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  • 大鼠脑缺血区非特异性酯酶阳性细胞的分布和定量研究

    作者:雷万龙;刘勇;姚志彬;袁群芳;凌凤东

    目的探查非特异性酯酶阳性细胞的变化和与脑缺血的病理联系. 方法用酶组织化学方法对40只SD大鼠脑局部缺血/再灌流损伤区非特异性酯酶阳性细胞的分布和数量进行了观查. 结果脑缺血区非特异性酯酶阳性细胞的数量增加发生于脑缺血1h再灌流2h,随后逐渐增加,在脑缺血1h再灌流16h达到高峰.阳性细胞的增加显示明显的时间依赖关系.阳性细胞主要位于小血管和微血管的壁内及其周围.在缺血侧基底节区非特异性酯酶阳性细胞比皮质缺血区多. 结论非特异性酯酶阳性细胞对脑缺血刺激反应敏感,在缺血侧基底节区,其反应更为强烈,此因素可能是基底节区易发生中风的原因之一.

  • 非特异性酯酶在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用研究

    作者:李士根;张昕;甄天民;郭永和;刘永春;刘凤梅

    目的 探讨非特异性酯酶(Non-specific esterase,NSE)在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用。 方法 以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定室内5个品系淡色库蚊的NSE活力。 结果 5个品系淡色库蚊中以抗DDVP品系NSE活力水平高,其次为抗DDVP降解品系和抗残杀威品系。抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近。 结论 NSE在淡色库蚊对有机磷类杀虫剂的抗性中起重要作用,也是对氨基甲酸酯类杀虫剂产生抗性的机制之一,与对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性关系不大。

  • 微板法测定抗药性酯酶检测淡色库蚊抗药性的研究

    作者:李士根;蒋滨;甄天民;王风刚;刘永春;孙传红;王怀位

    目的研究简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术. 方法以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用酯酶微板法测定实验室和现场单个淡色库蚊体内非特异性酯酶活力. 结果实验室5个品系淡色库蚊以抗DDVP品系非特异性酯酶活力水平高,其次为抗残杀威品系和抗DDVP降解品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近;3个现场淡色库蚊种群对DDVP抗性为4.15~9.36倍,对残杀威抗性为1.02~3.81倍,其非特异性酯酶活力水平均较高. 结论酯酶微板法测定非特异性酯酶能够检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平,能够早期预测抗性发展趋势,便于制订抗药性克服对策.

  • 广东省湛江市抗溴氰菊酯白纹伊蚊代谢酶活性及其特征研究

    作者:李袁飒;孟凤霞;蔡松武;刘起勇

    目的 了解广东省湛江市白纹伊蚊野外种群对溴氰菊酯抗性水平和多功能氧化酶(MFO)、非特异性酯酶(NSE)、谷胱甘肽转移酶(GSTs)的活力水平及动态特征,为该地区白纹伊蚊控制及抗药性治理提供依据.方法 以实验室品系为参考,采用WHO推荐的成蚊接触筒法,测定白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗药性,同时用酶标仪测定酶活力;SPSS 20.0软件分析比较种群间酶活力水平、酶活力的频率分布、变异性、酶活力与蛋白质含量的关系等.结果 广东省湛江市白纹伊蚊已经对溴氰菊酯产生高抗性;其成蚊的MFO、NSE和GST酶活力分别为实验室参考品系的1.67、1.91和1.96倍,且两种群间3种代谢酶差异有统计学意义(P<0.05).该野外种群3种代谢酶的活力分布均呈正偏态分布,GST抗性为主要机制,抗性个体高达72.73%,其次为NSE,抗性个体占59.76%,另外还存在2种或3种酶活力同时增高的抗性个体.结论 白纹伊蚊湛江种群成蚊对溴氰菊酯的高抗性,可能与3种代谢酶尤其是GST活力增强有关;应加强该地区白纹伊蚊溴氰菊酯等拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性监测与机制研究工作,制定切实可行的抗性治理策略.

  • 滤纸法测定淡色库蚊非特异性酯酶和乙酰胆碱酯酶活性的实验研究

    作者:赵玉强;甄天民;王新国;王怀位;孙传红

    目的:测定淡色库蚊敏感品系和抗性品系的非特异性酯酶(NSE)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性状况,区分单个蚊虫的抗性情况。方法:滤纸法。结果:敏感品系个体的NSE和A chE在滤纸上显色较浅或不显色,抗性品系个体则显色较深。采用不同浓度杀虫剂对蚊虫Ach E活性进行抑制试验,敏感品系个体的AchE随杀虫剂浓度的增加而被抑制(不显色),抗性品系个体则不被抑制(显色明显)。结论:两品系间AchE的含量和活性有所不同。滤纸法可快速地测定淡色库蚊内的NSE和AchE活性,简单易行,可作为一种淡色库蚊抗药性测定方法,便于在现场中推广应用。

  • 河南省部分地区溴氰菊酯抗性中华按蚊代谢酶活性的调查研究

    作者:祁欣;张红卫;徐铁龙;汤林华;周水森;郑彬

    目的 了解河南省部分地区溴氰菊酯抗性中华按蚊的代谢酶活性,探讨中华按蚊对溴氰菊酯的代谢抗性机制.方法 2010年8月在河南省桐柏、淮滨县和永城市采集中华按蚊样本,子1代成蚊用接触筒内成蚊药膜滤纸接触法,按照WHO标准,区分溴氰菊酯抗性与敏感样本,并用微量滴定板法测定抗性样本的非特异性酯酶、谷胱甘肽S转移酶(GST)和P450单加氧酶活性.以实验室敏感品系蚊为对照.结果 淮滨、永城和桐柏三地中华按蚊抗性样本的A、B型非特异性酯酶活性均高于对照组(t=2.41,3.30,10.31,7.67,7.90,11.17,均P<0.05);永城和淮滨地区中华按蚊抗性样本GST活性高于对照组的敏感品系(t=3.687,2.484,均P<0.05);淮滨、永城及桐柏三地的中华按蚊抗性样本和敏感品系的P450单加氧酶活性的差异均无统计学意义(t=-1.489,0.397,-0.413,均P>0.05).结论 永城、淮滨两个地区中华按蚊的溴氰菊酯抗性与酯酶和GST活性增高有关;桐柏地区中华按蚊的溴氰菊酯抗性与酯酶活性增高有关.

  • 微量滴定板法测定蚊虫非特异性酯酶检测抗药性的研究

    作者:李士根;蒋滨;甄天民;王凤刚;刘永春;孙传红;王怀位

    目的:探讨简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术.方法:以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用微量滴定板法测定实验室和现场单个淡色库蚊非特异性酯酶活力.结果:实验室5个品系淡色库蚊以抗DDVP品系非特异性酯酶活力水平高,其次为抗残杀威品系和抗DDVP降解品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近;3个现场淡色库蚊种群对DDVP抗性为4.15~9.36倍,对残杀威抗性为1.02~3.81倍,其非特异性酯酶活力水平均较高.结论:微量滴定板法测定非特异性酯酶能够检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平.方法简便快速,结果客观准确,可重复性强;可测出抗性频率,早期发现抗性的存在;可测知抗性机制,便于制订克服抗药性的对策.

  • 冰冻储存对淡色库蚊非特异性酯酶活性的影响

    作者:李士根;王霄;谭文彬;甄天民;全芯;高红刚;刘永春

    目的 探讨冰冻储存对淡色库蚊非特异性酯酶(non-specific esterase,NSE)活性的影响,为蚊虫抗药性生物化学检测方法 的推广应用提供依据.方法 以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定单个蚊虫NSE活性.结果 DDVP抗性品系淡色库蚊NSE活性水平明显高于敏感品系;经完全随机设计的方差分析比较,-20℃冰冻0、7、14、21、28 d的淡色库蚊NSE活性A值之间的差别,敏感品系4龄幼虫的F值为0.7642,该品系3日龄雌成虫的F值为0.7452,DDVP抗性品系4龄幼虫的F值为0.1092,该品系3日龄雌成虫的F值为0.1521,P值均>0.05,差异无统计学意义.结论 -20℃冰冻28 d对淡色库蚊4龄幼虫和3日龄雌成虫体内NSE活性无影响,可在现场采集蚊虫带回实验室集中测定.

  • 高效氯氰菊酯对德国小蠊乙酰胆碱酯酶和非特异性酯酶活性的影响

    作者:张丽;沈孝兵;刘晨星;周黛青

    目的:了解高效氯氰菊酯对德国小蠊乙酰胆碱酯酶和非特异性酯酶活性的影响,为探索抗性机制及抗药性生化检测方法提供理论依据. 方法:采用Groun改进的Ellman方法和Valles方法分别测定施用不同浓度高效氯氰菊酯后24 h和30 h德国小蠊乙酰胆碱酯酶的酶活性及施药后24 h后德国小蠊非特异性酯酶的活性.结果: 随着施药浓度增加,乙酰胆碱酯酶酶活性受抑制程度逐渐增加,施药浓度在0.002%以上各剂量组的乙酰胆碱酯酶酶活性与对照组相比,差异均有显著性.各施药组和对照组非特异性酯酶活性差异无显著性. 结论:乙酰胆碱酯酶是高效氯氰菊酯的主要靶标酶之一.

  • 血清胆碱酯酶活性的临床价值

    作者:马冬玲;李影波

    血清胆碱酯酶(SChE)是由肝细胞合成的一种非特异性酯酶,本文检测胆碱酯酶主要是指SChE而言,肝病时SChE活力降低主要由于肝细胞损害后此酶合成减少,以致血清中该酶的活力减少.故测定SChE的活力可反映肝细胞功能.但临床上主要用于估计肝脏的储备功能和肝病的预后.为探讨其临床价值,我们对各型肝病患者进行SChE活性检测,现将结果报告如下.

  • 微板法检测蚊虫体内非特异性酯酶活性研究

    作者:赵玉强;李士根;李文;甄天民;闫歌;王新国;孙传红;王怀位;刘凤梅

    目的探讨蚊虫抗药性敏感测试方法,方法采用微板法,对室内常规饲养的敏感品系和室内选育的DDVP、抗残杀威品系淡色库蚊非特异性酯酶的活性进行了测定.结果敏感品系蚊虫OD值≥0.9的占17.16%(35/204条);<0.9的占82.84%(169/204条);抗DDVP品系OD值≥0.9的占83.33%(200/240条);<0.9的占16.67%(40/240条);抗残杀威品系≥0.9的占74.89%(176/235条),<0.9的占25.11%(59/235条).结论敏感品系与抗性品系淡色库蚊的平均OD值存在较大差异.

  • 非特异性酯酶在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性发展中的作用

    作者:王新国;王怀位;李文;甄天民;孙传红;赵玉强;李士根

    目的探讨非特异性酯酶(Non-specific esterase)在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性发展中的作用.方法生物测试法,微滴定板法.结果 3个抗性品系随世代增加抗性增强NSE的活性各不相同,抗DDVP品系随世代增加抗性增高NSE活性而增强,其次为抗残杀威品系,抗氯氰菊酯品系则变化不明显,与敏感品系相接近.结论 NSE在淡色库蚊对有机磷杀虫剂的抗性中起重要作用,也是对氨基甲酸酯类杀虫剂产生抗性的机制之一,与拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性关系不大.

  • 非特异性酯酶在蚊虫不同种类和不同发育期的变化

    作者:李士根;甄天民;盛忠秋;赵玉强;王新国;孙传红

    目的研讨非特异性酯酶(Non-specific esterase,NSE)在蚊虫不同种类和不同发育期的变化,为应用生化方法检测蚊虫抗药性及科学合理地进行蚊虫化学防治提供依据.方法以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用微量滴定板法测定单个蚊虫NSE活力.结果显示4种敏感蚊虫的Ⅳ龄幼虫NSE活力有非常显著性差异(F=229.9842,P<0.01),3日龄雌成蚊NSE活力亦有非常显著性差异(F=37.1873,P<0.01);敏感品系和抗DDVP品系淡色库蚊NSE活力水平在不同发育期有变化,Ⅰ~Ⅲ龄幼虫较低,Ⅳ龄幼虫高,蛹期下降,成虫期较高,各发育期抗DDVP品系NSE活力均高于敏感品系.结论测定NSE检测蚊虫抗药性可选择Ⅳ龄幼虫或3日龄未吸血雌成蚊,不同种类蚊虫应分别制定判断标准;蚊虫化学防治应选择低龄幼虫施药.

  • 氦-氖激光对小鼠巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞内非特异性酯酶影响的图像分析研究

    作者:任明姬;王宇一;袁维中;郑红;马秀梅

    目的:探讨氦-氖(He-Ne)激光照射对机体免疫功能的影响。方法:将小鼠随机分成4组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ~ⅣV组为He-Ne激光照射的不同时间组,采用a-茶酚醋酸酯法显示非特异性酯酶,并用图像分析系统对小鼠腹腔巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞内非特异性酯酶作定量分析。结果:各照射组的三种免疫细胞内非特异性酯酶的各项指标均较对照组差异有非常显著性(P<0.01),各照射组之间比较,差异也均有非常显著性(P<0.01)。结论:He-Ne激光可激活三种免疫细胞,增强机体免疫力。

  • 非特异性酯酶与淡色库蚊抗药性关系的研究

    作者:李士根

    目的 探讨非特异性酯酶与淡色库蚊抗药性的关系,为应用生物化学方法检测蚊虫抗药性提供依据.方法 测定敏感(S)、抗DDVP(Rd)、抗残杀威(Rp)、抗氯氰菊酯(Rc)品系淡色库蚊及其恢复品系(Rd降解、Rp降解、Rc降解)淡色库蚊的抗药性水平和NSE活性水平.结果 Rd、Rp、Rd降解、Rp降解品系淡色库蚊的抗药性系数分别为12.17、11.21、6.10、8.38,其NSE活性OD值≥1.0的个体频率分别为95.10%、52.77%、57.33%、40.28%;Rc、Rc降解品系淡色库蚊的抗药性系数分别为534.31、83.26,而其NSE活性OD值≥1.0的个体频率分别为8.75%、8.33%,均与S品系的8.25%相近.结论 淡色库蚊对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性变化伴随其NSE活性的变化,而对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性变化不伴随其NSE活性的变化.测定NSE可用来判断蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性状况.

  • 植物精油熏杀致倦库蚊对酯酶活性的影响

    作者:杨频;潘沁红;马雅军

    目的为揭示植物精油熏杀蚊虫的作用机制.方法用微量滴定板法测定了乙酰胆碱酯酶和非特异性酯酶活性在5种植物精油作用下的变化.结果芸香科植物精油、留兰香油和香茅油处理的致倦库蚊,其乙酰胆碱酯酶活性升高,增长率分别为12.85%,24.68%,23.50%,菊科植物精油和椒样薄荷油处理的蚊虫,其乙酰胆碱酯酶活性降低,分别降低了4.01%和5.92%.结论乙酰胆碱酯酶是留兰香油和香茅油的重要靶标酶,非特异性酯酶是芸香科植物精油、留兰香油、香茅油和椒样薄荷油的重要靶标酶.

  • DDVP和残杀威对淡色库蚊非特异性酯酶及乙酰胆碱酯酶作用的研究

    作者:李士根;公茂庆;秦剑中;赵玉强;王新国;刘永春;王凤刚;甄天民

    目的:研讨DDVP和残杀威对淡色库蚊非特异性酯酶(NSE)及乙酰胆碱酯酶(AChE)的作用,完善蚊虫抗药性的生物化学检测方法;方法:用微量滴定板法测定单个蚊虫NSE和AChE活力;结果:DDVP和残杀威可抑制活体淡色库蚊NSE活力,处理72 h后NSE活力基本恢复到处理前水平,DDVP对NSE的抑制作用大于残杀威;抗DDVP品系和抗残杀威品系淡色库蚊AChE对DDVP和残杀威的敏感性均较敏感品系降低,抗残杀威品系AChE不敏感性较抗DDVP品系强,残杀威对淡色库蚊AChE的抑制作用大于DDVP;结论:测定NSE检测蚊虫抗药性时,若虫已用有机磷或氨基甲酸酯类杀虫剂处理,应在处理72 h后测定,测定AChE不敏感性检测蚊虫抗药性时,可选用残杀威作为抑制剂.

  • 不同品系及不同性别淡色库蚊非特异性酯酶活性比较

    作者:李士根

    目的 探讨不同品系及不同性别淡色库蚊非特异性酯酶(NSE)活性的差异,为应用生物化学方法检测蚊虫抗药性提供依据.方法 以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定单个蚊虫NSE活性.结果 抗敌敌畏(Rd)和抗残杀威(Rp)品系淡色库蚊NSE活性水平明显高于敏感(S)品系,抗氯氰菊酯(Rc)品系淡色库蚊NSE活性水平与S品系相近.S、Rd、Rp、Rc 4种品系淡色库蚊3日龄雌雄成虫NSE活性均为雌性大于雄性.结论 测定NSE活性可判断蚊虫抗药性状况,不同性别蚊虫应分别制定判断标准.

  • 微板法测定淡色库蚊体内非特异性酯酶检测其对杀虫剂抗性的研究

    作者:李士根;蒋滨;秦建中;马玉玲;孙传红;郭永和;甄天民

    目的探讨简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术.方法以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用微板法测定实验室和现场单个淡色库蚊体内非特异性酯酶活力.结果实验室五个品系淡色库蚊以抗DDVP品系非特异性酯酶活力水平高,其次为抗残杀威品系和抗DDVP降解品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近;三个现场淡色库蚊种群对DDVP抗性为4.15~9.36倍,对残杀威抗性为1.02~3.81倍,其非特异性酯酶活力水平均较高.结论微板法测定非特异性酯酶能够检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平.方法简便快速,结果客观准确,可重复性强;可测出抗性频率,早期发现抗性的存在;可测知抗性机制,便于制订抗药性克服对策.

  • 抗DDVP和敏感淡色库蚊不同发育期非特异性酯酶活力变化的研究

    作者:李士根;赵玉强;王新国;盛忠秋;孙传红;王凤刚;甄天民

    目的研讨非特异性酯酶(Non-specific esterase,NSE)活力在抗DDVP和敏感品系淡色库蚊不同发育期的变化,为应用生物化学方法检测蚊虫抗药性及科学合理地进行蚊虫化学防治提供依据.方法以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用微量滴定板法测定单个蚊虫NSE活力.结果敏感品系和抗DDVP品系淡色库蚊NSE活力水平在不同发育期有变化, Ⅰ~Ⅲ龄幼虫较低,Ⅳ龄幼虫高,蛹期略下降,成虫期较高.各发育期抗DDVP品系NSE活力均高于敏感品系,Ⅳ龄幼虫和成虫期二者差别明显.结论测定NSE检测蚊虫抗药性可选择Ⅳ龄幼虫或3日龄未吸血雌成蚊;蚊虫化学防治中应选择低龄幼虫期施药.

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