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垂体腺苷酸环化酶激活肽与生殖
垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)属于胰泌素/胰高血糖素/血管活性肠肽(VIP)家族,广泛分布于中枢神经系统及多种外周组织.PACAP在多种动物生殖系统中都有表达,对动物生殖功能有重要的影响.本文就PACAP对动物生殖功能的作用做一简要综述.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 动物 生殖 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽及其受体研究现状
垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)属于胰液素家族.广泛分布于中枢及肠神经系统,本文主要论述了PACAP及其受体国内外研究的新进展,包括命名、机理、分类及基因定位,临床价值等.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 受体 促胰液素 -
银屑病皮损中PACAP的定量病理研究
定量研究垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)在银屑病发病中的作用.方法采用免疫组织化学及图像分析的方法定研究银屑病患者皮损及非皮损部位PACAP 的原位表达情况. 定量结果表明银屑病患者皮损部位的PACAP 原位表达明显低于非皮损部位,表现为皮损组的PACAP的面积密度及平均光密度值显著低于正常人对照组(p《0.01),与正常人相比,非皮损部位PACAP 的原位表达也呈下调表达,即非皮损组的PACAP的面积密度及平均光密度值明显低于正常人对照组(p《0.05). 结论: PACAP在银屑病皮损中的异常下调表达,提示PACAP可能与银屑病表皮细胞的过度增殖有关.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 银屑病 免疫组织化学 图像分析 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽对血管内皮保护作用的扫描电镜观察
目的:借助扫描电镜观察,探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(ASACAP)保护血管内皮的形态学证据.方法:雄性新西兰家兔60只,随机等分为动脉粥样硬化模型组(AS组)和PACAP干预组(P组).于实验的第0、2、4、8、12周采集兔血清,测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG);于第0、4、8、12周处死每组兔各5～6只,取其主动脉,观察血管内膜面及内皮形态的改变.结果:2周时,两组兔血脂均已显著升高;至12周时,P组的Tc、TG均显著低于同期AS组水平(P<0.05).扫描电镜观察发现,随高脂血症的出现,As组兔血管内膜出现损伤,且程度逐渐加重.早期可见明显的白细胞黏附,及内皮细胞的变形、隆起,接着可见内皮细胞破损、脱落,形成内膜面的"溃疡样"缺损.P组出现类似上述变化的时间较AS组晚,且病变的程度较同期As组为轻.结论:PACAP可延缓并减轻高脂血症对内皮造成的形态损伤,具有明显的内皮形态保护作用.
关键词： 内皮 血管 垂体腺苷酸环化酶激活肽 保护作用 扫描电镜 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺血-再灌注大鼠核因子κB和肿瘤坏死因子α表达的影响
目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对局灶性脑缺血 - 再灌注大鼠的脑保护作用及对核因子κB p65(NF-κB p65)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响. 方法 取健康雄性SD 大鼠72只,采用随机数字法分为假手术组、缺血 - 再灌注组、PACAP组,每组大鼠24只,每组再分为再灌注12 h和24 h组,每时间点12只大鼠.采用线栓法建立大脑中动脉缺血模型,于缺血后2 h进行再灌注.PACAP 组于再灌注30 min内,由尾静脉注射(5×10-7)%的PACAP,(5×10-9)g/kg,假手术组和缺血 - 再灌注组,用等体积(0.1 ml/kg)的等渗盐水代替PACAP.再灌注12、24 h取脑,光镜下观察脑组织的结构;并采用Western印迹法检测 NF-κB p65的表达,免疫组化法检测TNF-α的表达. 结果 ①PACAP组大鼠光镜下脑组织细胞损伤程度与缺血 - 再灌注组相比明显减轻.② PACAP组再灌注12、24 h,TNF-α阳性细胞的表达分别为(20.0±2.5)、(30.7±1.3)个/高倍视野,缺血 - 再灌注组分别为(40.8±3.7)、(60.7±3.5)个/高倍视野,与假手术组的(2.8±0.8)、(3.0±0.7)个/高倍视野的表达比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),缺血 - 再灌注组与PACAP组比较,差异亦有统计学意义(P＜0.01).③再灌注12和24 h, PACAP组NF-κB p65表达的灰度值为57±7、49±8,缺血 - 再灌注组为90±14、74±10,与假手术组的41±17、41±10比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),缺血 - 再灌注组与PACAP组比较差异亦有统计学意义(P＜0.01). 结论 PACAP能抑制大鼠局灶性脑缺血 - 再灌注后TNF-α、NF-κB p65的表达,这可能是其脑保护作用机制之一.
关键词： 脑缺血 再灌注损伤 垂体腺苷酸环化酶激活肽 NF-κB 肿瘤坏死因子α -
垂体腺苷酸环化酶激活肽27治疗帕金森病小鼠的实验研究
目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽27(PACAP27)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠是否具有治疗作用.方法 静脉给予神经肽PACAP27对MPTP诱导的PD小鼠模型进行治疗,采用免疫组织化学及蛋白印迹分析方法对PD标志物酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运体(DAT)、囊泡单胺转运体2(VMAT2)进行检测,并用高效液相色谱(HPLC)检测纹状体单胺类递质.结果 神经肽PACAP可明显减少黑质TH阳性细胞的损失,以PACAP(0.02 μg/d)治疗组为明显(93.33±4.87,F=85.58,P＜0.01).生理盐水(NS)治疗组较正常对照组纹状体TH、DAT、VMAT的表达明显降低,而PACAP治疗组较NS治疗组TH表达明显增多,以PACAP治疗组(0.02 μg/d)增高为明显(136.34±8.45,F=113.88,P＜0.01);而DAT和VMAT2在PACAP治疗组中则呈现了多种变化趋势.HPLC检测发现PACAP治疗组(0.02 μg/d)多巴胺(DA)代谢产物二羟苯乙酸(DOPAC)含量较NS治疗组明显升高(1590.7±473.3,F=375.71,P＜0.01),与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 静脉注射PACAP27可对MPTP诱导的PD小鼠模型产生明显的治疗作用,而这种治疗作用可能与单胺类递质转运体DAT、VMAT2的表达高低无明显直接关系.
关键词： 帕金森病 垂体腺苷酸环化酶激活肽 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻谷氨酸引起的大鼠海马神经元细胞内钙离子浓度升高的可能机理
目的探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽-38(PACAP-38)稳定海马神经元细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)作用的可能机理.方法取新生SD大鼠海马,用B27无血清培养基培养神经元;经Fura-2/AM标记后,共聚焦显微镜下测定[Ca2+]i.结果 PACAP-38(10 pmol*L-1)能抑制谷氨酸(500 μmol*L-1)所致海马神经元[Ca2+]i升高,而Rp型硫化环腺苷酸(20 μmol*L-1)或氯化白屈菜赤碱(0.1 μmol*L-1)能阻断PACAP-38的抑制作用.二丁基环腺苷酸(0.1～100 μmol*L-1)和豆寇酰佛波醇乙酯 (0.01～10μmol*L-1) 也能抑制谷氨酸引起的海马神经元[Ca2+]i升高.结论 PACAP-38减轻谷氨酸引起的海马神经元[Ca2+]i升高可能与激活细胞内蛋白激酶A和蛋白激酶C信号转导系统有关.
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垂体腺苷酸环化酶激活肽的生物学效应及其与偏头痛之间的相关性
垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide, PACAP)是由ADCYAP1基因编码的,属于血管活性肠肽(VIP)-胰高血糖素-促胰液素家族。PACAP由ADCYAP1基因编码,形成一个包含175个氨基酸的前肽。经过剪切, PACAP表达为两种形式的蛋白,分别是由27个氨基酸组成的PACAP-27和由38个氨基酸组成的PACAP-38。初, PACAP是Miyata等［1］人在1989年从羊下丘脑中发现的一种神经肽。PACAP广泛分布于中枢神经系统和外周组织器官中,其中下丘脑中的含量高,在哺乳动物中, PACAP主要是以PACAP-38的形式存在,而PACAP-27的含量极低。PACAP的生物学功能十分广泛,本文旨在综述PACAP在各系统中的基本功能,并着重介绍PACAP与头痛之间的相关性。
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 血管活性肠肽 生物学效应 偏头痛 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻大鼠缺血性脑水肿作用的实验研究
目的:研究垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)在缺血性脑水肿中的作用及其可能的受体机制.方法:采用大鼠四动脉结扎脑缺血模型,分别运用干湿重法和酶学法测定脑组织含水量及Na+、K+含量.结果:大鼠四动脉结扎脑缺血30in,再灌流1 h,脑组织含水量明显增加,a+含量增高,而K+含量降低.缺血前经测脑室分别给予1×10-9 mol、1×1110mol及1×11-11 mol的PACAP均能抑制脑组织含水量、Na+含量的增加和K+含量的降低.特异性PACAPⅠ型受体拮抗剂PACAP6-38能完全阻断PACAP的上述作用,而单纯给予PACAP6-38对脑缺血后脑组织含水量、Na+、K+含量无显著影响.结论:外源性PACAP对缺血性脑水肿具有保护作用,该作用是由I型受体介导的.
关键词： 脑缺血 脑水肿 垂体腺苷酸环化酶激活肽 大鼠 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽与2型糖尿病
垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)是一种广泛分布于包括胰岛细胞在内的全身各个组织的神经肽,作为副交感和感觉神经递质发挥作用.PACAP刺激胰岛素的分泌是一种葡萄糖依赖性的,这一作用主要通过增加cAMP的形成和刺激钙的摄取来完成.大量动物实验表明,PACAP在调节胰岛素对摄食的反应具有重要的生理作用,与2型糖尿病的发生密切相关,其受体选择性激动剂对2型糖尿病具有潜在的治疗作用.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 胰岛素 2型糖尿病 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽与支气管哮喘
支气管哮喘(简称哮喘)是儿童常见的慢性疾病之一,对儿童的健康造成很大威胁.气道慢性炎症、气道高反应性及气道重塑是哮喘的基本特征.大量的研究发现垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)具有多种生物学活性,参与免疫调节、炎症反应、呼吸节律、氧化应激等.明确PACAP在哮喘中的发病机制,有望成为哮喘药物研究的新方法和新策略.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 哮喘 -
大鼠急性脊髓损伤后内源性垂体腺苷酸环化酶激活肽表达的变化
目的:观察大鼠脊髓损伤后垂体腺苷酸环化酶激活肽表达的变化,分析其在脊髓损伤中的意义,为进一步探索脊髓损伤后的再生修复机制和神经营养因子治疗脊髓损伤提供实验依据.方法:实验于2005-10/2006-09在汕头大学医学院生殖医学研究中心完成.①实验分组:选择清洁级健康成年雌性SD大鼠66只,随机抽签法分为损伤后1,3,7,14,28 d组以及正常对照组,每组11只.②实验方法:改良的NYU装置制备脊髓损伤模型,对照组不做手术.损伤后1,3,7,14,28 d麻醉取材.逆转录-聚合酶链反应扩增垂体腺苷酸环化酶激活肽.③实验评估:采用苏木精-伊红染色观察脊髓损伤后的病理变化,免疫组织化学检测阳性细胞计数,逆转录-聚合酶链反应及蛋白免疫印迹方法检测脊髓组织中垂体腺苷酸环化酶激活肽蛋白及mRNA的表达情况.结果:纳入66只大鼠,均进入结果分析.①在蛋白和mRNA水平垂体腺苷酸环化酶激活肽表达呈时间相关性,正常对照组可见垂体腺苷酸环化酶激活肽mRNA和蛋白的少量表达,脊髓损伤后1 d表达开始增加,7 d时表达明显增加,与3 d时比较差异有显著性意义(P＜0.05).②苏木精-伊红染色结果可见脊髓灰质出血水肿坏死,神经细胞变性死亡,免疫组织化学显示正常对照组神经元中有垂体腺苷酸环化酶激活肽阳性表达,损伤后垂体腺苷酸环化酶激活肽的表达逐渐增高,损伤7 d时垂体腺苷酸环化酶激活肽表达明显增加(P＜0.05),至28 d时表达仍较高.结论:损伤后垂体腺苷酸环化酶激活肽表达增加,内源性垂体腺苷酸环化酶激活肽的增加可能有利于受损脊髓神经元的存活与再生.
关键词： 脊髓损伤 垂体腺苷酸环化酶激活肽 组织构建 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽对缺血性脑损伤的保护作用
垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)是一种新发现的神经肽,具有多种生物学活性.近年来PACAP的神经保护和神经营养作用越来越引起人们的注意.在缺血性脑损伤中,它能减少兴奋性氨基酸的释放,清除自由基,抑制炎性细胞趋化及神经元和小脑颗粒细胞的凋亡等,且PACAP相对分子质量小,能完全通过血脑屏障,为临床治疗缺血性脑损伤提供新的途径.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 缺血性脑损伤 脑保护 -
PACAP对谷氨酸引起海马神经元损伤的保护作用
目的研究垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对谷氨酸引起的海马神经元损伤的保护作用及其受体机制.方法海马神经元体外培养7d,给予谷氨酸.结果当谷氨酸是0.1～1.0mmol/L时,随着剂量的增加,神经元的存活率逐渐降低;10-9mol/L～10-13mol/L的PACAP,能减轻谷氨酸引起的海马神经元损伤;PACAP Ⅰ型受体特异性拮抗剂PACAP6-38能抑制PACAP减轻谷氨酸对海马神经元损伤作用.结论 PACAP具有减轻谷氨酸引起的海马神经元损伤的作用,该作用是由PACAPⅠ型受体介导的.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 谷氨酸 海马 神经元 受体 -
二丁酰环腺苷酸对大鼠内囊出血并应激性胃溃疡血浆胃组织中垂体腺苷酸环化酶激活肽血管活肽血管活性肠肽的影响及意义
目的 探讨二丁酰环腺苷酸对大鼠内囊出血并应激性胃溃疡的治疗作用及机制.方法 用RIA方法测定内囊出血及二丁酰环腺苷酸治疗后血浆及胃组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽含量的变化.结果 内囊出血时血浆垂体腺苷酸环化酶激活肽含量明显高于对照组(P＜0.01),胃组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽含量明显低于对照组(P＜0.01);而二丁酰环腺苷酸治疗后血浆垂体腺苷酸环化酶激活肽含量明显低于出血组(P＜0.01),胃组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽含量明显高于出血组(P＜0.01).结论 血浆及胃组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽可能是参与内囊出血后的应激性胃溃疡过程中的一个重要因素,二丁酰环腺苷酸对大鼠内囊出血并应激性胃溃疡有重要治疗作用.
关键词： 二丁酰环腺苷酸 脑出血 内囊 血浆 垂体腺苷酸环化酶激活肽 血管活性肠肽 胃溃疡 应激 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻一氧化氮介导的谷氨酸神经毒作用
研究垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)是否通过作用于一氧化氮(NO)代谢途径,减轻谷氨酸的神经毒作用.取新生SD大鼠海马,用B27无血清培养基培养神经元;重氮化反应法测定NO浓度,MTT法测定神经元存活率,PACAP能减少谷氨酸引起的海马神经元死亡;谷氨酸呈剂量依赖性地增加海马神经元培养液中NO的含量,PACAP能不同程度地减少NO的含量;分别给予2 mmol/L L-Arg,100 靘ol/L SNP和 200 靘ol/L SNAP处理后,海马神经元存活率明显下降,给予不同浓度的PACAP (10-9,10－11,10-13 mol/L)能增加神经元的存活率.上述结果提示,PACAP通过抑制NO释放及其神经毒作用,减轻谷氨酸引起的海马神经元损害.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 一氧化氮 神经元 原代培养 谷氨酸 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻谷氨酸对海马神经元的损伤并抑制胞内钙升高
对原代培养7～9 d的海马神经元给予谷氨酸处理, 24 h后, 神经元的存活率降低.预先给予垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)能显著减少谷氨酸引起的海马神经元死亡.谷氨酸呈剂量依赖性增加海马神经元细胞内钙离子含量, PACAP能抑制谷氨酸引起的海马神经元细胞内钙离子浓度的升高, 特异性PACAP Ⅰ型受体拮抗剂PACAP 6-38能完全阻断PACAP减轻谷氨酸所致海马神经元损伤及降低谷氨酸所致神经元细胞内钙离子浓度升高的作用. 提示PACAP能减轻谷氨酸引起的培养海马神经元的损伤, 该作用与PACAP抑制谷氨酸引起的海马神经元细胞内钙离子浓度升高有关, 是由PACAP Ⅰ型受体介导的.
关键词： 谷氨酸 垂体腺苷酸环化酶激活肽 神经元 -
垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺氧缺血新生大鼠胱冬酶-3和X-连锁凋亡抑制蛋白表达的影响
目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase activating peptide,PACAP)对脑缺氧缺血(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠胱冬酶-3和x-连锁凋亡抑制蛋白(x-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)的影响,探讨其脑保护作用和有效剂量.方法 60只新生大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组以及PACAP大剂量组(10-8 mol)、中等剂量组(10-9 mol)和小剂量组(10-8 mol),建立HIBD动物模型.应用实时荧光定量聚合酶链反应法榆测新生大鼠HIBD后24 h损伤侧脑组织的胱冬酶-3 mRNA和XIAP mRNA表达情况,应用分光光度法检测胱冬酶-3活性.结果 在HIBD后24 h,生理盐水对照组胱冬酶-3 mRNA表达和酶活性以及XIAP mRNA表达均显著高于假手术组(P均<0.01);PACAP各剂量组胱冬酶-3 mRNA表达和酶活性均显著低于生理盐水对照组(P均<0.01),而XIAP mRNA表达均显著高于牛理盐水对照组(P均<0.01).结论 PACAP能上调XIAP mRNA表达,抑制胱冬酶-3 mRNA表达和酶活性,对新生大鼠HIBD具有保护作用,而且在大剂量、中等剂量和小剂量时均有效.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 缺氧缺血 脑 大鼠 X-连锁凋亡抑制蛋白 胱冬酶-3 -
银屑病皮损及非皮损中垂体腺苷酸环化酶激活肽及其受体的研究
目的探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)及其受体(PACAP-R)在银屑病发病中的意义.方法采用免疫组化的方法研究寻常性银屑病患者皮损及非皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达情况.结果银屑病患者皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达均明显低于非皮损部位,表现为皮损组PACAP及PACAP-R的面积密度及平均吸光度值显著低于正常人对照组(均为P＜0.01);与正常人相比,非皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达也呈下调表达,即非皮损组的PACAP及PACAP-R的面积密度及平均吸光度值明显低于正常人对照组(P＜0.05).结论 PACAP及PACAP-R在银屑病皮损中下调表达,提示PACAP可能与银屑病表皮细胞的过度增殖有关.
关键词： 银屑病 垂体腺苷酸环化酶激活肽 -
PACAP衍生多肽RDB的高效制备及其改善胰岛素抵抗作用的初步研究
为了制备垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)衍生多肽RDB并初步研究其改善脂肪细胞胰岛素抵抗的作用,利用基因工程技术,选用大肠杆菌偏爱密码子,以重叠延伸PCR方法合成RDB基因序列,定向插入到高效表达载体pKYB-MCS中,用大肠杆菌ER2566进行表达,融合蛋白经Chitin-Beads柱纯化后,利用β-巯基乙醇诱导蛋白内含肽的N端自剪切,释放目的肽,再用HPLC制备纯度较高的PACAP衍生多肽RDB,实现RDB的高效制备；利用制备的重组肽RDB研究其对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的改善作用及初步机制.制备的重组肽RDB的Mr为3.990 k,纯度大于95％,其产率为17.3 mg/L发酵产物；制备的RDB可明显促进胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖利用及信号分子IRS-1的表达.结果表明在确立的优化条件下可高效制备纯度较高的PACAP衍生多肽RDB(纯度≥95％),RDB能改善胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的胰岛素敏感性,其作用机制与胰岛素信号通路相关蛋白的表达有关.
关键词： 垂体腺苷酸环化酶激活肽 基因工程 3T3-L1细胞 胰岛素抵抗 重组衍生物
