首页 > 文献资料
-
建立乙烷硒啉在癌症患者血浆中的浓度测定方法及其药代动力学研究
目的：建立湿法消解-电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定人血浆中乙烷硒啉的浓度，并将其用于乙烷硒啉分散片的人体药代动力学研究。方法血浆样品经硝酸消解后，用ICP-MS法测定给药后血浆中不同时间含硒药物总量，并用WinNonlin 5.2软件计算主要药代动力学参数。结果乙烷硒啉主要药代动力学参数如下：tmax为（9.20±0.98）h，Cmax为（597.58±221.73）ng· mL-1，AUC0-t为（2.57±0.92）μg· mL-1· h，平均滞留时间（ MRT）为（24.60±0.63） h。结论建立的ICP-MS法简便、快速、灵敏，适用乙烷硒啉分散片临床监测。
关键词： 乙烷硒啉 电感耦合等离子体质谱法 血药浓度 药代动力学 -
乙烷硒啉对H-22荷瘤鼠CYP450酶系影响
目的:观察新药乙烷硒啉(BBSKE)对肿瘤H-22引起的小鼠肝脏细胞色素P450含量及其主要亚型活性变化的影响.方法:H-22荷瘤小鼠,给予不同剂量的BBSKE 10 d后,提取肝微粒体,Omura法测定CYP450的含量,分光光度法测定CYPI A,CYP3A和CYP2E1活性.结果:肿瘤H-22能引起CYP1A活性升高(P<0.01),CYP3A活性降低(P<0.01);BBSKE能明显下调荷瘤鼠CYP1A活性,上调CYP3A活性作用(P<0.05).肿瘤H-22和BBSKE对CYP450含量和CYP2E1均无明显影响.结论:BBSKE对荷瘤鼠CYP1A活性有下调作用;对CYP3A有诱导作用;对CYP2E1无明显影响.
-
乙烷硒啉在大鼠和结肠癌荷瘤裸鼠体内的组织分布研究
目的:考察抗肿瘤新药乙烷硒啉在大鼠和结肠癌荷瘤裸鼠体内的组织分布规律.方法:采用荧光分光光度法和液相色谱-质谱联用法分别测定SD大鼠和人结肠癌LS174T细胞荷瘤裸鼠灌服乙烷硒啉后各组织中药物浓度经时变化.结果:大鼠灌服乙烷硒啉2h后,药物广泛分布于各组织,以胃肠及其内容物、肝、肾中含量高；24 h肝肾组织硒浓度分别为(6.14±0.87)和(6.93±0.94) μg·g-1,同时间点血液中硒浓度为(4.43±1.65) μg·mL-1;48 h后除肾脏外,其他各组织硒浓度数值均低于血硒浓度.结肠癌裸鼠给药后1h即可见原形药迅速分布于各组织,至24 h肾脏药物浓度达峰值,而其他组织中药物浓度显著降低,至48 h肿瘤中仍可检测出较高药物浓度.结论:乙烷硒啉口服给药后在大鼠和结肠癌荷瘤裸鼠体内均可广泛分布,并对肿瘤组织具有一定选择性,其组织分布特点可能与药物的代谢排泄途径相关.
-
不同载体材料改善难溶性药物乙烷硒啉溶出性能的实验研究
目的:改善水不溶性药物乙烷硒啉的溶出性能,以提高乙烷硒啉固体制剂的药物溶出度.方法:以聚维酮(polyvinylpyrrolidone,简称PVP)、枸橼酸、酒石酸、羟丙基-β-环糊精(hydroxylpropyl-β-cyclodextrin,简称HP-β-CD)等辅料为载体材料,以溶剂溶解与分散法制备乙烷硒啉固体颗粒及其物理混合物,并进行体外溶出度试验.利用差示扫描量热法(Differential Scanning Calorimetry,简称DSC)和X-射线衍射法来验证药物的存在状态.结果:以PVP为载体材料所制固体颗粒的体外溶出行为显著优于其他载体材料,且载体材料的比例越大,药物溶出越快.结论:DSC和X-射线衍射图实验证明,PVP载体材料改变了乙烷硒啉的存在状态与亲水性,溶出性能得到显著改善.
-
乙烷硒啉与顺铂联合应用对肿瘤细胞的协同效应分析
以人胃癌细胞BGC 823和人肺癌细胞PG-BE1为对象,研究乙烷硒啉与顺铂的体外联合抗肿瘤作用是否表现为协同增效.MTT法检测乙烷硒啉与顺铂单药及不同联合给药方案对BGC 823及PG.BE1细胞的增殖抑制作用:采用经典的中位效应理论计算不同联合方案时两药的联合指数CI,比较单药与联合时顺铂所需剂量的变化.结果显示,乙烷硒啉与顺铂联合可以产生协同作用.设置不同的给药剂量比例时,明显的协同作用表现为:在人胃癌细胞BGC 823中,顺铂与乙烷硒啉比例为2:3;在人肺癌细胞PG-BE1中,顺铂与乙烷硒啉比例为1:3.乙烷硒啉与顺铂联合后.明显降低了顺铂的用量,并且随着药物浓度的升高,减量作用逐渐提高,起到了联合增效的作用.
-
高效液相色谱法测定乙烷硒啉注射剂中乙烷硒啉的含量
采用高效液相色谱法测定乙烷硒啉注射剂中乙烷硒啉的含量.使用ODS色谱柱,流动相组成0.01％磷酸-甲醇(60∶40,v/v),流速1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长320 nm,进样体积20μL.结果表明:在上述色谱条件下乙烷硒啉色谱峰峰型良好,在10-50 μg/mL浓度范围内,乙烷硒啉浓度与峰面积之间线性良好(r2=0.9999),低检测限为100 ng/mL,精密度、日间与日内差、稳定性、回收率均符合要求.自制三批乙烷硒啉注射剂的含量以标示量计,在102％-103％之间.本法简单、准确、可靠,可用于乙烷硒啉注射剂含量的测定.
-
活性氧族介导乙烷硒啉在A549细胞中诱导的快速凋亡
硫氧还蛋白还原酶(TrxR)是哺乳动物细胞内负责清除过量活性氧族(ROS)的重要酶类.本研究的目的是探究ROS在TrxR抑制剂乙烷硒啉抗肿瘤机制中的作用.在人肺癌细胞A549中,乙烷硒啉迅速诱导ROS含量上升和线粒体膜电位下降,并导致细胞死亡.ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸的预孵育可以显著抵抗这三种现象.AnnexinV-PI法和Western blot的结果表明乙烷硒啉激活了内源性凋亡通路.线粒体通透性转变孔道抑制剂环孢菌素A可以抑制乙烷硒啉诱发的细胞色素c释放和细胞死亡,而同时一些Bcl-2家族蛋白含量却没有明显变化.这些结果说明ROS可能部分地通过增加线粒体通透性,释放包括线粒体内的促凋亡因子来介导乙烷硒啉诱发的快速凋亡.首次报道了ROS可能在乙烷硒啉抗肿瘤机制,特别是其早期过程中有重要作用.
-
创新抗肿瘤药物-乙烷硒啉对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的氧化还原状态研究
我们研究了以硫氧还蛋白还原酶为靶点的创新抗肿瘤药物-乙烷硒啉在不同剂量下,对小鼠H22肝癌肿瘤组织中的氧化还原状态的影响.主要考察了小分子抗氧化物质谷胱甘肽(GSH),脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量及重要的抗氧化物酶活性以反映H22肿瘤组织中的氧还状态.我们发现,GSH含量,硫氧还蛋白还原酶和超氧化物歧化酶的活性的降低.以及丙二醛含量的升高,都和肿瘤生长抑制及乙烷硒啉的剂量密切相关.而谷胱甘肽还原酶以及谷胱甘肽过氧化物酶在一些药物剂量下.有代偿性的活性上升趋势.过氧化氧酶几乎不受影响.后,我们研究了肿瘤生长抑制率与这些肿瘤氧还因子的关系.我们的研究显示:乙烷硒啉可能是通过诱导氧化应激水平抑制小鼠体内H22肿瘤细胞的生长.
-
国家一类抗肿瘤新药有机硒化合物乙烷硒啉的药效药理作用
乙烷硒啉是由北京大学药学院设计合成并具有国际国内自主知识产权的有机硒化合物,其生物学靶点为硫氧还蛋白还原酶.作为国家一类抗肿瘤新药,乙烷硒啉正在进行临床Ⅰ期试验.本篇综述主要介绍目前已研究发表的乙烷硒啉的药效药理作用,包括体内体外的抗肿瘤作用及免疫调节功能.这些结果为乙烷硒啉进行更深入的抗癌临床研究提供了理论基础及治疗思路.
-
乙烷硒啉对大鼠生殖毒性影响
目的 观察乙烷硒啉对大鼠配子成熟、交配行为、生育力和早期胚胎发育方面的毒性影响.方法 乙烷硒啉设0,250,500和1 000 me/kg组.雄性大鼠连续灌胃给药8周,雌性大鼠连续灌胃给药2周,进行组内同笼交配,共交配2个性周期.交配期间继续给药至妊娠第14 d处死,解剖检查卵巢、子宫和胚胎等生殖器官.在确定雌鼠受精后处死同笼的雄鼠,解剖检查雄性睾丸和附睾等生殖器官.结果 给药期间各剂量组大鼠体重增长缓慢(平均大差值达到-70 g);雄性大鼠生殖器官发育良好,性功能正常,精子数量多、成熟,畸形率低.妊娠大鼠各剂量组的活胎数明显减少(窝平均大差值达到-6.8个)、吸收胎数增多(窝平均大差值达到+5.9个)和受精卵着床后丢失率增加(>54%);但交配率、妊娠率、黄体数、着床数、死胎数、胎仔体重和胎仔体表畸形数等与对照组基本一致.结论 乙烷硒啉可影响雄性成年大鼠体重增长,引起妊娠大鼠早期胚胎发育障碍和受精卵着床后丢失;但对大鼠其他生殖功能无明显损害作用.
-
乙烷硒啉对犬的长期毒性试验研究
目的 研究乙烷硒啉连续给药后对犬的毒性反应及其严重程度.方法 采用纯种Beagle犬,受试物共分成3个给药组(600mg/kg、200mg/kg和67mg/kg)和1个溶剂对照组,连续口服给药12周,停药后再观察4周,进行一般症状观察、血象、生化、心电图、尿液、骨髓象、眼睛、脏器解剖,脏器系数和组织病理学等检查.结果 给药12周高剂量组个别犬在摄食过快时出现呕吐,粪便颜色变浅;谷丙转氨酶和谷草转氨酶增高,葡萄糖降低;肝脏、脾脏和肾脏脏器系数值升高;存在肝细胞脂肪性变和前列腺腺瘤样型肥大的组织病理学变化.停药恢复期基本恢复正常数值.结论 乙烷硒啉在相当于临床人拟用量42倍下,连续口服给药后犬仅出现轻度消化道刺激症状,肝功能异常和血糖值降低;轻-中度肝脏、脾脏和肾脏的肿大;轻度-中度的脂肪肝和前列腺腺瘤样型肥大;毒性反应主要集中在消化道,重点在肝脏.犬用药的无明显毒性反应剂量为67mg/kg.
-
乙烷硒啉与顺铂或氟尿嘧啶联合应用对胃癌BGC-823的治疗作用
目的 观察乙烷硒啉与顺铂或氟尿嘧啶联合应用对胃癌BGC-823的体内、外抗肿瘤作用.方法 MTT法测定5、10、20、40μmo·L-1乙烷硒啉单药及固定其浓度为5 μmol·L-1与顺铂或氟尿嘧啶联合时对BGC-823的生长抑制作用.建立裸鼠移植瘤模型,采用乙烷硒啉、顺铂、氟尿嘧啶单药及乙烷硒啉与后两者联合的不同给药方案,观察抗肿瘤作用.结果 乙烷硒啉对BGC-823有明显增殖抑制作用,24、48、72 h的IC50值分别是30.23、19.70和11.67 μmol·L-1,联合后效果明显增强(P＜0.05).体内实验,联合组肿瘤增长率明显降低,与单药组有非常显著差异(P＜0.01).结论 乙烷硒啉单药表现明显抗肿瘤作用,与顺铂或氟尿嘧啶联合后可以增效.
-
乙烷硒啉的临床药物动力学和代谢转化特点研究
目的 研究肿瘤患者口服乙烷硒啉(1,2-[bis(1,2-Benzisoselenazolone-3(2H)-ketone)]ethane,BBSKE)后的药物动力学及体内代谢转化特征.方法 3例肿瘤患者单次口服给药剂量为600 mg·d-1,采集各个时间点的血浆样品及尿样,用液相色谱-串联四极杆质谱(LC/ESI-MS/MS)联用技术测定血浆样品中BBSKE的含量,用液相色谱-电喷雾离子阱质谱(LC-ESI/MSn)联用技术对尿及血浆中的代谢产物进行分析鉴定.结果 得到了BBSKE在血浆中的药时曲线图及主要的药物动力学参数.在尿中共发现了6个BBSKE的氧化、甲基化、葡萄糖醛酸化代谢产物,在血浆中共发现了2个BBSKE的氧化、葡萄糖醛酸化代谢产物.结论 BBSKE的血药浓度较低,表观分布容积大.氧化、甲基化、葡萄糖醛酸化反应是BBSKE在人体内的3种重要代谢途径.
-
乙烷硒啉对大鼠连续灌胃给药十二周的长期毒性试验研究
目的 研究乙烷硒啉连续给药后对大鼠的毒副反应及其严重程度.方法 采用SD种大鼠,受试物共分成3个给药组(1 000mg/kg,400 mg/kg和160 mg/kg)和1个溶剂对照组,连续121服给药12周,停药后再观察4周,进行一般症状观察,血象、生化、脏器解剖、脏器系数和组织病理学等检查.结果 给药12周高剂量组的大鼠体重增长缓慢,摄食量减少,谷草转氨酶、碱性磷酸酶、总胆红素、总胆同醇增高,葡萄糖降低,心脏、肝脏、脾脏、肾脏和睾丸脏器系数值升高,肝脏存在肝细胞脂肪性变,个别已经发展到轻度肝硬变.停药4周大鼠的体重增长差值有明显的缩小,总胆周醇增高,心脏、肝脏脏器系数值仍有一定升高,肝脏轻、中度肝细胞脂肪性变和早期肝硬变仍然存在.结论 乙烷硒啉存相当于临床人拟用量70倍时,出现体重增长明显缓慢、血液葡萄糖降低、肝功能和脂代谢等异常、肝脏等脏器系数值增加、肝细胞脂肪性变和早期肝硬变等的毒副反应.大鼠用药的无明显毒副反应剂量为160mg/kg.
-
小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长与血硫氧还蛋白还原酶活性的相关性
背景与目的:研究表明硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)在肿瘤组织中的表达较正常组织中明显增多且活性升高,但关于肿瘤生长与血TrxR活性的关系报道却很少.本实验的目的是研究小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长与血TrxR活性的关系.方法:建立H22肝癌昆明小鼠皮下移植瘤动物模型,分为5组:空白组不接种肿瘤细胞.模型组接种肿瘤细胞,这两组小鼠均给予5‰羧甲基纤维素钠灌胃作为对照:乙烷硒啉低、中、高剂量组均接种肿瘤细胞,并分别灌胃给予36 mg/kg、72 mg/kg、216 mg/kg乙烷硒啉.于肿瘤接种前、肿瘤生长至100 mm3给药前、给药第1天、给药第4天及给药第10天5个时间点行眼眶取血,二硫代双硝基苯甲酸(dithio-bis-nitrobenzoic acid,DTNB)法测定血浆TrxR活性.处死小鼠剥离皮下肿瘤,DTNB法测定肿瘤组织TrxR活性.结果:给药结束时低、中、高剂量乙烷硒啉组小鼠的抑瘤率分别达到59.5%、74.3%、74.9%.空白组小鼠血TrxR活性稳定:接种肿瘤后小鼠血TrxR活性随肿瘤体积增大而增加,呈明显正相关:给药结束时,低、中、高剂量乙烷硒啉组小鼠血TrxR活性抑制率分别为59.2%、68.4%、68.9%.而肿瘤组织中TrxR活性抑制率分别为15.3%、25.8%、29.8%c,结论:H22肝癌小鼠血TrxR活性与其肿瘤生长呈正相关:不同剂量的TrxR抑制剂乙烷硒啉干预后,血TrxR活性能够被不同程度地抑制,与肿瘤生长的抑制呈一致性.
-
乙烷硒啉对大鼠致畸敏感期毒性试验研究
目的 观察乙烷硒啉对大鼠是否存在胚胎毒性和致畸毒性.方法 采用Wistat大鼠,每组妊娠鼠＞15只.试验设1 000 mg/kgbw、500 msg/kgbw、250 mg/kgbw和125 mg/kgbw 4个剂量组,同时设1个阳性对照组和1个溶剂对照组.在大鼠胚胎器官形成期连续灌胃给药10 d(孕6～15 d),在妊娠的第20天,处死妊娠鼠,计数黄体数、着床数、活胎数、早期死胎数(包括吸收胎)和晚期死胎数;观察胎仔性别、外观、称取胎重,并检查骨骼和内脏发育情况.结果 给药＞250 mg/kgbw剂量组的孕鼠体重增长缓慢,胎仔的活胎率降低到94.9%以下、吸收胎率增加到4.5%以上,与溶剂对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05或＜0.01);黄体数、着床数、死胎数、胎仔体重、身长、尾长和胎仔性别等与溶剂对照组基本一致.给药各剂量组未见明显的骨骼畸形和内脏器官畸形.结论 乙烷硒啉在＞250 mg/kgbw剂量时,对大鼠具有明显的母体毒性和胚胎毒性;在＜500 mg/kgbw剂量时,不存在骨骼、内脏器官的致畸毒性.
-
乙烷硒啉致突变试验研究
目的 观察乙烷硒啉是否存在遗传毒性.方法 应用Ames试验、中国仓鼠肺细胞体外培养染色体畸变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,研究乙烷硒啉的致突变作用.结果 Ames试验在＜400 μg/皿浓度下未见回复突变菌落数显著增加;中国仓鼠肺细胞体外培养染色体畸变试验在＜3.3 μg/ml浓度下未出现细胞染色体畸变率显著增高;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验在＜20.0 g/kg剂量下未诱发微核细胞率的增高.结论 乙烷硒啉在试验剂量范围内无致突变作用.
-
乙烷硒啉对小鼠体内移植性肝癌(H22)和Lewis肺癌的抗肿瘤作用
目的 观察乙烷硒啉对小鼠移植性肝癌(H22)和Lewis肺癌的抗肿瘤作用,并探讨其可能的抗肿瘤机制.方法 建立小鼠体内移植性肝癌(H22)和Lewis肺癌模型,每种属60只,分别设为5组:阴性对照、阳性对照(CTX)和乙烷硒啉3个剂量组,每组12只.于接种肿瘤第2天至第8天5组分别连续腹腔注射5g/L羧甲基纤维素钠溶液、60mg/kg CTX及25、12.5、6.3mg/kg乙烷硒啉.停药3d后(第11天)每组处理一半动物,计算抑瘤率,并用流式细胞仪观察其对细胞周期的影响;另一半动物观察生命延长率.结果 乙烷硒啉在25、12.5、6.3mg/kg剂量下对小鼠肝癌H22移植瘤的抑瘤率分别为52.5%、43.6%和30.2%,生命延长率分别为56.6、38.7%和14.2%;对小鼠Lewis肺癌的抑瘤率分别为43.8%、29.6%和18.9%,生命延长率分别为47.3%、17.9%和6.3%.乙烷硒啉各剂量组肿瘤细胞凋亡率明显高于对照组(P＜0.05),且25.0mg/kg组出现S期阻滞(P＜0.05).结论 乙烷硒啉对小鼠移植性肝癌(H22)和Lewis肺癌具有抗肿瘤作用,且随剂量的增加其抑制肿瘤作用显著增强.其抗肿瘤作用可能是通过诱导细胞凋亡,同时干扰肿瘤细胞生长周期,导致S期阻滞而实现的.
-
抗肿瘤新药乙烷硒啉对人舌鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响
目的:探讨新型有机硒化合物乙烷硒啉(BBSKE)对人舌癌CAL27细胞株生长和增殖的影响.方法:分别采用体外细胞实验MTT、Hoechst 33258免疫荧光染色、Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术、Transwell小室实验检测2、5、10、20 μmol/L(含1％‰DMSO)的BBSKE对CAL27细胞增殖、细胞周期及迁移的影响,并设置溶剂对照组和正常对照组.结果:5、10、20 μmol/L的BBSKE作用CAL27细胞后,其增殖抑制率较对照组明显增加(P＜0.01),且随作用时间的延长而增加.Hoechst 33258免疫荧光染色结果显示5、10 μmol/L BBSKE组相比对照组细胞出现凋亡形态改变.Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术分析结果显示与对照组相比,2、5、10、20 μmol/L BBSKE组CAL27细胞G2/M期比率呈梯度增加(P＜0.01),细胞周期被阻滞于G2/M期(P＜0.01).Transwell小室实验结果显示,CAL27细胞的迁移数量在2、5、10、20 μmol/L BBSKE组相比对照组明显减少(P＜0.01),且迁移细胞数与药物浓度呈反比.结论:BBSKE对CAL27细胞具有增殖抑制作用,其机制可能是通过引起细胞周期阻滞于G2/M期而诱导细胞凋亡,并且抑制细胞迁移,提示BBSKE可作为舌鳞状细胞癌患者化疗治疗的备选药物.
-
乙烷硒啉对大鼠围产期毒性的研究
背景与目的:观察乙烷硒啉对大鼠妊娠晚期、分娩期、哺乳期及胚胎和胎仔出生后生长发育、学习能力以及生殖能力的影响.材料与方法:大鼠妊娠第15 d至哺乳第28 d,连续灌胃给予250、500和1 000 mg/kg剂量的乙烷硒啉,同时设1%羧甲基纤维素钠为对照组,观察各组大鼠和胎仔的生长、发育、生殖能力等项指标.结果:给药后F0代母鼠体重增长明显减慢,未见生殖、胚胎毒性反应;F1代仔鼠的出生体重和哺乳期体重增长减慢,生理达标、新生反射等发育迟缓;对停药后F1代大鼠的体重增长、摄食量、脏器系数、同笼交配率、妊娠率及胚胎发育全过程未见明显的生殖、发育等毒性变化.结论:乙烷硒啉可使母鼠和F1代仔鼠的体重增长缓慢,生理发育迟缓,但不影响F1代仔鼠器官发育、生殖能力以及停药后体重的增长和摄食量.
