首页 > 文献资料
-
HGF/SF-Met的信号通路及其在肿瘤中的作用研究进展
Met是由原癌基因met编码的酪氨酸激酶受体,是HGF/SF在人体内唯一的受体.HGF/SF与Met结合后可以促进Met自身磷酸化并启动下游信号通路的活化,HGF/SF-Met下游信号通路复杂,与胚胎的发育、组织损伤修复等密切相关,此外还与肿瘤的发生、发展密切相关.对HGF/SF-Met信号通路及其在肿瘤发生、发展中作用机制的研究为肿瘤靶向治疗提供了一个极有希望的新靶点.
-
建立新型院内急救模式的探讨
随着科学技术的不断进步，对院内急救能力提出了更高要求，传统的院内急救模式落后于技术的进步，笔者根据国外急救医疗小组(MET)的成功经验，从院内急救现状、MET的基本内容、新型院内急救模式的措施等三方面对建立院内急救模式进行了探讨。
-
MET和HER2在胃癌中的表达及临床意义
目的：分析胃癌人群中癌基因MET、人表皮生长因子受体2（ HER-2）的蛋白表达及其与临床病理学特征的关系，为探索其对胃癌根治术患者复发及生存的预测价值。方法收集2007年2月20日至2013年2月20日来接受手术切除的胃或胃食管交界处腺癌患者标本共180例。采用EnViSion免疫组化法和FISH法对每个标本中的MET和HER2进行其相关的基因阳性表达水平进行检测，并对二者与患者的相关个人信息、病变部位、肿瘤的分化程度、有无转移等相关信息之间的线性相关关系进行研究。观察免疫组化评分与荧光原位杂交检测HER2的高表达与基因扩增之间的重叠率。统计患者两年内病死率。结果通过对180例胃癌患者进行免疫组化以及FISH方法检测HER2发现， HER2和MET的阳性表达率是40.0%和31.1%，基因扩增率是36.7%和34.4%，HER2和MET的高表达与基因扩增之间的重叠率是73.6%和78.6%，各个免疫组化间的重叠率比较差异有显著性（ P ﹤0.01）。MET表达与患者的个人信息、病变大小、病变部位以及是否出现淋巴道转移无关（ P ﹥0.05），而与分化程度、临床分期以及是否出现门脉侵犯有关（ P ﹤0.05）；HER2表达与患者的个人信息、是否出现门脉侵犯、病变部位、是否出现淋巴道转移以及临床分期无关（ P ﹥0.05），而与分化程度与病变大小有关（ P ﹤0.05）。经过为期2年的随访工作发现，死亡率为33.3%（60/180），其中54例患者在检测过程中呈MET和HER2的双向高度表达。结论 MET和HER2的共同高度表达与胃癌患者病死率之间有相关性，HER2与肿瘤的分化程度和病变大小有关，MET与肿瘤分化程度和门脉侵犯有关，为今后临床上对胃癌患者癌基因的检测结果分析提供了重要的生物学资料。
-
抑制MET对RAS突变型结肠癌细胞的抗肿瘤作用
目的 探讨抑制MET对于RAS突变结肠癌的体内体外抗肿瘤作用.方法 选取4种常见RAS突变型结肠癌细胞(HCT-116、DLD-1、Lovo和HCT-15),采用siRNA敲除MET蛋白表达,或者加入特异性MET抑制剂PHA-665752,采用MTT及集落形成实验观察抑制MET对结肠癌细胞增殖抑制的作用,应用Western Blotting检测PHA-665752对MET/AKT/ERK信号通路的作用.另外,应用HCT-116细胞系构建裸鼠皮下成瘤模型,给予PHA-665752腹腔注射,观察MET抑制剂对体内肿瘤的抑制作用.结果 RAS突变的4种结肠癌细胞系均有MET蛋白表达.应用siRNA敲除MET蛋白表达对HCT-116和Lovo细胞的增殖抑制作用分别为19.6±4.5％和27.8±5.8％,而应用MET特异性抑制剂PHA-665752对两种细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性,细胞克隆形成实验证实PHA-665752可有效抑制细胞克隆形成.另外,应用HCT-116细胞构建裸鼠皮下成瘤模型,给予PHA-665752单药证实MET抑制剂可明显抑制HCT-116细胞的皮下移植瘤(第四周肿瘤体积:PHA-665752组为300±72 mm3,对照组为608±59 mm3,t=5.731,P=0.005).Western Blotting证实应用PHA-665752预处理能明显抑制HGF激活的p-MET、p-AKT和p-ERK.结论 抑制MET对于RAS突变型结肠癌具有抗肿瘤作用,靶向MET可能成为RAS突变型结肠癌的有效治疗.
-
骨形态发生蛋白在急性和慢性肾脏病的研究进展
骨形态发生蛋白又称为成骨蛋白(OP-1),具有广泛的生物学功能,在骨、肾脏、肝脏、眼睛等器官组织中发挥着促分化、促进生长发育、抗纤维化、抗炎等功能.本文综述目前肾脏病领域对该蛋白所作的研究,探讨其在肾脏病中的应用前景和要解决的问题.
-
12～14岁正常和肥胖男性青少年运动能耗的比较研究
目的:分析比较肥胖和正常青少年静息能量消耗(RMR)和进行相同运动时的耗氧量、代谢当量(MET)及自觉疲劳感觉(RPE).方法:通过采集身高、体重等信息,抽取12～14岁肥胖和正常青少年各15名,在2天内采用Cosmed K4b2便携式气体代谢分析仪测试被试完成两部分测试过程中的氧耗量.第一部分是在餐后2小时以上,先测试30分钟静息能量消耗,随后测试第三套全国中学生广播体操(舞动青春)的能量消耗.第二部分在餐后1小时以上,在实验室分别进行3、4、5、6、7、8km/h的走或跑递增跑台运动,每级5分钟,中间无间断.采用RPE分级表,在广播体操运动后即刻和每级跑台运动结束即下一速度开始加速前,记录被试相应的RPE值.计算上述各项运动MET.结果:肥胖和正常青少年1 MET分别为3.88 m1/min/kg和5.45m1/min/kg.肥胖青少年在进行广播体操和3km/h、4km/h、5km/h、6km/h、7km/h、8km/h跑台运动时的总能量消耗、MET值均高于正常青少年;排除体重影响,肥胖青少年在进行广播体操和3km/h,、4km/h、5km/h、6km/h、7km/h、8km/h跑台运动时单位体重能量消耗低于正常青少年.肥胖(r=0.963,P<0.01)和正常(r=0.986,P<0.001)青少年RPE和MET值呈高度相关.结论:正常青少年静息能量消耗(以ml/min/kg表示)高于肥胖青少年.肥胖和正常青少年从事相同定量负荷运动时,运动能耗和代谢当量不同.RPE可以作为反映青少年运动强度的有效指标.
-
肝细胞生长因子及其受体在新药发现中的研究进展
肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)及其受体(Met)在组织的发育、再生和体内平衡中发挥着重要的作用,该信号通路传导异常可以正负双向调节多种疾病的发生和发展.目前,基于HGF/Met通路在生理和病理上的重要作用,HGF及其受体Met已成为新药发现的重要靶点,如在肿瘤的治疗中选择性的Met抑制剂是靶向治疗的热点,在心脑血管疾病中HGF类似物或者Met激活剂的研究也进展较快.本文主要对HGF及其受体Met在肿瘤和心脑血管疾病治疗领域的研究进展进行综述.
-
美沙酮维持治疗者合并甲基苯丙胺依赖1例报告
美沙酮维持治疗(MMT)是以生物、心理、社会医学模式为基础,应用美沙酮对阿片类吸毒人员进行长期维持治疗的一种替代治疗方法,目前全球范围内针对阿片类吸毒人员应用广泛,其目的是减少毒品滥用,降低艾滋病传播相关危险行为,减少违法犯罪,恢复吸毒人员的社会功能[1-2].而甲基苯丙胺(MET)滥用近年来呈不断上升趋势,甚至被部分阿片依赖者作为戒断后的替代品,但两类毒品同时形成依赖者并不多见[3].现将1例美沙酮维持治疗合并甲基苯丙胺依赖报告如下.
-
HGF／SF-MET通路的基本原理
20世纪80年代中期，MET和它的配体肝细胞生长和离散因子（ HGF／SF）相继被3个独立的研究机构发现。 MET基因早在人的骨肉瘤细胞中克隆［1］，随后发现原癌基因MET编码受体酪氨酸激酶（RTK）蛋白［2］，该基因常由基因重排即在其5′端加上易位启动区tpr（ tpr）而被激活，并在远处转移中发挥重要作用。在其他的研究中，肝细胞生长因子与成纤维细胞分泌的另一种细胞离散因子被分别命名，但很快证实二者是同一个蛋白，称为HGF／SF［3］。 Bottaro等［4］提出HGF／SF作为MET的配体，发现通过靶向敲除小鼠Hgf和MET基因得到证实，对这些变异小鼠的研究提示了Hgf和MET基因所编码的蛋白在不同细胞与组织的生存、生长及迁移中的重要生理作用。 HGF／SF-MET信号系统标志特征是MET蛋白所激活的细胞反应的多样性，它由该信号系统MET下游停泊蛋白--生长因子受体结合蛋白2（GRB2）及接头蛋白1（GAB1）［5］的激活和该信号系统与其他信号系统间的关联介导。 HGF／SF-MET的异常表达在许多不同病理类型的肿瘤中发现，本文介绍HGF／SF-MET通路在癌症中的基本原理。
-
麦冬皂苷B通过MiR-34a对非小细胞肺癌A549细胞影响的研究
目的:研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞中miR-34a的表达情况,miR-34a和Met信号通路的相关性,进一步明确麦冬皂苷B(Ophiopogonin-B,OPB)治疗肺癌的分子机制.方法:采用非小细胞肺癌A549细胞,胚胎肺成纤维细胞MRC-5,以及A549+ OPB细胞作为研究对象.实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)方法检测miR-34a在A549,MRC-5,A549+ OPB中的表达情况.MTT增殖实验检测miR-34a对A549细胞增殖能力的影响.使用生物信息学软件预测miR-34a的下游功能靶基因,通过荧光素酶报告验证.Western Blot技术验证miR-34a和OPB对Met蛋白表达的影响.结果:与MRC-5细胞相比,A549及A549+ OPB细胞中miR-34a的表达量明显下降.转染miR-34a后可抑制A549细胞的增殖能力.生物信息学预测显示Met是miR-34a可能的功能性靶基因,且得到荧光素报告实验结果的证实.与未转染A549细胞株相,转染后的细胞株及A549+OPB细胞株,miR-34a表达升高,Met的表达降低.结论:在非小细胞肺癌中OPB可能通过miR-34a调控靶基因Met而发挥抗癌作用.
-
鼠源性单克隆抗体Met4用于检测胃癌组织Met的表达及临床意义
目的:观察研究肝细胞生长因子受体Met在胃癌组织及相对应的淋巴结转移灶中的表达水平,同时比较分析抗Met单克隆抗体Met4和多克隆抗体C28在检测Met表达水平中的差别.方法:采用免疫组织化学间接法检测胃癌组织芯片中Met表达水平,比较Met4与C28的检测效能.结果:Met在细胞膜及胞浆阳性表达率在不同病理分级组间无统计学意义(P>0.05).Met4组Met的阳性染色部位于细胞膜(浆),而C28组Met阳性染色部位在细胞浆中,二者在Met亚细胞染色定位上有差别.Met4的阳性检出率(58.3%)高于C28阳性检出率(30.5%),具有统计学意义(P<0.05).Met4组21例胃癌原发灶Met阳性病例中14例淋巴结转移灶Met表达阳性,C28组11例原发灶Met阳性病例中6例淋巴结转移灶Met表达阳性.原发灶中Met阳性表达与转移淋巴结中Met的阳性表达有显著相关性(P<0.05).结论:Met阳性表达可能在肿瘤的淋巴转移过程起重要作用.Met4用于肿瘤的诊断及靶向治疗.具有良好的临床应用前景.
-
人源抗Met基因工程抗体scFv的改造与特性分析
目的:将已制备的抗Met单链抗体基因与人IgG Fc基因片段融合,表达有活性的融合蛋白分子,以增强单链抗体的可溶性.方法:从人淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增并制备人IgG的Fc基因片段,并克隆于已构建好的pBAD-scFv原核表达载体中,转化大肠杆菌Top10,经阿拉伯糖诱导表达融合蛋白scFv-Fc.所表达的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE、Western blot分析鉴定,并用ELISA检测抗体效价.结果:序列分析表明重组质粒pBAD-scFv-Fc基因序列正确;SDS-PAGE分析表明,scFv-Fc融合蛋白分子量为60 ku,且为可溶性蛋白;该蛋白经过His亲和层析纯化、ELISA检测,结果表明,该融合蛋白能够与抗原分子Met特异性结合.结论:改造后的抗体融合蛋白scFv-Fc能与人Met特异性结合,增加了抗体蛋白溶解度,有利于抗体的大量制备.
-
MET4和C-28检测胰腺癌MET蛋白表达的对比研究
目的：对比研究兔多抗C-28和鼠单抗MET4在胰腺癌组织中检测MET蛋白表达的差异性和相关性。方法：采用免疫组化间接法研究C-28和MET4检测67例胰腺癌组织中MET表达情况，定量图像分析MET4和C-28的检测效能。结果：MET4和C-28检测胰腺癌的阳性率分别为70.1％和71.6％。两种抗体检测MET阳性率无显著差异(X2=0.980，P=0.387)。相关分析显示两者无显著相关性(r=-0.127，P=0.307)，在C-28未检出的病例中有84.2％(16/19)MET4检出，在MET4未检出的病例中有85.0％(17/20)C-28检出。在无MET蛋白表达的胰岛和正常胰腺上皮中，C-28有染色，而MET4无染色。结论：相对C-28抗体,MET4用于检测胰腺癌MET蛋白表达具有较高的特异性。
-
miR-34a调控肺癌EGFR耐药细胞株中MET信号通路探讨
[目地]研究肺癌耐药细胞株HCC827/GR中MET信号通路的调控,明确肺癌获得性耐药的分子机制.[方法]使用HCC827细胞[epidermal growth factor receptor(EGFR)基因19外显子缺少的肺腺癌细胞株],在此细胞的基础上培养吉非替尼耐药细胞株.检测耐药细胞株中MET的表达,并使用RT-PCR的方法检测miR-34a的表达;使用TargetScan等生物信息学软件预测miR-34a的下游靶点,并在细胞内验证miR-34a是否可以调控MET的表达.[结果]与HCC827细胞相比,HCC827/GR细胞株对吉非替尼明显耐药.在耐药HCC827/GR细胞株中,miR-34a低表达,MET高表达,而在HCC827细胞株中,miR-34a高表达,MET低表达.TargetScan生物信息学软件提示,MET是miR-34a的下游靶点之一.将携带荧光报告基团和MET 3'UTR的载体与miR-34a共转染入细胞后荧光度下降.[结论]miR-34a可能通过调控靶基因MET而参与EGFR-TKI的获得性耐药.
-
妊娠合并糖尿病80例
目的 探讨孕期及时诊断糖尿病(GDM)、良好管理与母婴预后的关系.方法 回顾性分析80例分娩的妊娠合并糖尿病(A组)与随机选择同期无糖尿病高危因素以及50 g葡萄糖负荷试验正常的孕妇80例(B组),对妊娠合并糖尿病的并发症妊高征、产后出血、早产、感染、巨大儿、糖尿病酮症、羊水过多,以及分娩时间方式、围产儿情况作比较分析.结果 仅有1/3的孕妇有患糖尿病的多饮、多食、多尿现象,50g葡萄糖负荷试验、100g葡萄糖耐量试验仍是筛选、诊断GDM主要手段;经过积极的治疗和监测,GDM的并发症中,除了早产明显高于对照组(P<0.05),其他和对照组相比差异均无统计学意义,巨大儿反而低于对照组(P<0.05).有5例GDM的首发症状为妊高征.结论 对GDM良好的孕期管理可明显改善母婴的预后.
-
MUC1、MUC2与Met在下咽癌中的表达及其临床意义
目的:探讨MUC1、MUC2与Met在下咽癌中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组化方法检测了59例下咽癌MUC1、MUC2和Met的表达.结果:59例下咽癌中MUC1高表达率为66.1%(39/59),MUC2高表达率为61.0%(36/59),Met高表达率为61.0%(36/59);MUC1低表达率为33.9%(20/59),MUC2低表达率39.0%(23/59),Met低表达率39.0%(23/59).MUC1和MUC2均与Met的表达高低显著相关(P＜0.01),MUC1与MUC2的表达不相关(P＞ 0.05).此三项指标的高表达组淋巴结转移的发生率均显著高于低表达组(P＜0.01),而在肿瘤的不同分化程度组间差异无显著性(P＞0.05).MUC2蛋白的表达在肿瘤的不同T分级组间差异有显著性(P＜0.01).MUC1、MUC2、Met高表达组生存率均显著低于低表达组(P＜0.01).结论:MUC1、MUC2、Met的表达参与了下咽癌的发生发展,3项指标联合检测可更好地预测下咽癌的预后.
-
微小RNA miR-199a/a*模拟物转染肝癌细胞HepG2中Met原癌基因的表达
目的 探讨在肝癌细胞系HepG2中,Met是否为miR-199a/a+的靶基因.方法 将miR.199a/a+的模拟物及阴性对照物分别转染至HepG2细胞中,转染后48 h及72 h分别提取RNA及蛋白行RT-PCR及Western Blot检测Met的表达.结果与阴性对照相比,转染Up-miR-199a+组的Met mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.001)表达水平均显著下调;而Up-miR-199a组与阴性对照组相比无统计学差异.结论 肝癌细胞HepG2中miR-199a+负调控Met的mRNA及蛋白表达.
关键词： 微小RNA miR-199a/a* Met 肝癌 HepG2细胞系 -
激活表皮生长因子受体增强MKN45细胞对MET抑制剂耐受性的机制研究
目的 探讨产生MET抑制剂耐药性的分子机制.方法 MKN45细胞培养好以后,使用MET特异性抑制剂PHA-665752 (250 nmol)或多西环素(DOXY,1μg/ml)诱导的shRNA系统使MET基因沉默,计算不同处理组(未处理组、EGF组、Gefitinib组和EGF+ Gefitinib组)MKN45细胞的存活率,同时通过Western-Bolt方法检测表皮生长因子受体(EGFR)、MET、AKT和MAPK的磷酸化水平.结果 PHA-665752或多西环素(DOXY)处理后,抑制MET基因表达,导致细胞存活率严重下降(P＜ 0.001),同时EGFR、MET、AKT和MAPK的磷酸化水平亦严重下降.然而,加入EGF后,细胞存活状况得到明显改善(P＜0.001或P＜0.01),并且AKT和MAPK的磷酸化水平明显上升.结论 激活表皮生长因子受体EGFR增强MKN45细胞对MET抑制剂的耐受性可能是AKT/MAPK信号通路发挥作用的.
关键词： 表皮生长因子受体 Met AKT/MAPK信号通路 -
上皮-间质转型/间质-上皮转型失衡与髓失生肝
近些年来,再生医学的发展为肝脏病的防治提供了新视角,基于干细胞的再生医学研究与应用发展迅速,与之相关的再生修复机制不断被发现,其中上皮-间质转型( epithelial-mesenchymal transition,EMT)、间质-上皮转型( mesenchymal-epithelial transition,MET)及EMT/MET平衡与失衡机制在再生修复中的科学意义和临床价值已成为新的研究热点."髓失生肝"是我们在继承中医"生机学说"[1]的基础上,就"肝主生发"藏象理论提出的新病因病机认识,有利于提高中医药防治肝脏病的能力和临床疗效[1].
-
推拿结合肌肉力量技术(MET)治疗肩周炎
肩周炎是肩关节周围炎的简称.为肩关节周围软组织的一种病变.肩关节周围炎是以肩部疼痛和肩关节活动受限为主症的一种常见疾病.临床上多见于四十五岁以上年龄的人.女性高于男性.临床治疗主要以针灸、推拿、理疗为主,功能锻炼为辅.在推拿治疗过程中,由于肩关节周围软组织粘连、痉挛,在做一些被动治疗时,患者多感觉疼痛难忍,并且患者的年龄多有可能伴有心脏病或高血压等一些内科疾病,在治疗过程中不得不慎重运用手法.近年笔者结合肌肉力量技术推拿治疗肩周炎,以不痛为基础,患者主动配合.乐于接受.疗效显著.现介绍如下.
