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组织原位记忆T细胞的研究进展
黏膜部位是诸多病原体入侵的门户，近些年来新发的传染病大部分都是通过黏膜部位传播，如人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（ human immunodeficiency virus，HIV-1）、流感等。面对各种外来病原体的不断入侵，免疫系统在黏膜部位也采取了多样的抵御措施［1］，如分泌防御素、黏蛋白以及趋化抗原特异性免疫记忆细胞的归巢［2］。在黏膜部位诱导抗原特异性的免疫记忆是近些年来黏膜免疫的重要目标。记忆T细胞是免疫记忆的主要载体之一，其形成经历了抗原特异性克隆的增殖、收缩和记忆3个时相，只有少数细胞终成为长效记忆性T细胞。与初始T细胞相比，记忆T细胞活化阈值很低，不需要专职抗原提呈细胞的协助；其维持与效应T细胞不同，不需要抗原的持续存在［3］。根据能否产生速发性效应功能以及归巢受体的表达，可将记忆性CD8＋T 细胞分为两群：中心记忆 T 细胞（ central memory T cell， TCM ）和效应记忆 T 细胞（ effector memory T cell， TEM ）。 TCM（表达CCR7和 CD62L分子），主要分布于淋巴结和脾，介导反应性记忆，再次接触抗原时迅速增殖，不直接行使效应功能；而TEM不表达归巢到淋巴结的分子CCR7和CD62L，主要存在于脾和淋巴组织以外的器官和组织［4］，不断参与周身循环［5］，可迁移至外周炎症组织显示速发性效应功能，增殖能力较低，介导保护性记忆。目前大部分对于记忆T细胞的理解主要是来源于对位于血液循环以及淋巴组织中的T细胞的研究。近年研究发现一种分化更为完全的记忆T细胞，因其长期存在于病原体感染过的组织部位而被命名为组织原位记忆T细胞（ tissue-resident memory T cells ， TRM ）。 TRM不参与血液循环以及淋巴循环［4］，在感染早期建立，其维持不需要外周循环中的TEM以及TCM的补充，并且为局部组织提供免疫保护。与TEM相比其在表型、功能特征以及组织分布上具有较大的异质性。实验表明这群定居在外周组织中的记忆T细胞在对抗局部感染的过程中起着重要作用，本文将就TRM的发现、定位、功能以及诱导与维持机制等方面的研究进展进行综述。
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组织原位分析鼻咽癌细胞核DNA干系倍体及其异质性
组织原位分析鼻咽癌细胞核的DNA干系倍体及其异质性.收集42例鼻咽癌病例的归档蜡块,4μm、8μm连续组织学切片各一张.每个病例选取三个癌巢或肿瘤组织区域(共126个样本),使用TIGER细胞图像分析仪4μm组织切片测量鼻咽癌细胞核DNA的光密度等参数,8μm组织切片测量单个完整鼻咽癌细胞核的体积等参数,计算获得每个癌巢或肿瘤组织区域的以单个完整鼻咽癌细胞核的体积为单位的DNA含量(以体积积分光密度表述),以同一切片内正常鼻咽部上皮非基底细胞作为其内参照,计算其DNA干系倍体.结果显示:鼻咽癌细胞核的DNA干系倍体主要集中在1.76～3.00(DNA指数为0.88～1.50)之间,14个样本为DNA干系四倍体,仅2个样本为DNA干系亚二倍体;DNA干系倍体异质性率为66.67%.可得结论:(1)鼻咽癌DNA干系倍体主要在近二倍体与近四倍体之间;(2)鼻咽癌中存在DNA干系倍体异质性.
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组织原位测算单个肝细胞核的DNA总量
目的 再次探讨利用图像分析系统在组织切片原位测算以单个完整细胞(核)体积为单位的化学物质总量方法的可靠性.方法 选取10只成年健康雄性昆明小鼠,每只小鼠按常规制片方法制作4 μm和11 μm两种厚度的肝组织切片各一张,改良Feulgen染色,应用细胞图像分析仪在组织原位测量和计算以单个完整二倍体、四倍体和八倍体肝细胞核体积为单位的DNA总量.结果 组织原位测算的以单个完整二倍体、四倍体、八倍体肝细胞核体积为单位的DNA总量间的比值基本上呈2或4的倍数关系.结论 应用细胞图像分析仪在组织切片原位通过合适的抽样和测量计算,可较准确地获得以单个完整细胞(核)体积为单位的化学物质总量.
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人胚胎大脑标本石蜡制片及免疫组织化学方法
免疫组织化学是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行定位,在组织原位显示抗原(或抗体),抗原、抗体反应具有较高的特异性,但其结合是不可见的,必须借助可见的组织化学手段显示其反应部位,因此,免疫组织化学是目前病理学、组织学、胚胎学等多学科领域研究的重要方法.但免疫组织化学是否成功?其关键因素之一就是制作标本石蜡制片.经查阅文献,目前有关人胚胎肠[1]组织石蜡制片有少数报道,但对人胚胎大脑标本石蜡制片过程及免疫组织化学方法的操作,未见报道.现就人胚胎大脑4个月标本为例,根据本实验室工作经验,对其流程及方法进行探讨.
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慢性乙型肝炎患者肝组织瘦素的表达
近年来瘦素(leptin)与肝脏疾病的关系日益受到关注.动物实验表明,瘦素可能在鼠肝纤维化病理形成中具有重要意义[1].目前关于人瘦素血清学研究较多,而本实验采用免疫组化方法,主要探讨HBV感染者肝组织原位瘦素表达情况.
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乙型肝炎血清可溶性Fas与FasL的检测
FasL和Fas是介导细胞凋亡的一对重要的细胞膜表面死亡分子及其受体,表达FasL的细胞可介导表达Fas的靶细胞发生凋亡.细胞毒性T细胞(CTLs)介导的细胞免疫在乙型肝炎的发病机制中起着重要作用,其主要机制是通过FasL介导Fas阳性的肝细胞凋亡[1].因此,Fas/FasL介导的细胞凋亡机制与乙型肝炎的发生发展有着密切关系.迄今,有关肝病Fas和FasL的研究大多限于肝组织原位,至于其可溶性Fas(sFas)和可溶性FasL(sFasL)与肝病的关系尚不清楚,两者在乙型肝炎中的变化也未见报道.本研究通过检测乙型肝炎血清中sFas和sFasL的水平,探讨sFas和sFasL在乙型肝炎中的临床意义和两者对乙型肝炎肝内细胞凋亡可能存在的调节作用.
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结肠癌瘦素和瘦素受体表达及其意义
结肠癌是严重威胁人类健康的常见恶性肿瘤,其具体发病机制尚未完全阐明.瘦素在许多恶性肿瘤中都有表达,可能在刺激肿瘤细胞增殖,调节肿瘤血管生成及肿瘤侵袭、转移等方面起重要作用[1].本研究拟通过免疫组化和组织原位RT-PCR技术探讨在人类结肠癌中瘦素及其受体的表达.
