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α7烟碱型乙酰胆碱受体基因敲除对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝脏炎症的影响研究

李富强;吴小翠;徐丽娜;陈小梅;唐翠兰

摘要: 目的:探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)基因敲除对非酒精性脂肪性肝炎( NASH)小鼠肝脏炎症的影响。方法2014年6月—2015年5月,选取40只 SPF 级雄性6周龄 C57BL/6J 小鼠和40只 SPF 级雄性6周龄α7nAChR基因敲除小鼠,采用随机数字表法分为 C57普通饲料组、C57高脂高糖组、基因敲除普通饲料组、基因敲除高脂高糖组,每组20只。C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠给予普通饲料喂养,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠给予高脂饲料喂养同时饮用20%果糖饮用水,喂养24周,建立 NASH 小鼠模型;小鼠饲养期间定期称量体质量,并且尾静脉取血检测丙氨酸氨基转移酶( ALT)、天冬氨酸氨基转移酶( AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平。21周时 C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠给予400μg/ kg 烟碱腹腔注射;C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔注射,均1次/ d,共3周。24周后处死小鼠,眼球取血,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清炎性细胞因子白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,观察小鼠肝脏外观变化及肝脏湿重,肝脏病理切片染色观察炎症程度和脂肪变性情况。结果第12、15、18、21、24周时,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠体质量较 C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组升高(P <0.05);第12、15、18、21、24周时,基因敲除高脂高糖组小鼠体质量较 C57高脂高糖组升高(P <0.05)。C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠第8、16、24周时血清 ALT、AST、TG、TC 水平,第24周时血清 IL-6、TNF-α水平、肝脏湿重较 C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组升高(P <0.05);基因敲除高脂高糖组小鼠第8、16、24周时血清 ALT、AST 水平,第16、24周时血清 TG、TC 水平,第24周时血清 IL-6、TNF-α水平、肝脏湿重较 C57高脂高糖组升高(P <0.05)。病理切片苏木素-伊红(HE)、油红染色结果显示:C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠炎症程度和脂肪变性均不明显,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠在第8 周开始出现轻微炎症和脂肪变性,以小脂滴为主,到第16、24周,炎症和脂肪变性逐渐加重,脂肪变性以中、大滴为主,基因敲除高脂高糖组小鼠肝脏组织炎症程度和脂肪变性均明显重于 C57高脂高糖组小鼠。结论α7nAChR基因敲除能够明显加重 NASH 小鼠的肝脏炎症。

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