差异有显著性统计学意义(P<0.05);多糖组及总皂苷中、高剂量组对醋酸致小鼠扭体反应扭体次数的影响与对照组比较,差异有显著性及非常显著性统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论:细胞培养竹节参与野生天然竹节参的药用价值相当.
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天然与细胞培养竹节参的抗炎、镇痛作用研究
目的:对比研究天然竹节参和植物细胞培养竹节参的抗炎和镇痛活性,确定细胞培养竹节参的活性成分.方法:以二甲苯致小鼠耳肿胀为急性炎症模型,以小鼠醋酸扭体实验为止痛模型,分别对天然竹节参,细胞培养竹节参及细胞培养竹节参的分离产物总皂苷、多糖等成分进行抗炎和镇痛试验.结果:细胞培养竹节参中、高剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响与对照组比较,差异有显著性和非常显著性统计学意义(P<0.05,P<0.01);天然竹节参组及细胞培养竹节参中、高剂量组对醋酸致小鼠扭体反应的影响与对照组比较,差异有显著性及非常显著性统计学意义(P<0.05,P<0.01);竹节参分离产物总皂苷中、高剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响与对照组比较,差异有显著性统计学意义(P<0.05);多糖组及总皂苷中、高剂量组对醋酸致小鼠扭体反应扭体次数的影响与对照组比较,差异有显著性及非常显著性统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论:细胞培养竹节参与野生天然竹节参的药用价值相当.
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高效液相色谱法定量分析竹节参中人参皂苷Rg1的含量
竹节参为五加科植物竹节参Panax japonicus C.A.Meyer的干燥根茎,以根状茎和肉质根入药,主产于云南、贵州、四川、湖北等省.竹节参主要药理活性成分包括竹节人参皂苷、人参皂苷、三七皂苷,其药理作用和临床应用已引起研究者的普遍关注[1,2].目前国内外人参皂苷的测定方法主要有比色法、薄层光密度法、高效液相色谱法、液质联用法等.经比较,高效液相色谱法具有灵敏度高、准确可靠、较易推广等优点[3,4].为此,该研究建立了以人参皂苷Rg1为质控指标,采用RP-HPLC定量分析竹节参中人参皂苷Rg1的含量,为评价竹节参质量及进一步研究提供一定依据.
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竹节参在治疗心脑血管病方面的研究进展
中药竹节参为五加科植物竹节参(Panax ja-ponicus C.A.Mey)的根状茎及肉质块根,为名贵常用中药,<中华人民共和国药典>收载品种,民间又称竹节三七、土参等.竹节参是土苗医药的当家药物,被认为具有滋补强壮,止血通经,活血祛淤等功能[1].
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土家族珍稀药材神参(竹节参)的研究概况
竹节参Panax japonicus C.A.Mey是我国西南地区土家族、苗族聚居地民间常用的中草药,具滋补强壮、活血化瘀、消肿止痛、止血祛痰、滋补强壮等功效[1、2].在前期的科研工作中.发现竹节参单味药及其复方在风湿病和心血管系统疾病上临床疗效非常显著.并立项进行研究.本文对土家族珍稀药材竹节参(神参)的历史沿革、资源分布、化学成分、药理作用、临床应用进行介绍,为加强土家族珍稀地产药材的质量控制和研究开发打下基础.
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HPLC同时测定竹节参中竹节参皂苷Ⅴ和Ⅳ a含量
目的:建立HPLC同时测定竹节参中竹节参皂苷Ⅴ和Ⅳ a的含量测定方法,并对不同产地的竹节参药材进行含量测定.方法:采用Hibar C18色谱柱,以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长203 nm.结果:竹节参皂苷Ⅴ在0.36～7.20μg(r＞0.999)范围内线性关系良好,平均加样回收率为96.0％,(RSD=0.73％,n=6);竹节参皂苷Ⅳa在0.57～11.40μg(r＞0.999)范围内线性关系良好,平均加样回收率为104.2％(RSD=0.86％,n=6).结论:该方法结果准确、重复性好,可用于竹节参药材的质量控制.
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分析比较竹节参两种不同提取方法所得挥发性成分
目的 分析比较不同的竹节参挥发性成分.方法 采用挥发油提取器法和索氏提取器法提取竹节参挥发性成分,使用GC-MS联用仪进行测定.依据C9-C30正构烷烃在HP-5MS柱上的保留时间计算各峰保留指数,用峰面积归一化法测定各成分相对含量.结果 从正己烷索氏提取液中鉴定了13种组分,占总峰面积的93.7％；从挥发油提取器法提取物中鉴定了14种组分,占总峰面积的70.4％.结论 两种提取方法得到的挥发性成分主成分变化较大,本研究为竹节参的进一步开发提供了科学依据.
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竹节参总皂苷不同提取工艺的比较研究
目的:通过比较竹节参总皂苷不同提取工艺以优选竹节参总皂苷稳定、可靠的提取工艺,以期为民族中药竹节参的现代化开发利用奠定实验基础.方法:以提取物中竹节参总皂苷含量和齐墩果酸含量以及提取物抗氧化能力作为考察指标,比较60％乙醇回流提取法、水提醇沉法、泡沫分离法、水饱和正丁醇超声提取法、60％乙醇超声提取法等提取工艺,希望为竹节参总皂苷提取工艺的选择提供参考.结果:60％乙醇超声提取法所得竹节参总皂苷提取率、齐墩果酸转移率相对较高,分别达到99.31％和33.59％,且提取物体外抗氧化活性相对较高达到71.30 U/g.结论:60％乙醇超声提取法具有提取时间短,稳定性好,有效成分转移率高,提取成本较低,可广泛应用于大型工业化生产等优点,为竹节参总皂苷的较优提取工艺.
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竹节参总皂苷对环磷酰胺致免疫低下小鼠免疫功能的影响
目的 研究竹节参总皂苷(Total Saponins of Panax japonicus Rhizoma,TSPJ)对环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠免疫功能的影响.方法 腹腔注射环磷酰胺(Cy)复制免疫功能低下的动物模型；摘取脾脏称质量并计算脾脏指数,MTT法检测T淋巴细胞增殖活性,微量分光光度法检测血清溶血素抗体HC50形成水平,流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群(CD4+T细胞、CD8+T细胞)比例、B细胞及NK细胞比例,ELISA法检测血清IFN-γ量.结果 TSPJ可增加免疫低下小鼠脾脏质量与脾脏指数,促进脾脏T淋巴细胞增殖,提高免疫低下小鼠血清溶血素水平,上调外周血CD4+/CD8+比例、B淋巴细胞及NK细胞比例,提高血清中IFN-γ的水平.结论 TSPJ通过刺激小鼠的特异性及非特异性免疫应答,对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫功能有良好的增强作用.
