首页 > 文献资料
-
怀牛膝对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制研究
目的:研究怀牛膝对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制.方法:将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、怀牛膝高剂量组、怀牛膝中剂量组和怀牛膝低剂量组5组. 灌胃治疗12周后,观察肾功能、尿蛋白、肾脏病理变化;以RT-PCR检测p53和mdm2基因mRNA表达;以琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡.结果:怀牛膝能显著改善肾脏功能,明显降低肾组织细胞凋亡,且可下调p53基因表达、上调mdm2基因表达.结论:怀牛膝可能通过抑制细胞凋亡而发挥保护糖尿病大鼠肾脏功能的作用.
-
MDM2在食管鳞癌中的表达及其意义
目的 探讨MDM2蛋白在食管鳞癌中的表达及其意义.方法 采用免疫组化SP法分别对49例食管鳞癌组织、30例癌旁非典型增生组织及49例正常黏膜组织中MDM2蛋白的表达进行检测.结果 正常食管黏膜组织MDM2蛋白阳性表达率为30.61%(15/49),非典型增生组织MDM2蛋白阳性表达率为60.33%(19/30),食管鳞癌组织中MDM2蛋白阳性表达率为87.76%(43/49);三者两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MDM2蛋白表达与食管鳞癌的发生发展有关.
-
p53和鼠双微粒体2在肾母细胞瘤中的表达
目的 探讨p53和鼠双微粒体2(murine double minute 2,MDM2)在肾母细胞瘤中的表达,以及其在疾病发生、发展中的作用.方法 36例肾母细胞瘤患者的手术组织标本36份为肾母细胞瘤组,以相应瘤旁正常肾组织标本12份为对照组.采用免疫组织化学EliVision法检测2组P53蛋白和MDM2蛋白表达情况;比较不同临床分期、预后、病理类型肾母细胞瘤P53和MDM2蛋白表达差异,分析MDM2与p53的相关性.结果 肾母细胞瘤组P53蛋白阳性表达率(30.6％)及MDM2蛋白阳性表达率(41.7％)高于对照组(0、8.3％)(P＜0.05);预后良好型肾母细胞瘤P53蛋白和MDM2蛋白阳性率分别为15.4％、23.1％,低于预后不良型(70.0％、90.0％) (P＜0.05);P53和MDM2蛋白在临床Ⅰ期、Ⅱ期肾母细胞瘤及4个不同组织学分型肾母细胞瘤的表达差异无统计学意义(P＞0.05);肾母细胞瘤中MDM2蛋白与P53蛋白表达呈正相关(c=0.663,P=0.000).结论 P53蛋白及MDM2蛋白阳性表达可用于判断肾母细胞瘤细胞分化程度,但不能作为临床分期的参考指标;p53和MDM2阳性表达与肾母细胞瘤的发生、发展有关.
-
mdm2基因在肾母细胞瘤中的表达及其与临床病理因素的关系
目的探讨mdm2基因在小儿肾母细胞瘤中的表达及其与临床病理因素的关系.方法应用免疫组织化学技术检测24例肾母细胞瘤中的mdm2表达水平,分析mdm2与临床病理因素的关系.结果在24例肾母细胞瘤中mdm2的表达水平与淋巴结转移、临床分期及分化程度呈明显相关性(P＜0.05).结论mdm2基因高表达是肾母细胞瘤转移中的重要的分子生物学事件,检测肾母细胞瘤mdm2的表达情况对评估患儿的预后可能具有重要意义.
-
紫外线照射对乳腺癌细胞NFkB、p53和MDM2的影响
目的了解NFkB家族蛋白在乳腺癌细胞系的表达及紫外线照射后所引起的变化.方法用L-15培养液培养并传代9个乳腺癌细胞系,收获细胞,对其进行胞浆、胞核蛋白质提取,Western印迹法观察NFkB家族蛋白及其抑制物的表达;采用20 J/m2剂量紫外线照射细胞,继续培养细胞并提取蛋白质进行检测.结果9个乳腺癌细胞系p50、p65和IkB-α胞浆表达阳性率分别为:88.9%、55.6%、77.8%,胞核表达阳性率分别为:66.7%、44.4%、22.2%.紫外线照射后胞核p50、p65和IkB-α阳性率分别为:100%、100%、33.3%.p53在乳腺癌细胞表达阳性率为44.4%,MDM2表达阳性率为33.3%,紫外线照射后p53和MDM2表达阳性率分别为:66.7%、77.8%.结论NFkB、p53和MDM2与乳腺癌细胞的发生、发展有关.紫外线照射可引起胞核NFkB及细胞MDM2阳性率明显提高,NFkB和MDM2可望成为判断乳腺癌预后新的标志物.
-
p53和MDM2在3种RP小鼠视网膜中的表达
目的了解凋亡相关基因p53和MDM2与视网膜色素变性(retinitis pigmentosa, RP)发病的关系.方法以RP模式动物rds小鼠、rd小鼠、C3H小鼠及正常对照C3B小鼠为材料,提取不同发病时间(出生后7、12、17、23、29、37和50d)视网膜的总RNA,以β-actin和L19 核糖体蛋白基因为内对照,RT-PCR分析小鼠发病过程中视网膜p53和MDM2的表达.结果在C3B小鼠视网膜中,p53和MDM2的表达完全同步.出生后7d,高表达;7～12d期间,表达量迅速下降;12～50d期间,表达水平低,但基本稳定.p53和MDM2在rds小鼠的表达水平低,但基本上是同步、稳定表达.在rd小鼠中,p53的表达变化不大,但MDM2的表达则与p53不同步,类似于C3B小鼠MDM2的表达.在C3H小鼠的视网膜,p53和MDM2的表达也不同步.7～23d期间,p53的表达基本稳定;自23d后逐步下降,其中23～29d期间,p53的表达下降快.而MDM2的表达总体变化不大.结论在这3种RP模式动物中,虽然凋亡相关基因p53和MDM2存在着表达差异,但其发病过程中视网膜细胞的变性死亡可能是通过p53非依赖型途径进行的.
-
苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脊髓中P53、MDM2及IL-17表达的影响
目的:观察苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脊髓中P53、MDM2及IL-17表达的影响.方法:将45只C57BL/6雌性小鼠随机分3组,分别为正常组、模型组、治疗组,每组15只.模型组和治疗组用MOG35-55免疫诱导建立慢性EAE模型,治疗组于免疫后第13天起腹腔注射苦参素200 mg/kg,1次/d,连用10 d.采用HE和勒克斯光蓝(LFB)染色观察3组小鼠脊髓组织病理学变化,采用免疫荧光组化染色法检测脊髓组织中P53和MDM2蛋白的表达,采用ELISA法测定脊髓匀浆中IL-17的表达.结果:与模型组相比,苦参素治疗组小鼠EAE发病时间推迟,神经功能评分降低(P<0.05),小鼠脊髓组织中炎症浸润和脱髓鞘评分降低(P<0.05),P53蛋白表达增加(P<0.01),而MDM2与IL-17的表达降低(P<0.01).小鼠脊髓组织中P53与IL-17表达呈负相关(r=-0.665,P<0.05).结论:苦参素可能通过调节P53/MDM2的表达,控制致炎因子的表达,从而对EAE起到一定的治疗作用.
-
肺癌组织中MDM2、P53蛋白的表达
目的:观察肺癌组织中MDM2、P53蛋白的表达及其相互关系.方法:用Western blot方法,检测31例肺癌组织及相应21例癌旁3 cm组织和12例癌旁5 cm组织中MDM2、P53蛋白的表达.结果:①肺癌组织中MDM2、P53表达量高于癌旁组织.②肺癌组织中MDM2与P53表达量之间呈正相关(r=0.432,P＜0.05).③肺鳞癌组织中MDM2、P53蛋白增高表达率分别为77.3%(17/22)和72.7%(16/22);肺腺癌组织中2者增高表达率均为100%(7/7),1例小细胞肺癌和1例大细胞肺癌组织中MDM2蛋白表达均降低,而P53蛋白表达均增高.结论:MDM2过量表达可能是肺癌发生的一个重要标志,在肺癌的发生发展过程中可能有重要作用.
-
食管贲门双源癌患者癌组织中mdm2,CyclinD1和p16蛋白的表达
目的:探讨食管贲门双源癌组织中mdm2、CyclinD1和p16蛋白的表达.方法:采用免疫组化ABC法,对河南食管癌高发区30例双源癌患者食管鳞癌(SCC)和贲门腺癌(GCA)组织中mdm2、CyclinD1和p16蛋白的表达进行检测.结果:30例双源癌患者SCC组织中mdm2、CyclinD1和p16蛋白阳性率分别为57%(17/30)、45%(13/29)和24%(7/29),CCA组织中分别为73%(22/30)、33%(10/30)和17%(5/30),SCC和GCA组织中3种蛋白的阳性率差异均无统计学意义(P均＞0.05).SCC和GCA组织中mdm2、CyclinD1和p16蛋白表达的一致性差异无统计学意义(P均＞0.05).结论:食管和贲门双源癌存在较高的mdm2、CyclinD1和p16蛋白表达一致性改变,提示河南食管癌高发区食管贲门双源癌可能具有相似的发病因素和分子机制.
-
食管癌前病变和癌组织中p15、p16、mdm2和p53蛋白的表达
目的:探讨食管癌高发区河南林州市食管癌患者p15、p16、mdm2和p53的表达变化特征及其与各级病变的关系.方法:取食管癌高发区河南林州市居民156例的食管内镜黏膜活检组织(包括正常食管上皮(NOR)21例,基底细胞过度增生(BCH)45例,不典型增生(DYS)23例,原位癌组织(CIS)45例和鳞状细胞癌(SCC)22例),采用免疫组化ABC法分析p15、p16、mdm2和p53蛋白的表达情况.结果:NOR和各级癌前病变组织及SCC组织中均出现不同程度的p15、p16、mdm2和p53表达.随着病变发展(从NOR→BCH→DYS→CIS→SCC),p15和p16的表达逐渐降低,mdm2和p53的表达逐渐增高(P＜0.05).结论:p15、p16的低表达和p53、mdm2的高表达可能是导致病变持续向癌方向发生发展的机制之一.
-
MDM2基因多态性与鲁西南汉族人群食管鳞状细胞癌风险性关联研究
目的 研究MDM2基因多态性在鲁西南汉族人群中的分布并分析其与食管鳞状细胞癌的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析检测132例食管鳞状细胞癌患者(病例组)和132例健康人群(对照组)MDM2 SNP309的基因多态性,并比较不同基因型与食管鳞状细胞癌发病风险的关系.结果 MDM2 SNP309位点在鲁西南汉族群体中的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律.对照组和病例组MDM2 SNP309基因座位上突变等位基因频率分别为37.50％和45.45％,差别无统计学意义(P＞0.05)；SNP309基因座中突变等位基因G的纯合子G/G基因型频率分别为10.61％和18.94％,差别具有统计学意义(P＜0.05)；MDM2 SNP309的G/G基因型可增加食管鳞状细胞癌的发病风险(OR=2.27；95％CI:1.04～4.97).结论 MDM2基因SNP309位点的G/G基因型可能与鲁西南地区食管鳞状细胞癌的发病风险增高具有相关性.
-
Pokemon及mdm2蛋白在胆囊癌组织中的表达及其意义
目的 探讨Pokemon及mdm2蛋白与胆囊癌的发生、发展的关系及其临床意义.方法 采用免疫组织化学S-P法检测40例胆囊癌、12例胆囊腺瘤、20例胆囊息肉及20例胆囊炎组织中Pokemon和mdm2蛋白的表达水平,分析其与胆囊癌临床病理学特征的关系,以及Pokemon和mdm2蛋白在组织中表达的相关性.结果 在检测的胆囊癌、胆囊腺瘤、胆囊息肉及胆囊炎组织中Pokemon蛋白的阳性表达率分别为60.0％、25.0％、30.0％、25.0％,mdm2 蛋白的阳性表达率分别为57.5％、16.7％、35.0％、30.0％,胆囊癌组织中Pokemon及mdm2蛋白的阳性表达率高于其他组,差异有统计学意义(P＜ 0.05)；Pokemon及mdm2蛋白的表达与肿瘤的病理学分级及Nevin分期相关(P＜0.05),与患者性别、年龄、肿瘤组织学类型及是否合并结石无关(P＞0.05).Poketnon蛋白的表达与mdm2蛋白的表达呈正相关(r=0.434,p＜0.05).结论 Pokemon蛋白和mdm2蛋白可能共同参与了胆囊癌的发生、发展和转移的过程,Pokemon基因有望成为胆囊癌治疗的一个有效的靶基因,从而为胆囊癌的治疗开辟新的途径.
-
儿童急性淋巴细胞白血病细胞系Eu-4细胞凋亡机制的研究
目的:观察MDM2对白血病细胞凋亡及阿霉素治疗的影响. 方法:将MDM2转染入P53阴性的儿童急性淋巴细胞白血病细胞系Eu-4细胞,用MTT法检测转染前后白血病细胞对阿霉素(ADM)的反应,并用流式细胞术检测转染前后白血病细胞凋亡的变化.结果:稳定转染MDM2的Eu-4细胞表现出对ADM的耐药,细胞凋亡率的测定也表明MDM2转染后Eu-4细胞凋亡率减少,差异有显著意义(P＜0.01),MDM2的转染抑制了白血病细胞凋亡(P＜0.01).结论:在儿童白血病细胞,MDM2具有P53不依赖的抗凋亡效应,揭示了肿瘤细胞化疗耐药的新机制.
-
miR-194-2-192簇与MDM2在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义
目的:目的:探讨miR 194-2-192簇与鼠双微体基因2(MDM2)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及临床意义.方法:留取MM患者骨髓标本21例,应用嵌合荧光法(SYBR Green Ⅰ)的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-194-2-192簇和MDM2的表达情况,并用2-△△Ct方法进行相对定量分析.以10例健康体检者作为对照.结果:miR-194-2-192簇在MM患者中的表达显著低于对照者,而MDM2的表达显著高于对照组(均P＜0.05),且均与ISS临床分期有关(均P＜0.05).miRNA-192与MDM2呈显著负相关(r=-0.353,P＝0.035).经过不同治疗后,MM患者中硼替佐米治疗者的MDM2表达水平显著低于VAD(长春新碱+阿霉素+地塞米松)治疗者(P＜0.05).结论:MDM2是miR-192的直接靶基因.miRNA-194-2-192簇低表达和MDM2高表达可能是MM发病发展的重要因子.
关键词： 多发性骨髓瘤 miR-194-2-192簇 Mdm2 -
Survivin及其异变体、P53和MDM2在柔红霉素诱导Jurkat细胞凋亡中的变化
目的:探讨Survivin及其异变体(Survivin-2B和Survivin-△Ex3)、P53和MDM2在柔红霉素(DNR)诱导白血病Jurkat细胞凋亡中的变化.方法:DNR设0.1 mg/L、1 mg/L、10 mg/L3个浓度,作用Jurkat细胞12h、24 h后,用RT-PCR方法检测Survivin、Survivin-2B、Survivin-△Ex3、P53及MDM2基因的mRNA表达变化,用Western-blot方法检测同样条件下Survivin、P53及MDM2蛋白表达的变化.结果:在mRNA水平,DNR抑制Survivin、Survivin-△Ex3表达,促进Survivin-2B、P53表达,具有时间与浓度依赖性(P＜0.05)；DNR抑制MDM2表达表现出时间依赖性和不完全浓度依赖性(P＜0.05).在蛋白水平,DNR以时间和浓度依赖方式抑制Survivin、MDM2表达,促进P53表达(P＜0.05).结论:DNR通过下调Survivin、Survivin-△Ex3、MDM2表达,上调Survivin-2B、P53表达,从而诱导Jurkat细胞凋亡,且呈时间和浓度依赖性.通过干扰Survivin、Survivin-△Ex3及MDM2的表达,有望提高白血病细胞对DNR的敏感性,从而提高临床缓解率及预后.
关键词： Survivin及其异变体 Mdm2 P53 Jurkat细胞 柔红霉素 -
下调PPP2R5C表达对Jurkat细胞GsK-3β、MDM2、pTEN、TP53通路相关调控基因表达谱的影响
目的 利用基因芯片技术研究RNA干扰下调PPP2R5C对Jurkat细胞中GSK-3β、MDM2、pTEN、TP53通路相关基因表达的影响.方法 利用核转染技术将PPP2R5C-siRNA799转导Jurkat细胞,培养48 h后,提取细胞总RNA,纯化mRNA后反转录制备目标序列,与Affymetrix基因表达谱芯片3' IVT杂交,以Affymetrix GeneChip Scanner 3000扫描仪扫描得到原始图像数据,并应用GeneSpring GX 11.0软件进行差异表达谱分析.结果 基因芯片分析GSK-3β、MDM2、pTEN、TP53信号通路相关的47个基因,发现全部基因发生了差异表达,其中上调基因有22个,下调基因有25个.明显上调的基因有 SNAI1、APC、CDKN1A、ATM、MDM2和pTEN,而明显下调的基因只有GSK-3β.结论 下调Jurkat细胞PPP2R5C基因时,在一定程度上选择性调节涉及细胞增殖和凋亡相关的GSK-3β、MDM2、pTEN和TP53信号通路基因的表达,从而抑制Jurkat细胞增殖.
-
siRNA抑制人前列腺癌细胞PC3的MDM2表达及细胞增殖
目的 研究siRNA MDM2对人前列腺癌细胞PC3的MDM2表达和细胞增殖的作用.方法 构建PGCsilencerTM-MDM2 siRNA,并转染入PC3细胞,分别用RT-PCR和Western blot检测siMDM2对PC3细胞MDM2基因和蛋白表达的抑制作用;用MTT法检测siMDM2对PC3增殖抑制的作用,用流式细胞术检测siMDM2对PC3细胞凋亡的影响.结果 PT-PCR和Western blot结果显示siMDM2能显著抑制PC3细胞MDM2基因和蛋白的表达,抑制率高可达65%;MTT和流式细胞术结果证明siMDM2能显著抑制PC3细胞增殖并诱导细胞凋亡.结论 siMDM2能特异有效地抑制MDM2在PC3中的表达,并抑制PC3细胞增殖,促进其凋亡.
-
胆管癌中MDM2和PTEN的表达及其相关性
目的 探讨MDM2和PTEN在胆管癌(bile duct carcinoma,BDC)的表达情况,并探讨二者之间的关系及临床意义.方法 采用免疫组织化学Elivision方法检测42例胆管癌、22例癌旁组织中MDM2、PTEN的表达.结果 MDM2在BDC组织中阳性率为38.1％,显著高于癌旁组织(P＜0.05).在分化程度差、淋巴结转移的患者中,MDM2表达显著增高(P＜0.05).PTEN在BDC组织中表达率为31.0％,显著低于癌旁组织的72.73％(x2=10.168,P＜0.05).在肿瘤大小、分化程度、TNM分期和淋巴结转移等临床病理指标上,PTEN表达差异无统计学意义(P＞0.05).MDM2与PTEN蛋白表达在BDC组织中呈显著负相关(rs=-0.313,JP＜0.05).结论 MDM2与胆管癌进展相关,有可能作为评价胆管癌预后的指标.
-
p53基因突变对非小细胞肺癌TSG101/MDM2信号通路的影响
目的 探讨p53基因突变在肺癌中对TSG101/MDM2信号通路影响的临床病理学意义.方法 采用免疫组织化学方法 检测185例肺癌组织标本中TSG101、MDM2及p53的表达,用聚合酶链反应单链构象多态性(Polymerase Chain Reaction,single-strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)分析法检测p53突变情况,以及Western blot检测TSG101在肺癌组织和正常肺组织中的表达.结果 (1)肺癌组中p53蛋白的总阳性率为80.54%(149/185),PCR-SSCP检测结果 显示总突变率为56.67%(17/30),p53蛋白表达与病理分期、淋巴结转移有相关性(P＜0.05);TSG101蛋白的低表达率为58.92%(109/185),Western blot结果 显示TSG101在癌组织中的表达明显低于对照组(P＜0.05),TSG101蛋白表达与病理分期、分化、淋巴结转移有相关性(P＜0.05); MDM2蛋白的过表达率为77.84%( 144/185),MDM2蛋白表达与病理分期、淋巴结转移有相关性(P＜0.05).(2)在p53阳性的149例中TSG101阳性76例,MDM2阳性139例,在p53阴性的36例中TSG101阳性33例,MDM2阳性5例.P53与TSG101两者共表达率为41.08%,一致性为42.70%.P53与MDM2两者共表达率为75.14%,一致性为91.89%.结论 (1)p53/MDM2上调与TSG101表达下调肺癌的发生及生物学行为有关.(2)当p53突变时,TSG101与MDM2的表达呈负相关关系.
-
p14ARF和MDM2在甲状腺肿瘤组织中的表达
目的 研究甲状腺肿瘤组织中p14ARF和MDM2蛋白的表达及临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测78例甲状腺乳头状癌(thyroid papillary carcinoma,PTC)、34例甲状腺乳头状微小癌(thyroid papillary microcarcinoma,PTMC)和45例甲状腺腺瘤中p14ARFRF和MDM2蛋白的表达.结果 p14ARF和MDM2蛋白在三组中表达差异有统计学意义(P<0.01).p14ARF蛋白在PTC组的阳性率显著低于腺瘤组(P=0.002)及PTMC组(P=0.008).MDM2在PTC组的阳性率显著高于腺瘤组(P=0.000)及PT-MC组(P=0.009).PTC组与PTMC组中p14ARF蛋白和MDM2蛋白表达显著负相关.p14ARF蛋白表达与PTC组的淋巴结转移显著负相关.结论 p14ARF和MDM2可能参与了PTC与PTMC的发生和发展,p14ARF可作为临床判定PTC生物学行为的辅助指标.
