首页 > 文献资料
-
川芎嗪对大鼠低压低氧性肺动脉高压的预防作用及初步机制探讨
目的:研究川芎嗪(TMP)对慢性低压低氧性肺动脉高压模型大鼠的防治作用及其机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为3组,即正常对照组、低压低氧组与川芎嗪组(100 mg·kg-1·d-1).建立低压低氧性肺动脉高压大鼠模型,观察TMP干预后大鼠平均肺动脉压力(mPAP)、左颈总动脉插管测平均颈动脉压(mCAP)、右心室肥厚指数(RVHI)和肺血管形态学的改变,计算肺细小动脉管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%),以及大鼠血清中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)水平.结果:检测TMP干预21 d,大鼠mPAP、RVHI、WT%和WA%各指标比较,低压低氧组显著高于正常对照组(P<0.05或P<0.01),川芎嗪组显著低于低压低氧组(P<0.05或P<0.01).低压低氧条件对颈动脉压力mCAP影响不大,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).血清中NO含量比较,低压低氧组显著低于正常对照组(P<0.05),川芎嗪组显著高于低压低氧组(P<0.05).血清中ET-1、HIF-1α与VEGF含量比较,低压低氧组显著高于正常对照组(P<0.05),川芎嗪组显著低于低压低氧组(P<0.05).结论:TMP可有效预防大鼠低压低氧导致的肺动脉高压和肺小动脉的结构重建,其作用机制可能与上调大鼠血清NO含量和下调ET-1、HIF-1α与VEGF活性有关.
-
家族性腺瘤性息肉病中VHL和VEGF的表达
目的:分析希佩尔-林道病(VHL)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)在家族性腺瘤性息肉病中的表达,并探讨其在腺瘤形成以及癌变过程中的可能作用机制.方法:收集我科2003年3月到2007年8月10例家族性腺瘤性息肉患者手术切除标本,分别取正常肠黏膜组织、≥1 cm的腺瘤性息肉以及癌变腺瘤组织,采用SP法免疫组化方法检测VHL和VEGF在这些标本组织中的表达.结果:VHL阳性信号呈棕黄色主要表达于胞质内,VEGF阳性表达为棕黄色,主要表达于肿瘤细胞胞质.VHL在正常肠黏膜组织和≥1 cm的腺瘤性息肉中的表达均较强,两者相差并不显著(x2=2.4,P＞0.05),但明显高于VHL基因在癌变腺瘤中的表达,差异具有统计学意义(x2=7.2,P＜0.05;x2=14.4,P＜0.05);VEGF在正常肠黏膜细胞、≥1 cm的腺瘤性息肉到癌变腺瘤组织中阳性表达率不断升高,差异具有统计学意义(x2=5.051,-P＜0.05;x2=11.52,P＜0.05).结论:VHL可能作为肿瘤抑制基因参与了家族性腺瘤性息肉的发展,VHL和VEGF血管内皮生长因子的异常表达与腺瘤到癌变的过程密切相关.
-
HIF-1α、VEGF在家族性息肉病中的表达及相关性研究
目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在家族性腺瘤性息肉病(FAP)患者结肠腺瘤、癌变腺瘤中的表达变化及相关性,分析其对家族性腺瘤性息肉病"腺瘤-腺癌"发生发展的作用.方法:应用免疫组化SP法分别检测10例家族性腺瘤性息肉病患者术后切除标本中正常上皮、≤0.5 cm腺瘤、≥1.0 cm腺瘤以及癌变腺瘤中HIF-1α和VEGF表达情况,并分析二者与临床病理特征之间关系.结果:在正常上皮黏膜、≤0.5 cm腺瘤、≥1.0 cm腺瘤以及癌变腺瘤变化过程中两者表达逐渐增强(P均大于0.05),其表达与腺瘤体积有关,癌变腺瘤与正常黏膜之间表达有显著差异(P＜0.05).≤0.5 cm腺瘤与正常黏膜之间无显著差异,但癌变腺瘤与两者之和有显著差异(P＜0.05).两者表达水平呈现极显著正相关(P＜0.01).结论:HIF-1α、VEGF在家族性腺瘤性息肉病"腺瘤-腺癌"发展中起重要作用,HIF-1α、VEGF表达存在显著的正相关,表明在家族性腺瘤性息肉病"腺瘤-腺癌"进程中,VEGF的表达主要由HIF-1α水平调控.
-
HIF-1α反义寡核苷酸体外对人脑胶质瘤细胞U251的作用
目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸(ASODN)转染对人胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响,探讨以HIF-1α为靶点进行反义寡核苷酸转染治疗胶质瘤的有效性.方法:设计合成针对HIF-1α的寡核苷酸片段.实验分6组:空白对照组、脂质体组、正义组和反义组(1.0 μmol/l、2.5 μmol/l和5.0 μmol/l).利用脂质体包裹瞬时转染人胶质瘤细胞系U251,MTT法检测细胞增殖;采用AO/EB染色及末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡的变化.结果:转染后各组细胞增殖抑制率分别为(1.30±0.05)%、(1.98±0.35)%、(2.47±0.48)%、(22.30±2.08)%、(33.60±4.19)%和(56.20±4.22)%.转染HIF-1α反义寡核苷酸组较各对照组相比细胞增生下降, 凋亡增加(P《0.01). 结论:HIF-1α反义寡核苷酸转染人胶质瘤U251细胞系可以抑制细胞增生并诱导胶质瘤细胞凋亡,HIF-1α有望成为一个极具潜力的肿瘤治疗的靶点.
-
缺氧时肺动脉平滑肌Kv亚型的表达及缺氧诱导因子-1在其中的作用
目的 探讨缺氧对培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)上Kv3.1、Kv4.2基因转录的影响及缺氧诱导因子-1(HIF-1)和红细胞生成素(EPO)3′端增强子在其中的作用.方法 体外合成EPO 3′端增强子野生型和突变型片段,借助脂质体转入PASMCs,用RT-PCR法测定细胞在常氧或缺氧条件下培养18 h的Kv3.1和Kv4.2的mRNA.结果 缺氧18 h能增加Kv3.1和Kv4.2基因转录.转入野生型EPO 3′端增强子片段后,能消除缺氧时Kv3.1、Kv4.2基因转录的增加,而转入突变型片段则无此作用.结论 缺氧有增加PASMCs上Kv3.1、Kv4.2基因转录的作用,该作用受到HIF-1的调制,且在Kv3.1、 Kv4.2基因的调控序列中,可能存在与EPO3′端增强子片段相似的序列.
-
缺氧诱导因子-1与脑缺血缺氧性损伤研究进展
缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是目前发现的重要的缺氧感受因子.它作为一种转录调节因子,在脑缺血缺氧状态下,可激活100多种缺氧反应性基因表达,对脑缺血缺氧后微血管的再生、神经元的能量代谢、神经干细胞的增殖、分化的调控起到重要作用.但近又发现,HIF-1是介导脑缺血缺氧后炎症损伤的关键因子,同时参与脑缺血缺氧后神经元的迟发性死亡.对近5年来国内外HIF-1与脑缺血缺氧性损伤的相关研究成果进行综述.
-
缺氧诱导因子-1α在颈动脉粥样硬化发病机制中的研究
新生血管生成和炎症浸润是颈动脉粥样硬化不稳定斑块的重要特点,其产生的分子机制尚不完全清楚.缺氧诱导因子-1是一个能在缺氧状态下发挥活性的转录因子.在颈动脉粥样硬化病变中,缺氧诱导因子-1通过α活性亚单位调控多种靶基因表达而促进新生血管生成、促进炎症反应和平滑肌细胞迁移增殖导致病变进展.
-
HIF-1表达在肿瘤生长及演进中的作用
恶性肿瘤细胞异常增殖的代谢模式,引起氧供应失衡,形成特异性肿瘤缺氧微环境.缺氧通过活化缺氧诱导因子-1 (hypoxia induced factor-1,HIF-1)发挥功能,肿瘤细胞中过表达的HIF-1在多种恶性肿瘤生长、演进及放射治疗和化学治疗抵抗中起到关键作用.
-
缺氧诱导因子-1在心肌保护中的作用
红素氧合酶-1、内皮素-1和心房钠尿肽等基因的表达,从而发挥心肌保护作用.
-
缺氧与血红素氧化酶-1的表达
血红素氧化酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)为诱导型血红素氧化酶,是一种急性应激反应蛋白,其催化血红素代谢的产物具有扩张血管和抗氧应激损伤等保护作用.急性缺氧普遍诱导哺乳动物细胞中HO-J基因的表达,但在一些人类细胞中,缺氧却抑制HO-1的表达,显示出种属、组织和细胞的特异性.缺氧时HO-1的特异性表达可能受细胞内活性氧、MAPK途径以及HIF-1,AP-1和Bachl等转录因子的调节.
-
HIF-1与肿瘤多药耐药关系的研究进展
缺氧是许多肿瘤的特性,缺氧诱导因子-1(HIF-1)在多种肿瘤中广泛存在,可调控一系列靶基因的转录,对于肿瘤多药耐药(MDR)的形成有着多方面的作用.
-
缺氧诱导因子-1与细胞凋亡
缺氧诱导因子-1(HIF-1)是一种主要由缺氧诱导细胞产生的重要的转录因子.HIF-1的表达水平与糖酵解、细胞周期阻滞、细胞生存与增殖、血管新生、血管舒缩、红细胞生成、肿瘤生长,转移以及肿瘤多药耐药等许多生命活动密切相关.HIF-1通过调控凋亡相关基因的转录在促细胞凋亡和抗细胞凋亡中都发挥着重要的作用.
-
缺氧诱导因子-1的研究与应用进展
缺氧诱导因子-1(HIF-1)是细胞在缺氧条件下产生的一个主要调控因子,近年来的研究发现,HIF-1与血管生成、炎症发生和脂肪形成过程密切相关,并对肿瘤、心血管疾病、炎症和肥胖症的治疗具有重要的指导意义.
-
胃良恶性病变组织中VHL和HIF-1α及其mRNA表达与MV计数的关系
目的 研究胃良恶性病变组织中VHL和HIF-1α及其mRNA表达水平和MV计数及其临床病理意义.方法 取49例胃癌,20例癌旁组织,36例淋巴结转移灶和80例不同类型胃良性病变手术切除或胃镜活检标本常规制作石蜡包埋切片,用EnVisionTM免疫组化法检测VHL和HIF-1α表达和MV计数,用原位杂交法检测VHL和HIF-1α mRNA表达.结果 胃癌组织VHL及其mRNA表达阳性率明显低于癌旁组织及各类型胃良性病变(P<0.05或P<0.01),胃癌组织HIF-1α及其mRNA表达阳性率明显高于癌旁组织及各类型胃良性病变(P<0.05或P<0.01),胃癌组织MV计数明显高于癌旁组织和各种类型胃良性病变(P<0.01),VHL及其mRNA阴性表达和(或)HIF-1α及其mRNA阳性表达的癌旁组织及胃良性病变黏膜上皮均呈轻至重度不典型增生;胃癌原发灶与相应淋巴结转移灶比较VHL和HIF-1α及其mRNA表达阳性率及MV计数间,差异无统计学意义(P>0.05).胃癌组织学分级Ⅱ级、浸润深度T1+T2、无淋巴结转移及无远处转移病例HIF-1α及其mRNA表达阳性率及MV计数明显低于组织学分级Ⅲ+Ⅳ级、浸润深度T3+T4、区域淋巴结转移及远处器官转移者(P<0.05或P<0.01),但VHL及其mRNA表达阳性率则与HIF-1α相反(P<0.05或P<0.01);N1站淋巴结转移者VHL及其mRNA表达阳性率明显高于N2+N3站淋巴结转移病例(P<0.05);VHL和HIF-1α及其mRNA在胃癌组织中表达呈高度不一致性(X2VHL=14.66,P<0.01;X2VHL mRNA=6.74,P<0.05);VHL及其mRNA阳性者或HIF-1α及其mRNA阴性者MV计数明显低于VHL及其mRNA阴性或HIF-1α及其mRNA阳性者(P<0.01).结论 VHL和HIF-1α及其mRNA表达水平可能是反映胃癌发生、进展、临床生物学行为及预后的重要标记物.VHL和HIF-1α及其mRNA在胃癌组织中表达可能存在负性调节作用;VHL及其mRNA可能抑制胃癌组织中微血管生成.HIF-1α及其mRNA可能促进微血管生成.
-
HIF-1α特异性RNA干扰表达载体的构建及体外效应研究
目的 己知缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在缺氧状态下可通过调节内皮素-1(ET-1)的升高而参与肺血管内皮细胞损伤及肺动脉高压,终导致肺出血.RNA干扰(RNAi)是双链RNA介导的序列特异性转录后同源靶基因沉默效应,目前RNAi技术已成为一种研究基因功能的有力工具,故拟通过构建人HIF-1α基因的特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,观测该载体在缺氧状态下对HIF-1α基因的干扰作用及对ET-1的抑制作用.方法 选择6个(a-f)可能的人HIF-1α siRNA干扰位点,设计合成相应的特异性互补寡聚核苷酸链(A～F),采用基因克隆技术,将合成的(A～F)链序列定向插入真核表达载体中,构建成重组质粒HIF-1α siRNA真核表达载体(A'～F'),通过脂质体法转染至体外人脐静脉内皮细胞(HUVECs)48 h,再以CoCl2(100μM)模拟缺氧刺激3 h后,观测siRNA对HIF-1αmRNA和HIF-1α蛋白表达的抑制效应及ET-1水平.结果 ①成功构建了分别针对6个HIF-1αsiRNA干扰位点(a～f)的重组质粒HIF-1α siRNA真核表达载体(A'-F');②该6组真核表达载体转染HUVECs并经CoCl2模拟缺氧刺激后,与未转染组比较,结果 显示B'及D'组明显抑制HIF-1α mRNA及HIF-1α蛋白的表达,并部分抑制ET-1表达,而其余4组与未转染组比较并无差异.结论 针对b及d干扰位点的B'及D'特异性siRNA真核表达载体,能明显干扰HIF-1α基因的表达,进而抑制ET-1的释放.该实验为下一步用B'、D'特异性siRNA真核表达载体在动物体内研究HIF-1α与新生儿缺氧性肺出血关系奠定基础.
-
缺氧诱导因子-1在帕金森病发病机制中的研究进展
缺氧诱导因子-1(HIF-1)是主要的氧平衡调节因子之一,其降解和转录活性受多种因素调控,HIF-1活性改变和其下游基因的表达异常在多种神经疾病中具有重要作用.帕金森病(PD)病因尚不完全明确,多数研究认为基因和环境因素相互作用共同促进了PD的发病.氧化应激、线粒体功能障碍、铁稳态失衡等参与了PD的发生发展,近研究发现,HIF-1在细胞自噬、应激、小胶质细胞激活、能量代谢、神经保护及疾病治疗等方面发挥重要作用,而这些作用于PD关系密切.
-
缺氧诱导因子-1α在胶质瘤中的研究进展
缺氧诱导因子-1(Hypoxia inducible factor- 1,HIF-1)是调节细胞缺氧反应的主要转录因子,HIF-1α为其活性调节亚单位.HIF-1α在胶质瘤中表达显著增加,并与胶质瘤的恶性进展密切相关.HIF-1为异二聚体结构,调控多种与细胞缺氧反应相关基因的表达;氧水平、相关癌基因与抑癌基因及细胞因子等均可调节HIF-1α蛋白的表达;HIF-1α和肿瘤内新生血管形成、细胞代谢、细胞凋亡及细胞坏死之间均存在密切关系,并可影响放化疗对肿瘤的疗效;以HIF-1α为靶点的药物或基因治疗正在成为胶质瘤基础和临床研究关注的热点.
-
缺氧诱导因子-1与脑膜瘤血管生成
缺氧诱导因子-1是细胞在缺氧条件下产生的具有转录活性的核蛋白,由α亚单位和β亚单位构成,其中α亚单位被认为是特异性氧调节亚单位,决定了HIF-1的活性.大量研究发现HIF-1是肿瘤血管生成信号途径的关键性上游转录调控因子,通过影响其他血管生长因子的表达,而直接参与血管生成的全程.脑膜瘤是常见的颅内肿瘤,多呈实体性,且血供丰富,在颅内呈膨胀性或侵袭性生长,其发生、发展与血管生成密切相关.深入研究HIF-1在脑膜瘤中的表达及其对血管生成的调控可能为脑膜瘤的治疗发现新方法.
-
亚砷酸对人肝癌细胞HepG2中HIF-1α表达的影响
目的 探讨亚砷酸对人肝癌细胞HepG2中HIF-1α表达的影响.方法 以0、0.25、0.5、1、2和4μmol/L的亚砷酸处理人肝癌细胞HepG2缺氧环境中培养8 h;1μmol/L的亚砷酸处理人肝癌细胞HepG2缺氧培养0-10h,WST-8法和台盼蓝染色法分析细胞增殖和活力,采用RT-PCR和Western Blot方法检测肝癌细胞中HIF-1 α的表达.结果 ①不同剂量的亚砷酸和不同缺氧时间下对肝癌细胞活力和增殖率的影响与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).②随着亚砷酸浓度的增加,HIF-1α蛋白表达逐渐降低,与对照组相比差异呈显著性(P＜0.01).③不同剂量的亚砷酸对HIF-1α mRNA表达的影响与对照组相比无差异显著性(P＞0.05).结论 亚砷酸抑制人肝癌细胞HepG2中HIF-1α蛋白表达是通过转录后机制.
关键词： 亚砷酸 缺氧诱导因子-1 人肝癌细胞HepG2 -
缺氧诱导因子-1和血管内皮生长因子在肝癌组织中的表达及临床意义
目的探讨肝癌组织中HIF-1α和VEGF表达的相互关系及临床意义.方法应用免疫组化SABC法检测36例肝癌及15例癌旁组织中HIF-1α、VEGF的表达,分析比较其与肝癌组织病理学的关系.结果肝癌组中的HIF-1α及VEGF的表达较癌旁组增强(P＜0.01),且肝癌组中无包膜及已转移者HIF-1α、VEGF的表达水平相应较有包膜及未发生转移者高(P＜0.05);同时肝癌组织中HIF-α、VEGF两者的表达呈正相关(r=0.62,P＜0.05).结论肝癌组织中HIF-1 α和VEGF表达可反映肝癌的生物学行为,可作为预测肝癌浸润转移的一项重要指标.
