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白芍总苷对骨关节炎软骨细胞增殖及分泌表达的影响
目的 研究白芍总苷(TGP)对人骨关节炎软骨细胞(HOCs)增殖、凋亡、分泌表达的影响及其作用机制,为白芍总苷在骨关节炎洽疗方面提供初步的实验依据.方法 组织块法培养原代人骨关节炎软骨细胞;TGP处理人骨关节炎软骨细胞并培养12、24和48 h;采用CCK-8检测细胞存活率;ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)以及Caspase-3表达水平;Western blotting检测Bcl-2、Bax、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制剂-1 (TIMP-1)和核转录因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平.结果 TGP能促进细胞增殖,并存在时间和浓度依赖性,其中8μmol/L TGP作用24 h时细胞存活率高,存在显著性差异(P ＜0.05);TGP可以显著抑制凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3表达,并促进抗凋亡蛋白Bcl-2表达(P＜0.05);TGP可以显著降低与软骨退化相关的MMP-13/TIMP-1比值(P＜0.05);TGP可以抑制炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8表达(P ＜0.05);TGP可以抑制NF-κB的表达(P＜0.05).结论 TGP促进人骨关节炎软骨细胞增殖,抑制细胞凋亡、降低MMP-13/TIMP-1比值以及炎症因子的分泌,其机制可能是与抑制NF-κB的表达相关.
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染料木素对入骨关节炎软骨细胞增殖活性和蛋白分泌的影响
目的 探讨染料木素在延缓骨关节炎关节软骨退变中对软骨细胞增殖活性以及分泌Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响.方法 用白细胞介素1β(IL-1β)处理正常人软骨细胞形成骨关节炎模型,用染料木素及戊酸雌二醇处理骨关节炎软骨细胞,将细胞分为6组,A组:软骨细胞组(对照组);B组:软骨细胞+ IL-1β处理组;C组:软骨细胞+IL-1β3+染料木素(25 μg/ml)处理组;D组:软骨细胞+IL-1β+染料木素(50 μg/ml)处理组;E组:软骨细胞+IL-1β+染料木素(100 μg/ml)处理组;F组:软骨细胞+IL-1β+戊酸雌二醇(100 μg/ml)处理组.CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测各组collagenⅡ、MMP-13蛋白水平.结果 ①甲苯胺蓝染色显示,培养的软骨细胞呈异染性,证实为人软骨细胞.②正常人软骨细胞经浓度10 ng/ml的1L-1β处理后,Western blot检测显示,MMP-13蛋白含量升高,collagenⅡ蛋白含量降低,差异有统计学意义(P＜0.01),证实此种骨关节炎模型造模方法可行.③染料木素能显著增强骨关节炎软骨细胞的增殖活力,且与时间呈正相关,尤其是在72 h时,浓度为100 μg/ml的染料木素对关节炎软骨细胞的增殖活性促进作用强,差异有统计学意义(P＜0.05).④染料木素能显著升高骨关节炎软骨细胞表达collagenⅡ的水平,降低MMP-13的水平.结论 浓度为100 μg/ml的染料木素处理关节炎软骨细胞在72 h时对细胞作用为显著,能够增强软骨细胞活力,同时刺激collagenⅡ的合成分泌,抑制MMP-13的表达.
关键词： 染料木素 人骨关节炎软骨细胞 增殖活性 Ⅱ型胶原蛋白 基质金属蛋白酶-13
