首页 > 文献资料
-
染料木素对入骨关节炎软骨细胞增殖活性和蛋白分泌的影响
目的 探讨染料木素在延缓骨关节炎关节软骨退变中对软骨细胞增殖活性以及分泌Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响.方法 用白细胞介素1β(IL-1β)处理正常人软骨细胞形成骨关节炎模型,用染料木素及戊酸雌二醇处理骨关节炎软骨细胞,将细胞分为6组,A组:软骨细胞组(对照组);B组:软骨细胞+ IL-1β处理组;C组:软骨细胞+IL-1β3+染料木素(25 μg/ml)处理组;D组:软骨细胞+IL-1β+染料木素(50 μg/ml)处理组;E组:软骨细胞+IL-1β+染料木素(100 μg/ml)处理组;F组:软骨细胞+IL-1β+戊酸雌二醇(100 μg/ml)处理组.CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测各组collagenⅡ、MMP-13蛋白水平.结果 ①甲苯胺蓝染色显示,培养的软骨细胞呈异染性,证实为人软骨细胞.②正常人软骨细胞经浓度10 ng/ml的1L-1β处理后,Western blot检测显示,MMP-13蛋白含量升高,collagenⅡ蛋白含量降低,差异有统计学意义(P＜0.01),证实此种骨关节炎模型造模方法可行.③染料木素能显著增强骨关节炎软骨细胞的增殖活力,且与时间呈正相关,尤其是在72 h时,浓度为100 μg/ml的染料木素对关节炎软骨细胞的增殖活性促进作用强,差异有统计学意义(P＜0.05).④染料木素能显著升高骨关节炎软骨细胞表达collagenⅡ的水平,降低MMP-13的水平.结论 浓度为100 μg/ml的染料木素处理关节炎软骨细胞在72 h时对细胞作用为显著,能够增强软骨细胞活力,同时刺激collagenⅡ的合成分泌,抑制MMP-13的表达.
关键词： 染料木素 人骨关节炎软骨细胞 增殖活性 Ⅱ型胶原蛋白 基质金属蛋白酶-13 -
梅花鹿基质金属蛋白酶-13催化域的原核表达和活性分析
目的 利用基因工程技术体外表达梅花鹿基质金属蛋白酶-13(MMP-13)催化域并初步探讨其活性,为进一步研究鹿茸再生和快速增长机制奠定基础.方法 从梅花鹿鹿茸转录组数据中获得cdMMP-13基因序列,通过运用PCR方法获得了编码催化域(cdMMP-13)的cDNA序列,构建重组质粒pET28a-cdMMP-13后,转化大肠杆菌,利用IPTG诱导蛋白表达并纯化蛋白,表达产物经复性后鉴定酶活性.结果 表达产物为21 KDa的融合蛋白且具有明显明胶酶活性.结论 体外表达的具有催化活性的融合蛋白可为研究鹿茸快速生长和再生机制提供材料和基础.
关键词： 梅花鹿 基质金属蛋白酶-13 催化域 明胶酶谱法 -
HMGB1促进类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞表达基质金属蛋白酶-13
目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)能否激活类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)表达基质金属蛋白酶-13(MMP-13).方法:HMGB1与RASF共孵育后,采用流式细胞术、实时RT-PCR、ELISA分别检测细胞周期和MMP-13的基因表达量以及蛋白表达水平.结果:1 μg/ml HMGB1刺激滑膜成纤维细胞3小时,MMP-13 mRNA的表达明显增加;HMGB1刺激滑膜成纤维细胞48小时后MMP-13蛋白分泌增高,并且滑膜成纤维细胞增殖周期速度加快.结论:HMGB1可以激活滑膜成纤维细胞,使其增殖周期速度加快,MMP-13表达增加,提示HMGB1通过作用于滑膜成纤维细胞表达MMP-13加强关节结构破坏.
关键词： 类风湿性关节炎 高迁移率族蛋白1 滑膜成纤维细胞 基质金属蛋白酶-13 -
rIL-10基因干预对肝纤维化大鼠肝组织中胶原、MMP13及TIMP1表达的影响
目的：观察胶原、基质金属蛋白酶13（Matrix metalloproteinase 13，MMP13）及其抑制物基质金属蛋白酶抑制物-1（Tissue inhibitor of metalloproteinase 1，TIMP1）在猪血清诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的表达及大鼠白介素10（rat inter-leukin-10， rIL-10）基因干预的影响，探讨rIL-10基因抗肝纤维化的作用机制。方法：30只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组（C组）和纤维化模型组。 C组每周腹腔注射2次生理盐水，每次0．5 ml，共8周；纤维化模型组每周腹腔注射2次猪血清，每次0．5 ml，共8周。至造模第5周开始模型组随机分为纤维化组（M组），rIL-10基因干预组（I组）及空质粒对照组（P组）。 C组和M组大鼠尾静脉注射林格氏液作为试剂对照，I组大鼠尾静脉注射rIL-10质粒pcDNA3-rIL-10， P组大鼠尾静脉注射pcD-NA3空质粒，每周1次。于第8周末处死所有大鼠。天狼猩红染色检测各实验组大鼠肝组织胶原沉积情况，S-P免疫组化检测各组大鼠肝脏MMP13及TIMP1表达的情况。结果：天狼猩红染色显示：与C组比较，猪血清诱导的肝纤维化模型M组及空质粒对照P组大鼠肝组织中胶原沉积面积显著增多（P＜0．01）；与M组和P组比较，rIL-10基因干预I组大鼠肝组织中胶原的沉积面积显著减少（ P＜0．01）；免疫组织化学染色结果显示：与C组比较，猪血清诱导的肝纤维化模型M组及空质粒对照P组大鼠肝组织中MMP13及TIMP1表达明显增强（P＜0．01），I组纤维化大鼠肝组织中MMP13表达上调而TIMP1表达显著减少（P＜0．01），与M组和P组比较，I组纤维化大鼠肝组织中MMP13及TIMP1表达显著减少（P＜0．01）。结论：rIL-10基因抑制肝纤维化大鼠肝脏胶原沉积与其抑制基质金属蛋白酶抑制物TIMP1的表达相关。
-
去卵巢对兔膝关节软骨及基质金属蛋白酶-13表达的影响
目的 探讨去卵巢对兔膝关节软骨及基质金属蛋白酶-13( MMP-13)表达的影响.方法 将20只新西兰大白兔随机分为去势组和正常对照组,每组10只.去势组新西兰大白兔行双侧卵巢切除,正常对照组新西兰大白兔不作任何处理.去除卵巢l0w后,取血检测血清雌二醇水平；取左股骨髁关节软骨切片观察软骨形态,进行Mankin评分,免疫组化检测MMP-13蛋白的表达；取右股骨髁关节软骨进行RT-PCR检测MMP-13mRNA的表达.结果 去势组大白兔血清雌二醇水平较正常对照组显著下降(P＜0.01)；去势组大白兔关节软骨出现明显的退变；去势组Mankin评分比正常对照组显著增高(P＜0.01)；去势组的MMP-13蛋白表达比正常对照组显著增高(P＜0.01),去势组MMP-13 mRNA表达比正常对照组增高.结论 去卵巢兔血清雌二醇水平明显降低,膝关节软骨退变,关节软骨中MMP-13表达增高.
关键词： 骨性关节炎 去势 雌二醇 基质金属蛋白酶-13 -
老年类风湿关节炎患者血清MMP-13、sICAM-1、IL-10的检测
目的：探讨老年类风湿关节炎患者血清基质金属蛋白酶（MMP）-13、可溶性细胞黏附分子（sICAM）-1和白细胞介素（IL）-10检测的临床意义。方法选择2013年9月至2014年9月来该院治疗的类风湿关节炎老年患者48例为观察组，同期选择48例健康人员作为对照组。观察两组人员血清MMP-13、sICAM-1、IL-10的情况。结果观察组血清MMP-13、sICAM-1、IL-10水平高于对照组（P＜0.01或P＜0.05）。类风湿关节炎患者活动期组也均高于对照组和缓解期组（P＜0.01或P＜0.05）。类风湿关节炎患者MMP-13、sICAM-1、IL-10水平与血沉（ESR）、高敏C-反应蛋白（hs-CRP）呈显著正相关（P＜0.05），与病程相关性较小（P＞0.05）。结论血清MMP-13、sICAM-1、IL-10水平与类风湿关节炎的发病及病情进展有关，可作为类风湿关节病情判断的指标，具有较高的临床应用价值。
-
中药熏洗对膝骨性关节炎患者关节滑液中MMP-3和MMP-13的影响
目的:观察中药熏洗治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效和对关节滑液中MMP -3和MMP - 13的影响.方法:膝关节骨性关节炎90例,分成治疗组和对照组.分别采用补肾活血汤熏洗和热开水熏洗加双氯芬酸钠乳膏外搽治疗,观察两组患者的临床症状、体征、Lysholm's膝关节评分以及关节滑液中MMP -3和MMP - 13变化.结果:两组治疗后Lysholm's膝关节评分较治疗前明显升高(P＜0.01),治疗组的评分值高于对照组(P＜0.01),治疗组总体优良率为93.33％,对照组总体优良率为82.22％,治疗组疗效优于对照组(P＜0.01),两组治疗后关节滑液MMP -3、MMP - 13水平明显下降(P＜0.01),治疗组MMP -3、MMP - 13下降较对照组更为明显(P＜0.01).结论:补肾活血汤熏洗治疗膝骨性关节炎疗效显著,其作用机制可能通过降低MMP -3、MMP - 13的水平,减轻滑膜炎症和关节软骨的破坏,从而发挥对骨性关节炎的治疗作用.
-
基质金属蛋白酶-13、基质金属蛋白酶-14和组织蛋白酶D在结肠癌中的表达及意义
目的 探讨基质金属蛋白酶(metalloproteinase,MMP)-13、MMP-14及组织蛋白酶-D(Cathepsin D)在结肠癌中的表达及意义.方法 收集2014年2月至2016年3月内蒙古医科大学附属医院80例结肠癌患者的手术切除组织,对其进行染色判定,同期选择80例我院健康体检者正常黏膜标本作为对照组.观察MMP-13、MMP-14、Cathepsin D在结肠癌临床病理特征的关系,两种结肠组织MMP-13、MMP-14、Cathepsin D的表达情况.结果 结肠组织中MMP-13、MMP-14、Cathepsin D性别、年龄、肿瘤部位无统计学意义(P＞0.05),肿瘤大小、组织学分级、Dukes分期、淋巴转移有统计学意义(P＜0.05);结肠癌组织中的MMP-13、MMP-14、Cathepsin D阳性表达率显著高于对照组[75.00％ (60/80)比1.25％ (1/80)、87.50％(70/80)比12.50％ (10/80)、71.25％ (57/80)比15.00％ (12/80)(P＜0.05)].结论 MMP-13、MMP-14、Cathepsin D的阳性表达在结肠癌组织与正常组织中存在差异,MMP-14与结肠癌的分化程度、分期、浸润转移之间密切相关,联合检测MMP-13、MMP-14、Cathepsin D的表达可能是判断病情和预后的重要指标.
关键词： 基质金属蛋白酶-13 基质金属蛋白酶-14 组织蛋白酶D 结肠癌 -
羌活地黄汤对大鼠佐剂性关节炎软骨金属蛋白酶-1、13及基质金属蛋白酶抑制剂-1的影响
目的:观察羌活地黄汤对大鼠佐剂性关节炎软骨中基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloprotease-1,TIMP-1)表达的影响.方法:Wistar大鼠32只,随机分为正常对照组、模型组、雷公藤对照组、羌活地黄汤组.制作大鼠佐剂性关节炎模型,造模第14天开始给药.羌活地黄汤组予混有羌活地黄汤的颗粒饲料,雷公藤组给予混有雷公藤多甙的饲料,正常组及模型组均给予普通饲料.第28天分别取各组胫骨平台关节软骨,采用免疫组织化学染色测定软骨中MMP-1、13及TIMP-1表达的阳性指数.结果:模型组MMP-1、MMP-13及TIMP-1表达的阳性指数水平明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.01),羌活地黄汤组MMP-1、13及TIMP-1表达阳性指数低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:羌活地黄汤可能是通过调控软骨细胞外基质中MMP-1、MMP-13及TIMP-1表达变化而维持软骨的动态平衡,从而延缓RA骨骼破坏.
-
MMP-13在家兔动脉粥样硬化斑块中表达的研究
目的:研究高脂血症家兔的动脉粥样硬化斑块中基质金属蛋白酶-13的表达,为进一步探讨动脉粥样硬化发病机制提供形态学依据.方法:将24只健康雄性新西兰白兔随机分为两组:(1)空白对照组(正常组)8只,每天给予普通饲料;(2)阳性对照组(模型组)16只,每天给予普通饲料+1g胆固醇+15%猪油.16周末所有实验用兔麻醉处死,各组行主动脉粥样硬化病理形态学观察,包括大体形态学观察、光镜观察.根据形态学特点再分成稳定斑块和不稳定斑块,通过免疫组化对斑块内的病变进行定量分析.结果:S-P免疫组化可见模型组中基质金属蛋白酶-13在粥样斑块中平滑肌细胞及泡沫细胞中的细胞核上呈阳性表达,而正常血管壁表达阴性.在稳定性斑块与不稳定性斑块对比中发现,MMP-13在不稳定斑块中表达明显较稳定斑块要高.结论:MMP-13在AS不稳定斑块中较稳定斑块阳性表达明显,显示MMP-13与AS斑块的不稳定性有密切联系.
关键词： 动脉粥样硬化 基质金属蛋白酶-13 斑块 -
基质金属蛋白酶-13和CD44V6在大肠癌中表达的研究
目的:观察人大肠癌中基质金属蛋白酶-13的表达情况,探讨其与大肠癌分化、浸润及转移的关系.同时观察大肠癌中基质金属蛋白酶-13和CD44V6表达的相关性,以进一步探讨黏附分子及基质金属蛋白酶对肿瘤浸润转移的影响,为临床完善治疗大肠癌的方法提供理论依据.方法:将60例大肠癌石蜡标本进行分组.根据病理分级分为三组:高分化组20例,中分化组32例,低分化组8例;根据浸润深度分为两组:≥浆膜41例,≤肌层19例;根据Ducks分期分成两组:A+B期24例,C+D期36例;根据是否有淋巴结转移分为两组:淋巴结转移(+)33例,淋巴结转移(-)27例.HE染色,光镜观察病变;通过S-P免疫组织化学染色及图像分析系统对组织内的阳性抗原进行定位及定量分析.结果:基质金属蛋白酶-13在大肠癌组织间质细胞中表达,主要在纤维细胞胞核及胞浆中染色,棕黄色,大体呈条索状,环绕癌组织腺体走形,肿瘤细胞中表达不明显或无表达.基质金属蛋白酶-13表达量与大肠癌的病理分化程度不相关,而与肿瘤细胞的浸润深度、Ducks分期及淋巴结转移情况密切相关.CD44V6主要表达在肿瘤细胞胞浆和细胞膜上,呈强阳性表达.其表达量也与大肠癌的病理分化程度不相关,同样与肿瘤细胞的浸润深度、Ducks分期及淋巴结转移情况密切相关.Spearman相关性分析结果显示大肠癌中基质金属蛋白酶-13和CD44V6的表达可能具有相关性.结论:基质金属蛋白酶-13在大肠癌基质中有表达;其表达与大肠癌的部位及分化程度无关.而与大肠癌浸润深度、Ducks分期、淋巴结转移密切相关;基质金属蛋白酶-13和CD44V6在大肠癌中的表达可能具有相关性.
-
ILK和MMP-13在非小细胞肺癌中的临床意义及表达
目的:探讨整合素连接激酶(ILK)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在非小细胞肺癌(NSCLC)表达及其相互之间关系.方法:利用双抗体夹心(ABC-ELISA法)检测46例NSCLC患者ILK和MMP-13的表达.结果:患者血清中ILK和MMP-13明显高表达健康对照组(P<0.01).ILK和MMP-13在NSCLC患者中高表达,在早期与晚期组、淋巴结转移与非转移组间差异有统计学意义(P<0.05).结论:ILK和MMP-13在NSCLC转移中起到重要作用.
关键词： 整合素连接激酶 基质金属蛋白酶-13 非小细胞肺癌 -
中等强度跑台运动对高脂饮食小鼠膝关节软骨MMP-13、LRP5的影响
目的 探讨跑台运动对高脂饲料喂养小鼠膝关节软骨的作用机制.方法 30只雄性C57BL-6小鼠平均分为正常组、高脂组和跑台组.高脂组和跑台组以40％高脂饲料喂养8周后,跑台组进行为期4周、每周5次、每次45 ain的中等强度跑台训练.采用HE、番红固绿染色并进行Mankin评分观察小鼠膝关节软骨形态变化,免疫组化分析膝关节基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)表达情况,RT-PCR法检测膝关节软骨MMP-13、LRP5、β-catenin水平.结果 与高脂组比较,跑台组小鼠体质量、Lee's指数下降(P＜0.05),但Mankin评分证实膝关节软骨退化明显(P＜0.05),关节软骨MMP-13 mRNA表达升高(P＜0.05);免疫组化结果也显示,跑台组小鼠膝关节MMP-13、LRP5表达较高脂组升高(P＜0.00l).结论 中等强度跑台运动加剧高脂饲料喂养小鼠膝骨关节炎进程,关节软骨MMP-13、LRP5表达水平增高可能诱发膝骨关节炎.
-
类风湿关节炎患者血清MMP-13、sICAM-1、IL-10检测的临床意义
通过对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、可溶性细胞黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)和白介素-10(interleukin-10,IL-10)的检测,探讨三者在RA发病及病情进展中的临床意义.采用ELISA方法检测115例RA患者、76例健康对照组血清MMP-13、sICAM-1、IL-10水平,并用Spearman相关分析检验三者与抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体,类风湿因子(RF),红细胞沉降率(ESR),超敏C反应蛋白(hs-CRP)等相关性.结果显示:RA患者血清MMP-13、sICAM-1、IL-10水平明显高于对照组(P＜0.05),活动期组患者血清MMP-13、sICAM-1比缓解期组水平高(P＜0.05),但不同病程组之间差异无显著统计学意义(p＞0.05);RA患者血清MMP-13、sICAM-1、IL-10水平与ESR、hs-CRP呈显著正相关(P＜0.05或P＜0.01),与病程相关性较小(P＞0.05),且MMP-13、sICAM-1与抗CCP抗体、RF、DAS28、关节压痛数、关节肿胀数呈显著正相关性(P＜0.05或P＜0.01).研究结果表明,MMP-13、sICAM-1、IL-10与RA的发病及病情进展有关,可成为RA病情判断、疗效观察等方面的重要标志物和临床指标.
关键词： 类风湿关节炎 基质金属蛋白酶-13 可溶性细胞黏附分子-1 IL-10 相关性 -
血清MMP-13及TGF-β1检测在慢性肝病中的临床价值
目的 探讨各类慢性肝病患者血清基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的变化及其临床价值.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测50例慢性肝炎患者、50例肝硬化患者、60例肝癌患者及50名健康体检者(正常对照组)血清MMP-13和TGF-β1水平.结果 慢性肝炎组、肝硬化组、肝癌组及正常对照组MMP-13水平分别为287.05±29.80、328.04±62.03、329.02±70.04、(279.03±32.80) ng/L;TGF-β1水平分别为0.99 ±0.11、0.96±0.12、2.22±1.08、(0.65±0.09) μg/L;慢性肝炎组、肝硬化组、肝癌组血清MMP-13及TGF-β1水平均高于正常对照组.肝癌组及肝硬化组血清MMP-13水平明显高于慢性肝炎组(P＜0.01).肝癌组血清TGF-β1水平明显高于肝硬化组和慢性肝炎组(P＜0.01)；而慢性肝炎组、肝硬化组和正常对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 慢性肝病发展过程中MMP-13及TGF-β1有过度表达,动态分析其水平对慢性肝病的辅助诊断和病情监测有一定意义.
关键词： 基质金属蛋白酶-13 转化生长因子-β1 慢性肝炎 肝硬化 肝癌 -
间接性TMJ损伤后髁突软骨中MMP-13表达及其意义
目的通过观察羊颞下颌关节(temporomandibularjoint,TMJ)间接创伤后不同时期髁突软骨中基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达,探讨MMP-13在TMJ创伤后导致颞下颌关节骨关节病(temporomandibularjoint osteoarthrosis,TMJOA)过程中的作用.方法用自制撞击装置造成山羊双侧颞颌关节间接性创伤.分别于伤后1周、1个月、3个月、6个月取材,并以正常TMJ作为对照,用免疫荧光组织化学方法进行观察.结果TMJ髁突软骨中MMP-13伤后1周即出现强的表达,以后逐渐减弱;荧光着色于软骨破坏区增生滑膜样组织及软骨肥大带较强,正常对照组基本呈阴性反应.结论MMP-13参与了TMJ创伤所致TMJOA过程,并起了重要作用.
关键词： 颞下颌关节 创伤 基质金属蛋白酶-13 免疫荧光 -
脂多糖诱导成骨细胞MC3T3-E1中MMP-13表达的分子机制研究
目的 探讨脂多糖(LPS)对小鼠成骨细胞MC3T3-E1中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响及其分子机制.方法 采用LPS处理传代培养的小鼠成骨细胞MC3T3-E1,Western blotting检测MC3T3-E1中MMP-13及转录因子C/EBPβ、核因子κB (NF-κB)及其抑制蛋白IκB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的表达;观察使用NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082干预及特异性siRNA沉默C/EBPβ、TNF-α和IL-6表达对MC3T3-E1中MMP-13表达的影响.结果 Western blotting检测结果显示:LPS能够诱导MC3T3-E1中MMP-13高表达,促进NF-κB、C/EBPp、TNF-α和IL-6的表达和活化,抑制IκB表达;Bay1 1-7082干预及siRNA沉默TNF-α表达能有效抑制MC3T3-E1中TNF-α和MMP-13的表达,而siRNA沉默C/EBPβ和IL-6表达对MC3T3-E1中MMP-13的表达无明显影响.结论 LPS通过NF-κB/TNF-α诱导MMP-13在成骨细胞MC3T3-E1中高表达,这为阐明牙周炎的发病机制奠定了基础.
关键词： 脂多糖 基质金属蛋白酶-13 肿瘤坏死因子-α 牙周炎 -
瘦素对 IL-1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞MMP-13 mRNA 表达的影响
目的:探讨瘦素对IL-1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞基质金属蛋白酶-13 ( MMP-13 ) mRNA表达的影响及其机制. 方法:体外培养大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用免疫细胞化学方法及甲苯胺蓝染色法鉴定Ⅱ型胶原及蛋白多糖表达;MTT法检测不同质量浓度瘦素环境下正常及 IL-1β诱导软骨细胞的增殖活力;实时定量PCR法检测不同质量浓度瘦素处理后IL-1β诱导软骨细胞MMP-13 mRNA的表达, ELISA法检测培养基上清肿瘤坏死因子α( TNFα)的水平;通过小RNA干扰( siRNA)抑制瘦素长型受体( OB-Rb)表达,观察瘦素对MMP-13 mRNA表达的影响. 结果:所有细胞均能分泌Ⅱ型胶原及蛋白多糖. MTT结果显示,低质量浓度瘦素对细胞增殖无明显影响,瘦素质量浓度大于等于10 ng · ml -1后可显著促进细胞增殖;而10 ng · ml-1的IL-1β可显著抑制细胞增殖,同时给予100 ng· ml-1及1 μg· ml -1瘦素则可进一步抑制细胞增殖,差异均有统计学意义( P<0.05). 实时定量PCR结果显示,IL-1β可增加软骨细胞MMP-13 mRNA表达及TNFα分泌,而加入瘦素(100 ng· ml -1 )后可进一步刺激MMP-13 mRNA的表达及TNFα的分泌,差异具有统计学意义(P<0.05). 转染OB-Rb siRNA的软骨细胞OB-Rb mRNA的表达显著下降(P<0.05),MMP-13 mRNA的表达则不受影响;IL-1β处理对转染组OB-Rb的 mRNA表达无明显影响,但可显著诱导MMP-13 mRNA的表达增加( P<0.05) ,进一步加入瘦素后,OB-Rb mRNA的表达有所增加,但表达量远远低于siRNA未处理组,差异具有统计学意义( P<0.05) ,MMP-13 mRNA的表达则未见增加. 结论:一定浓度的瘦素可通过与OB-Rb结合促进IL-1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞MMP-13 mRNA表达,具有降解软骨作用.
-
慢性肝病患者转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α和基质金属蛋白酶-13表达与临床价值
目的:分析慢性肝病患者转化生长因子(TGF)-β1、肿瘤坏死因子(TNF)-α及基质金属蛋白酶(MMP)-13的表达水平及其相互关系.方法:采用双抗体"夹芯"酶联免疫吸附法,对慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者及正常对照血TGF-β1、TNF-α及MMP-13进行检测,并分析其表达特点与临床价值.结果:慢性肝病患者血TGF-β1、TNF-α及MMP-13表达水平均高于正常对照组;肝癌患者组血清TGF-β1和TNF-α表达水平均明显高于肝硬化组和慢性肝病组(P<0.01);肝硬化组与肝癌患者组血MMP-13水平显著高于慢性肝炎组(P<0.01);慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者的血清中TNF-α和TGF-β1表达水平呈显著相关性,但MMP-13水平与TNF-α、TGF-β1间无明显相关性.结论:TGF-β1、TNF-α和MMP-13在肝癌发展过程中过度表达,动态分析有助于肝癌的诊断和鉴别.
-
MMP-13及p38MAPK在肝细胞癌侵袭和转移中的作用
目的 探讨肝细胞癌中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和丝裂原激活蛋白激酶p38(p38MAPK)的表达及其在肝细胞癌侵袭和转移中的作用.方法 使用原位杂交检测32例肝癌组织及对应的癌旁组织中MMP-13 mRNA的表达,使用免疫组化检测MMP-13蛋白和p38MAPK蛋白,分析它们和临床病理的关系.结果 MMP-13 mRNA及MMP-13、p38MAPK蛋白在癌组织中阳性表达率分别为90.63%(29/32)、93.75%(30/32)和96.88%(31/32),在癌旁组织阳性表达分别为59.38%(19/32)、71.88%(23/32)和59.38%(19/32),癌组织显著高于癌旁组织,差异均有高度统计学意义(均P<0.01).MMP-13蛋白和p38MAPK蛋白在癌组织中的表达成显著正相关(P<0.01).MMP-13蛋白及p38MAPK蛋白表达在肿瘤组织甲胎蛋白不同分化程度、有无门静脉癌栓和(或)肝包膜受累之间的差异均有统计学意义(均P<0.05),但与肿瘤直径和血清AFP水平无明显相关性(P>0.05).结论 MMP-13和p38MAPK在肝癌的生长过程中发挥了重要作用,其可能参与了癌细胞的侵袭和转移机制.p38MAPK信号通路可能参与了MMP-13的调节.
