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芪天胶囊中红景天苷和芍药苷的含量测定
目的:建立HPLC测定芪天胶囊中红景天苷和芍药苷含量的方法.方法:采用:Kromasil ODS-1色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.02 mol·L-1磷酸(B),梯度洗脱[0 ～ 15 min,19％ A;15 ～50 min,19 ～ 28％ A;50 ～ 60min,28％A]分段变波长测定,0～ 25 min,275 nm(测红景天苷),26 ～ 60 min,230 nm(测芍药苷)；柱温35℃,流速1.0 mL·min-1.结果:两种成分的线性关系良好,精密度、稳定性、重复性的RSD均＜3％,平均加样回收率分别为98.33％,97.77％.结论:该方法简单,灵敏、准确.可用于芪天胶囊的质量控制.
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女贞子“一测多评”法测定
目的:建立女贞子“一测多评”(QAMS)法,以实现女贞子中多指标成分控制.方法:采用HPLC法,以建立女贞子中红景天苷、女贞苷、特女贞苷、橄榄苦苷和oleonuezhenide含量测定方法为基础,以特女贞苷为参照物,统计其他成分的相对校正因子(fi,s)作为定量参数,同时统计其他组分与特女贞苷的相对保留时间(γi,s)作为定性参数.结果:各成分分离良好,系统适应性与方法学考察结果符合含量测定要求,在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均＞0.999 5,平均回收率为96.8％ ～ 105.0％(RSD≤3％),在系统适应性范围内各fi,s的RSD均＜5％,各γi,s的RSD均＜2％,比较校正因子法与外标法的测定值,显示无显著差异.结论:建立的QAMS法准确、快速,结果可靠,具有可操作性,可用于女贞子多指标成分质量控制.
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女贞子中红景天苷的提取纯化工艺优选
目的:优选女贞子中红景天苷的提取、纯化工艺.方法:采用HPLC测定红景天苷含量,以红景天菅含量及浸膏得率的综合评分为指标,通过正交试验考察溶剂、料液比、时间及次数对红景天苷提取工艺的影响；通过单因素试验筛选大孔树脂型号,并优选其纯化工艺条件.结果:优选的提取工艺为加6倍量水回流提取3次,每次1h；D4020型大孔树脂纯化女贞子中红景天苷的工艺条件为上样液质量浓度0.5 g·mL-1,吸附流速1 BV·h-1,用5 BV的20％乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,减压回收,即得红景天苷粗品,其纯度达16.34％.结论:按优选的工艺条件提取、纯化后,女贞子中红景天苷含量提高了2.12倍.
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中药水煎液前处理方法对大孔吸附树脂分离效果的影响
目的:考察中药水煎液不同前处理方法对大孔树脂吸附分离效果的影响,确定其内在规律.方法:以红景天水煎液为对象,红景天苷含量为指标,分别采用一次醇沉、二次醇沉、加入沉淀剂、沉淀剂加醇沉、离心5种精制处理方法,考察对大孔树脂吸附效果的影响.结果:二次醇沉法及沉淀剂合并醇沉的方法对水煎液的精制效果佳,同时对大孔树脂的分离效果也佳.结论:中药水煎液使用不同的前处理方法对大孔吸附树脂分离效果具有显著影响.
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复方红景天颗粒提取工艺优选
目的:优选复方红景天颗粒的提取工艺.方法:采用比较试验法和正交试验法,对复方红景天颗粒主要成分的水提取[艺进行优选,以HPLC测定红景天苷提取量及浸膏得率为考察指标,对提取次数、浸泡时间、加水量、提取时间等因素进行优选.结果:佳提取工艺为浸泡0.5h后,提取2次,第1次加10倍量水提取2h,第2次8倍量水提取1h.结论:复方红景天颗粒的水提取工艺合理、简单易行.
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复方酪萨维口腔速崩片中蔷薇红景天提取物的大孔树脂纯化工艺优选
目的:优选大孔树脂纯化复方酪萨维口腔速崩片中蔷薇红景天提取物的工艺条件.方法:以红景天苷、酪萨维的含量及回收率为指标,通过单因素试验筛选大孔树脂型号并优选其纯化工艺.结果:AB-8型树脂分离效果较好,佳工艺为蔷薇红景天提取物加适量水充分溶解以2 BV·h-1的流速上样,径高比1∶7,红景天苷、酪萨维的比上柱量分别为7.18,10.43mg·g-1,水洗除杂,加40％乙醇12 BV洗脱,洗脱流速4 BV·h-1,树脂可重复利用3次;红景天苷、酪萨维平均提取量分别为1.870％,3.186％,平均回收率分别为82％,96.26％,平均纯度依次为5.72％,9.72％,纯度分别提高了2.51,2.94倍,浸膏得率由纯化前的13.73％减少至4.57％.结论:AB-8型大孔树脂对红景天苷和酪萨维具有良好的纯化效果,优选的工艺稳定可行.
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市售二至丸水蜜丸和配方颗粒的体外溶出度比较
目的:考察二至丸水蜜丸和配方颗粒中5种药效活性成分的溶出情况,比较这些成分在2种剂型中的体外溶出特点.方法:参照《中国药典》2010年版二部附录XC溶出度测定法,采用第二法桨法,转速75 r·min-1,测试不同溶出介质(水,30％乙醇,0.1 mol·L-1盐酸和pH 4.5,6.8的磷酸盐缓冲液).利用UPLC测定2种剂型中红景天苷、特女贞苷、女贞苷、木犀草素和齐墩果酸5种药效成分的体外溶出度,比较2种制剂的溶出行为.结果:在各个溶出介质中,二至丸2种不同制剂中各活性成分的溶出行为差别很大,配方颗粒中红景天苷、特女贞苷、女贞苷在各个介质里都能快速溶出且溶出量高(＞85％);而水蜜丸中木犀草素和齐墩果酸只能在pH6.8磷酸盐缓冲液中溶出很少的量(＜30％).从差异因子和相似因子分析,2种制剂中相同成分的溶出曲线无相似性.结论:和水蜜丸相比,配方颗粒中活性成分的累积溶出量更高,且在同一种溶出介质中,能溶出更多的药效成分.说明在体外溶出方面,配方颗粒这种新型的中药形式具有更大的优势.建立的溶出度方法可以应用于二至丸制剂的质量控制.
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红景天苷磷脂复合物的体外透皮试验
目的:考察红景天苷磷脂复合物的体外透皮特性,为改善红景天苷的皮肤透过性能提供参考.方法:以离体昆明种小鼠皮肤作渗透屏障,采用改良直立式Franz扩散池法进行体外透皮特性研究.利用HPLC测定红景天苷含量,流动相乙腈-水-磷酸(15∶85∶0.05),检测波长275 nm.结果:红景天苷磷脂复合物和红景天苷醇溶液组的8h累积渗透量分别为(14.8±0.42),(3.01±0.41) μg·cm-2,红景天苷磷脂复合物组的增透系数是红景天苷醇溶液组的52倍,给药8h后在小鼠离体皮肤中的滞留量分别为0.95,0.02 μg· cm-2.结论:红景天苷磷脂复合物溶液能明显提高红景天苷在小鼠皮肤中的滞留量和经皮透过量.
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在体单向肠灌流模型研究红景天苷的大鼠肠吸收特性
目的:研究红景天苷在大鼠小肠的吸收特征.方法:运用大鼠在体单向肠灌流模型,以酚红为标示物,分别研究了不同浓度、肠段红景天苷的吸收情况.结果:红景天苷在pH 5.5～8.0的Krebs-Ringer(K-R)试液中稳定性较好.不同浓度的红景天苷在大鼠各肠段的Peff无显著性差异,表明红景天苷在大鼠小肠内吸收无明显变化,且无自身浓度抑制作用,主要以被动转运方式吸收.十二指肠、空肠、回肠、结肠的肠灌流的有效渗透系数(Peff)、吸收速率参数(Ka)值表明,红景天苷在十二指肠、空肠、回肠的吸收优于结肠.结论:红景天苷在大鼠小肠吸收方式以被动转运为主,且在肠道中易吸收.
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红景天苷通过激活PI3K/AKT/NRF2通路减轻MCAO大鼠的神经细胞凋亡
目的:研究红景天苷(Sal)通过激活PI3K/AKT/NRF2通路减轻大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠的神经细胞凋亡的作用及其机制.方法:健康成年雄性SD大鼠120只,采用线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,术后立即腹腔注射红景天苷(50mg/kg),分别连续给药ld、2d和7d,采用Longa评分法对大鼠神经功能损伤评分,Western blot法检测大鼠缺血侧脑组织Bcl-xl、Bax、HO-1蛋白及NRF2核蛋白的表达.同时,采用侧脑室注射PI3K抑制剂(LY294002) 30min后造模,红景天苷给药ld,检测AKT、p-AKT、Bcl-xl、Bax、HO-1蛋白NRF2核蛋白的表达.结果:与MCAO组比较,红景天苷分别给药1、2、7d后,MCAO+Sal组能够下调Bax,上调Bel-xl蛋白的表达(P＜0.05),促进NRF2的核转录水平,提高HO-1蛋白的表达(P＜0.01,p＜0.05);经侧脑室注射LY294002后再腹腔注射,红景天苷对AKT、p-AKT、Bcl-xl、Bax、HO-1蛋白及NRF2核蛋白的表达没有显著作用.结论:红景天苷能够改善MCAO大鼠的神经功能损伤,抑制神经细胞凋亡,主要是通过激活PI3K/AKT信号通路,促进AKT的磷酸化,激活NRF2的核转录,促进HO-1的蛋白表达,进而抑制神经细胞凋亡,改善神经功能.
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二至丸有效成分对损伤后肝细胞再生障碍大鼠肝细胞凋亡及胆红素水平的影响
目的:探索二至丸有效成分对损伤后肝细胞再生障碍大鼠肝细胞凋亡及胆红素水平的影响.方法:将40只Wistar大鼠随机分为4组(即正常组、模型组、齐墩果酸+红景天苷组、雷帕霉素组),除正常组仅行肝部分切除术(PHx)外,其余各组建立损伤后肝细胞再生抑制复合模型(PHx+2AAF),给药组分别予齐墩果酸+红景天苷和雷帕霉素治疗性给药7d后处死.采用自动生化分析仪检测血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)水平,并用流式Annexin V+PI法检测肝细胞凋亡水平、BrdU流式检测肝细胞周期及Caspase-3表达.结果:与模型组比较,齐墩果酸+红景天苷组大鼠血清TBIL水平显著下降(P＜0.01),而DBIL水平显著升高(P＜0.05),同时肝坏死细胞水平、早期和晚期凋亡水平显著降低(P＜0.01,P＜0.05),肝活性细胞水平明显升高(P＜0.05),肝细胞处于G0/G1期及S期细胞增殖明显升高(P＜0.01,P＜0.05),肝细胞Caspase-3表达水平显著降低(P＜0.0l).结论:二至丸有效成分明显降低损伤后肝细胞再生障碍大鼠胆红素的分泌,抑制肝细胞凋亡和Caspase-3的活化.
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红景天苷对β淀粉样蛋白诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用研究
目的:探讨红景天苷对β淀粉样蛋白(A β)所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其可能机制.方法:通过体外培养SH-SY5Y细胞,采用含A β 1-40的细胞培养基制备疾病模型,经A β 1-40作用24h后,不同浓度100和200μmol/L红景天苷干预,MTT法检测各组细胞存活率;流式细胞技术、TUNEL检测细胞内活性氧ROS及凋亡情况;ELISA检测细胞内AGEs含量;Western blot检测细胞内晚期糖基化终末产物受体RAGE、NF-κB(p-p65)、Bax和Bcl-2蛋白的表达变化.结果:红景天苷干预可明显改善Aβ1-40损伤后的细胞存活率,抑制Aβ1-40引起的细胞内ROS水平及细胞凋亡率升高;降低RAGE、NF-κB(p-p65)蛋白水平表达,逆转A β 1-40导致的细胞Bcl-2/Bax蛋白表达的比例下降.结论:红景天苷可以抑制Aβ1-40诱导SH-SY5Y细胞损伤及凋亡,其机制可能与调节RAGE、NF-κB(p-p65)及相关凋亡基因Bax和Bci-2的蛋白表达有关.
关键词： 红景天苷 β淀粉样蛋白 晚期糖基化终末产物受体 活性氧 -
中药组分HJJB方对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠的防治作用
目的:探讨中药组分HJJB方(红景天苷、姜黄素、绞股蓝总苷、白术多糖)对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂防性肝炎的防治作用.方法:采用高脂饮食14周诱导大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型.在造模第9周起,随机分为模型组,HJJB方高、低剂量组,罗格列酮组,灌胃给药6周.观察肝组织病理变化(HE染色),肝组织甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)含量的变化,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)活性及TG、总胆固醇(TC)含量的变化.结果:模型组肝组织出现显著的肝细胞脂肪变性及空泡样变,肝组织TG、FFA含量较正常组显著升高(P＜0.01),血清ALT、AST、GGT活性及TG、TC含量较正常组亦明显升高(P＜0.01).HJJB方高、低剂量组的上述病理改变显著减轻,肝组织TG、FFA含量及血清ALT、AST、GGT、TG、TC水平显著低于模型组(P＜0.01),其中HJJB方高剂量组的肝组织TG、FFA含量和血清ALT、AST、GGT活性显著低于HJJB方低剂量组和罗格列酮组(P＜0.05,P＜0.01).结论:中药组分HJJB方对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝炎具有良好的防治作用.
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红景天苷对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪肝肝脏脂肪合成和氧化环节的干预作用
目的:基于肝脏脂肪合成和氧化环节,探讨红景天苷防治非酒精性脂肪肝的作用机制.方法:采用单纯高脂饮食14周诱导的大鼠非酒精性脂肪肝模型.在造模第9周起,随机分为模型组、红景天苷组和罗格列酮对照组,灌胃给药6周.观察肝组织病理变化;肝组织甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)含量的变化;肝组织乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)、丙二酰辅酶A(Malonyl CoA)、脂肪酸合成酶(FAS)、肉毒碱棕榈酰转移酶-l(CPT-1)含量的变化;肝组织ACCase和CPT-1 mRNA水平的变化.结果:模型组肝组织出现显著的肝细胞脂肪变性及空泡样变,肝组织TG、FFA、ACCase、FAS、Malonyl CoA含量和ACCase mRNA水平较正常组均显著升高(P＜0.01),CPT-1含量和mRNA水平较正常组显著降低(P＜0.01).红景天苷组的上述病理改变显著减轻,肝组织TG、FFA、ACCase、Malonyl CoA、FAS含量和ACCase mRNA水平显著低于模型组(P＜0.01),CPT-1含量和mRNA水平显著高于模型组(P＜0.01).结论:红景天苷能抑制肝脏脂肪合成,促进脂肪酸氧化,这可能是其防治非酒精性脂肪肝的重要机制.
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红景天苷对缺血再灌注大鼠脑组织损伤的保护作用
目的:探讨红景天苷对缺血再灌注大鼠脑组织损伤的保护作用及其机制.方法:用线栓法制备SD大鼠大脑中动脉栓塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO).在缺血和再灌注即刻分别给予红景天苷(2.5、5、10mg/kg)进行保护.脑缺血1.5h再灌注24h后用Zea-Longa标准进行神经功能评分;TTC染色法测定大鼠脑梗死面积;比色法测定大鼠脑组织内谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase iNOS)的活性;Western blot法测大鼠脑组织Bcl-2和Bax两种蛋白的表达水平.结果:红景天苷5、10mg/kg能改善MCAO-I/R大鼠的神经功能(P<0.05,P<0.01);减小脑缺血面积(P<0.05,P<0.01);红景天苷5mg/kg能提高脑内GSH-Px活性(P<0.05);降低iNOS的活性(P<0.05);红景天苷5mg/kg组与模型组Bcl-2的表达分别为(1.54±0.44)、(1.02±0.33),显著增加Bcl-2的表达(P<0.05);Bax表达分别为(1.21±0.12)、(1.44±0.15),红景天苷5mg/kg使Bax的表达显著减少(P<0.01).结论:红景天苷可以通过增加自由基的清除、调节凋亡和抗凋亡蛋白的表达来减轻MCAO-I/R造成的脑组织损伤.
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高效液相色谱-荧光检测法测定海康灵中红景天苷的含量
海康灵口服液由何首乌、红景天等数味中药组成,具有补气益肾、醒脑益智、活血化瘀等作用,临床上用于治疗老年性头晕耳鸣,记忆力减退,药理实验证明具有抗老年性痴呆作用.为有效控制该产品的质量,笔者对处方中的君药红景天的主要活性成分红景天苷的含量进行了测定,取得了满意的效果,现报道如下.
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红景天苷对糖尿病大鼠心肌组织中JNK/AP-1信号通路和TGF-β1mRNA表达的影响
目的:观察红景天苷对糖尿病模型大鼠心肌组织中JNK/AP-1信号通路及转化生长因子-β1(TGF-β 1) mRNA表达的影响并探讨其可能的心脏保护机制.方法:50只SD大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ) (55mg/kg)结合高糖高脂饲料喂养4周制备糖尿病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、SP600125组(SP,15mg/kg)、低剂量红景天苷组(LSDS,25mg/kg)、中剂量红景天苷组(MSDS,50mg/kg)、高剂量红景天苷组(HSDS,100mg/kg),并设对照组.相应剂量药物灌胃12周,处死大鼠取左心室组织,HE及Masson 染色观察心肌组织病理学改变,Western blot检测p-JNK、p-c-Jun及p-c-Fos蛋白表达情况,RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达水平.结果:模型组大鼠心肌组织中p-JNK、p-c-Jun、p-c-Fos及TGF-β l mRNA表达较对照组明显上升(P＜0.01),中、高剂量红景天苷组p-JNK和p-c-Jun蛋白表达水平较模型组显著下降(P＜0.05),低、中、高剂量红景天苷组p-c-Fos及TGF-β 1 mRNA表达较模型组显著下降(P＜0.05,P＜0.01).结论:红景天苷可能通过抑制心肌组织中JNK/AP-l信号通路激活,下调TGF-β 1 mRNA表达,发挥糖尿病大鼠心脏保护作用.
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红景天对急性心肌梗死大鼠心肌组织肾上腺髓质素及其受体表达的影响
目的:观察红景天对心肌梗死大鼠心肌组织肾上腺髓质素(AM)及其受体降钙素受体样受体( CRLR)表达的影响,探讨红景天促进大鼠缺血心肌血管新生的可能机制,了解红景天苷是否为红景天该作用的有效成分.方法:建立Wistar大鼠急性心肌梗死模型,造模前7d开始分组灌胃生理盐水、红景天或红景天苷,灌胃持续至造模手术后第7天,处死动物取心脏标本,进行HE染色,免疫组化测定梗死心肌边缘区和非梗死区CD31阳性反应强度,实时定量聚合酶链式反应法和蛋白印迹法检测心肌组织AM、CRLR的表达.结果:红景天组梗死边缘区心肌CD31表达显著高于生理盐水组(P＜0.05)；红景天组心肌组织AM、CRLR表达均明显高于生理盐水组(P＜0.05),红景天苷组各指标的表达水平均介于生理盐水组和红景天组之间.结论:红景天具有上调AM、CRLR表达和促进AMI大鼠缺血心肌血管新生的作用,红景天苷是红景天发挥该作用的有效成分之一.
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红景天苷对低氧条件下大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响
目的:研究红景天苷对模拟不同海拔缺氧条件下大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响.方法:本实验将大鼠按照随机分组方法分成对照组、5000m海拔组、8000m海拔组,按实验设计每组设有生理盐水组和红景天苷组,各组大鼠在进入高海拔模拟实验舱前3d分别行0.9％氯化钠溶液及红景天苷灌胃,置于海拔舱24h.大鼠出舱后及时抽血做血气分析.麻醉后摘取心脏,HE染色显微镜下观察心肌细胞及肌纤维变化,HE法检测不同海拔环境下大鼠心肌细胞凋亡因子Caspase-3基因的表达,TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,Western blot检测大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、Cyt-c的表达.结果:随着海拔升高,缺氧程度加剧,凋亡心肌细胞数量增加,Bax表达增加,Bcl-2表达减少,凋亡下游蛋白表达增加,与同海拔下生理盐水组比较,红景天苷组均可明显降低心肌细胞的凋亡,减少Bax表达,增加Bcl-2表达,使凋亡下游蛋白表达减少.结论:红景天苷能够在高海拔下抵抗缺氧,降低心肌细胞凋亡及凋亡下游蛋白的表达,从而保护心肌细胞.
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红景天苷对非酒精性脂肪性肝炎的降脂保肝作用研究
目的:探讨中药红景天的主要成分红景天苷对高脂饮食诱导的金黄地鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的干预作用.方法:18只雄性金黄地鼠随机分成正常组、模型组和红景天苷组,除正常组外,其余两组均给予高脂饮食喂养6周以复制NASH模型;造模第3周起,红景天苷组给予红景天苷药液灌胃4周.6周后处死地鼠,收集标本,检测肝组织甘油三酯(TG)含量,血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,对肝组织进行HE染色.结果:红景天苷能明显降低肝组织TG含量及血清AST活性,改善肝组织脂肪变性的病理状态.结论:红景天苷具有显著的抗NASH病理损伤的药理效应.
