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向成骨细胞和成脂肪细胞分化的小鼠骨间充质干细胞调节单核细胞来源的破骨细胞发育
为探究分化阶段的骨间充质干细胞对于破骨细胞的影响,将小鼠密质骨来源的间充质干细胞体外诱导分化,研究其对于破骨细胞发育的调控作用.从小鼠密质骨中分离培养得到间充质干细胞,将其进行成骨和成脂肪诱导1周,分别将成骨分化和成脂肪分化的间充质干细胞与CD11b+的单核细胞共同培养,并以抗酒石酸的酸性磷酸酶染色鉴定破骨细胞.结果表明:向成骨分化和成脂肪分化的间充质干细胞均可以调节单核细胞向破骨细胞分化.与未分化的间充质干细胞相比,成骨分化的间充质干细胞促进破骨细胞发育的作用减弱,而成脂肪分化的间充质干细胞促进破骨细胞发育的作用增强.结论:间充质干细胞调节破骨细胞发育的能力在其分化为不同种类细胞后发生相应变化,提示间充质于细胞通过分化为子代细胞而对破骨细胞发育发挥选择性的调节.
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小檗碱对脂肪细胞瘦素和抵抗素基因表达的影响
小檗碱是中药黄连的主要成分,具有改善胰岛素抵抗、降血糖和纠正脂质代谢紊乱的作用,临床上用于治疗2型糖尿病[1].近年来,脂肪组织在2型糖尿病发病中的作用日益受到重视,脂肪细胞分泌的多种激素在机体的糖、脂代谢中起重要作用,其中瘦素(leptin)和抵抗素(resistin)的作用备受关注.本实验采用的3T3-L1细胞株是一种来自小鼠的前脂肪细胞,在一定条件下能分化成脂肪细胞,被广泛用于脂肪细胞的功能研究.本研究通过体外观察小檗碱对瘦素和抵抗素基因表达的影响,探讨其改善胰岛素抵抗的分子机制.
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人脐血间充质干细胞的分离培养及其多向分化潜能的实验研究
目的 研究人脐血间充质干细胞(MSCs)分离培养的生物学特性及其向成骨、成脂诱导分化的能力.方法 从人脐血中分离扩增MSCs,显微镜下观察其形态及生长情况,绘制生长曲线,电镜下观察超微结构,流式细胞仪检测细胞表面标志物;成骨、成脂诱导后以碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色鉴定MSCs成骨分化潜能,油红O染色鉴定成脂分化潜能.结果 人脐血MSCs为成纤维细胞样,漩涡状贴壁生长排列,传至第110代细胞形态无明显变化;电镜下显示为低分化细胞;细胞表面不表达CD34和CD45,强表达CD29、CD44和CD90;成骨诱导后可检测到ALP表达及钙化结节形成;成脂诱导后可检测到脂滴形成.结论 人脐血中可分离出MSCs,与其他来源的MSCs具有类似的生物学特性及多向分化潜能,脐血有可能成为骨组织工程种子细胞的来源.
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人脐血间充质干细胞的生物学特性及其成骨成脂肪分化
背景:目前有关脐血间充质干细胞的生物学特性及分化能力的研究较少.目的:观察人脐血间充质干细胞的生物学特性,及其向成骨、成脂肪细胞分化的能力.方法:从不同胎龄脐血中分离间充质干细胞,对其进行原代和传代培养,并诱导其向成骨及成脂肪细胞分化.结果与结论:倒置相差显微镜下见分离培养的脐血间充质干细胞贴壁生长,呈成纤维细胞样外观,细胞呈螺旋状排列;透射电镜下可见脐血间充质干细胞胞核比例大,细胞器少,为低分化细胞;原代及传代培养的脐血间充质干细胞生长曲线均呈S 型,第3,5 代细胞增殖能力强,低胎龄的脐血间充质干细胞集落形成能力强.流式细胞仪检测结果显示,脐血间充质干细胞稳定表达间充质干细胞相关抗原CD29,CD44 和CD90,不表达造血细胞标志CD34 和CD45.成骨诱导后3 周,碱性磷酸酶染色为强阳性,茜素红染色可见大量钙化基质的形成;成脂诱导3 周,油红O 染色可检测到胞质中脂滴的形成.提示脐血间充质干细胞具有间充质干细胞的形态特征、生长增殖特点及细胞表面标志物等生物学特性,可向成骨细胞及脂肪细胞分化.
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人类脂肪来源干细胞经长期深低温保藏后保留的增殖能力和多能性
背景 人类脂肪来源干(间质)细胞作为间叶细胞谱系(包括脂肪,骨骼肌和心肌,骨,软骨,血管)组织缺损的再生疗法的工具,是很有应用前景的.同其他领域所发生的一样(包括造血干细胞和脐带血细胞在基于细胞的治疗方法中的应用),在未来可能的临床应用中,脂肪来源干细胞深低温保藏也许是一项必不可少的基本技术.方法 作者从18位患者的抽吸获得脂肪中分离出脂肪来源干细胞,并在干细胞深低温保藏6个月前后分别检测它们的增殖能力和多功能性,深低温保藏过程遵循他们已确定的方案.通过检测培养细胞的倍增时间对细胞增殖能力进行量化分析,通过分析脂肪来源干细胞向成软骨、成骨、和成脂谱系细胞的分化确定细胞的多功能性.另外,通过流式细胞术确定细胞表面标记物的表达谱,并对新鲜的和经深低温保藏的脂肪来源干细胞表面标记物的表达谱进行对比.结果 经深低温保藏的脂肪来源干细胞完全保存分化成脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞的能力及增殖能力.流式细胞术分析结果显示深低温保藏前后细胞表面标记物表达谱保持不变.结论 在现有的方案下,脂肪来源干细胞至少可深低温保藏6个月,且不损失任何增殖能力和分化潜能.这些结果保证了自体库存的脂肪来源干细胞在未来的临床应用中的可用性.
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间充质干细胞免疫调节作用研究进展
骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSCs)是骨髓中的多能祖细胞,具有向成骨细胞、成软骨细胞、成脂肪细胞、成肌细胞等多种结缔组织分化的性质,并可支持造血[1-4].体外试验和异基因移植研究中均显示,MSCs具有较强的免疫调节功能,近年来对MSCs的免疫调节及其临床应用的研究取得了较大进展.
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成骨细胞分化与骨骼发育的转录因子Cbfα1/Runx2
成骨细胞是参与骨形成,骨骼生长和发育的一类重要细胞,它起源于多能间充质干细胞,是间充质干细胞在体内的各种调控因素的调节下发育而成.然而,间充质干细胞具有多向分化潜能,不同刺激条件下可向成骨细胞、破骨细胞、成脂肪细胞、成软骨细胞和成肌细胞分化.Cbfα1/Runx2是新发现的一类调控间充质干细胞向成骨方向分化的特异性转录因子[1、2],因此了解Cbfa1/Runx2调控间充质干细胞的作用机理,可以加深对骨骼发育分子机制的认识.本文就当前研究领域内Cbfα1/Runx2与骨骼发育关系的研究进展综述如下.
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胎血间充质干细胞移植对脑卒中大鼠的治疗作用
间充质干细胞(MSCs)是可从人骨髓、外周血、肌肉、胎肝、脐带血中分离获得的非造血干细胞,能分化成脂肪细胞、成骨细胞、神经元和肝细胞等多胚层组织细胞.本研究试图经尾静脉注射胎血MSCs给大脑中动脉栓塞模型(MCAO)大鼠,探讨其在脑内存活、迁徙、分化情况及其对神经功能改善的可能作用.报告如下:
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通络生骨胶囊对骨髓基质干细胞成骨和成脂肪双向分化的影响
目的:研究通络生骨胶囊对体外培养糖皮质激素诱导骨髓基质干细胞(MSCs)成骨和成脂肪双向分化的影响.方法:使用地塞米松浓度10-8M诱导MSCs成脂肪和成骨双向分化,以通络生骨胶囊治疗,采用逆转录聚合酶链反应法检测脂蛋白脂酶,骨桥蛋白基因的表达水平,观察MSCs成骨和成脂肪分化的改变.结果:地塞米松10-8M可诱导MSCs成骨和成脂肪双向分化;通络生骨胶囊具有明显的抑制成脂肪分化,促进成骨分化的作用.结论:通络生骨胶囊治疗激素性股骨头坏死药效机制,可能是通过对MSCs成脂肪和成骨分化调控的影响而产生作用.
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绝经后骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞成脂肪分化能力初探
探讨绝经后骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞成脂肪分化能力的变化.选用3月龄健康SD雌性大鼠行双侧卵巢切除术后,建立骨质疏松症的动物模型,使用密度梯度离心法分别获取各组的骨髓间充质干细胞(MSCs),体外培养传至3、4代后,加入成脂肪诱导液进行成脂肪诱导后,观察细胞形态改变,并用RT-PCR法检测成脂肪分化过程的标志物脂蛋白脂酶(LPL)的mRNA水平.实验分为3月正常未诱导组(3conMSCs)、3月骨质疏松未诱导组(3ovx MSCs)、3月正常成脂肪细胞诱导组(3conADI)、3月骨质疏松成脂肪细胞诱导组(3ovxADI).结果显示:(1)形态学改变,成脂肪诱导后,MSCs成类圆形,在胞浆内有脂滴形成,3ovxADI组形成脂滴明显多于3conADI组.(2)LPL的mRNA的表达,未诱导组3conMSCs组和3ovx MSCs组没有表达;诱导组在诱导7 d时,有表达,而且3ovxADI组明显高于3conADI组;诱导14 d时,趋势一致,诱导组的表达量均高于7 d.通过检测成脂肪分化的指标LPL的mRNA的表达发现,3ovx组明显高于3con组.研究结果表明,绝经后骨质疏松症大鼠MSCs成脂肪分化能力增强.
