GDNF在脑疾病中研究进展

胶质细胞源性神经营养因子是近年来发现的一种蛋白质,特异性保护多巴胺能神经元,增加乙酰胆碱转移酶的活性,促进损伤后感觉及运动神经元的再生.对抗谷氨酸所致的神经元变性.在脑缺血性疾病中治疗效果持不同见解.近年研究显示外源性GDNF对多种神经疾病有神经保护作用,现就这一方面的研究做一综述.

APP-17肽对大鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的 观察APP-17肽对大鼠多巴胺能神经元变化的影响.方法 SD雌性大鼠分4组:对照组、帕金森病(PD)模型组、PD治疗组、APP-17肽预防组.PD以黑质多巴胺能神经元变性和减少为特征.以6-羟多巴胺单侧损毁大鼠脑内多巴胺能系统可建立PD动物模型.通过阿普吗啡诱导旋转,观察行为学改变,并经过高压液相法检测大鼠脑内纹状体和黑质多巴胺及其主要代谢产物水平,可反映多巴胺减少或恢复程度.4周后灌注固定,取大脑组织冰冻切片,作TH免疫组织化学染色.结果 (1)行为学检查:APP-17肽预防组及PD治疗组旋转次数明显低于PD模型组.(2)多巴胺及代谢产物含量检测:APP-17肽预防组及PD治疗组代谢产物含量均有明显增加,接近对照组.(3)TH免疫组织化学染色:APP-17肽预防组及PD治疗组多巴胺能神经元数目与正常大鼠相似,明显多于PD模型组.结论 APP-17肽对大鼠多巴胺能神经元具有防治和保护作用.

小胶质细胞表面受体在多巴胺能神经元损伤中的作用

小胶质细胞广泛存在于中枢神经系统各区域[1],可表达多种类型的神经递质受体,通过分泌多种趋化因子和细胞因子从而与周围的免疫细胞产生相互作用.深入认识小胶质细胞表面的神经递质受体及其在小胶质细胞功能调控中的作用,将有助于深化人们对多种疾病的认识,并将进一步促进探索新的神经退行性疾病治疗手段.

Engrailed基因对中脑多巴胺能神经元发育的影响

神经系统在结构和功能上都是一个高度复杂的系统,发育生物学虽为生物学中重要的领域,近20年來因新技术的引进,使得发育研究进入基因层次,能更清楚地了解控制机制.中脑多巴胺( midbrain dopamine,mDA)能神经元是哺乳动物中枢神经系统多巴胺的主要来源,对中脑多巴胺神经元的发育过程及其调节机制的研究是神经发育生物学的重要问题,多巴胺神经元的发育是一包括多种转录因子和生长因子参与的严格控制过程.在胚胎发育早期,是由控制中脑发育的多种同源域蛋白调控多巴胺前体细胞的增殖和迁移;在特异性转录因子Nurrl和Ptx3表达后,多巴胺神经元开始表达特定的表型并合成DA;终在与纹状体靶细胞的正确联系建立的前提下分化成熟;同时这一过程要受到来自周围细胞信号的相互影响.近20年来研究表明,Engrailed基因对中脑多巴胺能神经元发育的影响.Engrailed(EN-蛋白)是同源盒蛋白转录因子,其含有同源异型结构( homeobox)的蛋白质,是DNA结合蛋白,在胚胎发育、基因表达调节、细胞分化、神经发生等方面发挥重要作用.它能被细胞分泌和内摄,并调节转录和翻译,是神经系统喙尾(A -P)轴分化的重要决定因子,并控制着中脑多巴胺能神经元的发育和存活.新近研究发现,EN蛋白还具有更多的功能,包括轴突导向等,并且与一些疾病相关,如帕金森病( Parkinson disease,PD),精神分裂症、自闭症和药物成瘾等,近来还发现它通过基因融合或基因失调控方式参与肿瘤的发生,被认为是乳腺癌的候选基因.

帕金森病诊疗指南

帕金森病(Parkinson disease,PD)又称震颤麻痹,是发生于中老年人群的进展性神经系统变性疾病.其主要病理改变为以黑质部位为主的多巴胺能神经元的进行性丢失以及残存神经元内路易氏包涵体的形成.主要临床特征为静止性震颤、肌强直、运动迟缓和姿势反射障碍.

Ghrelin抑制A型钾通道电流对小鼠黑质多巴胺能神经元兴奋性的影响

目的 探讨ghrelin是否通过抑制A型钾通道电流增强正常小鼠黑质多巴胺能神经元的自发放电.方法 应用出生15~20 d的C57BL/6小鼠制备脑片,脑片全细胞膜片钳技术观察ghrelin对黑质多巴胺能神经元自发放电频率及A型钾通道电流幅度的影响.结果 小鼠黑质脑片灌流100 nmol/L ghrelin,多巴胺能神经元自发放电频率明显升高(n=5,t=3.55,P<0.05);应用A型钾通道阻断剂4-AP可以完全阻断ghrelin的细胞兴奋效应.应用100 nmol/L ghrelin可以明显抑制A型钾电流的电流幅度(n=5,t=5.67,P<0.01).结论 Ghrelin能够提高正常小鼠黑质多巴胺能神经元的兴奋性,其机制可能是通过抑制A型钾通道电流实现的.

MPTP细胞损伤模型中Ca2+浓度和β-链蛋白表达变化

目的 检测β-链蛋白(β-catenin)表达量和Ca2+浓度在1-甲基-4-苯基1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的多巴胺神经元损伤过程中的改变,探讨MPTP诱导的帕金森病(PD)模型的发病机制.方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞并建立MPTP细胞损伤模型,通过3-(4,5-二.甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)方法检测不同浓度MPTP细胞组的细胞存活率,采用Ca2+荧光探针Fura-2/am在荧光分光光度计下测定各组不同浓度MPTP的SH-SY5Y细胞内的游离Ca2+浓度,应用Western blot方法分析不同浓度MPTP细胞组的β-catenin表达量.结果 与对照组比较,50、200、500、800、1 000 μmol/L浓度MPTP损伤组SH-SY5Y细胞的存活率明显降低,差异均有显著性(F=116.30,P＜0.05);在不同浓度MPTP作用下,SH-SY5Y细胞的游离Ca2+浓度显著升高(F=53.56,P＜0.05);不同浓度MPTP细胞组的β-catenin表达均高于对照组,差异有显著性(F=176.95,P＜0.05).结论 β-catenin表达的增高和Ca2+浓度的改变可能在MPTP对多巴胺神经元损伤过程中发挥了重要的作用.

重组Persephin慢病毒对多巴胺能神经元的保护作用

目的 探讨重组慢病毒介导的Persephin基因治疗对6-OHDA制备的帕金森病(PD)模型大鼠多巴胺能神经元的保护作用.方法 将64只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、6OHDA组、空病毒+6-OHDA组、Persephin慢病毒预处理+6-OHDA组,并给予相应处理.6-OHDA注射21d后检测大鼠的旋转行为,免疫荧光检测黑质多巴胺能神经元数目,Western blot检测Persephin及酪氨酸羟化酶(TH)在脑内黑质区的表达.结果 Persephin慢病毒黑质注射4周后,多巴胺能神经元成功表达Persephin蛋白(F=5.451,q=3.228～4.736,P＜0.05).6-OHDA注射21d后,Persephin慢病毒预处理+6-OHDA组旋转次数明显低于6-OHDA组和空病毒+6-OHDA组(F=7.551,q =4.228、5.336,P＜0.05),多巴胺能神经元数目和TH表达水平显著高于6-OHDA组和空病毒+6OHDA组(F=6.251、5.251,q=3.228～5.736,P＜0.05).结论 Persephin对6-OHDA制备的PD模型大鼠多巴胺能神经元具有保护作用.

HO-1对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的作用

目的 探讨抑制血红素加氧酶-1(HO-1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的作用.方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、MPTP组及锌原卟啉(ZnPPIX)+MPTP组,每组6只.腹腔注射MPTP(30 mg/kg)5 d制备帕金森病小鼠模型,MPTP组于MPTP注射前4d行侧脑室注射9 g/L氯化钠溶液2 μL,连续8 d；ZnPPIX+ MPTP组于MPTP注射前4d行侧脑室微注射ZnPPIX(50 μg/kg)2 μL,共8d;对照组以等量的9 g/L氯化钠溶液取代ZnPPIX和MPTP.应用Western blots法检测黑质内HO-1和酪氨酸羟化酶(TH)的表达水平.结果 ZnPPIX+MPTP组小鼠黑质内HO-1表达明显低于对照组和MPTP组,差异有显著性(F=6.844,q=5.943、4.444,P＜0.05)；MPTP组、ZnPPIX+MPTP组黑质区TH表达较对照组明显下降(F=5.095,q=4.303、4.030,P＜0.05),ZnPPIX+MPTP组小鼠TH表达量与MPTP组比较差异无显著性(q=0.234,P＞0.05).结论 抑制HO-1表达对MPTP致帕金森病小鼠黑质内多巴胺能神经元的损伤无明显作用.

雌激素对多巴胺能神经元功能调节作用的研究进展

GDNF对多巴胺能神经元的保护及治疗MA依赖研究进展

甲基苯丙胺(MA)的毒性作用与多巴胺系统有密切关系,而大量研究表明胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)是一种有效的多巴胺能神经营养因子,本文综述GDNF对多巴胺能神经元保护功能机制及用于治疗MA依赖的研究进展,以期为相关研究和应用提供参考.

阿特拉津对青春期大鼠黑质区多巴胺能神经元的损伤作用

目的:探讨阿特拉津对青春期大鼠黑质区多巴胺能神经元的损伤作用.方法:将4周龄的Wistar雄性大鼠40只随机分为4组,分别为对照组(1%甲基纤维素)、阿特拉津低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)和高(200 mg/kg)剂量组,每组10只,连续灌胃45 d后处死.收集中脑黑质部分,采用免疫组织化学法(SP法)检测神经元细胞中酪氨酸羟化酶(TH)的变化,并采用实时定量PCR法(qPCR)和Western blot检测多巴胺能神经元损伤相关基因mRNA和蛋白的表达情况.结果:免疫组化结果显示,200 mg/kg ATR组中TH阳性细胞数较对照组显著减少,差异具有统计学意义(P<0.01).qPCR结果显示,与对照组相比,100和200 mg/kg ATR染毒组TH mRNA和Bcl-2 mRNA的表达量显著降低;200 mg/kg ATR组p53 mRNA和Caspase-9 mRNA的表达量显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示,与对照组相比,100和200 mg/kg ATR染毒组TH和Bcl-2的蛋白表达量显著降低;100和200 mg/kg ATR组p53蛋白表达量显著增加;50、100和200 m g/kg A TR组Caspase-9蛋白表达量均显著增加,差异均具有统计学意义(P均<0.05).结论:阿特拉津可以影响大鼠黑质区多巴胺能神经元损伤相关基因mRNA和蛋白的表达.

脑源性神经营养因子的研究现状

脑源性神经营养因子(BDNF)是广泛分布于神经系统的一种神经营养因子.近年来的研究表明,脑源性神经营养因子对于缓解基底神经节疾病引起的Parkinson's和阿尔默茨海默病等具有一定的效果.同时,脑源性神经营养因子也能通过修复或缓解多巴胺能神经元的退行性病变,达到抗抑郁的目的 .