探讨研究TrkB在卵巢上皮性癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的:研究酪氨酸激酶受体B(TrkB)在卵巢上皮性癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学方法对10例正常卵巢组织、17例卵巢良性上皮性肿瘤组织、21例卵巢交界性上皮性肿瘤组织、60例卵巢上皮性癌进行TrkB检测.结果 TrkB在卵巢上皮性癌中的阳性率与正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤及交界性卵巢肿瘤相比差异均有显著性(P＜0.05).在卵巢上皮性癌中,TrkB的表达与肿瘤的临床分期、组织的分化程度及有无淋巴结转移有关,临床分期越晚、组织分化越差,TrkB表达越高,有淋巴结转移组的表达率高于无淋巴结转移组(P＜0.05).结论 TrkB在卵巢上皮性癌的发生发展中起着重要作用.

补肾方药对衰老大鼠海马学习记忆相关基因BDNF及其受体TrkB mRNA表达的影响

目的:观察补肾方药左归丸、右归丸对衰老大鼠海马学习记忆相关基因脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB mRNA表达的影响,探讨老年大鼠学习记忆功能减退的部分分子机理,以及左归丸、右归丸的改善作用.方法:以自然衰老SD大鼠为动物模型,随机分设4组:青年对照组、老年对照组、老年左归丸组、老年右归丸组.采用原位杂交技术,观察各组大鼠大脑切片海马各分区(CAl、CA2、CA3、DG)BDNF、TrkB mRNA表达变化.结果:与青年对照组相比,老年对照组大鼠海马各分区的BDNF、TrkB mRNA表达均明显减弱(P＜0.05),而左归丸、右归丸能不同程度地提高老年对照组大鼠海马DG、CAI、CA2、和CA3分区低下的BDNF、TrkB mRNA的表达.结论:老年大鼠的学习记忆功能退化,与学习记忆相关的基因BDNF、Trk B表达异常有关.而滋补肾阴方药左归丸、温补肾阳方药右归丸能通过提高BDNF、TrkB基因的表达,进而改善老年大鼠的学习记忆功能,延缓机体衰老.

补肾活血颗粒对帕金森病模型大鼠黑质细胞TrkB及Tau表达的影响

目的:探讨补肾活血颗粒对帕金森病模型大鼠黑质中TrkB及Tau表达的影响.方法:33只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和补肾活血颗粒治疗组,应用免疫组织化学染色技术观察大鼠黑质中TrkB、Tau表达的变化情况.结果:与正常组及模型组比较,治疗组TrkB表达显著增强(P＜0.01);与正常组比较,模型组Tau表达显著增强(P＜0.01);与模型组比较,治疗组Tau表达明显降低(P＜0.01).结论:补肾活血颗粒治疗帕金森病的疗效机制可能与上调模型大鼠黑质细胞中的TrkB表达,强化了神经修复损伤因子作用及下调Tau蛋白,减轻细胞内蛋白质凝聚表达有关.

酒精处理对青春期大鼠海马CA3区BDNF和trkB表达的影响

目的 为探讨青春期饮酒致学习记忆力下降并长期持续的可能机制,本研究观察了青春期大鼠酒精处理后海马CA3区BDNF(脑源性神经营养因子)和trkB(酪氨酸激酶受体B)的表达变化.方法 选用30 d 龄SD雄性大鼠,以25%的酒精按8g/kg·d 灌胃,连续灌7d,动物分别在停酒后0d、3d、7d和14d 处死;对照组以等量生理盐水代替酒精按同样方法处理.用免疫组织化学方法(ABC法)检测海马CA3区BDNF和trkB的表达,Motic3.2图像分析系统测定免疫阳性产物的平均灰度值.结果 BDNF的表达在停酒后0d 、3d、7d、14d,实验组与相应对照组相比差异无显著性(P＞0.05);trkB的表达在停酒后0d、7d、14d,实验组与相应对照组相比差异无显著性(P＞0.05); 3d显著下降(P＜0.05).结论 BDNF、trkB表达的相对不足可能是青春期饮酒致学习记忆力持续性下降的原因之一.

酒精处理对青春期大鼠海马齿状回BDNF和trkB的影响

目的 为探讨青春期饮酒致学习记忆力下降并长期持续的可能机制,本研究观察了青春期大鼠酒精处理后海马齿状回BDNF(脑源性神经营养因子)和trkB(酪氨酸激酶受体B)的含量变化.方法 选用30d(天)龄SD雄性大鼠,以25%法)检测海马齿状回BDNF和trkB的含量,Motic3.2图像分析系统测定免疫阳性产物的平均灰度值.结果 BDNF和trkB的含量在停酒后0d、3d、7d,实验组与相应对照组相比均无显著差异(P＞0.05);停酒后14d,BDNF含量显著上升(P＜0.05),trkB含量显著下降(P＜0.05).结论 BDNF、trkB含量的相对不足致齿状回神经再生能力下降,可能是青春期饮酒致学习记忆力持续性下降的原因之一.

瞬时高眼压对兔视网膜BDNF/TrkB浓度影响的研究

目的 观察准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)术中负压吸引对兔视网膜BDNF/TrkB浓度的影响,从神经营养因子被剥夺的角度分析LASIK术中负压吸引引起视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的发生机制.方法 48只健康新西兰大耳白兔随机分为实验对照组、负压吸引20 s组、吸引45 s组和吸引3 min组.实验对照组只进行激光治疗,负压吸引各组先用负压发生器吸引眼角巩膜缘,持续20 s、45 s及3 min,分别于术后即刻、7 d、10 d、14 d各时间点处死白兔,取视网膜组织检测脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB的浓度.结果 视网膜BDNF/TrkB浓度的动态观察:与实验对照组相比,负压吸引20 s和45 s组视网膜BDNF/TrkB的浓度变化无统计学意义(P>0.05).而负压吸引3 min组视网膜BDNF和TrkB的浓度都有所增加,与实验对照组差异有统计学意义(P<0.05),且都于术后7 d达到高峰,10 d则明显下降,14 d回到接近正常对照组水平.负压吸引3 min后各时间点BDNF和TrkB的浓度变化与实验对照组比较,术后即刻和7 d差异有统计学意义(P<0.05),术后10 d和14 d差异无统计学意义(P>0.05).结论 LASIK术中负压吸引引起的眼压急剧升高,可以导致视网膜中BDNF/TrkB浓度变化,但这种改变为可逆的;负压吸引持续时间越长改变越明显.神经营养因子被剥夺是高眼压引起RGCs凋亡的机制之一.

7,8-二羟基黄酮对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的 探讨7,8-二羟基黄酮(7,8-DHF)对自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响.方法 用Western blotting法检测清洁级雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠及SHR胸主动脉和VSMCs中平滑肌肌动蛋白(SM-α-actin)及增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达水平;用不同浓度7,8-DHF和(或)TrkB特异性抑制剂ANA-12处理SHR胸主动脉源性VSMCs,用CCK-8法检测VSMCs活性;用Western blotting法检测7,8-DHF和(或)ANA-12处理SHR胸主动脉源性VSMCs后SM-α-actin和PCNA的蛋白表达水平.使用Prism 5统计软件,应用独立样本t检验或单因素方差分析进行统计学分析.结果 同WKY大鼠比较,SHR胸主动脉组织中SM-α-actin的蛋白表达水平显著降低[(0.72±0.06),(0.41±0.08);t=6.35,P<0.05],PCNA的蛋白表达水平则明显升高[(0.51±0.09),(0.99±0.15);t=6.43,P<0.05].SHR胸主动脉源性VSMCs中SM-α-actin的蛋白表达水平较WKY大鼠显著降低[(0.71±0.05),(0.36±0.04);t=11.12,P<0.01],PCNA的蛋白表达水平则明显升高[(0.69±0.07),(1.05±0.08);t=8.49,P<0.05].7,8-DHF能明显抑制SHR胸主动脉源性VSMCs增殖活性,并呈浓度依赖性(F=17.49,P<0.01),给予ANA-12(10μmol/L)处理后,SHR胸主动脉源性VSMCs的增殖活性较单独给予7,8-DHF组显著升高[(0.52±0.08),(0.86±0.14);t=5.13,P<0.01];ANA-12能够显著消除7,8-DHF引起的SHR胸主动脉源性VSMCs中SM-α-actin蛋白表达水平的升高[(0.85±0.13),(0.35±0.15);t=4.37,P<0.01]及PCNA蛋白表达水平的降低[(0.42±0.13),(0.76±0.10);t=3.54,P<0.05].结论 7,8-DHF能够有效抑制SHR胸主动脉源性VSMCs由收缩型向增殖型转化,其作用可能是由TrkB受体介导.

BDNF及TrKB可能成为肿瘤治疗的新希望

脑源性神经营养因子是酪氨酸蛋白激酶受体B的配体,两者结合促进酪氨酸蛋白激酶受体同源二聚体形成,激活酪氨酸激酶受体B活性,促进受体酪氨酸残基磷酸化,活化的酪氨酸蛋白激酶受体B顺序激活多种蛋白酶,将脑源性神经营养因子信号传至细胞核,产生各种生物学效应.越来越多的研究发现,脑源性神经营养因子和酪氨酸蛋白激酶受体B在恶性肿瘤中的表达高于肿瘤旁组织及正常组织,它们通过促进肿瘤的血管形成,抑制肿瘤的失巢凋亡,抵抗抗肿瘤因子等各种方式,促进肿瘤的生长、分化和转移.脑源性神经营养因子及酪氨酸蛋白激酶受体B与肿瘤的密切联系,为临床治疗提供了一个新的治疗策略,那就是通过靶向抑制脑源性神经营养因子及酪氨酸蛋白激酶受体B的表达,从而促进肿瘤细胞失巢凋亡,抑制生长,分化和转移,达到治疗肿瘤的目的.从目前的基础和临床的研究看来,这种治疗策略有很大的应用前景.

酪氨酸激酶受体B介导的卵巢上皮性癌OVCAR3细胞失巢凋亡抑制与其侵袭的关系

目的 探讨失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)介导的卵巢上皮性癌(卵巢癌)OVCAR3细胞的失巢凋亡抑制与其侵袭的关系.方法 采用RT-PCR和实时定量PCR技术检测4种细胞包括3种不同病理类型的卵巢癌细胞系OVCAR3、SKOV3(两者均为卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系)和ES2(卵巢透明细胞癌细胞系)细胞及神经母细胞瘤细胞系sK-N-DZ细胞中,以及经不同方式[贴壁培养和立体培养(培养后形成团簇细胞)]培养的OVCAR3细胞中TrkB mRNA的表达.转染TrkB小分子干扰RNA(siRNA)后,流式细胞仪检测OVCAR3细胞的凋亡率,以转染无意义的(scrambled)siRNA者为阴性对照;体内、体外侵袭实验检测不同方式培养的OVCAR3细胞的侵袭能力.结果 (1)OVCAR3细胞中TrkB mRNA表达水平为0.0240±0.0017,明显高于SKOV3细胞的0.0030±0.0006、ES2细胞的0.0027±0.0009及SK-N-DZ细胞的0.0087±0.0003(P＜0.01);OVCAR3团簇细胞中TrkB mRNA表达水平为0.0437±0.0021,明显高于贴壁细胞的0.0240±0.0017(P＜0.01).(2)转染TrkB siRNA后,OVCAR3细胞的凋亡率为(46.3±5.9)%,明显高于阴性对照的(9.0±0.8)%(P＜0.01).(3)体外侵袭实验显示,OVCAR3团簇细胞的穿膜细胞数为(71.8±0.8)个,明显多于贴壁细胞的(47.7±0.8)个(P＜0.01);体内侵袭实验显示,转染TrkB siRNA后,OVCAR3细胞在裸鼠体内形成的肿瘤体积为(6.0±1.4)mm3,明显小于阴性对照的(16.3±4.7)mm3(P＜0.01).结论 TrkB可能通过诱导卵巢癌OVCAR3细胞的失巢凋亡抑制而赋予其高侵袭能力.

It has been suggested that altered levels/function of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) play a role in the pathophysiology of neurodegenerative diseases including Alzheimer’s disease. BDNF positively contributes to neural survival and synapse maintenance via stimulating its high afifnity receptor TrkB, making upregulation of BDNF and/or activation of BDNF-related intracellular signaling an attractive approach to treating neurodegenerative diseases. In this short review, I brielfy introduce small natural compounds such as lfavonoids that successfully increase activation of the BDNF system and discuss their beneifcial effects against neurodegeneration.

酪氨酸激酶A和酪氨酸激酶B与脑缺血缺氧性损伤

酪氨酸激酶A(TrkA)和酪氨酸激酶B(TrkB)是神经营养因子的高亲和力受体,通过与其特异性配体(神经生长因子和脑源性神经营养因子)结合,发挥对脑缺血缺氧性损伤的保护作用.它们与脑缺血缺氧的关系已成为近年来一个研究热点.本文从TrkA和TrkB在脑缺血缺氧性损伤后的表达、作用及其保护机制方面进行综述.

甲基乙二醛诱导大鼠海马神经元损伤及氟西汀的保护作用

目的 探讨氟西汀(FL)对甲基乙二醛(MG)诱导的海马神经元毒性损伤的保护作用.方法 取新生24 h Sprague-Dawley大鼠海马神经元原代培养至第7天,予MG和(或)FL干预24 h,分为5组,每组样本数均为6.(1)MG组:培养液中加入MG;(2)FL组:培养液中加入FL;(3)MG+FL组:培养液中加入MG和FL;(4)预处理(pre)FL+MG组:海马神经元原代培养第6天加入FL,干预24 h后加MG再培养24 h;(5)对照组:仅加相应体积完全培养液.异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(AnnexinV-FITC)联合碘化丙啶(PI)法检测海马神经元凋亡率,以2,7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)水平;采用荧光实时定量聚合酶链反应及Western印迹法检测脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸蛋白激酶(TrkB)mRNA和蛋白表达水平.结果 MG组海马神经元凋亡率(8.83±0.31)%高于对照组(1.63±0.15)%及MG+FL组(3.20±0.30)%;ROS水平比值(10 229±946)高于FL组(3076±41)、对照组(4265±82)、MG+FL组(6058±179)及pre FL+MG组(6076 ±281);BDNF mRNA比值及蛋白水平比值(2.37±0.33;0.625±0.008)分别高于对照组(1.00±0.27;0.582±0.003)而低于>FL组(3.88±0.32;0.855±0.007)、MG+FL[(7.66±0.34;1.113±0.023)和pre FL+MG组(6.96 ± 0.54;0.689±0.014)];TrkB mRNA及蛋白水平比值(0.50±0.06;0.133±0.006)则低于对照组(1.00 ± 0.06;0.328±0.000)、FL组(5.45±0.42;0.460±0.005)、MG+FL组(4.21±0.32;0.414±0.006)和pre FL+MG组(3.75±0.72;0.373±0.008).上述差异均具有统计学意义,P均<0.01.结论 FL可部分抑制MG诱导的海马神经元内ROS水平的上升,同时激活BDNF-TrkB信号通路,减少细胞凋亡,发挥神经保护作用.

酪氨酸激酶受体B与脑源性神经营养因子mRNA在鼻咽癌中的定量表达

生而上调(P<0.05).BDNF在有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者(P<0.05).TrkB的表达强度与BDNF有正相关的关系(rs=0.281,P<0.05).结论 表明TrkB和BDNF在鼻咽癌的浸润和转移机制中起着重要作用,特异性阻断TrkB/BDNF信号传导通路,将为临床治疗鼻咽癌找到新的突破点.

脑源性神经营养因子及其受体在变应性鼻炎鼻黏膜中的表达

目的 探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase B,TrkB)在变应性鼻炎发病中的作用.方法 采用6～8周健康SD大鼠,随机分成实验组20只和对照组10只,以卵清蛋白致敏激发制成变应性鼻炎模型,免疫组化染色检测鼻黏膜中BDNF及TrkB的表达及分布.结果 BDNF及TrkB在实验组和对照组大鼠鼻黏膜中主要表达在鼻黏膜上皮细胞、腺细胞及导管细胞和固有层炎性细胞的胞质内及部分腺细胞胞核内:实验组和对照组鼻黏膜中BDNF的积分光密度(integrated optical density,iOD)值分别为77344.17±8567.02和54124.82±18515(P<0.05),TrkB的iOD值分别为93087.57±17001.97和74914.78±15895.92(P<0.05),均具有显著性差异.BDNF与TrkB呈正相关(rs=0.589,P<0.01).结论 BDNF与变应性鼻炎的发生有着密切的联系,可能主要通过与TrkB结合而参与变应性鼻炎的发生、发展.

酪氨酸激酶受体B和脑源性神经生长因子与头颈肿瘤

酪氨酸激酶受体B（tyrosine kinase receptors，TrkB）信号传导通路在肿瘤的发生、发展过程起到重要的调控作用。脑源性神经生长因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）与TrkB结合，是激活TrkB信号传导通路主要的途径。研究发现多种恶性肿瘤中有TrkB及BDNF过度表达且与肿瘤预后相关。本文就TrkB及BDNF在头颈肿瘤中的研究进展做一综述。

鼻咽癌细胞株C666-1细胞中酪氨酸激酶受体B的表达与抗失巢凋亡的关系

目的 探讨酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)对鼻咽癌细胞系C666-1失巢凋亡特性的影响和调控.方法 用反转录聚合酶链反应(PT-PCR)以及蛋白质印迹法检测培养的C666-1细胞中TrkB以及其配体脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达.采用TrkB的抑制剂K252a以及其配体BDNF分别作用于C666-1细胞,采用软琼脂集落形成实验观察细胞的集落形成能力以及悬浮培养后用活细胞计数kit-8(cell counting kit-8,CCK-8)法和膜联蛋白V碘化丙啶(annexin V-propidium iodinate,Annexin V-PI)双染色法检测对细胞的增殖和凋亡的影响.通过蛋白质印迹法观察TrkB、BDNF、磷酸化的丝氨酸苏氨酸激酶(serine threonine kinase,Akt)等蛋白在实验前后的表达变化的情况.结果 培养的C666-1细胞表达TrkB及BDNF.C666-1细胞受K252a作用后在软琼脂中集落细胞数减少,而在BDNF作用下集落细胞数增加.在悬浮培养状态,K252a对C666-1细胞的增殖具有抑制作用,经K252a作用后C666-1细胞的TrkB表达下调,并同时下调磷酸化的Akt蛋白(p-Akt);而BDNF作用后,内源性BDNF表达增强,且TrkB和p-Akt的表达上调.结论 TrkB具有抑制鼻咽癌细胞C666-1失巢凋亡的作用,K252a能够抑制TrkB的表达从而诱导凋亡,是具有潜力的酪氨酸激酶抑制剂.

脑源性神经营养因子与视网膜神经节细胞损伤与修复的研究进展

青光眼视神经损伤后轴浆流阻断,神经营养因子剥夺,视网膜神经节细胞凋亡且不会自发再生.作为重要的神经营养素家族成员之一,脑源性神经营养因子在视网膜神经节细胞的损伤与修复过程中具有重要的意义,但是其在青光眼中的信号通路仍不十分明了.因此有必要就脑源性神经营养因子的结构、受体、分布及其对视网膜神经节细胞存活和轴突再生的作用和信号通路进行综述,以期为青光眼的视神经保护治疗提供理论依据.

微波辐射对大鼠大脑皮层和海马突触素Ⅰ及相关信号通路的影响

目的 探讨微波辐射对大鼠大脑皮层和海马突触素Ⅰ及其相关影响因子BDNF和受体TrkB表达的影响.方法 采用30 mW/cm2微波辐射Wiser雄性大鼠40只,于辐射后6 h、1 d、3 d和7 d取材,通过免疫组织化学和RT-PCR检测大脑皮层和海马突触素Ⅰ,BDNF和TrkB表达的改变.结果 30 mw/cm2辐射后,突触素Ⅰ mRNA在大脑皮层于辐射后6 h和1 d增加(P<0.01),而3 d和7 d减少(P<0.01);海马突触素Ⅰ mRNA于辐射后6 h和1 d增加(P<0.01).BDNF蛋白在大脑皮层于辐射后6 h表达增强(P<0.05).1～3 d达高峰(P<0.01);在海马于辐射后1 d表达增强(P<0.05),3 d～7 d达高峰(P<0.01).大脑皮层BDNF mRNA辐射后6 h增加(P<0.01),1 d减少(P<0.01).3 d和7 d又见增加(P<0.01或P<0.05);海马BDNF mRNA于辐射后1 d增加(P<0.01).TrkB蛋白在大脑皮层于辐射后1～3 d表达增强(P<0.01);在海马于辐射后3～7 d表达增强(P<0.01).TrkBmRNA在大脑皮层于辐射后6 h和7 d增加(P<0.01);海马TrkB mRNA于辐射后6 h、3 d和7 d减少(P<0.01或P<0.05).结论 微波辐射可引起大脑皮层和海马突触素Ⅰ、BDNF及其受体TrkB表达异常,参与了微波辐射所致的突触传递障碍及其修复过程.

聪圣胶囊对去皮层血管大鼠前脑BDNF及其受体trkB作用的实验研究

本研究采用WISTAR成年大鼠，去除大鼠脑皮层血管建立模型，免疫组化采用ABC法，研究发现模型组大鼠大脑皮质、海马、大细胞基底核中的BDNF(脑源性神经营养因子)阳性细胞数量显著减少，有的BDNF阳性细胞呈空泡状，有的呈萎缩状，胞体明显缩小，扣带皮质、海马CA1区明显。结果说明去皮层血管后，聪圣胶囊可能激活大鼠皮质、海马等处神经元BDNF、trkB及其mRNA的表达，通过其旁分泌和自分泌方式作用自身或邻近神经元，也可能通过靶源性的方式作用于大细胞基底核的胆碱能神经元，以保护皮质、海马、大细胞基底核神经元免遭变性坏死。

脑源性神经营养因子与神经退行性疾病的关系研究进展

脑源性神经营养因子(Bdnf)是一类广泛分布于成年哺乳动物脑内的神经营养因子类物质。它对维持周围和中枢神经元的存活、生长、分化及神经损伤后的修复与再生具有十分重要的意义[1]。阿尔茨海默病(ad)是一类多发生在老年的神经退行性疾病，临床特点是逐渐出现记忆力减退、认知功能障碍、行为异常和社交障碍，以老年斑(sP)、神经元纤维缠结(nft)为主要病理改变。近年研究发现脑内脑源性神经营养因子 Bdnf 及其受体 trkB 水平的下降与阿尔茨海默病（ad）的发病密切相关，并取得了显著的进展，现综述如下。