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  • 同步固—液双相泌尿生殖道支原体培养、鉴定和药敏

    作者:陈玉莲;徐涛;翁杏花;马碧蓝;李磊邦

    目的 同步进行固体与液体支原体培养,解决液体培养的假阳性和假阴性,缩短培养时间,准确的鉴定为临床用药提供可靠的药敏结果.方法 采用法国生物梅里埃公司Mycoplasma IST2支原体试剂盒对6363例疑似非淋菌性尿道炎(NGU)患者进行泌尿生殖道支原体培养、鉴定和药敏试验;用上海恩科生物有限公司生产的解脲脲原体和人型支原体的选择显示培养基.结果 泌尿生殖道支原体阳性检出率为32.8%,其中Uu阳性率为75%、Mh阳性率为2%、Uu+Mh混合感染阳性率为24%;药敏试验结果显示,Uu、Mh、Uu+Mh对原始霉素、交沙霉素、强力霉素敏感性均较高,达到90%以上;而Uu对氧氟沙星和环丙沙星具有较高的耐药性.结论 固体、液体同步培养支原体只需2d时间,将支原体固体培养的金标准与液体培养的药敏相结合达到试验互补,为临床泌尿生殖道支原体培养提供准确的鉴定和药敏报告.

  • 固体培养和液体培养对铜绿假单胞菌双鞭毛影响的比较

    作者:谷海瀛;李凡;符新颖;郭红荔

    铜绿假单胞菌属于单端双鞭毛菌,而不是单端单鞭毛菌,这一发现是将菌种接种在哥伦比亚羊血琼脂平板上培养得出的[1].本文研究证实铜绿假单胞菌液体培养双鞭毛细胞数与单鞭毛细胞数的比值高于固体培养.

  • 上海地区耐多药结核菌突变特点

    作者:罗涛;赵明;李霞;徐鹏;桂晓虹;Sam Pickerill;Kathryn De Riemer;梅建;高谦

    快速诊断并阻断耐多药结核茵的传播对控制耐多药结核病疫情具有非常重要的意义.结核分枝杆菌生长缓慢,传统的基于固体培养的药物敏感试验非常耗时,新的基于耐药突变的分子诊断方法将是快速诊断的发展趋势.结核分枝杆菌耐药与基因组上特定基因的点突变有关.目前WHO审核通过了2个基于检测突变的快速诊断产品,但由于不同地区耐药突变特点不同,其在不同地区检测的敏感性和特异性有很大差异.我们观察了上海地区耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变特点,筛选出一套高敏感耐药突变位点用于耐药结核病的快速诊断.

  • 诱导白木香产生沉香真菌的固体培养条件优化

    作者:崔晋龙;肖培根;郭顺星;王梦亮

    目的 对诱导白木香产生沉香的3株活性真菌的固体培养条件进行优化,为该类真菌的推广应用提供参考.方法 采用真菌固体培养方法,对影响真菌生长的营养和培养条件等因子进行优化,实验结果采用单因素方差分析法.结果 得到了培养3株活性真菌的佳固体培养基配方,获得了真菌固体生长的适温度、pH值、装料量、基质含水量和光照条件.结论 在实验得到的佳条件下,能够较快的培养出高质量的固体菌种;为3株活性真菌诱导白木香产生沉香的生产推广提供了菌种培养的优化条件.

  • 蜜环菌固体培养特性

    作者:程显好;郭顺星

    目的 研究蜜环菌的固体培养特性.方法 利用半固体琼脂培养基对蜜环菌进行暗培养,观测不同培养基、不同碳源、不同氮源、不同温度对蜜环菌生长和形态的影响.测定蜜环菌不同发育阶段菌体中多糖、还原糖、葡萄糖和甘露醇的含量变化.结果 蜜环菌在不同培养基上的生长量差别较大,形态也有差别.蜜环菌对糖的利用明显优于相应的糖醇,对小分子的乙醇和甘油都能够利用,对于淀粉则利用较慢.蜜环菌对有机氮源和无机氮源都能很好利用.VitB1对蜜环菌生长没有明显促进作用.蜜环菌在麦芽汁培养基上30℃培养的生长周期比25℃条件下缩短7d左右.蜜环菌在对数生长期和稳定生长期多糖含量分别为9.29%和4.70%,甘露醇含量分别为10.08%和10.58%,生长期中葡萄糖和总还原糖的含量则一直很低.结论 碳源因素对蜜环菌生长的影响大于氮源因素.蜜环菌适宜生长温度为20~30℃.甘露醇是蜜环菌体内积累较多的小分子糖类成分.

  • 富硒猫棒束孢菌丝的培养方法

    作者:胡杰;王靖;杨喜花;任连生;张文平

    目的 制备富硒猫棒束孢,通过固体培养,实现无机硒向有机硒的生物学转化.方法 在猫棒束孢常规培养过程中,加入无机硒化合物,采用高效液相色谱-电感耦合等离子体-质谱(HPLC-ICP-MS)法检测培养好的富硒猫棒束孢和非富硒猫棒束孢菌丝粉中有机硒含量,确定其生物转化率.结果 840 g小米和42 g葡萄糖中加入亚硒酸钠140 mg,平均可培养出富硒猫棒束孢菌丝粉280 g,所培养富硒猫棒束孢中有机硒含量为48.78μg/g,无机硒的的生物转化率为21.39%.结论 在猫棒束孢常规固体培养过程中加入无机硒化合物(亚硒酸钠),可以成功实现无机硒的有机化转化,本方法可用于猫棒束孢的富硒培养.

  • Xpert Meb/RIF检测方法的探讨

    作者:杨顺利

    随着分子生物学诊断技术的不断发展, GeneXpert在多个国家和地区进行了验证评估, Xpert Meb/RIF检测技术作为一种利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术,逐渐受到临床的广泛关注。该方法通过核酸提取、扩增和检测,将前处理后的待检标本放入密闭的反应盒中,通过上述三位一体操作程序自动给出实验结果,整个过程只需2h就可得出痰标本是否菌阳、带菌量多少、是否利福平耐药的结果[1],而传统的方法得出利福平耐药结果需要3个月的时间,增加了检测的快速性。我院接受了全球基金项目为我院配备的一台GeneXpert检测仪,目前已检测30例痰标本,现将30例痰标本涂片镜检,固体培养和 GeneXpert 检测分枝杆菌3种方法将以对比总结。

  • 中国被毛孢分生孢子形成过程显微结构的研究

    作者:李建宏;谢放;王灿;张楠

    分生孢子是中国被毛孢(H sinensis)生活史中极为重要的一个环节,其在冬虫夏草侵染和形成过程中有着十分关键的作用.本实验以中国被毛孢纯培养菌种为实验材料,采用显微镜观察了其菌丝体经营养生长产分生孢子过程中显微结构变化,结果表明:中国被毛孢在固体培养条件下,可以形成分生孢子,其形态和产生方式与微循环产孢过程中形成的分生孢子一致,同时,在产孢过程中,还存在瓶梗结构纵裂形成对生分生孢子的现象.

  • 泌尿生殖道支原体液体培养与固体培养比对

    作者:翁杏华;徐涛;关尚;陈瑞湖;陈玉莲

    目的:验证泌尿生殖道支原体液体培养,准确地为鉴定临床用药提供科学理论依据.方法:对636例用Mycoplasma IST2 支原体试剂盒液体培养阳性的标本转种在支原体固体培养基,按培养条件和时间要求进行低倍显微镜结果确认.结果:泌尿生殖道支原体液体培养阳性率为33%,固体培养阳性检出率为32%.结论:泌尿生殖道支原体液体培养与固体培养相符率为97%,支原体液体培养变红且清亮不用做固体培养,支原体液体培养变红且混浊需要加做支原体固体培养,将支原体固体培养的金标准与快速带药敏的液体培养相结合达到试验互补,避免了假阳性造成的误诊,合理使用抗生素,确保医疗安全.

  • 结核分枝杆菌两种培养方法比较

    作者:徐成良;陈兆俊;陆英;柳正卫;胡建军;王谦信

    为了更快、更准地检测结核分枝杆菌,并且能客观评估肺结核化疗效果与控制效果,使用Bact/ALERT 3D液体培养技术是一个较好的结核杆菌培养方法,有利于早发现耐药患者[1].在国家卫生部-法国梅里埃基金会结核病防治项目资助下,常山县人民医院于2011年2月-2012年8月对150例初治和复治涂阳肺结核患者2个月末的痰标本进行传统的罗氏固体培养法(固体培养)和Bact/ALERT 3D液体培养法(液体培养)的对照研究[2].

  • 黄连等单味中药对人型支原体的药敏试验

    作者:傅琳玲;曹双林;符梅;邵萍

    由于中草药具有褐色、黑色等颜色,给人型支原体液体培养药敏试验的结果判断带来一定的困难.我们对黄连等单味中药进行液体加固体培养作人型支原体药敏试验,并检测敏感中药体外小抑菌浓度,为中药对支原体体外药敏试验提供了一种方法.

  • 解脲支原体的病原学诊断方法初探

    作者:陈京;汤兴丽

    目的:研究液体培养解脲支原体后加做固体培养的必要性.方法:将180例不孕不育患者标本先接种解脲支原体液体培养基进行液体培养24 h后,再分别转种解脲支原体固体培养基培养,同时取124例液体培养液变红的标本做普通细菌培养和真菌培养.结果:液体培养阳性率为51.11%,固体培养阳性率为46.11%,差异无统计学意义(P>0.05).但液体培养阳性而固体培养阴性的标本占19.6%,液体培养法判断为阴性的污染标本中28.1%固体培养阳性.普通细菌培养和真菌培养共检出13株产脲酶菌和40株不产脲酶菌.结论:采用单一的液体培养法进行临床检测解脲支原体易出现假阳性或假阴性.确切的诊断仍要靠液体培养初筛后加做固体培养.

  • 泌尿生殖道支原体液体培养法与固体培养法结果比较的研究

    作者:杨颖;罗永慧;江莎莎;甘雪华

    目的 比较液体培养与固体培养方法对泌尿生殖道支原体检测的可靠性,从而提高支原体检测的准确率.方法 采用液体培养基和固体A7琼脂培养基平行检测106例宫颈分泌物样本的Uu和Mh.结果 对Uu检测,液体培养法阳性56例;固体培养法阳性49例;对Mh检测,液体培养法阳性24例,固体培养法阳性17例,两种培养法培养Uu及Mh的阳性率均没有显著性差异(P>0.05).液体培养法灵敏度较高而特异度较低,固体培养法则正好相反,特异性高而灵敏度低.结论 在泌尿生殖道支原体检测中,实验室应尽可能采用两种培养方法平行检测,以弥补两种方法各自的不足,提高检测的准确度.

  • Bact/ALERT 3D液体培养技术在耐药结核病早期诊断中的应用研究

    作者:王谦信;陈兆俊;陆英;柳正卫;胡建军;姜阳兴

    目的 分析150例初、复治涂阳肺结核患者2个月末的痰标本进行Bact/ALERT 3D仪液体培养和固体罗氏培养情况.方法 对治疗2个月后150例初、复治涂阳肺结核患者的2个月末的痰标本进行Bact/ALERT 3D仪液体培养,阳性培养物送浙江省疾控中心进行HAIN分子生物学试验,并与固体罗氏培养法进行比较.结果 150例中,涂阳37例,液体痰培养阳性29例;涂阴113例,液体痰培养阳性65例.菌型鉴定结果均为结核分枝杆菌.传统药敏试验结果,耐药19例(其中:广泛耐药2例,耐多药6例,单耐药8例,多耐药3例).Bact/ALERT 3D液体快速培养法从接种到HAIN实验出结果,平均20.5 d;传统罗氏培养法时间平均3个月.Bact/ALERT 3D液体快速培养法未见污染,传统罗氏培养法污染7例.结论 Bact/ALERT 3D液体快速培养法检测结核分枝杆菌,具有阳性分离率高,能缩短报告时间,污染率低,安全可靠,自动化程度高,在耐药结核病早期诊断中具有应用价值.

  • 应用硝酸盐还原实验建立快速结核分枝杆菌药物敏感分析方法

    作者:王彦;王庭祥;张晨钰;钟丽英;李文华;张彩云;郑志清

    我国是结核病的高发区,耐药现象非常严重.应用分枝杆菌培养及药物敏感性试验是保证治疗药物针对性的主要手段.但传统的固体培养基方法存在耗时长、培养阳性率不高等缺点;而应用诸如BACTEC等先进设备又存在价格昂贵的不足.我们根据结核分枝杆菌的代谢特点,以硝酸盐还原成亚硝酸盐为基础的培养方法[1],以红颜色产生与否来判断结核分枝杆菌生长情况,建立快速、准确的药物敏感分析方法.

  • 幽门螺杆菌的固体培养与液体保存

    作者:邸振福;熊益群;谢谨琳;刘心亮;徐绍刚;穆桂萍;赵丽

    [目的]探索高效的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)培养和保存方法.[方法]固体培养基采用空肠弯曲菌琼脂加混合抗生素的马血清,利用固体培养基,在微需氧条件下,37℃培养2~3 d,培养出Hp;菌株采用保存液保存于低温液氮条件下,复苏.[结果]成功培养出Hp,且增菌迅速;菌珠保存可成功复苏.[结论]采用固体培养和保存液低温液氮保存,能够较好培养出细菌,且保存后复苏率高.

  • 猪苓菌丝固体培养特性研究

    作者:程显好;郭顺星

    利用固体琼脂培养基对猪苓暗培养,观测不同培养基、不同碳源、不同氮源、不同温度对猪苓生长和菌丝形态的影响,并测定猪苓在两种不同培养基上菌丝产生猪苓酮类成分的差异.结果表明: 1. 猪苓菌的营养需求比较简单,在只有碳源和氮源的简单培养基上均能生长; 2. 麦芽汁培养基、GPY培养基和GPC培养基比较适合于猪苓菌固体培养; 3. 玉米浆、酵母膏、奶粉、硫胺素、伴生菌提取物、蜜环菌提取物、活性白土、硅藻土、高岭土等对猪苓生长都显示出促进作用; 4. 固体培养猪苓菌丝能分泌黑色素; 5. 麦芽汁培养以及以甘油、甘露醇为碳源的培养基,都可以诱导猪苓菌丝形成菌核; 6. 麦芽汁培养基和甘油培养基上培养获得的菌丝体中含有猪苓酮类成分.

  • 药用真菌粗毛黄褐孔菌生物学性质的研究

    作者:陈向东;兰进

    目的:研究药用真菌粗毛黄褐孔菌的生物学特性,为粗毛黄褐孔菌人工培养和工业化生产培养提供参考.方法:考察粗毛黄褐孔菌菌株在不同温度、光照下对菌丝生长的影响,酯酶同工酶酶谱.同时对液体培养粗毛黄褐孔菌的碳源、氮源和初始pH对菌丝生物量和胞外多糖含量的影响进行了研究.结果:粗毛黄褐孔菌菌丝在25℃生长速度较快,黑暗培养有利于菌丝生长,粗毛黄褐孔菌有8条酯酶同工酶.在液体培养条件下,综合考虑生物量和胞外多糖产量,葡萄糖是较好的碳源,酵母膏是较好的氮源,在6.5~7.5范围内的初始pH值较好.结论:为粗毛黄褐孔菌人工培养和工业化液体深层发酵培养提供参考.

  • 34例男性顽固性尿道感染解脲支原体的培养与药敏分析

    作者:蔡明钢;张万鹏;韩建德

    目的:了解男性顽固性非淋菌性尿道炎患者的解脲支原体感染及耐药情况.方法:对我科门诊34例顽固性尿道解脲支原体感染患者进行液体培养和固体培养,并进行药物敏感性试验.结果:液体培养阳性34例(100%),固体培养阳性26例(76.47%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);药敏试验显示:美满霉素有较高的敏感性,红霉素、罗红霉素、阿齐霉素和交沙霉素则中度敏感到耐药占多数,而大多数菌株对环丙沙星、氧氟沙星、强力霉素耐药,其中环丙沙星耐药率高(88.46%).结论:男性顽固性尿道解脲支原体感染与液体培养出现假阳性及抗生素耐药有关.

  • 解脲脲原体液体培养法与固体培养法结果的比较

    作者:何洁钿;陈加力;许自雯;庄贤文

    目的比较液体培养和固体培养,了解液体培养法对解脲脲原体(Uu)检测的可靠性,加强Uu检测的质量控制.方法采用液体培养基和固体A7琼脂培养基平行检测1150例宫颈分泌物样本的解脲脲原体.结果液体培养法阳性401例;固体培养法阳性34 5例;液体培养法阳性而固体培养法阴性90例;固体培养法阳性而液体培养法阴性34例.两种方法所得的结果有较强的正关联性(关联系数r=0.759).吻合度较强,有统计学意义(Kappa系数为0.755),但本质上有显著性差异(P<0.001).结论 Uu的检测以液体培养法作筛选,结合固体培养法作鉴定,可提高检测结果的准确性.

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