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肺癌组织中CTGF和WISP-1基因表达的研究
目的 研究肺癌中CTGF和WISP-1基因表达与临床病理因素的关系.方法 采用RT-PCR和免疫组化染色法对60名肺癌患者的癌组织和癌旁正常肺组织中CTGF和WISP-1表达水平进行测定.结果 65%(39/60)的肺癌组织CTGF基因表达水平低于癌旁正常肺组织(t=-1.59,P=0.016);83%(50/60)的肺癌组织WISP-1基因表达水平高于癌旁正常肺组织(t=4.15,P=0.000),此结果得到免疫组化的证实.Pearson相关分析:WISP-1和CTGF基因的表达呈显著负相关(r=-0.299;P=0.020).多元线性回归分析:肿瘤位置和性别对癌组织CTGF基因表达有重要影响;病理类型、年龄和家族史对WISP-1基因表达有影响.结论 CTGF和WISP-1基因中单个基因或两个基因相互作用对肺癌的进展均起重要作用及其与临床病理因素的关系.
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膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究
目的：使用膝关节骨性关节炎（ OA）临床组织标本与人软骨细胞株（ NHAC），以分子生物学手法探讨WISP-1在骨关节软骨基质合成和分泌中的调控机理，明确其在骨性关节炎中的作用。方法 NHAC细胞以1.4×106／mL密度播种于6孔板（直径3．5 cm）后培养48 h，于含有0．2％牛血清白蛋白（ BSA）的DF中继续培养12 h，使细胞处于静止状态。向含0．02％BSA的DF培养基中加入10、50和100 ng／mL的 Wnt 刺激细胞6 h。对照 siRNA 与β-catenin siRNA，使用 EntranserTM-R （ Engreen）转染试剂转染至NHAC。转染24 h后使用PBS清洗细胞两次。向含0.02％BSA的DF培养基中加入50 ng／mL的Wnt刺激细胞。向NHAC负荷不同剂量WISP-1，24 h后观察MMPs和ADAMTS4。利用总RNA提取试剂盒提取组织标本和细胞RNA，反转录产物cDNA作为PCR扩增模板进行定量PCR；使用蛋白提取试剂盒提取蛋白。结果在膝关节组织标本中发现，在骨性关节炎关节软骨中WISP-1、Wnt和b-catenin基因表达及蛋白水平明显增高。在NHAC细胞，Wnt诱导下WISP-1转录水平显著提高，与Wnt呈现剂量依赖关系。经敲除内源性β-catenin表达后，Wnt诱导WISP-1作用明显降低。 WISP-1以量依存性的诱导细胞外基质蛋白分解酶MMP3、MMP9、MMP13和ADAMTS4基因表达在软骨细胞中Wnt诱导WISP-1信号途径通过β-catenin的可能性很大。结论 WISP-1与骨性关节炎的发生具有一定的相关性；在软骨细胞中Wnt诱导WISP-1的信号途径通过b-catenin。
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肾癌组织WISP-1表达及其临床意义的探讨
5.结论:WISP-1可能与肾癌的发生和分化相关.
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WISP-1基因的RNAi技术在膝骨关节炎中的治疗作用
目的：通过RNA 干扰技术阻断人骨关节炎呈现OA滑膜细胞WISP-1信号通路，探索其在骨关节炎治疗中的应用前景。方法根据干扰RNA 设计原则，合成并构建WISP-1 shRNA质粒表达载体。将质粒表达载体转染入滑膜细胞并分组。转染24 h后测定细胞β-catenin、WISP-1、MMP-3 mRNA 相对表达水平。结果 OA滑膜细胞经过RNAi后WISP-1、MMP-3表达明显减少,意味着干扰WISP-1使得Wnt/β-catenin通路对MMP-3的诱导作用降低，也进一步证实了Wnt /β-atenin/WISP-1通路的存在。因此，WISP-1可以作为治疗骨关节炎一个理想的靶点。结论本实验中我们观察到， OA滑膜细胞经过RNAi后MMP-3表达明显减少,意味着Wnt/β-连环蛋白信号通路对MMP-3的诱导作用降低，进一步证实了Wnt/β-连环蛋白(catenin)/WISP-1通路的存在。
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结肠肿瘤中wisp-1的表达及意义
目的 探讨wisp-1在原发性结肠癌组织中的表达及临床意义.方法 应用免疫组化EnVision两步法检测wisp-1蛋白在138例结肠癌组织(48例含癌旁组织)、37例结肠腺瘤组织及66例结肠正常黏膜组织中的表达;应用实时荧光定量PCR检测wisp-1基因在37例新鲜原发性结肠肿瘤标本及对照组37例正常结肠中的表达;分析wisp-1蛋白、基因表达与患者临床病理特征的关系.结果 wisp-1蛋白在正常结肠、结肠腺瘤、癌旁组织及结肠癌中阳性率分别为53.0%、67.6%、75.0%、76.1%,其在结肠癌及癌旁组织中表达高于正常结肠(P<0.05);wisp-1蛋白表达与淋巴结转移及浸润深度有关(P<0.05);wisp-1基因在结肠肿瘤中平均表达是正常结肠中的1.349倍(P>0.05).结论 wisp-1蛋白异常可能在结肠癌的发生过程中起重要作用,而其基因在结肠癌中的作用尚需进一步研究.
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结直肠癌中WISP-1和MMP-2的表达及临床意义
目的 探讨人结直肠癌组织中Wnt-诱导分泌蛋白-1(WISP-1)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达与其临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化PV-9000法检测112例结直肠癌组织、56例腺瘤组织和30例癌旁正常组织中WISP-1和MMP-2的表达.结果 结直肠癌组织中WISP-1和MMP-2蛋白均明显高于结直肠腺瘤组织和正常结直肠组织(P<0.05);WISP-1和MMP-2在结直肠癌中的阳性表达与肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移、浆膜浸润及TNM分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别无关(P>0.05);WISP-1与MMP-2的表达呈正相关(rs=0.732,P<0.05).结论 WISP-1和MMP-2的高表达可能与结直肠癌的侵袭转移有关,联合检测两者的表达对临床评估结直肠癌患者的病情提供一定的理论依据.
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胃肠道间质瘤124例DOG1、WISP-1表达与临床意义
目的 探讨DOG1和WISP-1在胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)中诊断及预后的意义.方法 收集川北医学院附属医院病理科124例有完整临床病理资料的GIST,应用免疫组化EnVision两步法检测了DOG1和WISP-1蛋白在124例GIST中的表达情况,并与非GIST进行对照研究;应用χ2检验及Spearmen检验对结果进行统计学分析.结果 124例GIST中DOG1的阳性表达率为96%(119/124),CD117的阳性变表达率为91.0%(111/124),两者在GIST中的表达水平差异无统计学意义(P>0.05);GIST与非GIST中DOG1的表达水平差异有统计学意义(P<0.001);本组病例中WISP-1阳性率为80.6%(100/124),其中极低风险性、低风险性、中风险性和高风险性的阳性表达率分别为44.4%(4/9)、66.7%(26/39)、86.9%(17/20)和95.0%(38/40),其阳性表达率与美国国立卫生研究院(NIH)风险分级呈正相关关系(P<0.001);GIST与非GIST 中WISP-1的表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 DOG1是GIST中一个敏感又特异的标记物,与CD117联用能提高GIST的诊断准确率,临床上可将其作为鉴别消化道间叶源性肿瘤的一线抗体;WISP-1的表达可能和GIST恶性进程有关,有可能作为评估GIST生物学行为的指标.
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Cyr61、CTGF、NOV、WISP-1基因在肾癌中的表达
目的 探讨肾癌组织CCN蛋白中Cyr61、CTGF、NOV和WISP-1基因的蛋白表达水平及意义.方法 采用Western blot半定量方法检测31例肾癌组织和18例癌旁正常肾组织中Cyr61、CTGF、NOV、WISP-1基因的蛋白表达.结果 Cyr61、CTGF、NOV、WISP-1蛋白在肾癌组织中的表达水平均低于癌旁正常组织(P<0.05),其中乳头状肾癌的NOV和WISP-1表达水平高于透明细胞癌(P<0.05),G1级肿瘤NOV表达水平高于G2.3肿瘤(P<0.05).结论 Cyr61、CTGF、NOV和WISP-1在肾癌中低表达,CCN基因在肾癌的发生和发展中可能起抑制作用.
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肺癌组织中Cyr61、WISP-1基因表达及意义
目的 研究人肺癌组织中Cyr61和WISP-1的基因表达水平及其与临床参数的关系.方法 采用real-time PCR和免疫组织化学染色法对60例肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常肺组织Cyr61和WISP-1表达水平进行测定.结果 癌组织中Cyr61表达水平低于癌旁正常肺组织,WISP-1表达水平高于癌旁组织(P均＜0.05);Cyr61水平与病理类型、病理分级、转移、吸烟及家族史等相关(P均＜0.05),WISP-1与病理类型和年龄相关(P均＜0.05).结论 Cyr61和WISP-1在肺癌的发展中起重要作用;其表达的蛋白产物可作为临床早期诊断和干预治疗的重要指标.
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肺癌组织中WISP-1 mRNA和蛋白的表达
目的:探讨人肺癌组织中WNT诱导的分泌型蛋白-1(WISP-1)基因的表达与临床病理因素的关系.方法:采用real-time PCR和免疫组化法检测原发性肺癌患者的癌组织和癌旁正常肺组织中 WISP-1 mRNA和蛋白的表达.结果:肺癌组织和正常肺组织中WISP-1 mRNA的相对表达量分别为(-3.09±3.53)μg/L和(-5.82±3.67)μg/L,WISP-1蛋白阳性率分别为63.3%和39.2%,肺癌组织中WISP-1 mRNA的相对表达量和蛋白阳性率均高于正常肺组织(P均＜0.05).肺癌组织中WISP-1 mRNA的表达与病理学类型、年龄有关(P＜0.05).多元线性回归分析显示:病理类型、年龄、家族史、转移、性别等对WISP-1 mRNA的表达有影响.结论:WISP-1基因可能是原发性肺癌发生发展过程中的重要生物学标志物,WISP-1基因表达的蛋白产物可作为临床干预治疗的重要靶蛋白.
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吲哚美辛对人结肠癌细胞BfL-1、WISP-1及PCNA表达的影响
目的本研究对我们前期利用功能蛋白质组学技术发现的吲哚美辛(Indomethacin,IN)抗结肠癌的非COX-2途径相关蛋白Bfl-1、WISP-1和PCNA的表达差异进行验证,并探讨IN抑制肿瘤的相关机制.方法应用荧光定量PCR技术检测IN处理组和未处理组HCT116细胞Bfl-1、WISP-1和PCNA mRNA的表达.结果吲哚美辛下调Bfl-1、WISP-1和pCNA mRNA的表达.结论吲哚美辛通过Bfl-1、WISP-1和PCNA等非COX-2依赖途径诱导HCT116细胞的凋亡并抑制其增殖
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WISP-1在涎腺腺样囊性癌中的表达及其意义
目的 探讨WISP-1、Ki-67在腺样囊性癌中的表达及其生物学意义.方法 收集19例涎腺腺样囊性癌病例,按有无神经侵犯分为神经侵犯组(9例)和无神经侵犯组(10例),用免疫组织化学SP法检测WISP-1、Ki-67在癌组织中的表达.结果 WISP-1在神经侵犯组腺样囊性癌阳性表达率为100%(9/9),而在无神经侵犯组腺样囊性癌阳性表达率仅为40%(4/10).结论 WISP-1高表达可能与腺样囊性癌的发生、神经侵犯有关.
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WISP-1,β-catenin,L1CAM在食管鳞状细胞癌中的表达及意义
目的:分析Wnt诱导的分泌型蛋白1(Wnt-induced secreted protein-1,WISP-1),β-catenin,L1CAM在食管癌组织中的表达及相关性,及三者与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组化En vision两步法检测60例食管癌组织和57例癌旁组织WISP-1,β-catenin,L1CAM蛋白的表达.结果:(1)60例食管鳞状细胞癌中WISP-1、β-catenin、L1CAM的阳性表达率或异常表达率,分别为66.7％,100％和43.3％,均高于癌旁组织的阳性表达率(9.6％、0和3.6％),差异均具有统计学意义(P<0.001).(2)WISP-1的表达与肿瘤分化程度有关(P=0.01),高分化鳞癌表达比率和强度高于低分化癌,而与性别、浸润深度、肿瘤分期、淋巴结转移无关.β-catenin表达与肿瘤分期相关(P=0.034),分期越高,表达缺失越多,与性别、浸润深度、分化程度、淋巴结转移不相关.L1CAM的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、肿瘤分期有关(P<0.05),与性别无明显相关性.(3)食管鳞癌中WISP-1与L1CAM之间的表达及WISP-1与β-catenin异常表达之间无相关性.L1CAM与β-cate-nin异常表达有显著相关性,β-catenin肿瘤细胞胞质和核阳性者,前者的阳性细胞数和比例增高(r=-0.495,P<0.001).结论:WISP-1、L1CAM蛋白在食管癌表达的增加,以及β-catenin异常表达均与食管癌的发生发展密切相关;L1CAM表达与β-catenin核表达在食管癌的侵袭、转移中发挥重要作用.联合检测WISP-1,β-catenin,L1CAM有望成为食管癌评估预后的生物学指标,为食管癌治疗提供新靶点.
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WISP-1与支气管哮喘气道重塑的关系
Wnt诱导的分泌型蛋白-1(WISP-1)是CCN家族成员之一。早期的研究已证实其在肿瘤形成和增殖中具有重要作用，其异常表达能促进细胞增殖、介导细胞黏附、刺激细胞转移、促进有丝分裂及细胞外基质的形成等。然而，近年来国内外研究发现，WISP-1的异常表达与哮喘气道重塑也密切相关。在哮喘中，WISP-1高表达可诱导气道平滑肌增生肥大，促进肺成纤维细胞活化和气道上皮下胶原沉积。本文就WISP-1与哮喘气道重塑的研究进展作一综述。
