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人内质网分子伴侣BiP抗原表位筛选及其在RA血清学诊断中的作用研究
目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值.方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽.比较合成多肽与RA患者血清(BiP抗体阳性)IgG的反应强弱,鉴定抗原抗体反应强的抗原表位多肽.进一步以获得的BiP抗原表位多肽作为包被抗原,检测79例RA患者、34例系统性红斑狼疮(SLE)患者、66例干燥综合征(SS)患者和173例正常人血清中抗BiP抗原表位多肽IgG抗体水平.结果:筛选到一条与RA患者血清反应强的多肽(N403),抗N403多肽IgG抗体在RA患者中的阳性率(67%),明显高于SS患者(29%)、SLE患者(0%)、和正常人(0%)(P＜0.01).抗N403多肽IgG抗体在RA血清学诊断中的敏感性为67%,特异性为93%.而且该抗体的检测对于RF、CCP、HRF、RA33、AKA、APF等抗体阴性的RA患者的诊断具有重要意义.结论:筛选获得的BiP抗原表位多肽N403,其检测抗体在RA临床血清诊断中具有很好的应用价值.
关键词： 人内质网分子伴侣BiP蛋白 抗原表位 类风湿性关节炎 多肽抗体 -
苹果过敏原Mal d4蛋白抗原表位预测及交叉反应分析
目的:预测苹果过敏原Mal d 4蛋白B细胞和T细胞抗原表位,探讨Mal d 4蛋白与其同源蛋白之间的交叉反应性.方法:以苹果过敏原Mal d 4蛋白的氨基酸序列为基础,采用生物信息软件HNN预测二级结构;运用DNAStar和Bcepred软件预测其B细胞抗原表位,用NetMHCⅡ、NetMHCⅡpan、Syfpeithi及Propred软件综合预测T细胞抗原表位;采用Clustal X1.83、Swiss-Model软件比对同源序列和模拟空间构象.结果:该蛋白二级结构以无规则卷曲为主.B/T细胞共同抗原表位的区域为53～61、85～93.苹果Mal d 4蛋白与桃、芒果、甜樱桃、草莓中的前纤维蛋白氨基酸序列同源性达88%以上,空间构象相似.结论:苹果过敏原Mal d 4蛋白与桃、芒果、甜樱桃和草莓的前纤维蛋白之间可能存在交叉反应,其优势抗原表位区域可能为53～61、85～93,是后续过敏原改造的重点,为继续深入开展苹果过敏原基础性研究提供理论依据.
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抗TRPC6多肽单克隆抗体的制备及其识别抗原表位分析
目的:制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其生物学特性进行鉴定.方法:采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫小鼠后经细胞融合,间接ELISA 法筛选阳性杂交瘤细胞;单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;间接ELISA 法鉴定该单克隆抗体的特性、效价及其相对亲和力;采用生物信息学进行抗原表位预测,并通过ELISA单抗相加试验分析单抗识别抗原位点的差异性.结果:获得3 株能稳定分泌抗TRPC6多肽的单抗杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F11和H8;抗体Ig亚类均为IgG1型;染色体鉴定符合杂交瘤细胞的特性;3株单抗相对亲和力比较F11较强,A2和H8接近;抗体识别位点分析结果表明A2与H8、A2与F11的相加指数分别大于50%,可能识别的是不同位点;而F11与H8的相加指数小于50%,可能识别的是同一位点.结论:抗TRPC6多肽单克隆抗体的成功制备及其识别抗原表位分析,为TRPC6蛋白的相关研究提供物质基础.
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抗CD20单链抗体融合显性抗原肽的原核表达和其抑瘤活性研究
目的：人工设计并表达美罗华（C2B8）单链可变区抗体与李斯特菌溶细胞素O（Listeriolysin O，LLO）显性抗原表位构成的重组融合蛋白（ScFv－pLLO），初步分析其抗淋巴瘤细胞活性。方法：查询数据库获得美罗华（C2B8）单抗VH 和VL基因序列，构建抗CD20单链抗体（ ScFv）基因序列，选取LLO的2个CD4＋T细胞表位，构建单链抗体融合抗原表位的重组蛋白基因序列，克隆至原核表达载体，经诱导表达纯化，流式细胞术和免疫共沉淀分析其与淋巴瘤细胞结合能力，细胞增殖实验测定其对淋巴瘤细胞生长的影响，凋亡实验分析其诱导淋巴瘤细胞凋亡的能力，淋巴细胞增殖实验分析其免疫原性。结果：成功诱导表达重组蛋白ScFv－pLLO。 ScFv－pLLO可不同程度地靶向结合不同淋巴瘤细胞系，并明显抑制Raji细胞生长和诱导其凋亡。 ScFv－pLLO可刺激免疫小鼠脾细胞增殖。结论：重组蛋白ScFv－pLLO保留了ScFv 的功能，可靶向结合和抑制CD20阳性淋巴瘤细胞的生长，同时可激活机体免疫应答，为进一步研究其模拟瘤细胞表面抗原和作为瘤细胞疫苗佐剂的功能奠定基础。
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猫主要过敏原Fel d 1的T细胞抗原表位分析及三维结构模拟
目的:预测猫主要过敏原Fel d 1与MHC Ⅰ、MHCⅡ类分子的结合力获得T细胞优势抗原表位,并模拟Fel d 1的三维结构,为猫主要过敏原的改造及其临床研究等提供依据.方法:从Uniprot数据库中得到猫主要过敏原Fel d 1的氨基酸序列,通过在线软件NetMHCⅡ2.2对Fel d 1氨基酸序列进行MHCⅡ抗原表位分析,使用软件SYFPEITHI分析MHC Ⅰ的抗原表位,再通过在线软件Swiss-Model预测Feld1的三维结构,以Ramachandran图评估三维结构的稳定性.结果:运用生物学软件分析得到Fel d 1上两个高值MHCⅡ抗原表位区域分别为22～43、80～95,MHC Ⅰ抗原表位优势区为17～30、56～84、91 ～103.Ramachandran图显示Feld 1的空间构象稳定.结论:本研究有助于确定Fel d 1的T细胞优势抗原表位及其三维结构模型,为Fel d 1抗原性改造提供理论依据,及将来的临床研究奠定基础.
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基于细菌展示技术的高通量抗原表位筛选方法的建立
目的:本研究旨在利用细菌表面展示技术结合流式细胞术建立一种快速直观的抗原表位的新方法.方法:本研究以传染性法氏囊病毒结构蛋白VP2作为目标蛋白,对该方法的可行性进行检测.将VP2基因分为连续不重叠的5个基因片段(V1～V5).将各段基因分别克隆至细菌展示载体pAPEx中,转化大肠杆菌DH5 α,利用IPTG诱导使蛋白片段锚定表达于大肠杆菌细胞间质侧的内膜上,利用溶菌酶破除细菌外膜(原生质球制备),使蛋白片段暴露于原生质球表面.将该原生质球先后与传染性法氏囊病毒多克隆抗体和FITC标记的兔抗鸡抗体进行孵育,利用流式细胞仪(Flow cytometer,FC)检测原生质球的荧光信号强度.结果:FC结果显示,除V2片段外其余片段均有很强的荧光信号,其荧光强度为V3强,V1、V4、V5其次.该结果说明V1、V3、V4、V5段存在抗原表位,V2段中无表位.为验证FC结果,本研究利用传统方法对各基因片段进行表达、纯化及Western blot鉴定,结果显示V3与多抗的结合能力强,V2段无阳性反应,与FC结果相符.此外,本研究利用抗原表位分析软件对各蛋白片段潜在抗原表位进行预测,其结果与FC结果相一致.结论:本研究利用FC对抗原表位筛选过程进行实时监测,通过荧光信号强弱即可判断抗原表位是否存在及强弱,与传统抗原表位筛选方法相比,节省了时间提高了效率.利用该方法可以快速地筛选出优势表位,对于流行病病原的基础研究及疫苗的研制具有重要意义.
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尘螨变应原Derf3、Derp3和Eurm3结构和功能的比较研究
目的：比较尘螨变应原Der f 3、Der p 3和Eur m 3的结构及功能异同。方法：用ProtParam、PROSITE、Jpred、Modeller 9.12和ABCpred等生物信息学工具来预测、比较Der f 3、Der p 3和Eur m 3的一级、二级、三级结构及抗原表位。结果： Der f 3、Der p 3和Eur m 3氨基酸序列一致性为88.51％，都含有3个胰蛋白酶活性位点氨基酸及2个功能结构区特异性序列；二级和三级结构中都由α-螺旋、β-折叠和无规卷曲组成；活性位点氨基酸在三级结构中完全重合，并相互靠近构成蛋白酶的活性中心；主要潜在抗原表位区域都为5个，并在第79-81 aa、129-135 aa和172-174 aa区域出现了重合，但表位重合区的氨基酸种类不完全相同。结论：应用生物信息方法预测和比较了Der f 3、Der p 3和Eur m 3结构与抗原方面的信息，为进一步研究变应原功能、疫苗研制奠定了基础。
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欧洲女贞花粉主要过敏原Ligv1理化性质与结构的生物信息学分析
目的：运用生物信息学相关软件，预测欧洲女贞花粉主要过敏原Ligv1的理化性质和结构，为Ligv1重组表达系统的选择和过敏原性改造提供参考。方法：查询文献获得Ligv1的氨基酸序列，运用生物信息学软件分析其理化性质（ProtParam）、信号肽（SignalP 4.1 Server）、跨膜区（TMHMM Server v.2.0）、二级结构（GOR4）、MHCⅡ类抗原表位（NetMHCⅡ2.2 Server）、B 细胞抗原表位（ProteanTM 5.01）以及系统发生树（MEGA 6）。结果：Ligv1在大肠杆菌中稳定性较好，不存在信号肽与跨膜区；二级结构中无规则卷曲占大多数；Ligv1潜在MHCⅡ类抗原表位为30～44区域；B 细胞抗原表位既具有连续的氨基酸序列，也具有不连续的氨基酸序列；Ligv1与欧洲白蜡以及木犀榄的同源蛋白进化距离近。结论：大肠杆菌是适合重组Ligv1的表达系统，Ligv1抗原表位分析为低过敏原性改造提供参考。
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人源α－烯醇化酶B细胞表位鉴定及其与牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶的交叉反应预测
目的：预测鉴定人源α－烯醇化酶蛋白的B细胞抗原表位，探讨人源α－烯醇化酶与牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶之间的交叉反应性。方法：以人源α－烯醇化酶蛋白序列为基础，综合应用多个软件预测B细胞线性表位；再以人源α－烯醇化酶的蛋白晶体结构为基础，采用4个生物信息学软件综合预测B细胞构象表位；利用原核表达系统对人源α－烯醇化酶蛋白进行表达、亲和层析法进行，纯化抗原免疫BALB／c小鼠，化学合成预测的线性表位片段检测抗体反应，确定人源α－烯醇化酶蛋白B细胞表位。利用ClustalX进行蛋白质序列比对和Swiss－Model进行同源模建，研究人源α－烯醇化酶和牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶的交叉反应性。结果：人源α－烯醇化酶线性B细胞表位优势区域为9－25aa，28－43aa，70－85aa，163－178aa，229－244aa，280－295aa；构象性B细胞表位优势区域为：1－4／24－30／77－86／124aa，9－16／51－59aa，250－254／262－268／271－274aa；合成的线性表位片段中9－25aa免疫应答反应强烈，其次是70－85aa ，再次为28－43aa，163－178aa，229－244aa，280－295aa；牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶和人源α－烯醇化酶氨基酸序列同源性高达50．11％，两者在线性B细胞表位优势区域的9－24aa和32－42aa序列高度相似；空间构象比对结果显示牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶和人源α－烯醇化酶之间的RMSD值为1．055?，且两者在3个构象性B细胞表位优势区域的空间构象高度相似，推测二者可能在上述区域发生交叉反应。结论：预测并鉴定了人源α－烯醇化酶蛋白的B细胞抗原表位，比较其与牙龈卟啉单胞菌的烯醇化酶可能发生交叉反应的位点，为研究人源α－烯醇化酶蛋白的自身抗原性和类风湿性关节炎发病机制提供了理论基础。
关键词： 抗原表位 人源α-烯醇化酶 牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶 交叉反应 -
以通用肿瘤相关抗原为靶点的免疫治疗
近几十年的研究证明人类肿瘤可以表达被细胞免疫特异识别的抗原,这一发现加速了以T细胞免疫为基础的抗肿瘤免疫治疗的发展.临床上成功的特异性肿瘤免疫治疗取决于对肿瘤抗原的发现,肿瘤相关抗原的寻找是体液免疫和细胞免疫治疗发展的关键因素.随着分子医学和分子免疫学技术的发展,特别是计算机在生物学中的广泛应用,对T细胞表位进行初步预测成为可能.本篇综述简要阐述肿瘤相关抗原(Tumor associated antigen, TAA)的分类、通用TAA抗原表位的筛选方法以及四种通用TAA在临床方面的初步研究.
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H5N1亚型禽流感病毒血凝素Th和B细胞表位预测及抗原性分析
目的:预测H5N1亚型禽流感病毒血凝素Th和B细胞相关抗原表位,并初步分析其抗原性.方法:依据近年H5N1亚型禽流感病毒流行趋势,下载得到相关HA蛋白氨基酸序列.进行生物信息学综合分析预测,获得Th和B细胞相关抗原表位,并比较其保守性和特异性.通过BALB/c小鼠和SPF鸡H5N1亚型禽流感病毒阳性血清,初步鉴定候选表位抗原性.结果:综合多项预测及空间构象模拟结果,我们获得了三条候选Th和B细胞表位,分别为HA141～155、HA206～223、HA302～316.候选表位处于H5N1亚型禽流感HA1 蛋白序列上相对保守的区域内,且与目前流行的H5N1亚型禽流感病毒HA相应区域具有较好的一致性.而不同候选表位在BALB/c小鼠和SPF鸡H5N1亚型禽流感病毒阳性血清反应中显示了不同抗体结合能力,预示了其成为功能表位的可能.结论:所筛选的表位具有成为H5N1亚型禽流感病毒HA Th和B细胞相关抗原表位的可能.本研究为深入揭示流感病毒感染与免疫机制,H5N1亚型禽流感功能表位认知及表位疫苗研究奠定了基础.
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人自身抗原52-kDRo／SSA，rRNP，Jo-1，SmD1，Scl-70，SSB-La 的原核表达及纯化鉴定
目的：制备重组人自身抗原52-kDRo／SSA，rRNP，Jo-1，SmD1，Scl-70以及 SSB-La，为建立自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定基础。方法在 NCBI 上查询人52-kDRo／SSA，rRNP，Jo-1，SmD1，Scl-70，SSB-La 的碱基序列和氨基酸序列，运用软件预测抗原表位，选择抗原表位并对密码子进行偏嗜性改造，采用人工合成方法合成抗原表位序列并插入至原核表达载体 pET30a 中。将重组质粒导入大肠杆菌 BL21经 IPTG 诱导表达，表达的重组蛋白用镍离子亲和层析柱纯化，用荧光免疫法测定重组蛋白活性。结果重组人自身抗原 SSB-La 是可溶性表达，52-kDRo／SSA，rRNP，Jo-1，SmD1以及 Scl-70是包涵体形式表达；纯化产物经荧光免疫法测定活性，结果显示：SSB-La， Scl-70以及 Jo-1具有较高的抗原活性，52-kDRo／SSA，rRNP 以及 SmD1抗原活性较弱。结论成功制备了重组人自身抗原52-KDRoSSA，rRNP，Jo-1，SmD1，Scl-70以及 SSB-La，为下一步研究开发自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定了基础。
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人VEGF165和小鼠VEGF164共同抗原表位分析及验证
目的 分析人VEGF165和小鼠VEGF164的共同抗原表位,为血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表位疫苗的设计和验证奠定基础.方法 分析人VEGF165和小鼠VEGF164蛋白与KDR结合的关键位点,确定其共同表位.将共同表位插入到VEGF骨架蛋白中,扩增含共同表位的骨架蛋白基因,与原核表达载体pET-24a连接,构建重组表达质粒pET-24a-FV,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Sephacryl S-100凝胶柱进行纯化,纯化的蛋白进行SDS-PAGE分析.以纯化的表位展示蛋白免疫小鼠,获得免疫血清,ELISA法测定血清效价,Western blot和间接免疫荧光法检测免疫小鼠血清对小鼠VEGF164和VEGF165的识别.结果 人VEGF165和小鼠VEGF164共同抗原表位为KDR 40s loop结合区的EYPDEIEYIFKP;重组表达质粒经双酶切及测序证明构建正确；表位展示蛋白主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的20％,纯度可达92％；小鼠VEGF164和人VEGF165均能与小鼠免疫血清发生反应,血清效价达到1∶104；免疫血清不仅能识别表位展示蛋白,还能识别小鼠VEGF164和人VEGF165单体和二聚体,还可与人HeLa、小鼠B16肿瘤细胞之间存在阳性反应,表明表位展示蛋白能展示VFGF的共同抗原表位.结论 骨架蛋白展示的VEGF164和VEGF165共同表位免疫小鼠后,能产生针对这两个蛋白的特异免疫反应,证实EYPDEIEYIFKP表位是VEGF164和VEGF165的共同抗原表位.
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弓形虫P30蛋白抗原表位的克隆表达及纯化鉴定
目的构建表达P30蛋白抗原表位的重组质粒及工程菌,获得纯化的P30蛋白抗原表位,用于检测弓形虫特异性抗体.方法采用PCR技术,设计一对引物(P30P3、P30P4),从弓形虫基因组DNA中扩增出编码P30蛋白抗原表位的基因片段,与载体pET28a(+)连接,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析.用离子交换纯化表达的P30抗原表位,用ELISA鉴定其抗原性.结果表达的P30蛋白抗原表位以包涵体形式存在,纯化的P30蛋白抗原表位片段有较好的抗原性,可用于检测弓形虫抗体.结论已成功构建了高表达P30蛋白的工程菌,为研制弓形虫抗体检测试剂或疫苗奠定了基础.
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重组人成熟型转化生长因子β1及其抗原表位在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性鉴定
目的 研制人转化生长因子(TGF)-β1自体蛋白疫苗,并诱导小鼠产生抗人TGF-β1的中和抗体.方法 将hTGF-β1及其抗原表位基因β32和β80分别克隆入pGEX-4T-1原核表达载体,并引入T细胞辅助表位(TT),转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达.应用GST亲和层析纯化重组融合蛋白,并经Western blot鉴定,用流式细胞术(FCM)检测抗hTGF-β1抗血清与人肝癌细胞株SMMC-7721表面膜型TGF-β1的结合状况.用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测血清中抗hTGF-β1抗体的效价.结果 成功构建了人成熟型TGF-β1及其不同表位基因片段的重组表达质粒pGEX-TT-β32、pGEX-TT-β80和pGEX-TT-hTGF-β1,表达的3种重组蛋白(GST-TT-β32、GST-TT-β80和GST-TT-hTGF-β1)经Western blot鉴定显示,同时具有hT-GF-β1和GST的抗原性.经纯化后免疫BALB/c小鼠,血清抗人TGF-β1抗体的效价均达到1∶104,其中GST-TT-β80的抗体效价高.FCM显示3种重组蛋白免疫的小鼠抗血清均能与高表达膜型TGF-β1的人SMMC-7721结合,但重组蛋白GST-TT-β80和GST-TT-hTGF-β1免疫组抗血清的结合率明显高于GST-TT-β32组.结论 构建的人成熟型TGF-β1及其不同表位片段的不同融合蛋白疫苗均能够诱导BALB/c小鼠产生抗人TGF-β1的中和抗体.
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腺病毒抗原表位嵌合蛋白的原核表达及其免疫原性
目的 设计含有人腺病毒(human adenovirus,HAdV)3、7、11、14及55型抗原表位的嵌合蛋白,利用大肠埃希菌进行原核表达,并检测其抗原性及免疫原性.方法 对5种型别HAdV的六邻体蛋白氨基酸序列进行分析,筛选出其中具有强抗原性的片段,片段之间用2个甘氨酸和1个丝氨酸进行连接,形成1个多抗原片段串联的嵌合蛋白.优化嵌合蛋白的基因序列并化学合成全长基因,克隆至原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),筛选高表达嵌合蛋白的工程菌.用High Affinity Ni-NTA resin纯化该嵌合蛋白,并将其作为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,间接ELISA法检测嵌合蛋白的抗原性及免疫原性.结果 成功构建了高表达嵌合蛋白的工程菌,表达的嵌合蛋白相对分子质量约55 000,表达量达95％;破菌上清中嵌合蛋白的纯度较高,纯化后纯度在90％以上.嵌合蛋白免疫小鼠4次后,小鼠抗血清效价达1∶320 000.制备的腺病毒抗原表位嵌合蛋白能有效检测血清中腺病毒3、7、1 1、14及55型抗体,且能有效刺激机体产生针对各型别腺病毒抗原表位的抗体.结论 表达制备的包含5种型别HAdV抗原表位的嵌合蛋白具有较好的抗原性及免疫原性,为进一步研制腺病毒疫苗、单克隆抗体及诊断试剂奠定了基础.
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呈现埃博拉病毒包膜糖蛋白抗原表位重组病毒样颗粒的构建
目的 构建呈现埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)包膜糖蛋白(glycoprotein,GP)抗原表位的病毒样颗粒(viruslike particles,VLPs).方法 通过EBOV GP抗原性预测,并结合其功能结构域分析获得潜在的B细胞表位,经基因重组将该抗原表位插入至乙肝核心抗原(HBcAg)的优势表位区域,SDS-PAGE法分析重组HBcAg抗原表位嵌合蛋白的表达.重组菌体破碎上清经硫酸铵沉淀和蔗糖密度梯度离心纯化后,通过电镜观察VLPs形态.将VLPs与Alum佐剂按1∶1的比例混合,经背部皮下免疫小鼠.ELISA及Western blot法检测小鼠血清的特异性.结果 重组HBcAg抗原表位嵌合蛋白的相对分子质量约19 300,纯化后蛋白浓度为1.244 mg/ml,镜下可见其以VLPs形式存在.VLPs免疫小鼠血清可与GP发生特异性免疫反应.结论 成功构建了呈现EBOV GP抗原表位的VLPs,其可有效诱导小鼠产生特异性免疫应答.本实验为EBOV基因重组疫苗的研究及特异性抗体的制备奠定了基础.
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EV71抗原表位的研究方法及研究进展
肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)属于小RNA病毒科(Picornaradae)肠道病毒属(Enterovirus)的成员,是引起亚太地区手足口病暴发的主要病原体之一.EV71可引起严重的神经系统病变,对6岁以下儿童造成较高的死亡率.目前尚无上市的疫苗来预防EV71的感染.因此,研制EV71疫苗及治疗药物十分迫切.病毒中和表位是刺激机体产生特异性免疫反应的物质基础,研究其结构、功能对于疫苗的研发,特别是亚单位疫苗的研制、药物靶点筛选至关重要.本文主要对研究EV71抗原表位的方法及新近况作一综述.
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过敏性疾病重组疫苗的研究进展
过敏性疾病是世界范围内严重的卫生问题之一.因多数情况下患者很难做到避免接触过敏原,因此特异性脱敏治疗成为重要的治疗措施.随着人们对过敏原表位认识的深入和蛋白重组表达技术的不断成熟,一种新型用于特异性脱敏治疗的疫苗——重组疫苗被众多学者认可并广泛使用.重组疫苗具有安全、高效、特异等传统过敏原疫苗不具备的优势,并可达到个体化治疗的目的.本文就特异性脱敏治疗(specific immunotherapy,SIT)、重组疫苗及其制备以及疫苗的临床试验作一综述.
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单克隆抗体表位分析技术的研究进展
单克隆抗体具有高度均一性及对靶分子的高亲和性、特异性,已广泛应用于自身免疫性疾病、炎性疾病和癌症的治疗.单克隆抗体与相应抗原的反应性决定于其所识别的抗原表位,确定相应表位在抗原结构上的位置是单克隆抗体筛选中的关键步骤.本文主要对几种单克隆抗体表位的分析方法,包括ELISA法、生物酶解法及化学切割法、噬菌体随机肽库、X-射线晶体学、丙氨酸扫描、氢氘交换质谱(hydrogen/deuterium exchange mass spectrometry,HDX-MS)、生物信息学表位预测方法的原理、特点及研究进展作一综述.
