AIM To explore the components and the distributions of the cytoskeleton network in neoplastic Hep G2 cellsextracted with triton X-100 and (NH4)2SO4.METHODS Using the mouse lung adenocarcinoma cell sublines (C6/C7) with low and high metastasis as acontrol, the human hepatocellular carcinoma cell line (Hep G2) as well as the cell sublines (C6/C7) wasextracted with triton X-100 and/or (NH4)2SO4, then stained with Coomasie blue R250 or labeled withimmunoenzymatic technique to identify the cytokeratin-type or vimentin-type intermediate filamentcomponents and study the distributions of cytoskeleton comparatively.RESULTS Extracted with triton X-100 and/or (NH4)2SO4, then stained with Coomasie blue R250, the cells'cytoskeleton network were showed clearly; still it was very difficult to identify the variations of thecytoskeleton network in morphology by light microscopy when the same cells was extracted with the differentextraction above; compared with the low metastasis cells (C7), most of the high metastasis cells (C6) werelikely showed that the distribution of the cytoskeleton network was more irregular and uneven as well asgathering on one side to the cell neucleus, and so did a few of Hep G2 cells (the percentage of regular andeven distribution of cytoskeleton, C6: 8.0±1.0; C7: 84.0±2.0; Hep G2: 96.0±2.0; n = 500; x2-test,P<0.01). Moreover, extracted with triton X-100 and (NH4)2SO4, then labeled by immunoenzymatictechnique, the mouse lung adenocarcinoma sublines (C6/C7) were positive for cytokeratin antibody only, butthe hepatocellular carcinoma cell (Hep G2) was positive for both cytokeratin and vimentin antibodies.Besides these, in the same cells, the distribution of the intermediate filament network showed by theimmunoenzymatic technique was nearly keeping with that of the cytoskeleton network showed by Coomasieblue R250 stain.CONCLUSION ① It is very difficult to identify the variations of the cytoskeleton network in morphologyby light microscopy when the same cell was extracted with triton X-100 and/or (NH4)2SO4 then stained withCoomasie blue R250 in comparsion. ② The characterizing distribution of the intermediate filament as well asthe ctoskeleton network that was irregular, uneven and gathering on one side to the nucleus in neoplastic cellmight provide a valuable information for studing tumor metastasis. ③ In analysing the components ofintermediate filament protein of malignant tumor cells, the heterogenous proteins (co-expression) must betaken into consideration.

环氧氯丙烷和Triton X-100联合处理猪主动脉瓣的实验研究

用环氧氯丙烷(EC)和(或)Triton X-100分别对戊二醛(GA)处理的猪主动脉瓣进行化学改性,以单纯GA处理的猪瓣作对照.经新西兰幼兔皮下埋藏2、4、6、8周后分别应用原子吸收光谱、光镜及电镜观察,对钙质进行定量、定性和形态学研究.发现EC+Triton X-100组的钙含量低、组织形态学示钙化程度轻,EC组和Triton X-100组次之,GA组重.实验证明:EC+Triton X-100联合化学改性GA处理的猪主动脉瓣能明显提高防钙化的效果.且能保持猪主动脉瓣完整的组织结构并提高猪主动脉瓣组织的稳定性.急性毒性试验证明,经EC处理和EC+Triton X-100联合处理的猪主动脉瓣无毒性反应.

不同打孔条件对BGC-823中MAC30和F-actin免疫荧光检测精度的影响

目的 探讨不同浓度和时间条件下,打孔试剂Triton X-100对胃癌细胞系BGC-823中MAC30和F-actin表达和定位精度的影响.方法 应用0.1％、0.2％或0.5％含量的打孔试剂Triton X-100,处理BGC-823细胞5、10或15 min,然后利用MAC30和F-actin抗体进行免疫荧光染色.结果 当应用0.1％Triton X-100与固定的胃癌细胞系BGC-823作用5 min,MAC30蛋白在BGC-823细胞质中高表达,F-actin染色清晰.随着打孔试剂含量从0.1％提高到0.5％,或作用时间从5 min延长到15 min,MAC30在细胞质和细胞核中表达也随之上调,尤在细胞质中高表达,而F-actin染色则开始变得模糊,直至无法分辨肌丝和伪足.结论 应用细胞免疫荧光染色揭示某蛋白与胃癌发生发展相关性研究中,应考虑不同打孔时间和含量所产生的染色结果差异,注重实验条件的选择与优化.

Triton损伤成年大鼠嗅上皮对嗅球钙结合蛋白-D和小白蛋白表达的影响

目的探讨嗅觉障碍的可能机制.方法成年SD大鼠,Triton X-100灌流单侧鼻孔,30,45和60 d后用免疫组化方法检测嗅球的钙结合蛋白-D(CB)和小白蛋白(PV)表达.结果损伤后30 d,与对照侧相比,损伤侧嗅球的CB和PV阳性细胞密度减少68.9%和66.7%,45 d后减少46.4%和50.0%,45 d的CB和PV阳性细胞密度比30 d时增加,60 d时接近对照侧.结论大鼠嗅球中CB和PV的表达受Triton诱导的传入神经阻滞的可逆调控.

火焰原子吸收光谱法测定血清中锌

血清经三氯乙酸沉淀蛋白后,并用Triton X-100作基体改进剂,导入原子化器中,原子化以后,213.8nm波长,其吸光值在一定范围内与锌含量成正比,与标准系列比较定量.结果 表明:加入三氯乙酸后,血清中的锌很容易游离出来,通过离心避免了燃烧头堵塞的现象,提高了检测的准确性和回收率,Triton X-100作基体改进剂起增敏和抗干扰的作用.方法 低检出限(3s/k)为0.015mg/L,相对标准偏差(n=7)为3.12%.应用此法测定血清中锌,加标回收率在90.8%～96.7%之间.

同种异体神经复合体桥接修复兔坐骨神经缺损与神经-肌结构重建及功能恢复

背景:课题组在前期研究中分别探讨了神经生长因子对胎兔许旺细胞培养的影响以及去细胞神经移植体的制备,弄在体外成功制备出重新细胞化的神经移植复合体. 目的:探讨种植许旺细胞的去细胞同种异体神经移植对神经-肌结构重建和功能恢复的作用. 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-03/2007-06在河北医科大学第三医院中心实验室完成. 材料:健康成年新西兰白兔37只,1只用于制备去细胞神经桥接体,剩余36只随机分为实验组、对照组,18只/组.方法:切取兔双侧坐骨神经,剥除周围组织,剪成约每段3 cm,放入TritonX-100水溶液中静置12 h,蒸馏水漂洗,以使溶于水的TritonX-100膜蛋白体复合物充分脱离神经干,如此反复,TritonX-100作用时间共为96 h,萃取好的去细胞神经桥接体在Hank's液中4℃保存.调整第2代许旺细胞浓度至1×10~(11)L~(-1),用100 μL微量注射器注入去细胞神经桥接体内,然后将神经段置于DMEM培养液中,即为同种异体神经复合体.实验组兔于膝关节上方造成20 mm长缺损,将种植许旺细胞的同种异体神经复合体缝接于坐骨神经两断端;对照组兔左侧坐骨神经造成20 mm长缺损后,用单纯的去细胞同种异体神经桥接物缝接神经两断端. 主要观察指标:分别于术后4,8,16周大体观察兔足部溃疡形成及愈合情况,通过肌电图、光镜、电镜等方法检测远端腓神经的轴突、髓鞘及胫骨前肌、运动终板的恢复情况. 结果:术后4,8,16周两组动物术区局部均未出现明显的排斥反应,实验组足部溃疡愈合情况、神经纤维数目、髓鞘及再生神经的超微结构、运动终板的形态及靶肌肉结构的恢复均优于对照组.术后4周两组均未见明显的神经传导,术后8,16周实验组胫骨前肌湿质量、神经传导速度均优于对照组(P<0.05). 结论:种植许旺细胞的去细胞同种异体神经复合体不仅能够为再生神经提供良好的支架作用,还能诱导和促进神经轴突和髓鞘的再生,对坐骨神经缺损后的神经-肌结构重建与功能恢复具有显著的促进作用.

胰蛋白酶法和Trilon X-100法脱猪软骨细胞的比较

背景:作为修复软骨缺损的一种材料,脱细胞软骨基质已受到越来越多研究者的关注,但是制备脱细胞软骨基质的两种主要背景:作为修复软骨缺损的一种材料,脱细胞软骨基质已受到越来越多研究者的关注,但是制备脱细胞软骨基质的两种主要方法其脱细胞效果孰优孰劣尚不清楚.目的:对比胰蛋白酶法和Triton X-100法脱猪关节软骨细胞的效果.设计、时间及地点:对比观察,于2008-03/07在山西医科大学第二医院骨科中心实验室完成.材料:新鲜猪膝、髋关节软骨市场上购得.方法;选取新鲜猪关节软骨片分别置入2.5g/L胰酶溶液和2.5 g/L Triton X-100溶液中脱细胞处理,并以未经处理的新鲜软骨片作对照.主要观察指标:①大体观察脱细胞后关节软骨的外观形态.②免疫组织化学染色及扫描电镜下观察两种脱细胞方式对细胞外基质胶原的影响.③每组随机选取10片软骨片进行加载、卸载试验和拉断试验,测定断裂强度和断裂拉伸率.结果:①经过两种方法脱细胞后,软骨脱细胞基质在外观上与未脱细胞软骨差别甚微,只是颜色较软骨略白,触摸较未脱细胞基质柔软.②免疫组织化学染色及扫描电镜可见,胰酶法和Triton X-100法均彻底脱去了关节软骨上的细胞成分,胰酶法观察到胶原排列有序,纹理清晰,可见胰酶在脱细胞的同时对细胞外基质没有明显的破坏;Triton X-100法观察到胶原仍比较多,但纹理结构有些紊乱,可能是Triton X-100法脱细胞对细胞外基质进行了破坏.③新鲜关节软骨组、胰酶组和Triton X-100组断裂强度和断裂拉伸率相比,差异均无显著性意义.结论:两种方法均彻底脱去了关节软骨上的细胞成分,脱胰酶法脱猪关节软骨细胞的方法作用时间较短,胶原保存好,且成本较低.Triton X-100法脱细胞步骤较多,时间较长,对胶原结构有轻微的破坏,但对软骨的力学性能没有显著影响.

不同方法制备脱细胞猪主动脉瓣膜支架的组织结构

背景:理想的脱细胞方法要求既能完全去除供体细胞,降低免疫原性,又能保留天然瓣膜的胶原纤维、弹力纤维等细胞外基质成分,以保持足够的机械强度.目的:采用不同洗剂制备脱细胞猪主动脉瓣膜支架,对比其组织结构,探讨为有效的脱细胞瓣膜支架制备方法.方法:20 个新鲜猪主动脉瓣膜随机分为新鲜对照组、去污剂组、酶消化组和去污剂-酶消化组,后3 组分别使用TritonX-100、胰蛋白酶以及二者联合的方法制备脱细胞瓣膜支架,对比支架大体形态、苏木精-伊红染色、Mallory-Heidenhain 染色和电镜下超微结构的不同.结果与结论:经脱细胞处理后,去污剂组瓣叶柔软、光滑,苏木精-伊红染色少量核物质存留、纤维排列规整,Mallory-Heidenhain 染色胶原纤维和弹性纤维相交错,电镜下呈波浪状排列、原纤维横纹清楚;酶消化组瓣叶局部塌陷,苏木精伊红染色细胞完全去除、纤维排列较紊乱,Mallory-Heidenhain 染色胶原纤维和弹性纤维呈网状排列,电镜下纤维部分断裂、原纤维横纹存在;去污剂-酶消化组瓣叶柔软、光滑,苏木精伊红染色细胞完全去除、纤维完整,Mallory-Heidenhain 染色胶原纤维和弹性纤维平行排列,电镜下纤维完好,但排列稀疏,原纤维横纹清晰.说明3 种方法均可有效去除供体细胞,保持纤维结构相对完整,在完全清除供体细胞并保持纤维支架完整性方面,TritonX-100 联合胰蛋白酶的方法更为有效.

聚氧乙烯辛烷基酚制备去细胞神经移植体

目的 采用聚氧乙烯辛烷基酚(Triton X-100)去除周围神经中的雪旺细胞和髓鞘,制取天然神经细胞外基质,构建组织工程化神经移植体.方法 健康新西兰大耳白兔30只,分别自梨状肌下缘水平以远切取10 mm双侧坐骨神经60根,随机分为A(12h组)、B(24 h组)、C(48 h组)、D(96 h组)、E(1 w组)用于化学萃取,F(新鲜神经)为对照组.5组神经Triton X-100萃取时间分别为12 h、24 h、48 h、96 h、1 w.在新鲜神经和萃取后的神经中段分别切取1段2 mm神经,10％甲醛固定,常规石蜡包埋、纵形切片,行HE染色、磷钨酸苏木素(PTAH)染色、阿尔辛蓝(Alcian blue)染色、层黏连蛋白(Laminin)免疫组化染色.在光镜下对各组神经进行观察.结果 光镜下对各组神经进行观察,新鲜神经可见雪旺细胞分布均匀,髓鞘、基底膜排列整齐.随着萃取时间的延长雪旺细胞、髓鞘逐渐减少,髓鞘与基底膜的界限不清,至96 h时神经雪旺细胞、髓鞘消失,纵切片上基底膜呈栅栏样排列,膜与膜之间为中空结构的基底膜管,萃取时间至1 w时,基底膜仍清晰,但由胶原纤维构成的管状结构排列疏散,不规则,部分有断裂.扫描电镜下观察,随着萃取时间延长,神经内的轴突、髓鞘逐渐减少,萃取时间至96 h时神经内的轴突、髓鞘已被完全去除,可见由胶原纤维构成的立体管状结构,胶原纤维仍维持原有的位置、形态及结构特征,管内并可见膜样结构.萃取时间为1 w时,由胶原纤维构成的立体管状结构与96 h的标本相似,但结构较之稍散乱,形成的管腔不规则.A～F组切片单位面积Lamiain平均灰度分别为:140.1 ±3.41；142.1±3.14；142.1±3.14;140.4 ±4.03;141.7±2.62;142.7±7.24,各组间无显著性差异(P=0.751).结论 用Triton X-100化学萃取方法是制备组织工程化神经移植体的有效方法.萃取人类长段粗大神经时,可适当延长萃取时间,不致破坏基底膜的主要成分层黏连蛋白.

聚氧乙烯辛烷基酚制备去细胞神经移植体的超微结构改变

目的 采用聚氧乙烯辛烷基酚(Triton X-100)去除异体周围神经中的雪旺细胞和髓鞘,制取天然神经细胞外基质的超微结构.方法 健康新西兰大耳白兔30只,分别自梨状肌下缘水平以远切取10 mm双侧坐骨神经60根,随机分为六组,其中12h组、24 h组、48 h组、96 h组、1 w组用于化学萃取,新鲜神经为对照组.神经萃取前先在手术显微镜下剪去表面的脂肪组织和部分神经外膜,然后置4℃蒸馏水中静置6h,以使细胞和髓鞘在低渗液体中膨胀、细胞被胀破,使之易于Triton X-100的渗透；再将神经放人3％的Triton X-100水溶液中分别静置12h,然后置于蒸馏水中震荡、漂洗6h,以使溶于水的Triton X-100膜蛋白复合体充分脱离神经干.如此反复,并且每次更换蒸馏水、Triton X-100水溶液.五组神经TritonX-100萃取时间分别为12h、24 h、48 h、96 h、1 w.在新鲜神经和萃取后的神经中段分别切取一段神经,2.5％戊二醛固定后,制成扫描电镜标本,用日立S-3500N型扫描电镜观察神经的立体结构并采集图像.结果 扫描电镜下观察,随着萃取时间的延长,神经内的轴突、髓鞘逐渐减少,少于96 h时仍可见有轴突、髓鞘的残留.萃取时间至96 h时神经内的轴突、髓鞘已被完全去除,可见由胶原纤维构成的立体管状结构,胶原纤维仍维持原有的位置、形态及结构特征,管内并可见膜样结构,为雪旺细胞基底膜.萃取时间为1 w的标本扫描电镜下观察,由胶原纤维构成的立体管状结构与96 h的标本相似,但结构较之稍散乱,形成的管腔不规则.结论 用Triton X-100化学萃取方法是制备组织工程化神经移植体的有效方法.萃取人类长段粗大神经时,为使雪旺细胞、轴突、髓鞘去除完全,可适当延长萃取时间.

无细胞百日咳纯化抗原中Triton X-100残留量检测方法的建立及验证

目的 建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测无细胞百日咳纯化抗原中Triton X-100残留量,并对该方法进行验证及初步应用.方法 HPLC条件:Agilent SB 300 C18色谱柱(规格:4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:纯化水与甲醇的体积比为20:80;检测波长:225 nm;色谱柱温:30℃;流速:0.8 ml/min;进样量:10μl.对方法的系统适应性、专属性、线性、准确性、精密性、耐用性及定量限进行验证,并用建立的方法检测6批无细胞百日咳纯化抗原中的Tfton X-100残留量.结果 该方法检测6份10 μg/ml Triton X-100的理论塔板数在1 550～1 580之间,Triton X-100峰面积和保留时间的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为2.59％和0.04％;12 μg/ml的Triton X-100溶液和无细胞百日咳纯化抗原样品中,Triton X-100能与其他物质完全分离;在2 ～ 30 μg/ml范围内,Triton X-100浓度与峰面积呈良好的线性关系(r2=0.999 01);该方法检测不同浓度Triton X-100样品的加标回收率均在98％～ 102％之间,RSD均不超过2％;同一实验人员在不同工作日和不同检测人员在同一工作日用该方法检测供试品中TritonX-100含量的RSD均小于4％;改变流动相的甲醇比例和柱温后,6次检测值的RSD分别为0.95％和0.51％;定量限可达0.5μg/ml.该方法检测6批无细胞百日咳纯化抗原中的Triton X-100残留量均较低.结论 建立的HPLC法系统适应性、专属性、线性、准确性、精密性、耐用性良好,可用于无细胞百日咳纯化抗原中Triton X-100残留量的定量检测.

流感病毒裂解工艺的优化

目的 探讨影响流感病毒裂解的因素,优化流感病毒裂解工艺.方法 分别在不同裂解时间(TritonX-100裂解1、2、3和4h)、不同终浓度的裂解剂(终浓度为0.5％、0.6％、0.7％和0.8％的TritonX-100)、不同总蛋白浓度(2 000、3 000和4 000 μg/ml)及不同的离子强度[终浓度为0.01、0.05、0.1和0.5 mol/L的PBS(pH 7.2)]下,对流感病毒进行裂解,电镜下观察病毒裂解效果,同时采用免疫单扩散法检测血凝素含量,Lowry法检测总蛋白含量,计算蛋白含量/血凝素含量比值(裂解后病毒纯度)及血凝素回收率,确定佳裂解工艺参数.结果 当裂解前病毒纯化液蛋白含量范围为2 000 ～3 000 μg/ml,PBS终浓度为0.1 mol/L时,利用终浓度为0.7％～0.8％的Tfton X-100裂解流感病毒2h,可获得佳裂解效果.结论 确定了流感病毒佳裂解参数,优化了流感病毒裂解疫苗生产中的裂解工艺.

比较两种方法制备脱细胞小血管支架

目的:比较0.5%Triton X-100+0.05%NH4OH和酶法制备脱细胞小血管支架的效果.方法:分别用含0.5%Triton X-100+0.05%NH4OH处理3 d或1.0H Triton X-100+0.125%胰蛋白酶+Dnase+Rnase孵育48 h,脱去犬股静脉中的细胞成分,50Co辐照消毒,血清浸泡24 h,将平滑肌细胞和内皮细胞接种到脱细胞支架中;进行H-E染色、胶原纤维和弹力纤维染色,扫描电镜观察及力学检测.结果:0.5%Triton X-100+0.05%NH4OH法完全地脱去了血管细胞;细胞外基质较完整地保留下来,其形态结构与脱细胞前无明显改变;见种植细胞在支架内生长良好,连成片,支架具有良好的生物相容性;力学结果显示其弹性回复率和大断裂强度好于酶组.结论:两种方法比较,0.5%Triton X-100+0.05%NH4OH法简便易行,成本低,脱细胞效果好,组织相容性佳,对力学性状影响小,是比较理想的制备脱细胞小血管支架的方法.

高效液相色谱法测定微乳体系中胰岛素含量的前处理方法比较

目的:研究反相高效液相色谱测定微乳体系中胰岛素含量的前处理方法,并对3种前处理方法进行了比较.方法:采用Triton X-100破乳、盐酸酸解、水饱和正丁醇萃取3种方法对胰岛素微乳体系进行前处理,用RP-HPLC对处理后样品中胰岛素的含量进行测定.结果:Triton X-100、酸解、萃取3种方法回收率分别为98.7%～100.6%,94.1%～96.8%,89.2%～92.7%;RSD分别为1.58%～3.20%,2.08%～4.30%,4.07%～6.09%.结论:3种方法中,以Triton X-100破乳法的结果较为精确,回收率较高;操作较为方便简单、快速可靠;对胰岛素稳定性没有影响,样品消耗量较少.

头孢唑酮在Triton X-100体系囊泡中的包封和缓释

目的 研究了β-内酰胺类抗生素药物头孢唑酮在表面活性剂囊泡中的包封和释放行为.方法 超声Triton X-100体系层状液晶制备了囊泡,用超离心分离法和紫外分光光度法测定头孢唑酮的包封率和释放速率.结果 Triton X-100/n-C10H21OH/H2O体系囊泡对头孢唑酮具有较好的包封和缓释作用.结论 表面活性剂体系囊泡可作为一种新的药物控制释放系统.

石墨炉原子吸收光谱法直接测定尿锰的条件优化探析

目的 通过研究和改进尿锰测定过程中的条件,为石墨炉原子吸收光谱法直接测定尿锰提供一种比较简便易行且结果稳定的方法.方法 通过优化石墨炉升温程序、Triton X-100的用量等测定条件,用0.1％ Triton X-100作为稀释剂,磷酸氢二铵为基体改进剂,将样品直接注入石墨管中,测定尿中锰的含量.结果 在适宜的测定条件下,测得该方法的检出限为0.40 μg/L,锰浓度在1.5 μg/L～ 20 μg/L时,体系的吸收值与锰的浓度之间具有良好的线性关系,相关系数r=0.997 0.RSD为1.1％ ～4.8％,加标回收率为95.0％～ 104.1％.将此方法应用于尿样中锰含量的测定,结果令人满意.结论 方法样品用量少,操作简单快速,灵敏度高,精密度高,准确度好,适用于大批量尿锰的测定,并大大提高了工作效率.

Triton X-100作稀释剂石墨炉原子吸收光谱法直接测定尿中铅

目前测定尿铅的标准方法是WS/T 18-1996《尿中铅的石墨炉原子吸收光谱测定方法》[1],普遍认为使用基体改进剂对于改善石墨炉原子吸收光谱法测定生物样品中铅具有很大的作用.本文用Triton X-100稀释尿样,使用氯化钯作为基体改进剂标准曲线法直接进样进行测定.表面活性剂Triton X-100稀释尿样能使尿液形成稳定的均相溶液,消除基体干扰效果好,避免进样损失,在测定中改善峰形,使测定信号稳定.该方法准确度好,简便快速,适用于大批量样品测定,现报告如下.

Triton X-100基体改进剂石墨炉原子吸收法直接测定血镉

目的 建立有机试剂作为基体改进剂测定血中镉的石墨炉原子吸收法. 方法利用Triton X-100表面活性剂的性质,将血液进行稀释制成悬浮液直接进样,直接测定血液中镉的含量. 结果方法的检出限为0.01μg/L,回收率为96.0%～101.5%,相对标准偏差(RSD)小于6.0%. 结论该法样品溶液易于灰化,原子化信号得以改善,基体干扰明显减少,简便易行,适用于大批血样中镉的测定.

Triton X-100、环氧氯丙烷联合改性处理牛颈静脉带瓣管道的体内外生物相容性研究

目的 评价Triton X-100、环氧氯丙烷联合改性处理戊二醛固定的牛颈静脉带瓣管道的体内外生物相容性.方法 取新鲜牛颈静脉,热缺血时间在2h以内,依次经戊二醛、Triton X-100、环氧氯丙烷交联处理,制备出新型抗钙化牛颈静脉带瓣管道(EC+Tr组)；以单纯戊二醛处理的牛颈静脉为对照(GA组),参照国家植入材料的检验标准,采用处理后牛颈静脉材料浸提液进行溶血试验、皮内注射刺激试验、急性全身毒性试验和细胞毒性试验.结果 溶血试验中,EC+Tr组溶血率为2.6％,小于GA组3.7％的溶血率(P＜0.05),符合国家标准(＜5％)；皮内刺激试验中,EC+Tr组PII(原发性刺激指数)为0.5,小于GA组的0.87,提示对受试动物皮肤刺激轻微；急性全身毒性试验中,受试动物均未出现毒性症状；细胞毒性试验中,EC+Tr组培养的L-929小鼠成纤维细胞经100％浓度材料浸提液处理后形态良好,增殖率达87.55％,毒性评级为1级(合格),优于GA组结果(增值率为69.47％,毒性评级为2级,P＜0.05).结论 Triton X-100、环氧氯丙烷联合改性处理戊二醛固定的牛颈静脉带瓣管道符合国家标准,具有良好的生物相容性,为进一步临床应用提供了理论依据.

TritonX-100-5-Br-PADAP光度法测定发样中铁

在表面活性剂Triton X-100存在下,以5-Br-PADAP作显色剂,光度法测定发样中铁,结果在所选浓度范围内线性关系良好,稳定时间长,回收率平均为98.14%.