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顺铂诱导人胃癌细胞SGC7901和人肝癌细胞HepG2凋亡的细胞形态学变化的比较
目的 观察顺铂诱导人胃腺癌细胞SGC7901和人肝癌细胞HepG2细胞凋亡的细胞形态学的异同并探讨其意义.方法 用倒置显微镜、荧光显微镜、透射电镜观察细胞经顺铂处理后的形态学改变.采用流式细胞术研究CDDP对两株肿瘤细胞诱导凋亡中DNA含量的影响.结果 经顺铂处理后,两株肿瘤细胞均表现出一些共同的凋亡形态学特征,如细胞及细胞核皱缩,微绒毛消失,细胞膜皱缩但完整,细胞内荧光强度增强.细胞超微结构变化如线粒体肿胀,胞质空泡化.但两者在细胞核形态方面表现出较大的差异;SGC7901表现为核染色质呈团块状或环状,聚集于核膜下;而HepG2主要表现为核碎裂、核膜崩解,核染色质呈梅花状散落在细胞中和一些细胞器通过细胞出芽裂解成由细胞膜包绕的凋亡小体并被周围细胞吞噬.在两者的流式细胞DNA的直方图上均检测到了亚二倍体峰.结论 顺铂可诱导SGC7901和HepG2产生不同形态的细胞凋亡,其中SGC7901主要表现为核固缩,HepG2表现为核碎裂.这种差异具有重要的生理意义.
关键词： 顺铂 人胃腺癌细胞SGC7901 人肝癌细胞HepG2 凋亡 流式细胞术 -
IFN-α联合5-FU对肝癌细胞增殖及凋亡的影响及机制研究
目的 探讨α-干扰素(IFN-α)联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响及机制.方法 培养人肝癌细胞HepG2,实验分为4组,对照组不加药物干预,5-Fu组加入40 μg/ml 5-Fu,IFN-α组加入4 000 U/ml IFN-α,联合用药组加入40 μg/ml 5-Fu和4 000 U/ml IFN-α.培养48 h后收集细胞,采用MTT法检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测各组细胞周期及凋亡情况,细胞免疫化学法检测各组Bcl-2、Caspase-3蛋白表达.结果 IFN-α组抑制作用较弱,为3.73％,5-FU组抑制率为22.50％,联合用药组抑制作用显著增强,抑制率为63.65％;联合用药组对肝癌HepG2细胞的周期影响大,G0/G1期比率明显增加,为(80.10±4.33)％,S期细胞比率明显减少,为(18.76±3.47)％,细胞增殖指数(PI)低,为(20.11±4.53)％,差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组肝癌HepG2细胞凋亡率为(22.51±4.41)％,明显高于其他组(P＜0.05);联合用药组Bcl-2蛋白表达率为(10.24±2.30)％,明显低于其他组(P＜0.05);联合用药组Caspase-3蛋白表达率为(30.12±1.81)％,明显高于其他组(P＜0.05).结论 IFN-α联合5-FU能明显抑制HepG2细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能是通过调节Bcl-2、Caspase-3蛋白而发挥作用.
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ω-3多不饱和脂肪酸对人肝癌细胞HepG2增殖及SOD、MDA 的影响
目的 本研究探讨不同浓度ω-3多不饱和脂肪酸(EPA、DHA)对人肝癌细胞HepG2增殖和脂质过氧化的影响.方法 采用MTT法测定肿瘤细胞存活率,黄嘌呤氧化酶法测定总SOD活力,TBA,法测定MDA,含量.结果 60、80和100μg/mL的EPA或DHA可抑制肿瘤细胞的存活率(P<0.01),且呈一定的剂量依赖性,同时,上述剂量的EPA和DHA处理后,总SOD活力明显下降(P<0.05)、而MDA含量明显升高(P<0.05).结论 ω-3多不饱和脂肪可通过影响细胞脂质过氧化来抑制人肝癌细胞HepG2的增殖.
关键词： ω-3多不饱和脂肪 人肝癌细胞HepG2 超氧化物歧化酶 -
川芎嗪含药血清对人肝癌细胞Hep G2增殖的抑制作用
目的观察川芎嗪(TMP)含药血清对人肝癌细胞Hep G2增殖的影响.方法选用SD雄性大鼠30只,随机分成3组,分别ip TMP 143.0、71.5 mg/kg、生理盐水0.8 mL,制备TMP大、小剂量组及生理盐水组含药血清,采用RP-HPLC法测定含药血清中TMP的质量浓度.将各组含药血清作用于人肝癌细胞Hep G248 h,MTT法测定不同质量浓度TMP含药血清对人肝癌细胞Hep G2增殖的抑制作用.结果TMP大剂量组血清(20%、10%、5%),TMP小剂量组血清(20%、l0%)对人肝癌细胞Hep G2增殖较生理盐水组有显著抑制作用(P＜0.05),高抑制率可达46.1%.结论TMP含药血清对人肝癌细胞Hep G2增殖有一定的抑制作用.
关键词： 川芎嗪 人肝癌细胞HepG2 高效液相色谱 MTT法 -
苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究
目的：研究苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法 BALB/C 裸鼠随机分为对照组和苦参碱25、50、75 mg/kg组，每组各10只。建立裸鼠肝癌细胞HepG2移植瘤模型。对照组ip生理盐水1 mL，1次/d；苦参碱25、50、75 mg/kg组分别ip 0.5、1.0、1.5 mg/mL苦参碱溶液1 mL，1次/d。连续给药35 d。计算瘤体体积和肿瘤体积抑制率。观察裸鼠瘤体HE染色病理改变和免疫组化染色，测定各组裸鼠瘤体Survivin蛋白表达量，并采用RT-PCR法检测裸鼠瘤体Survivin mRNA相对表达量。结果与对照组比较，苦参碱50、75 mg/kg组裸鼠瘤体体积显著减小（P＜0.01）；苦参碱组裸鼠瘤体生长速度较对照组减慢，肝癌细胞分布较对照组稀疏，且剂量越大越明显。苦参碱50、75 mg/kg组仅有少量Survivin表达于细胞质。与对照组比较，苦参碱50、75 mg/kg组裸鼠Survivin蛋白表达量和Survivin mRNA相对表达量显著减小（P＜0.01）。结论苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠具有抑瘤作用，有效剂量为50 mg/kg，其机制可能与下调Survivin表达、诱导肝癌细胞凋亡有关。
关键词： 苦参碱 人肝癌细胞HepG2 抑瘤作用 瘤体体积 Survivin表达 -
人肝癌细胞HepG2培养方法探究与分析
① 目的 探究人肝癌细胞HepG2合适的培养方法 .② 方法对比复苏中先40℃ 水浴溶解后37℃ 温浴与37℃ 水浴溶解细胞的存活率,确定佳复苏方法;对比采用一步消化法和分步消化法的细胞状态以选择适传代消化方法;对比手动慢速冻存法 、程序降温盒慢速冻存法与玻璃化冻存法冻存效果以选择合适冻存方法;对比刚复苏细胞用10％ 、12％ 、15％ 血清浓度DMEM培养液培养,确定其所需血清适浓度.③ 结果 复苏采用先40℃ 水浴溶解后37℃ 温浴,细胞平均存活率(81.0％)显然比37℃ 水浴溶解(69.3％)高;分步消化法效果比一步消化法效果好;冻存采用程序降温盒效果佳,玻璃冻存法次之,手动慢速冻存效果差;采用10％ 血清浓度的DMEM培养液培养刚复苏细胞增殖慢,死细胞多,12％ 血清浓度的死细胞少,但是增殖慢,而15％ 血清浓度的死细胞少且细胞增殖快.④ 结论 HepG2细胞复苏采用先40℃ 水浴溶解后37℃ 温浴,消化传代用分步消化法,冻存用程序降温盒,-80℃冰箱过夜,随后液氮中保存;刚复苏的细胞采用血清含量为15％ 的DMEM培养液效果好.
关键词： 人肝癌细胞HepG2 复苏 细胞传代 冻存 血清浓度 -
不同剂量HepG2细胞诱导小鼠胸腺产生差异性免疫应答
目的:探讨小鼠胸腺对不同剂量HepG2细胞免疫效应的差异.方法:将不同剂量DiI标记的HepG2细胞(2×103个/μL、2×105个/μL、2×107个/μL)注射到小鼠胸腺内,检测不同时间检点(3 d,5 d,7 d,14 d,21 d,28 d)小鼠胸腺出现的免疫应答变化.结果:低剂量HepG2细胞在小鼠胸腺内没有形成肿瘤组织,7 d被清除;中、高剂量HepG2细胞在小鼠胸腺内均形成肿瘤组织,其周围出现不同程度T淋巴细胞聚集,并在不同时间点(中剂量14 d,高剂量21 d)被完全清除.结论:胸腺可对异种抗原产生免疫应答,其应答程度与抗原剂量有关.
关键词： 人肝癌细胞HepG2 胸腺微环境 胸腺内免疫应答 -
黄芪多糖对人肝癌细胞HepG2凋亡相关基因表达的影响
目的 研究黄芪多糖(APS)联合斑蝥酸钠(SCA)对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及Bcl-2基因表达的影响.方法 实验分为对照组、SCA处理组、APS处理组、APS联合SCA处理组,采用免疫组化染色法(IH)观察APS联合斑蝥酸钠对HepG2细胞增殖的抑制作用,采用Western 印迹法检测各组细胞Bcl-2基因表达的变化.结果 与对照组相比,各处理组HepG2细胞中Bcl-2基因表达均明显减少,APS联合SCA处理组减少为明显.结论 APS联合SCA可明显抑制HepG2细胞Bcl-2基因的表达.
关键词： 黄芪多糖 人肝癌细胞HepG2 凋亡 -
当归多糖对肝细胞Hepcidin表达的影响
目的 探讨当归多糖(ASP)对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02 Hepcidin表达的抑制作用.方法 体外培养HepG2和L-02细胞,RT-PCR检测不同浓度(0、100、200、400 mg/L)的ASP诱导不同时间(0、24、48、72 h和96 h)对两种细胞Hepcidin mRNA影响.Western印迹观察400 mg/L ASP诱导96 h对两种细胞Hepcidin表达的抑制作用.结果 与对照组(0 mg/L)相比,浓度高于200 mg/L ASP能够显著下调HepG2和L-02细胞Hepcidin mRNA表达(P<0.001);400 mg/L ASP连续作用48 h后对HepG2和L-02细胞产生显著的Hepcidin抑制效应且抑制强度呈时间相关性;400 mg/L ASP连续作用96 h后显著抑制HepG2和L-02细胞Hepcidin表达(P<0.001).结论 ASP可以抑制HepG2和L-02细胞中Hepcidin的表达.
关键词： 当归多糖 Hepcidin 人肝癌细胞HepG2 人正常肝细胞L-02 -
褐藻糖胶抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制
目的:探讨褐藻糖胶对人肝癌细胞株HepG2体外增殖的相关机制.方法:采用MTT法测定不同浓度褐藻糖胶对人肝癌细胞株HepG2增殖的抑制作用,计算细胞生长抑制率;将0、10、100、500μg/md的褐藻糖胶作用于HepG2细胞,48 h后光镜观察细胞形态改变,用Hoechst染色法和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;Western blot检测cyclinD1和拓扑异构酶Ⅱα(topoisomerase Ⅱα,TopoⅡα)表达的改变.结果:褐藻糖胶具有抑制人肝癌细胞HepG2增殖的作用,呈剂量依赖性.不同浓度褐藻糖胶作用HepG2细胞后,500 μg/ml组较其他浓度组光镜下和Hoechst 33258染色均呈现较明显细胞形态改变,100 μg/ml和500μg/ml组均检测出DNA梯形条带.褐藻糖胶也能降低细胞增殖生物标志蛋白cyclinD1和TopoⅡα的蛋白表达.结论:褐藻糖胶抑制人肝癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与褐藻糖胶抑制细胞增殖的生物标志蛋白cyclinD1和TopoⅡα表达有关.
关键词： 褐藻糖胶 人肝癌细胞HepG2 凋亡 CyclinD1 TOPOⅡα -
基于微流控芯片的细胞迁移模型及其在黄芩苷药效学研究上的应用
基于微流控芯片技术建立一种体外细胞迁移模型,并将其用于黄芩苷药效的研究.设计与制作一种集成有微阀的微流控芯片;LIVE/DEAD染色试剂盒检测芯片中细胞活力;通过荧光素钠对芯片进行药物浓度梯度表征;DiI、DiO对细胞示踪染色观察微阀对细胞的隔离作用;每12小时显微镜拍照观察细胞的迁移状态并计算细胞迁移速率;ELISA法测定芯片细胞上清液中MMP-2、MMP-9和E-cadherin蛋白含量变化.实验结果表明,芯片中细胞活力接近100％;芯片可产生稳定的浓度梯度,且微阀对细胞有良好的隔离作用;黄芩苷对肝癌细胞HepG2的迁移具有显著抑制作用,并可显著降低MMP-2和MMP-9蛋白的分泌量.该研究为微流控芯片技术在中医药领域中的应用提供了一种新思路和新方法.
关键词： 微流控芯片技术 细胞迁移 黄芩苷 人肝癌细胞HepG2 MMP-2 MMP-9 E-cadherin -
欧前胡素下调Mcl-1蛋白表达诱导人肝癌细胞HepG2凋亡实验研究
目的：探讨欧前胡素对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法将人肝癌细胞系HepG2用5、10、20、40、80μM的欧前胡素处理24h或48h，以相同培养条件不加欧前胡素的HepG2细胞为对照组，MTT法检测欧前胡素治疗后HepG2细胞的增殖抑制情况；HepG2细胞用10、20、40μM的欧前胡素处理24h，通过流式细胞术和Western blot检测欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导作用和Mcl-1（myeloid cell leukemia-1）的表达；在HepG2细胞中转染pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体后再用欧前胡素治疗，检测欧前胡素对HepG2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应。结果10、20、40、80μM欧前胡素组增殖抑制率分别为24h：（7.2±1.7）%、（14.5±2.6）%、（37.4±3.7）%、（56.3±4.3）%；48h：（14.5±2.1）%、（23.6±3.0）%、（52.3±4.8）%、（78.3±5.9）%，与对照组（0）比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；10、20、40μM欧前胡素组凋亡诱导率分别为（3.9±0.8）%、（12.4±1.8）%、（26.9±2.5）%，与对照组（0.5±0.2）%比较，差异有统计学意义（P<0.05）。欧前胡素治疗后，HepG2细胞的Mcl-1表达水平显著下降，用pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体转染HepG2细胞后，欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导率较空pcDNA3.1载体转染组显著下降[（6.8±1.2）%比（25.7±2.3）%，P<0.05]。结论欧前胡素具有体外抗肝肿瘤的生物活性，其抗肿瘤效应的机制可能是通过下调Mcl-1蛋白表达从而诱导细胞凋亡。
关键词： 人肝癌细胞HepG2 欧前胡素 Mcl-1 凋亡 -
醉香含笑树皮提取物诱导HepG2细胞凋亡的作用机制
目的 探讨醉香含笑树皮提取物(extrat of barks of Michelia macclurei Dandy.,EBMMD)诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及相关机理.方法 采用倒置生物显微镜、流式细胞仪、Western-blotting等技术,考察EBMMD对HepG2细胞凋亡及COX-2蛋白表达的影响.结果 流式细胞术分析可见,EBMMD能明显诱导HepG2细胞凋亡,且呈浓度依赖关系;倒置生物显微镜观察可见细胞凋亡的形态学改变;随EBMMD浓度增高,细胞内COX-2蛋白的表达逐渐减少,且当EBMMD浓度达25.00 μg·mL-1时,能明显抑制COX-2蛋白表达.结论 EBMMD可以明显诱导HepG2细胞凋亡,其作用机理可能与下调细胞内COX-2蛋白表达进而诱导其凋亡有关.
关键词： 醉香含笑树皮提取物 人肝癌细胞HepG2 凋亡诱导机制 -
白花丹醌对人肝癌细胞HepG2侵袭和凋亡的影响
目的：探讨白花丹醌对人肝癌HepG2细胞侵袭和凋亡的影响。方法人肝癌HepG2细胞进行体外培养,经不同浓度的白花丹醌处理后, MTT法检测细胞的增殖抑制作用；Transwell细胞体外侵袭实验观察细胞的侵袭能力；流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况；免疫组化法检测细胞内Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。结果 MTT结果显示,与对照组比较,白花丹醌干预组抑制 HepG2细胞增殖,并呈剂量-效应关系( P<0．05)；Transwell细胞体外侵袭实验显示,随白花丹醌用药浓度的递增,细胞侵袭能力明显下降,尤其以4、8μmol·L-1明显(P<0．01)；流式细胞术结果显示,白花丹醌作用HepG2细胞48 h,4、8μmol·L-1组细胞凋亡率均明显高于对照组；免疫组化显示,随着白花丹醌浓度增加,Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,并呈剂量依赖性(P<0．01)。结论白花丹醌能够抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,同时具有抑制HepG2细胞侵袭的能力。
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去甲肾上腺素对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响
目的 观察去甲肾上腺素(NE)对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响.方法 体外培养HepG2细胞和L-02细胞,分别加入不同浓度NE处理,继续培养,采用MTr法观察细胞增殖情况,HE染色和Annexin V-FITC/PI染色法观察细胞形态学变化,流式细胞术观察细胞凋亡情况.结果 经0.1、1、10、50μmol/L NE处理24、48 h,HepG2细胞OD值显著下降(P均＜0.05),L-02细胞OD值无明显变化.10 μmol/L NE作用于HepG2细胞可见典型的凋亡形态学改变,胞质收缩、深染,核染色质浓缩;L-02细胞在NE作用前后形态学均无明显改变.HepG2细胞加入10 μmol/L NE后部分细胞呈绿色(为早期凋亡表现),加入50 μmol/L NE后部分细胞膜呈绿色,细胞核呈红色(为晚期凋亡表现);L-02细胞均未显示有荧光.0.1、1、10μmol/L NE作用于HepG2细胞24 h后,其凋亡率均显著高于对照组(0μmol/L NE),且呈剂量依赖关系(P均＜0.05);而上述浓度NE作用于L-02细胞24h后,其凋亡率较对照组先增高后降低(P均＜0.05).结论 NE可以抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,而对L-02细胞增殖和凋亡没有影响,提示其在特定类型肝癌临床治疗中具有潜在价值.
关键词： 去甲肾上腺素 人肝癌细胞HepG2 人正常肝细胞L-02 细胞增殖 细胞凋亡 -
秦皮乙素对人肝癌HepG2细胞体外增殖的影响及机制探讨
目的 探讨秦皮乙素对人肝癌HepG2细胞体外增殖的影响并初步探讨其作用机制.方法 采用不同浓度的秦皮乙素干预人肝癌HepG2细胞.采用MTT比色法观察细胞增殖率；流式细胞仪分析细胞凋亡及线粒体膜电位；分光光度法检测细胞Caspase 3、Caspase 8、Caspase 9活性；免疫荧光法检测Bax、Bcl-2、Caspase 9蛋白表达.结果 秦皮乙素干预后人肝癌细胞HepG2增殖抑制,凋亡增加；线粒体膜电位降低,Caspase3、Caspase9活性增强,均呈剂量依赖性；Caspase8活性无明显变化.Bax蛋白表达上调的同时Bcl-2蛋白表达下调,亦呈剂量依赖性.结论 秦皮乙素可抑制人肝癌HepG2细胞体外增殖；作用机制可能为通过线粒体途径诱导细胞凋亡.
关键词： 秦皮乙素 人肝癌细胞HepG2 凋亡 线粒体途径 -
分泌肿瘤坏死因子的基因工程细胞对HepG2细胞的抑制作用
目的 自行建立分泌人肿瘤坏死因子α的基因工程细胞,将其与肝癌细胞共培养,观察体外培养中分泌肿瘤坏死因子hTNF/293基因细胞表达的情况及对人肝癌细胞的抑制作用.方法 (1)建立可稳定分泌人肿瘤坏死因子α/293细胞;采用RT-PCR、Western blot、ELISA和流式细胞仪等技术检测人肿瘤坏死因子表达和分泌;(2)观察体外培养中分泌肿瘤坏死因子hTNF/293基因细胞对人肝癌细胞的抑制作用,于不同的时间点,用MTT法检测490 nm下的吸光度值.结果 RT-PCR、Western blot和ELISA等技术检测表明hTNFα/293细胞组和TNFα阳性组对共培养的HepG2细胞的增殖具有明显的抑制作用,且具有良好的量效关系.结论 提示TNF-α/293基因细胞可有效分泌hTNFα蛋白,并能分泌到细胞外;体外培养的人肿瘤坏死因子基因的工程细胞,所分泌肿瘤坏死因子α对人肝癌细胞增殖有明显抑制效应,且呈现出良好的数量依赖关系.
关键词： 人肝癌细胞HepG2 人肿瘤坏死因子α 人胚胎肾细胞-293 -
4种天然药物对人肝癌细胞HepG2增殖抑制作用的比较
目的 比较吉马酮、芝麻素、淫羊藿素、褐藻多糖硫酸酯等4种天然药物对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制效果,并探讨其作用机制.方法 通过MTT法比较4种药物对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞仪分析其对细胞凋亡的影响.Western blot法检测药物处理前后细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达变化.结果 4种药物均呈浓度依赖性地抑制HepG2细胞的增殖,其中淫羊藿素对HepG2的抑制效果为明显,作用48 h半抑制浓度IC50为30μmol/L;4种药物均诱导HepG2细胞凋亡,淫羊藿素诱导细胞凋亡的效果显著,30 μmol/L淫羊藿素处理48 h后,细胞凋亡率达到51.1％;4种药物均不同程度抑制周期相关蛋白Cyclin A、Cyclin B1、CDK1、CDK2和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,提高促凋亡蛋白Bax的表达.结论 4种天然药物在体外能明显抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,诱导其凋亡,淫羊藿素效果为显著;其分子机制与调节抑制细胞增殖和促凋亡相关蛋白的表达有关.
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亚砷酸对人肝癌细胞HepG2中HIF-1α表达的影响
目的 探讨亚砷酸对人肝癌细胞HepG2中HIF-1α表达的影响.方法 以0、0.25、0.5、1、2和4μmol/L的亚砷酸处理人肝癌细胞HepG2缺氧环境中培养8 h;1μmol/L的亚砷酸处理人肝癌细胞HepG2缺氧培养0-10h,WST-8法和台盼蓝染色法分析细胞增殖和活力,采用RT-PCR和Western Blot方法检测肝癌细胞中HIF-1 α的表达.结果 ①不同剂量的亚砷酸和不同缺氧时间下对肝癌细胞活力和增殖率的影响与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).②随着亚砷酸浓度的增加,HIF-1α蛋白表达逐渐降低,与对照组相比差异呈显著性(P＜0.01).③不同剂量的亚砷酸对HIF-1α mRNA表达的影响与对照组相比无差异显著性(P＞0.05).结论 亚砷酸抑制人肝癌细胞HepG2中HIF-1α蛋白表达是通过转录后机制.
关键词： 亚砷酸 缺氧诱导因子-1 人肝癌细胞HepG2 -
穿心莲内酯对HepG2细胞增殖、凋亡和MDR1、GST-π表达的影响
目的:探讨穿心莲内酯诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及对MDR1、GST-π表达的调控作用.方法:将不同剂量(0～80 μmol/L)穿心莲内酯与HepG2细胞共培养不同时间(24、48、72 h),采用50 μmol/L 5-氟尿嘧啶(5-FU)与HepG2细胞共培养作为阳性对照组;采用CCK-8(Cell CountinG Kit-8)法测定HepG2细胞的增殖情况,流式细胞术(Flow CytoMetry,FCM)测定HepG2细胞凋亡率;采用蛋白印迹方法(Western blot)测定HepG2细胞中MDR1、GST-π蛋白的表达情况,用半定量反转录-聚合酶链反应(SqRT-PCR)测定HepG2细胞中MDR1和GST-π-mRNA表达.结果:不同浓度穿心莲内酯均能抑制HepG2细胞增殖,且呈浓度与作用时间依赖性;80 μmol/L穿心莲内酯组的抑制率与阳性对照组相当(P＞0.05);穿心莲内酯作用于HepG2细胞48 h后,细胞出现凋亡.Western blot及SqRT-PCR结果显示,穿心莲内酯可下调MDR1、GST-π表达,下调作用比5-FU更强.结论:穿心莲内酯可抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡,可能与其抑制HepG2细胞中MDR1、GST-π mRNA和蛋白的表达有关,且其表达量与穿心莲内酯呈明显的时间及浓度依赖性.
关键词： 穿心莲内酯 人肝癌细胞HepG2 MDR1 GST-π
